全 文 ：·196· 中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第2期2007年2月
另外，临床上通常并不将板蓝根划归为抑菌药
物，其抑菌作用较黄连等典型的抑菌药弱，因此与先
前研究的黄连[53不同，其抑制率较后者相对较低，对
细菌作用的热力学参数变化规律不如黄连明显甚至
异常，如氯仿和石油醚萃取物虽然有较弱的抑菌作
用，但其最大发热功率和焓变值却高于对照组，与常
规的抑菌药(如黄连)作用趋势相反，并且有明显而
特异的后期放热现象，这在大肠杆菌的相关研究中
是不多见的HJ。
尽管对细菌的作用不是板蓝根的特异生物作
用，但本实验的结果仍表现出规律性，建立的方法可
为腮腺炎病毒和淋巴细胞等生物模型的评价工作提
供技术支持，其中前者可体现板蓝根抗病毒作用，后
者则反映板蓝根提高免疫力的作用。
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HPLC法测定罗汉果中罗汉果苷V和11一氧化罗汉果苷V
周 兢1’2，王梦月2，李晓波弘，屠鹏飞3，王强1
(1．中国药科大学中药分析教研室，江苏南京210038；2．上海交通大学药学院，
上海200240；3．北京大学医学部，北京100083)
摘 要：目的 建立HPLC法测定不同产地、不同栽培品系的罗汉果药材中罗汉果苷V和11一氧化罗汉果苷V。方
法采用ODS(250nlmX4．6nlm，5pm)色谱柱，以乙腈一水为流动相进行梯度洗脱，体积流量：0．75mL／min，检
测波长：210nlTl，柱温：40℃。结果罗汉果苷V在0．8046～20．1150扯g线性关系良好(r一0．9998)，平均回收率
为104．6％，RSD为3．28％(”一6)。11一氧化罗汉果苷V在0．5985～14．9625弘g线性关系良好(r一0．9984)。结
论本方法简便、快速、准确，可作为罗汉果药材的质量控制方法。
关键词：罗汉果；罗汉果苷V；11一氧化罗汉果苷V；高效液相色谱
中图分类号：R286．02 文献标识码：B 文章编号：0253—2670(2007)02—0196—03
DeterminationofmogrosideVand11一oxomogrosideVindriedmaturef uits
ofMomordicagrosvenoribyHPLC
ZHOUJin91”，WANGMeng—yue2，LIXiao_b02，TUPeng—fei3，WANGQian91
(1．DepartmentofChineseMateriaMadicaAnalysis，ChinaPharm ceuticalUniversity，Nanjing210038，
China；2．SchoolofPharmacy，ShanghaiJi oTongUn versity，Shanghai200240，China；
3．HeahhScienceCenter，PekingUniversity，Beijing100083，China)
Abstract：ObjectiveToestablishanoptimalHPLCmethodforeterminingthecontentsofmogro—
sideVand11-oxomogrosideVintheriedmaturefruitsofMomordicaegrosvenorifromvarioushabitats
andbreeds．MethodsODSColumn(250mm×4．6mm，5”m)wasusedwithacetonitrile—wateras
mobilephaseinagradientprogram，flowratewas0．75mL／min，detectionwavelengthwasetat210nm，
columntemperaturewas40℃．ResultsThelinerrangeofmogrosideVwas0．8046—20．1150弘g(r一0．
9998)andtheaveragerecoveryofmogrosideVwas104．6％，RSDwas3．28％(，z一6)．Thelinerrange
