全 文 ：·548· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第4期2005年4月
作用HO一8910PM细胞24h后，明显抑制NF—KB
P65亚基的表达，从而调控靶基因如VEGF、尿激酶
型纤溶酶原激活剂(urokinase—typeplasminogen
activator，uPA)和FAK的表达，降低Ho一
8910PM细胞的侵袭转移能力。Smad3是转化生长
因子一p(TGF一口)信号转导通路中的一个关键的信
号分子。研究表明，磷酸化激活Smad后，Smad3一
Smad4复合物与Smad结合元件(Smadbindingel—
ement，SBE)结合，启动相关靶基因的表达，从而影
响肿瘤的发生与发展。TGF一口通常会抑制细胞生
长，但是，有研究表明TGF—B在很多晚期实质性肿
瘤会过度表达，有利于肿瘤细胞逃离免疫监控，并促
进肿瘤新生血管生成。Lindemann[11]的研究表明，在
侵袭性乳腺癌MDA—MB一231细胞中，两种TGF一口
的抑制物SB一202190和SB一203580可明显延迟由
TGF—B诱导的Smad3在核中的堆积，并下调纤维
酶原激活物的抑制因子(plasminogenactivatorin—
hibitor，PAI)和uPA的表达，抑制MDA—MB一231
的侵袭能力。研究中首次发现，5F也能明显抑制
Smad3蛋白的表达，推测5F能降低TGF—p蛋白表
达水平，从而影响侵袭转移相关蛋白VEGF、uPA
的表达，抑制HO一8910PM细胞的侵袭转移能力。癌
基因ETS家族也在肿瘤发生发展中起着重要作用，
特别是其作为转录因子在肿瘤转移中的调控作用。
研究表明癌基因ETS影响蛋白水解酶的表达以及
肿瘤的血管生成。ETS一1是研究较多的ETS家族
成员，作为转录因子在细胞侵袭运动、血管生成、细
胞凋亡等中发挥重要作用[12’13]。5F作用Ho一
8910PM细胞使ETS一1mRNA的表达下降，从而
影响肿瘤细胞的侵袭转移能力。5F抗高转移卵巢癌
H0—8910PM细胞侵袭转移的作用机制与NF—xB、
Smad3和ETS一1这3个靶点密切相关。
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药根碱、小檗碱、黄连煎剂及模拟方对小鼠血糖的影响
付 燕1’2，胡本容1，汤强1，付琴1，张庆业1，向继洲1
(1．华中科技大学同济医学院药理学系，湖北武汉430030；2．广州市脑科医院，广东广州510000)
摘要：目的研究药根碱(Jat)的降血糖作用，并比较Jat、小檗碱(Ber)、黄连煎剂(HLD)及模拟方(Ber+Jat)
对小鼠血糖水平的影响。方法采用薄层扫描法测定HLD中Ber和Jat的质量分数，并根据其比值配制模拟方。
收稿日期：2004—07—19
基金项目：国家自然科学基金资助项目(30171151)
作者简介：付燕(1979一)，女，湖北省黄石市人，药理学专业硕士，研究方向为心血管药理和神经药理学。
E—mail：Fuyan一1111@hotmail．com
万方数据
中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第4期2005年4月·549·
小鼠ip四氧嘧啶制备糖尿病模型，模型小鼠和正常小鼠均ig给予不同剂量Jat、Ber、HLD和模拟方，葡萄糖氧化
酶法测定血糖。结果Jat、Bet、HLD和模拟方均有不同程度的降低糖尿病和正常小鼠血糖的作用，HLD作用最
强，Jat较同剂量Per作用弱，模拟方与单用Bet作用相当。结论黄连中可能还有除Ber和Jat之外的降血糖成
分，以天然成分比例配伍Ber和Jat，未见明显协同或拮抗作用。
关键词：药根碱；小檗碱；黄连煎剂；血糖
中图分类号：R286．．72 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2005)04—0548—04
EffectofIiatrorrhizine，berberine，HuanglianDecoctionand
compound-mimicprescriptiononbl odglucoseinmice
FUYanl’2，HUBen—ron91，TANGQian91，FUQinl，ZHANGQing—yel，XIANGJi—zhoul
(1．DepartmentofPharmacology，TongjiMedicalCo lege，HuazhongUniversityofScienceandTechnology，
Wuhan430030，China；2．GuangzhouBraiHospital，Guangzhou510000，China)
Abstract：ObjectiveTostudythhypoglycemica tivityofjatrorrhizine(Jat)andcomparetheffects
