全 文 ：·1084· 中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第7期2006年7月
虎杖药材指纹图谱研究
雷海民。，毕 葳，李 强，龚卫红，黄 娴，周玉新
(北京中医药大学中药学院，北京100102)
摘 要：目的 应用RP—HPLC对不同产地虎杖药材进行指纹图谱研究。方法KromasilC。。色谱柱(150nlm×4．6
mm，5”m)，乙腈一水二元梯度洗脱，体积流量：1mL／min，检测波长303am。结果根据选择的色谱条件制订了不
同产地虎杖药材的指纹图谱。结论色谱图对各产地虎杖药材中各成分得到了很好的分离，可作为虎杖药材的专
属性指纹图谱。
关键词：虎杖药材；高效液相色谱；梯度洗脱；指纹图谱
中图分类号：R282．7 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2006)07—1084一03
FingerprintofRhizomaPolygoniCuspidati
LEIHai—min，BIWei，LIQiang，GONGWei—hong，HUANGXian，ZHOUYu—xin
(BeijingU iversityofTraditionalChineseMedicine，Beijing100102，China)
Abstract：ObjectiveTos udya fingerprintofrawmaterialofRhizomaPolygoniCuspidatifrom
varioushabitatsbyRP—HPLC．MethodsKroma ilC18column(150mm×4．6mm，5肛m)wasused，with
mixturesofacetonitrileandwaterasmobilephaseinagradientmode．Theflowratewas1mL／mina d
wavelengthwas303nm．ResultsAccordingtotheoptimumchromatographiccondit ons，agoodfinger—
printofRhizomaPdygoniCuspidatih sbeendescribed．ConclusionThemethodissimpleandaccurate
withgoodreproducibility．ItmaybepracticalvalueforthequalitycontrolofsampleforRhizomaPo&goni
Cuspidatifromvarioushabitats．
Keywords：RhizomaedygoniCuspidati；HPLC；gradientelution；fingerprint
虎杖为蓼科植物虎杖 Po&ginumcuspidatum1仪器与试药
Sieb．etZucc．的干燥根茎和根。性味微苦、微寒，归
肝、胆、肺经。主要功能有祛风利湿、散瘀止痛、止咳
化痰。用于关节痹痛、湿热黄疸、经闭、瘕瘕、咳嗽痰
多、水火烫伤、跌打损伤、痈肿疮毒等。其主要化学成
分包括游离蒽醌及蒽醌苷类、白藜芦醇
(resveratr01)及虎杖苷(白藜芦醇苷，polydatin，pi
ceid)两种苠类化合物、鞣质以及黄酮类。现代药理
研究发现白藜芦醇苷有强心、扩血管、抑制血小板聚
集、降血糖、降血脂、镇咳平喘、抗菌、抗病毒、抗肿瘤
等多种作用。目前有文献报道用HPLC法测定虎杖
中的有效成分白藜芦醇和白藜芦醇苷的量[1]，但未
见到有关其指纹图谱的研究，并且白藜芦醇和自藜
芦醇苷不是虎杖药材中的仅有的有效成分，所以尝
试运用指纹图谱来对虎杖药材中的大部分有效成分
进行控制[2]，本实验采用RP—HPLC法对不同产地
虎杖的指纹图谱进行了研究。
Agilent1i00高效液相色谱仪(四元泵、在线脱
气、VWD检测器)，超声波清洗器(SK5200H，200W，
59Hz，上海科导仪器有限公司)；十万分之一分析天
平(AE240，Metier)，乙腈为色谱纯(Merck)。
不同产地虎杖(表1)，北京中医药大学生药系
刘春生教授鉴定为P．cuspidatumSieb．etZucc．。
2方法与结果
2．1 色谱分析条件：采用KromasilC。。色谱柱(150
mm×4．6mm，5弘m，北京分析仪器厂，SN：22209)，
乙腈一水二元梯度洗脱，体积流量：1mL／min，检测
波长303nm。记录时间60rain。
2．2 流动相条件：0～15min：乙腈15％～20％、
0．4％冰醋酸85％～80％；15～25rain：乙腈20％～
30％、0．4％冰醋酸80％～70％；25～40rain：乙腈
30％～50％、0．4％冰醋酸70％～50％；40～41
rain：乙腈50％～80％、0．4％冰醋酸50％～20％；
收稿日期：2005—10-20
基金项目：科技基础性专项基金资助项目(200IDEA20010)
*通讯作者雷海民Tel：(010)84738641E—mail：leihaimin@yahoo．com．ca
万方数据
中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第7期2006年7月·1085·
41～51min：乙腈80％、0．4％冰醋酸20％。该流动
相及梯度条件对色谱峰分离效果较好。
2．3供试品溶液制备：精密称取虎杖药材(60目)
250mg，精密加入甲醇50mL，称质量，超声处理45
min，补足损失的质量。摇匀，微孑L滤膜滤过，取续滤
液，即得。