收稿日期：2006—05—02
基金项目：国家“863”资助项目(2004AA223730一19)
作者简介：周兢(1982一)，男，江西人，中国药科大学在读硕士研究生，研究方向：中药的质量控制。
E—mail：markgraf0927@hotmail．corn
*通讯作者李晓波Tel：(021)34202804E—mail：xhli@sjtu．edu．cn
万方数据
中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第2期2007年2月·197·
of11一oxomogrosideVwas0．5985—14．9625pg(r一0．9984)andtheaveragerecoverywas102．5％，
RSDwas4．43％(72—6)．ConclusionHPLCmethodissimple，rapidandaccurate．Itcadbeusedforthe
qualitycontrolofthedriedmaturef uitsofM．grosvenori．
Keywords：thedri dmaturef uitsofMomordicagrosvenoriSwingle；mogrosideV；1 -oxomogroside
V；HPLC
罗汉果为葫芦科植物罗汉果Momordica
grosvenoriSwingle的干燥成熟果实，有清热润肺、
滑肠通便的功效[1]。罗汉果中主要化学成分为三萜
皂苷类成分罗汉果皂苷(mogrosides)[2～43。罗汉果
皂苷甜度高、热量低、水溶性好、稳定性好、安全可
靠，可以作为甜味剂，尤其是作为肥胖和糖尿病人的
代糖品。罗汉果皂苷为一系列葫芦烷型四环三萜类
衍生物，均以罗汉果醇(mogr01)为母核，不同种类之
间结构较为相似，给定量测定工作带来了一定难度。
罗汉果皂苷类物质的测定方法有紫外分光光度
法[5]、薄层扫描法[63和高效液相一电喷雾质谱联用
法[7]。罗汉果苷V(mogrosideV)作为罗汉果中的主
要成分，是评价罗汉果质量的指标性成分。此外研究
中发现11-氧化罗汉果苷V(1l—oxomogrosideV)在
罗汉果中也拥有较高的量，亦可作为控制罗汉果质
量的一个重要指标。因此本实验对罗汉果药材进行
甲醇超声提取后使用梯度洗脱法对提取液中的皂苷
类成分进行了分离，并对其中的罗汉果苷V和11一
氧化罗汉果苷V进行了测定。
1仪器与材料
日本岛津LC一2010AHT型高效液相色谱仪
系统，紫外检测器；SK7200HP超声仪(上海科导超
声仪器有限公司)。
罗汉果苷V对照品(自制，经UV、IR、MS、
NMR确证结构，其质量分数为98％以上)；11一氧化
罗汉果苷V对照品(自制，经UV、IR、MS、NMR确
证结构，其质量分数为95％以上)。乙腈、甲醇(色谱
级，TEDIA公司)，甲醇(AR，上海试剂四厂)，乐百
氏纯净水。
16种罗汉果药材样品，其中11种在产地采集，
5种为市售商品。
2方法与结果
2．1 色谱条件：色谱柱：日本岛津Shim—packvp—
ODS(250mmx4．6mm，5弘m)；柱温：40℃；流动
相：乙腈一水，梯度洗脱0～20min，乙腈一水(80：
20)，20rain以后，乙腈一水(76：24)；检测波长：210
nm；体积流量：0．75mL／min；进样量：20弘L。
2．2对照品溶液的制备：精密称定罗汉果苷V对
照品8mg于10mL量瓶中，甲醇溶解并加至刻度，
使成0．8mg／mL溶液，作为罗汉果苷V对照溶液。
精密称定11一氧化罗汉果苷V对照品6mg于
10mL量瓶中，甲醇溶解并加至刻度，使成
0．6mg／mL溶液，作11一氧化罗汉果苷V对照溶液。
2．3供试品溶液的制备：称定罗汉果药材粉末2g
于100mL具塞三角瓶中，精密加入50mL甲醇，超
声提取20min，冷却后补回原重，摇匀。取上清液通
过0．22肛m微孔滤膜，取续滤液作为供试品溶液。
2．4 线性关系的考察：取罗汉果苷V对照溶液
1．0、2．0、5。0、10．0、15．0、20．0、25．0肛L进样分析。
