全 文 ：·1652· 中草115ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第11期2006年11月
表3方差分析结果表
Table3 Resultsofvarianceanalysis
b’¨．∽，(I．3)一lo．1：{扎¨】1(I．3)一31．12
Z2Z。+o．0072Z2Z}一0．003Z2Zl+0．0098Z3ZI一
0．01Z3Zl一0．0073Z4Z_一0．0046zI?一0．0025
Z!?一0．012Z_{2—0．0039Zl2—0．018z5
2
(2)
对回归方程(2)进行显著性检验，得F回／(瓯l／
／‘¨I)／(S“／、，_)一17．63>F。。(20，9)一4．80，表明方
程的置信度为99％。
^1，，一(S，，／．／，)／(S，／．f)一4．47>F。：。(6，3)一
C
2．42，表明方程是失拟的。但由于p一警×100％一
2．24％失拟平方和仅占部平方和的2．24％，因此可
以认为方程基本是不失拟的。
综合考虑各因素之间的影响及交互作用，得到
优化的工艺条件：萃取压力40MPa，萃取温度40
‘C；分离I压力5MPa，分离I温度45C；分离Ⅱ温
度46C。其计算所得的预测结果为：蛇床子素的质
量分数为22．32％。
2．3．6回归方程的预测：在上述优化的工艺条件
下，蛇床子素的质量分数的优化值的预测区间可以
利用3d[51规则来确定。因为a一0．420，所以，在优化
的工艺条件下，其指标真值在22．32士1．26，即
21．06～23．58，此时置信度为99％。
2．3．7验证试验：依照最优的工艺条件，进行验证
试验见表4。结果与回归方程预测结果基本接近，表
明该工艺稳定可行。 ．
表4验证试验结果
Table4 Resultsofverificationtests
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补骨脂炮制前后补骨脂素和异补骨脂素的变化
郭晏华，罗志冬，贾天柱
(辽宁中医药大学药学院，辽宁沈阳 110032)
摘 要：目的 比较补骨脂炮制前后补骨脂素和异补骨脂素的变化。方法 采用雷公法、盐炙法对19个不同来源
的补骨脂药材进行了炮制。通过HPLC梯度洗脱测定补骨脂炮制前后的补骨脂素和异补骨脂素的量。结果盐炙
法有利于提高脂溶性化合物的总量，而雷公法提高了补骨脂素和异补骨脂素的量。结论 雷公法和盐炙法使补骨
收稿日期；2006—03—07
基金项目：辽宁省自然科学基金资助项目(20052561)
作者简介：郭晏华(1962一)，女，湖南省湘潭市人，副教授，在读博士，从事中药质量分析的科研及有机化学的教学工作。
Tel：(024)86870908E—mail：guoyanhualnu@sina．corn
万方数据
中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第11期2006年11月。1653’
脂中成分的量发生改变。
关键词：补骨脂；炮制；HPLC
中圈分类号：R284．1；R286．02文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2006)11一1652—03
ComparisonofPsoralenandisopsoralenbetweenrawPsoraleacorylifoliaandprocessedon s
GUOYan—hua，LUOZhi—dong，JIATian—zhu
(CollegeofPharmacy．LiaoningUniversityofTraditionalChineseMedicine，Shenyang110032，China)
Keywords：PsoraleacorylifoliaI。．；processing；HPI。C
补骨脂为豆科植物补骨脂Psoraleacorylifolia
I。．的干燥成熟果实，主产于四川I、河南等地，其主要
成分为补骨脂素和异补骨脂素，一般需炮制入药。补
骨脂经炮制后其功效和内在成分的量均发生了改
变口]。补骨脂炮制方法历来有多种，但以盐炙法为常
见。本实验采用不同的炮制方法，通过对得到的样品
进行炮制前后含补骨脂索和异补骨脂素的量、成分
散点图及成分拟和曲线的比较，探讨炮制前后补骨
脂中化学成分量的变化。
l仪器、材料试剂
高效液相色谱仪：I，c一10Atvp(日本岛津)，
SPD一10Atvp紫外检测器(B本岛津)，中北工作站。
补骨脂药材来自19个不同地区，经辽宁中医药
大学鉴定教研室翟延军教授鉴定均为补骨脂P．
coryli．foliaI。．的干燥成熟果实。采用盐炙法⋯并模
仿了雷公法[2]对补骨脂进行炮制，得补骨脂饮片。
补骨脂素和异补骨脂素对照品(中国药品生物
制品检定所)，甲醇为色谱纯，其他试剂均为分析纯。
2方法与结果
2．1 色谱条件：AgilentEclipseXDB—Cl8(150
mm×4．6mm，5Jum)ODS色谱柱，甲醇一水从0rain
(25：75)到60rain(20：80)非线性梯度洗脱；体积
流量为1．0mI。／min；检测波长为330nm，柱温为
32C。
2．2对照品溶液的制备：精密称取补骨脂素和异补
骨脂素对照品适量，以甲醇溶解，制成含0．0582
mg／mL补骨脂素、0．0459mg／mL异补骨脂素的混
合对照品溶液，备用。
2．3供试品溶液的制备：精密称取补骨脂饮片粉末
(过4号筛)o．50g，置索氏提取器中，加入70mL甲
醇，加热回流提取2h，放冷，转移至i00mL量瓶
中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，滤液过0．45tLm微
孔滤膜作为供试品溶液。
2．4方法学考察
2．4．1线性范围考察：吸取不同质量浓度的混合对
照品溶液，分别进样10肛I。，测定峰面积。以进样量