2．4方法学考察
2．4．1精密度试验：精密吸取虎杖药材供试品(产
地：西安)溶液10弘L，连续进样5次，以第1次测定
的色谱图作为参照，使用相似度计算软件计算相似
度，相似度平均值为0．999，RSD为0．204％。11、
23、28、43min4个对照峰峰面积平均值的RSD分
别为2．70％、0．65％、1．35％、0．280A。试验结果表
明，该方法精密度良好。
2．4．2 稳定性试验：取同一供试品溶液(产地：西
安)，分别于配制后0、2、4、6、8h依法测定，以第一
次测定的色谱图作为参照，使用相似度计算软件计
算相似度，相似度平均值为0．9996，RSD为
0．0517％。11、23、28、43min4个对照峰峰面积平
均值的RSD分别为2．17％、1．14％、0．75％、
0．73％。结果表明，供试品溶液在8h内稳定。
2．4．3重现性试验：按供试品制备及测定方法，对
同一批号(产地：西安)样品5份进行测定，使用相似
度计算软件计算相似度，相似度平均值为0．9993，
RSD为0．082％。11、23、28、43min4个对照峰峰面
积平均值的RSD分别为0．97％、2．39％、0．98％、
2．98％。结果表明，测定方法的重现性良好。
2．5指纹图谱分析软件：计算软件：采用国家药典
会编写的“中药色谱指纹图谱相似度评价系统
2004A版”。参数设置：(1)参照谱图：本品采用虎杖
药材提取物(产地：云南)色谱图作为相似度计算时
校正的参照谱图。(2)时间窗宽度：0．10。(3)数据剪
切：未剪切。(4)校正方式：由于采用梯度洗脱的方
式，各批次供试品指纹图谱中色谱峰保留时间可能
不一致，故相似度计算时不宜采用自动校正方式，而
应进行多点校正。校正色谱峰的确定：本品色谱图中
主要色谱峰在o～60min内基本分布均匀，为保证
不同批次虎杖药材提取物指纹图谱匹配时校正的准
确性，选择了4个主要指纹峰作为校正的Mark峰，
其中11min的峰为白藜芦醇苷，23min的峰为白藜
芦醇。(5)对照谱图的生成：采用平均算法，由10批
虎杖药材指纹图谱生成。(6)指纹图谱相似度计算结
果：以对照谱图为参照，各样品指纹图谱与对照谱图
进行比较，计算得各批次虎杖药材指纹图谱相似
度值。
2．6结果：各地虎杖药材图谱见图1，生成的对照
图谱见图2。以对照谱图为参照，各样品指纹图谱与
对照谱图进行比较，计算得各批次虎杖药材指纹图
谱相似度值，结果见表1。
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000 1014 2029 30．43 4057 5072 6086
t／rain
1一虎杖苷2一白藜芦醇
1-polydatin2-resveratrol
图2虎杖药材对照指纹图谱
Fig．2ComparedfingerprintofRhizoma
PolygoniCuspidate
表1 lO批次虎杖药材相似度结果(肛=2)
Table1 Similarityof10batchesofPhizoma
批号 产地 相似度(对照)
1 云南0．981
2 北京0．972
3 福建前材0．975
4 福建新罗0．969
5 河北0．952
6 杭州0．993
7 江苏0．993
8 江西0．991
9 山东0．996
10 西安0．962
万方数据
·1086· 中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第7期2006年7月
简便，重现性、稳定性、精密度良好。各地虎杖药材的
峰形及峰数相似度良好。虎杖药材HPLC法指纹图
谱的建立，使虎杖药材的质量标准更加全面、直观。
3．2流动相考察：曾试验了乙腈一水(18；82)；乙
腈一0．4％冰醋酸(18：82)；0～60min：乙腈0％～
100％，0．4％冰醋酸100％～0％等流动相条件，最
终从液相图谱可以看出本实验所选的梯度条件分离
效果最佳。
3．3 白藜芦醇和白藜芦醇苷经紫外全波长扫描(溶
剂：乙醇)确定最大吸收波长为303nm。
3．4 白藜芦醇和虎杖苷为虎杖中的有效成分，但不
是仅有的有效成分，无法用HPLC法测定其中每一
个有效成分来控制其质量，指纹图谱弥补了这个不
足，有力补充了虎杖药材的质量标准。
References：
[1]YinJ．ModernResearchandClinicalPracticeofChineseMa—
teriaMedica(中药现代研究与临床应用)[M]．Beijing：
AcademyPress，1994．
r2]ChP(中国药典)rS]．v01．I2005．
三七果实发育中生理生化的动态研究
安 娜h2，崔秀明3，萧凤回1’2，陈中坚3，段承俐1’2。
(1．云南农业大学中药材研究所云南省中药材规范化种植技术指导中心，云南昆明 650201；2．云南农业大学农学与
生物技术学院，云南昆明 650201；3．云南文山三七科学技术研究所，云南文山663000)
摘 要：目的 对三七果实发育过程中的生理生化变化进行研究。方法对三七果实发育过程中的生长情况、干鲜
质量变化、含水量变化及可溶性糖、淀粉和蛋白质的量进行动态测定。结果 在三七果实的发育过程中含水量先升
后降，于成熟时达到73．37％；果实的鲜、干质量随果实发育逐渐增加，发育前期质量增加明显；淀粉和蛋白质的量
同样随果实发育而逐渐增加，但发育后期质量增加较快；而可溶性糖的量则先升后降，到后期又略有上升。结论
三七果实于盛花期后80d达到成熟；在发育过程中，含水量的下降伴随着果实鲜、干质量的不断增加，而果实内营