ofJat，berberine(Ber)，HuanglianDecoction(HLD)，andcompounds—mimicprescription(Ber+Jat)on
bloodglucoselevelinmice．MethodsTLC—scanningmethodwasadoptedforthedeterminationofBerand
JatinHLD．Ber+Jatwasm deartificiallyaccordingtotheresultof heTLC-scanning．Diabeticmodel
miceweremadebyiPalloxan，diabeticandnormalmiceweregivenJat，Ber，HLD，andBer+Jatindiffer—
entdosebyigandappliednthestudy．Bloodglucoselevelwasanalyzedbyspectrophotometrywithglu—
cose—oxidase．ResultsJat，Ber，HLD，andBer+Jatdecreasedbloodglucose1evelofdiabeticandnormal
miceatdifferentdegrees．HLDshowedthemostsignificanthypoglycemicactivity．Jaralsopossessedth
functionofdecreasingbloodglucose．whichwas1essthanthatofBeratthesamedose．Therewasnosig—
nificantdifferencebetweenB r+JatandBer．ConclusionItimpliesthatherearesomeotherhypo—
glycemicingredientsnHLDbesidesB randJat．Jathasnoevidentsynergisticorantagonisticactionwhen
coexistedwithBerinnaturalatio．
Keywords：jatrorrhizine(Jat)；berberine(Ber)；HuanglianDecoction(HLD)；bloodglucose
黄连性苦寒，主清胃火，自魏晋时代始，已有用
黄连治疗消渴(基本属于现代医学的糖尿病)的记
载。小檗碱(berberine，Ber)是黄连中的主要成分
之一，能降低正常小鼠和四氧嘧啶致糖尿病小鼠的
血糖[1]，并对Ⅱ型糖尿病有较好的疗效[2]。药根碱
(jatrorrhizine，Jat)也是黄连所含的一种生物碱，
与Ber化学结构非常相似。为探讨Jat是否也有降
糖作用、黄连的降糖作用是否为Ber和Jat的综合
作用、Ber和Jat之间是否又存在着相互作用等问
题，本实验研究了Jat对小鼠的降血糖作用，并对
Jat、Bet、黄连煎剂(HuanglianDecoction，HLD)及
按Bet和Jat天然成分比值人工配制的模拟方
(Ber+Jat)对小鼠血糖的影响进行了比较研究。
1材料
1．1 药品与试剂：HLD的制备：四川产黄连40g
(购自武汉同济医院药剂科)制成粗粉，加水适量煮
沸30min，滤过，共煮3次，合并3次滤液，浓缩至
40mL，即相当于含生药1g／mL，用时稀释至0．2
g／mL。盐酸小檗碱，中国药品生物制品检定所，纯
度>95％，批号200001；盐酸药根碱，中国药品生物
制品检定所，纯度为98％，批号200004。根据薄层
扫描法测定HLD、Ber和Jat的质量分数及比值，人
工配置模拟方。四氧嘧啶：Sigam公司，批号A7413。
苯、甲醇、异丙醇、醋酸乙酯等所用试剂均为分析纯。
葡萄糖测定试剂盒：上海荣盛生物公司。
1．2 动物：昆明种小鼠，体重(20±2)g，雄性，由
华中科技大学同济医学院实验动物学部提供。
1．3 仪器：日本岛津CD--9301薄层扫描仪，TU一
1221紫外分光光度计(北京市通用仪器设备公司)。
2方法
2．1 HLD中Ber和Jat质量分数的测定：精密称
取盐酸小檗碱5．00mg和盐酸药根碱1．00mg，分
别置于10mL量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，得
0．5mg／mL盐酸小檗碱对照品溶液和0．1mg／mL
盐酸药根碱对照品溶液。将1I曹／mLHLD稀释至
0．02g／mL，即得供试品溶液。展开剂：苯一醋酸乙酯一
甲醇一异丙醇一水(6：3：3：1．5：0．5)。参照《中华
人民共和国药典>>2000年版一部方法，用微量点样
器分别吸取1、2、3、4、5pL对照品溶液和5pL供
试品溶液点在同一硅胶G薄板上，依法展开，取出
晾干，扫描测定。
2．2 HLD给药剂量折算方法：经薄层扫描法测定
万方数据
·550· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第4期2005年4月