为横坐标，峰面积为纵坐标，得线性方程。补骨脂素：
Y一100006X+249 5，，·一0．9994，线性范围：
0．058～0．293Yg；异补骨脂素：Y一931315X一一
2579．2∥一0．9994，线性范围：0．046～0．229gg。
2。4。2精密度试验：精密称取002号样品，制备供
试品溶液，精密吸取10pL，连续进样5次，测定补
骨脂素和异补骨脂素的质量分数，结果补骨脂素的
RSD为2．50％，异补骨脂素的RSI)为2．30％。
2．4．3稳定性试验：精密称取002号样品。制备供
试品溶液，分别在0、2、4、8、16h精密吸取10弘I，进
样，测定补骨脂素和异补骨脂素的质量分数。结果表
明16h内供试品溶液稳定性良好，补骨脂素的RSI)
为0．2％，异补骨脂素的RSD为0．5％。
2．4．4重现性试验：分别精密称取002号样晶5
份，各制备供试品溶液，精密吸取10肛L进样，测定
补骨脂素和异补骨脂素的质量分数，结果补骨脂素
的RSD为2．20％，异补骨脂素的RSD为1．90％。
2．4．5 回收率试验：采用加样回收法试验。精密称取
002号样品(含补骨脂素0．728％，含异补骨脂素
0．521％)o．5g各 份，分别加入补骨脂素对照品溶液
(0．49mg／mI。)7．0mI，，异补骨脂素对照品溶液(0．46
mg／ml，)7．0mI。，制备供试品溶液，进样测定，计算补
骨脂素平均回收率为96．71％。RSD为0．29％，异补骨
脂素平均回收率为97．20％，RSD为0．35％。
2．5测定：精密吸取10弘L供试品溶液注入液相色
谱仪，采用外标法计算补骨脂素和异补骨脂素的质
量分数，结果见表1。HPLC图见图1。
分别以19个生品及炮制品的各HPI。C色谱峰
的相对保留时间对相对保留面积作散点图可以看
出，与生品相比较，盐炙法使补骨脂中极性较大化合
物的量增加，但雷公法变化不大，见图2。
采用多元方差分析方法[23对生品和两种炮制品
的HPLC谱图中各峰的相对保留时间(x)及相对保
留面积(y)数据进行处理，分别得拟和曲线方程。生
万方数据
·1654· 中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第11期2006年11月
表1不同炮制方法的补青脂素和异补骨脂素(开一2)
Table1 PsoralenandisopsoralenInrawP．corylifoliaand fferentlyprocessedon s(恕一2)
2
A
、．．一一⋯一．⋯蔓⋯⋯一．k妣。⋯，．．、． ．一一．+ -一． ⋯IJ⋯一 ．一．‘1■。如=一二-oo⋯1．一
： B2
lI 。i,一tf_l
。⋯一一。一i童一jA立一一。一』己一jA点一一
I一补’l*Hff索2一肄补骨脂素
1一psoralcn2-isopsoralen
图1 四川成都产补骨脂生片(A)、雷公片(B)和
盐炙片(c)的HPLC图谱
Fig．1HPLCChromatogramsfP．corylifoliarom
Chengdu，SlchuanProvinceforawPsoraleae
pieces(A)，Leigongpieces(B)·andpieces
roastedwithsalt(C)
60
B
4l
2
c古or啬．i专。攒j5
+H对保留面#{
6i
4I
c
n。盛．
005l0I52025
圈2 补骨脂生片(A)、霄公片(B)和盐炙片(c)的散点圈
Fig．2ScatterofP．corylifoliarawPsoraleaepieces
(A)，Leigongpieces(B)，andpiecesroasted
withsalt(C)
品：Y一0．0236e0。5625x；雷公法：Y=0．0138e0‘82”；
盐炙法：y一0．0327e“527¨。
比较生品曲线和盐炙法曲线方程，由于二者回
归系数相近，但盐炙的常数项大于生品，表明在相同
的相对保留时间下，盐炙法的量大于生品。将盐炙法
曲线与雷公法曲线相比较也可得到相同的结果。但
雷公法曲线与生品曲线变化不大。这种结果与散点
图的结果一致。从该统计处理结果可以看出，雷公法
能适量提高补骨脂中补骨脂素和异补骨脂索的量，
而盐炙法将使总成分的量提高。
3讨论
生品及不同炮制品中含补骨脂素和异补骨脂素
的量结果表明：雷公法所得炮制品中补骨脂素量与
异补骨脂素量与生品比较略有升高，而盐炙品中补
骨脂素与异补骨脂素量与生品比较降低明显。目前
药典中的盐炙法是综合考虑了药理、化学成分的结
果，是否与总成分的量提高有关值得探讨。
为达到色谱峰的基线分离，根据补骨脂的紫外
图谱，分别在波长为246、295、320、330、360nm进
行了色谱峰的测定，结果显示在波长为330nm时
分离效果比较好。流动相分别采用了乙腈一水，等体
积的甲醇、乙腈一水的梯度洗脱，结果表明以甲醇一水
作为流动相较好。
补骨脂的炮制机制目前还不是十分的清楚，尤
其是炮制过程中成分之间的相互转化机制。以上实
验结果说明了不同炮制方法对补骨脂的一类化学成
分的影响，在补骨脂的炮制过程中存在补骨脂素和
异补骨脂素量上的改变。这些炮制后量上变化的物
质的改变机制以及与功效关系值得进一步的探讨。
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万方数据
补骨脂炮制前后补骨脂素和异补骨脂素的变化
作者： 郭晏华， 罗志冬， 贾天柱， GUO Yan-hua， LUC Zhi-dong， JIA Tian-zhu
作者单位： 辽宁中医药大学药学院,辽宁,沈阳,110032
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2006,37(11)
被引用次数： 6次

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