养物质的贮存及利用与果实的发育程度密切相关。
关键词：三七；果实发育；生理生化变化
中图分类号：R282．7 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2006)07—1086—03
Dynamicstudiesonphysiologicalandbiochemicalchangesduringfruit
developmentofPanaxnotoginseng
ANNal2，CUIXiu—min93，XIAOFeng—huil’2，CHENZhong—jian3，DUANCheng—lil’2
(1．InstituteofChineseMedicinalMaterials，YunnanAgriculturalUniversity；YunnanProvincialGAPCenter
ofChineseMedicinalMaterials，Kunming650201，China；2．FacultyofAgronomyandBiotechnology，
YunnanAgriculturalUniversity，Kunming650201，China；3．WenshanInstituteofNotoginseng
ScienceandTechnology，Wenshan663000，China)
Abstract：ObjectiveThephysiologicalandbiochemicalchangesw restudiedduringthePanaxnoto—
ginseng’Sfruitdevelopment．MethodsDynamicchangesoffruitssize，freshandryweight，moisture
contenta dsolublesugar，starchandproteinco tentswereinvestigated．ResultsThmoisturecontent
wasincreasedfirstandthendroppedto73．37％atmaturity．Thefreshandryweight，starchandprotein
contentsofP．notoginsen97Sfruitswereincreasedwiththefruitdevelopment．Thesolublsugarcontent
wasraisedfirst，thendecreased，andincreasedslightlyatthelateralstageoffruitdevelopment．Conclu—
sionTheP．notoginsen97Sfruitsarematureat80dafterpeakanthesis；thedecr aseofmoisturecontent
iscompaniedw ththegradualincreasingoffruitfreshandryweightduringthefruitdevelopment．The
storagendutilizationofnutrientsi P．notoginsen97S fruitsarecloselyrelatedwiththefruitdevelopment．
收稿日期：2005一lO一17
基金项目：国家自然科学基金资助项目[302600573
作者简介：安娜(1979一)，女，山西阳曲人，在读研究生，主要从事三七种子生理研究。
*通讯作者段承俐Tel：(0871)5227160E—mail：chengliduan@hotmail．com
万方数据
虎杖药材指纹图谱研究
作者： 雷海民， 毕葳， 李强， 龚卫红， 黄娴， 周玉新， LEI Hai-min， BI Wei， LI Qiang
， GONG Wei-hong， HUANG Xian， ZHOU Yu-xin
作者单位： 北京中医药大学中药学院,北京,100102
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2006,37(7)
被引用次数： 8次

参考文献(2条)
1.阴健;郭力弓 中药现代研究与临床应用 1994
2.中华人民共和国药典(一部)

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3. 潘莹.王树桂.张林丽.陈海南 薄层扫描法测定虎杖不同炮制品中大黄素含量[期刊论文]-中国民族民间医药
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5. 王信 HPLC法测定虎杖叶中槲皮素的含量[期刊论文]-中药材2006,29(4)
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3.龙海林.李强.司银楚.彭静波.雷海民.肖洪彬 虎杖的功效成分组研究Ⅲ——对血浆黏度影响的谱效分析研究[期
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4.王玲.计耀成 HPLC法测定热炎清颗粒中虎杖苷和白藜芦醇的含量[期刊论文]-中医药导报 2011(3)
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6.马培.许利嘉.刘延泽.彭勇.张鑫瑶.肖培根 虎杖药材UPLC特征图谱研究[期刊论文]-中国实验方剂学杂志
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