HLD中含Ber和Jat分别为0．455、0．095rag／
mL，相当于生药中含Ber、Jat分别为2．27％、
0．475％。按文献方法[11中Ber的给药剂量50rag／
kg折算成含有同量小檗碱的HLD给药剂量应为
2202mg／kg。
2．3模拟方的配制方法：根据生药中约含有Ber
2．27％和Jat0。475％，即Ber和Jat质量分数比例
约为5：1，按此比例称取盐酸小檗碱和盐酸药根碱
混合后配制成模拟方。
2．4糖尿病动物模型制备及分组[3]：健康成年小鼠
100只，禁食18h，除正常对照组10只小鼠ip生理
盐水0．1mL／lOg外，其余90只小鼠均ip四氧嘧
啶250mg／kg。72h后小鼠眼眶取血，测定小鼠空
腹血糖值。选择血糖值大于15．1mmol／L者即为糖
尿病模型小鼠，随机分为6组：Jat50、100mg／kg
组；Ber50mg／kg组；HLD生药2202mg／kg(相
当于Ber50mg／kg和Jat10mg／kg)组；模拟方
(Ber50mg／kg+Jat10mg／kg)组；模型组(生理
盐水0．1mL／10g)，每组10只小鼠。各组ig给予
相应剂量药物，连续5d，在末次给药后3h，眼眶采
血测空腹血糖。
2．5 对正常小鼠血糖的影响：健康成年小鼠70
只，禁食2h，随机分成7组：Jat25、50、100mg／kg
组；Ber50mg／kg组；HLD生药2202mg／kg组；
模拟方(Ber50mg／kg+Jat10mg／kg)组；正常对
照(生理盐水0．1mL／lOg)组，每组10只小鼠，各
组ig给予相应剂量药物1次，给药后3h，眼眶采血
测空腹血糖。
3 结果
3．1 HLD中Ber和Jat的质量分数测定结果：以
峰面积(y)为纵坐标，对照品质量(X)为横坐标，
得Ber和Jat回归方程分别为Y一2651X+
89．171，r=1．000；Y一1937．5X+32．239，r=
0．997。Ber和Jat线性范围分别为0．5～2．5mg和
0．1～o．5mg。供试品中Ber和Jat质量分数分别为
0．455和0．095mg／mL，相当于生药中含Ber和
Jat分别为2．27％、0．475％。
3．2对四氧嘧啶所致糖尿病小鼠血糖的影响：结果
见表1。Jat、Ber、HLD及模拟方均有不同程度降低
糖尿病小鼠血糖的作用，HLD效果最明显，模拟方
组与Ber组影响差异无显著性，Jat较同剂量Ber
降糖作用弱。
3．3对正常小鼠血糖的影响：结果见表2。HLD、
Ber、Jat及模拟方均有不同程度降低血糖作用，
HLD效果最明显，模拟方组与Ber组差异无显著
性，Jat较同剂量Ber降糖作用弱。
表1 Jat、Ber、HLD及模拟方对四氧嘧啶致糖尿病
小鼠血糖的影响(j±s，n一10)
Table1 EffectsofJat，Ber，HLD，andBer+Jat
onbloodglucoseindiabeticm einduced
byalloxan(；士s，以=10)
与正常对照组比较：44P<0．01；与模型对照组比较：
一P<0．01⋯P<0．001；与Jat50mg／kg组比较：▲P<
0．05； 与HLD组比较：△△P<0．01；与Ber+Jat组比较：
丫VP
modelgroup；▲P<0．05口5Jat0mg／kggroupl △△P<0．01w
HLDgroup：vvp
血糖的影响。士s，一一10)
Table2 EffectsofJat，Ber，HLD，andBet+Jatonblood
glucoseinnormalmice(；士s，万一10)
与正常组比较：。P<0．05一P
比较：丫P<0．05
。P<0．05’’P<0．01wnormalgroup；▲P<0．05USJat
50mg／kggroup；AP<0．05口sHLDgroup；丫P<0．05口5Ber+
Jutgroup
4讨论
单味中药成分繁多，在明确各主要成分药理效
应的基础上，寻找合理的中药成分配伍，发挥各成分
间的协同作用，消除或减少某些成分的毒性或副作
用，是加速中医药现代化，化繁为简的思路之一。黄
连治疗糖尿病已有悠久的历史，疗效确切。Ber是黄
连中的主要单体之一，临床和动物实验都证实Ber
能降低血糖‘¨]，改善胰岛素抵抗嘲，并对Ⅱ型糖尿
病有较好的疗效。Jat也是黄连中的一种异喹啉生
物碱，为Ber的同系物。本实验证实Jat在50、100
万方数据
中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第4期2005年4月·551·
mg／kg能剂量依赖性降低四氧嘧啶致糖尿病小鼠
和正常小鼠血糖，提示Jat也是黄连治疗糖尿病的
有效成分之一。但其降糖作用不及同量的Ber，推测
可能是Ber对a肾上腺素受体的阻断作用强于
Jat[7]，而更强地降低交感神经张力，抑制肾上腺皮
质功能，从而抑制糖异生。为进一步研究Jat与Ber
以天然比例配伍是否存在相互作用，本实验又观察