以峰面积对进样质量作线性回归，所得回归方程为
Y一174135X+31979，r一0．9998。结果表明罗汉
果苷V在0．8046～20．1150／*g与峰面积呈良好
的线性关系。
取11一氧化罗汉果苷V对照溶液1．0、2．0、5．0、
10．0、15．0、20．0、25．0弘L进样分析。以峰面积对进
样质量作线性回归，所得回归方程为y一242685x一
51823，r=0．9984。结果表明11-氧化罗汉果苷V在
0．5985～14．9625弘g与峰面积呈良好的线性关系。
2．5 精密度试验：取罗汉果苷V和11-氧化罗汉
果苷V对照溶液各20．0肛L进样，平行测定7次，
计算，结果罗汉果苷V和11一氧化罗汉果苷V峰面
积的RSD值分别为0．68％和0．82％。
2．6重现性试验：精密称取同一批罗汉果药材(样
品12)粉末5份，每份2g，制备供试品溶液，分别进
样20．0pL，外标法分别计算罗汉果苷V和11一氧化
罗汉果苷V的质量分数，结果罗汉果苷V的RSD
为1．20％，11一氧化罗汉果苷VRSD为1．61％。
2．7稳定性试验：精密称定罗汉果药材粉末2g，制
备供试品溶液，于0、6、12、24、48h分别进样20．0
肛L，外标法分别计算罗汉果苷V和11一氧化罗汉果苷
V质量分数，结果罗汉果苷V的RSD为0．28％，11一
氧化罗汉果苷V的RSD为0．37％。结果表明：供试
品溶液在48h内稳定性良好。
2．8加样回收率试验：精密称取同一批罗汉果药材
粉末6份，每份2g，分别精密加入0．8mg／mL罗汉
果苷V对照品溶液和0．6mg／mL11一氧化罗汉果苷
万方数据
·198· 中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第2期2007年2月
V对照品溶液各1mL，制备供试品溶液，分别进样
20．0弘L进行分析，外标法分别计算罗汉果苷V和
11一氧化罗汉果苷V的质量分数。结果罗汉果苷V
的平均加样回收率为104．6％，RSD为3．28％；11一
氧化罗汉果苷V的平均加样回收率为102．5％，
RSD为4．43％。
2．9样品测定结果：罗汉果样品制备供试品溶液，
分别进样20．0弘L测定，外标法计算罗汉果苷V和
11一氧化罗汉果苷V的质量分数。结果见表1，色谱
图见图1。
表1 不同产地罗汉果中罗汉果苷V和11一氧化罗汉果苷V的测定结果(捍一3)
Table1 DeterminationofmogrosideVand11一oxomogrosideVindriedmaturetruits
ofM．grosvenorifr mvarioushabitats(聆一3)
样品序号 产地／采集地 采集时间 罗汉果苷V／％ 11一氧化罗汉果苷V／％ 栽培品种
l 广西： 托福县永福镇百寿岩 2005．1 0．685 0．123 组培青皮果
2 广西，款福县龙江乡江口屯 2005．1 1．267 0．188 栽培青皮果
3 广西，jc福县 2005．1 0．551 0．139 拉江果
4 广西f缶桂县两江镇利比安罗汉果农场 2005．1 0．685 0．242 杂交果
5 广西I缶桂县两江镇利比安罗汉果农场 2005．1 0．981 0．287 组培红毛果
6 广西I缶桂县茶洞乡新街 2005．1 0．777 0．168 栽培冬瓜果
7 广西I自桂县茶洞乡新街 2005．1 1．065 0．224 栽培青皮果
8 广西l自桂县茶洞乡新街 2005．1 0．922 0．157 组培青皮果
9 广西：宅胜各族自治县 2005．1 0．990 0．169 组培青皮果
11 广西： 宅胜各族自治县 2005．1 0．793 0．109 青皮果
10 广西： 宅胜科技开发中心 2005．1 0．818 0．148 扦插培育
12 上海j芦宇大药房 2005．1 1．199 0．332
13 江西1肓昌华安药店 2005．2 0．876 0．302
14 湖北：莹昌同德大药房 2005．2 0．761 0．132
15 安徽j丐鞍山江南大药房 2004．12 0．409 0．105
16 广西1圭林润生堂药房 2005．2 0．346 0．103
^ ．I、
B
lO 20 30 40 0 10 20 30 40
f／／min
1—11一氧化岁汉果苷V2一岁汉朱霄V
1—11一oxomogrosideV2一mogrosideV
图1 罗汉果苷V(A)、11一氧化罗汉果苷V(B)和罗汉果样品(C)的HPLC图谱
Fig．1HPLCChromatogramsofmogrosideV(A)，and11-oxomogrosideV(B)，
andriedmaturefruitsofM．grosvenori(C)
3讨论 离度良好，样品前处理简单方便快捷，适宜于快速测
罗汉果为果实类药材，除罗汉果皂苷外还含有 定罗汉果及其提取物中两种皂苷的量，对于罗汉果
大量的糖类、油脂类及其他杂质．经考察选定甲醇作 及其提取物的质量评价具有指导意义。
为溶剂进行提取；此外对提取时间进行了考察，以甲 Ref,erences：
醇作为溶剂分别超声提取20、30、40min，在3种不}：{鬟三。黑静lAIrih．2。0，0。5s．，N。kajim。T，甜a1．s。。die。。。。h。
同条件下结果未出现显著性差异；最终选用甲醇超 ～。。。。stituentsofFru咖，‰。。，赢⋯．I．O。th。。。eetp inci一
声提取20min。 [3]概黑：。。YaTku，g崩akuhZa。5ssh，i记鲨2。釜1：允i15s1。。-1扯15。4．。。the
对罗汉果供试品溶液在甲醇一水和乙腈一水系统 ：：：譬1苜‘兹丢麓。兰嬲。骞畿。支i，囊嚣等1轰”po一
作为流动相的条件下的展开行为分别进行了考察。 E43TakemotoT，AriharaS，NakajimaT，et1．Studiesonthe
甲醇一水系统对罗汉果皂苷的分离度较差，而乙腈一水 ；誉1龄?‘≥兰糍芝童嚣rld9i8c3ae，．10$3．(1S1t)．1rucltu6r7e一嚣罢09”一
系统的分离度较好，故选用乙腈一水系统作为系统流 E53detGao。nnSiL。。,。ionWan。gfH。．。pT。。hei。‘甓：9蔷口=二：裟。tGior。n。a⋯nd—co‘嚣
动相，经实验确定乙腈比例为22％～25％时分离效 NatProdResDev(天然产物研究与开发)，2000，13(2)：36一
果最好，然而始终无法完全分离；改用梯度洗脱法， [6]Li。ngcQ，S。xJ，LiJ，以。1．Determi。。ti。。。f。。gro。id。V
最终确定流动相中乙腈比例为20％～24％。 ：if兽：、1篇1荨“[J]·G“4”g新J厶g胁hd‘广西轻工业’’
本实验所建立的高效液相色谱分析方法可以使 口3：：套誊j姜言譬曼／嚣篇暑f‘5a。li．三箸?姜；军戬譬
罗汉果中两种主要皂苷类成分达到基线分离，且分 科季)，2005，38(10)：2096—2101．
万方数据
HPLC法测定罗汉果中罗汉果苷Ⅴ和11-氧化罗汉果苷Ⅴ
作者： 周兢， 王梦月， 李晓波， 屠鹏飞， 王强， ZHOU Jing， WANG Meng-yue， LI Xiao-bo
， TU Peng-fei， WANG Qiang
作者单位： 周兢,ZHOU Jing(中国药科大学,中药分析教研室,江苏,南京,210038;上海交通大学药学院
,上海,200240)， 王梦月,李晓波,WANG Meng-yue,LI Xiao-bo(上海交通大学药学院,上海
,200240)， 屠鹏飞,TU Peng-fei(北京大学医学部,北京,100083)， 王强,WANG Qiang(中国
药科大学,中药分析教研室,江苏,南京,210038)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2007,38(2)
被引用次数： 4次

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本文链接：http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical_zcy200702015.aspx