了按Ber和Jat天然比例配制的模拟方对小鼠血糖
的影响。结果表明，模拟方的降糖作用与单用同剂量
的Ber相当，提示Ber和Jat以天然比例配伍未见
明显协同或拮抗作用，但不能排除黄连中可能还存
在其他的重要成分与Ber、Jat之间有着复杂的相互
作用，或Ber和Jat之间存在更佳的比例组合，仍须
进一步研究验证。而HLD的降血糖作用比单用
Ber、Jat和模拟方都强，恰好提示了黄连中除了Ber
和Jat之外，可能还有其他成分起着重要作用。
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川芎嗪含药血清对人肝癌细胞HepG2增殖的抑制作用
丰俊东，徐晓玉
(重庆医科大学中医药学院，重庆400050)
摘 要：目的 观察川芎嗪(TMP)含药血清对人肝癌细胞HepG：增殖的影响。方法选用SD雄性大鼠30只，
随机分成3组，分别ipTMP143．0、71．5mg／kg、生理盐水0．8mL，制备TMP大、小剂量组及生理盐水组含药血
清，采用KP—HPLC法测定含药血清中TMP的质量浓度。将各组含药血清作用于人肝癌细胞HepG。48h，MTT
法测定不同质量浓度TMP含药血清对人肝癌细胞HepG：增殖的抑制作用。结果TMP大剂量组血清(20％、
10％、5％)，TMP小剂量组血清(20％、10％)对人肝癌细胞HepG。增殖较生理盐水组有显著抑制作用(P<
0．05)，最高抑制率可达46．1％。结论TMP含药血清对人肝癌细胞HepG。增殖有一定的抑制作用。
关键词：川芎嗪；人肝癌细胞HepG：；高效液相色谱；MTT法
中图分类号：R285．5 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2005)04—0551—03
Inhibitionoftetramethylpyrazine-containingserumonproliferation
ofhumanlivercancerc llsHepG2
FENGJun—dong．XUXiao—yu
(CollegeofTraditionalChineseMedicine，ChongqingMedicalUniversity，Chongqing400050，China)
Abstract：ObjectiveToobserveth ffectsofratetramethylpyrazine(TMP)一containingserumOD
theproliferationofhumanlivercancerc llsHepG，．MethodsThirtySDmaleratsweredividedintothree
gr9upsrandomlyandtheserumwascollectedafteripTMPwiththedosageof143．0。71．5mg／kgorNS
O．8mLtopreparethTMP—containingserumlarge—andsmall-dosegroupsandNSgroupaswell．Are—
versed-phasehighperformanceliquidhromatography(RP—HPLC)methodwasusedtodeterminee
TMPconcentrationinratserum．Humanliverca cercellsHepG2wastreatedwithratTMP—containing
serumfor48h．InhibitionoftheTMP—containingserumo proliferationofHepG2wasdetectedbyMTT
收稿日期：2004—07—18
基金项目：国家自然科学基金资助项目(30070915)
作者简介：丰俊东(1978一)，女，黑龙江人，在读博士，主要从事中药药理研究。
Tel：(023)89014331E—mail：FengJunDon92001@sohu．corn
万方数据
药根碱、小檗碱、黄连煎剂及模拟方对小鼠血糖的影响
作者： 付燕， 胡本容， 汤强， 付琴， 张庆业， 向继洲， FU Yan， HU Ben-rong， TANG
Qiang， FU Qin， ZHANG Qing-ye， XIANG Ji-zhou
作者单位： 付燕,FU Yan(华中科技大学同济医学院,药理学系,湖北,武汉,430030;广州市脑科医院,广东
,广州,510000)， 胡本容,汤强,付琴,张庆业,向继洲,HU Ben-rong,TANG Qiang,FU
Qin,ZHANG Qing-ye,XIANG Ji-zhou(华中科技大学同济医学院,药理学系,湖北,武汉
,430030)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2005,36(4)
被引用次数： 30次
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