免费文献传递   相关文献

GC-MS Fingerprint of root tuber of Pseudostellaria heterophylla

太子参GC-MS指纹图谱的初步研究



全 文 :中草115Chinese’TraditionalandHerb lDrugs第38卷第1期2007年1月· 13·
3.1 内蒙两种源甘草种子的物理特性存在一定的
差异,上海庙种源种子的千粒质量略大于巴音乌素
种源。相同质量的混合样品中,两种源均以2级种子
所占比例最大,巴音乌素种源1级种子的比例较上
海庙种源高,但2、3级种子的比例均较上海庙种源
的低。两种源种子的粒质量百分比均呈正态分布,种
子组成中偏小或过重的种子所占比例较小。上海庙
种源种子粒质量分布在5~22mg,巴音乌素种源种
子粒质量分布在5~20mg。上海庙种源和巴音乌素
种源种子的单粒质量分别为12.3、11.7mg,正常种
子的比例分别为90%和87%。上海庙种源各粒级种
子的长、宽、厚测定值均略高于巴音乌素种源,但差
异未达到显著水平。
3.2 内蒙两种源甘草种子种皮的透性存在一定的
差异,巴音乌素种源未经处理的种子种皮的透水性
较上海庙种源强,电导率测定值是上海庙种源的2
倍,上海庙种源种子种皮的透水性较差,但种子耐贮
藏性和种子活力较巴音乌素种源强,两种源均以大
粒种子的透水性较强,以小粒种子的活力较强。机械
碾磨处理能够有效打破种皮的不透水性,不同种源
相同粒级处理过的种子电导率测定值之间的差异不
显著,两种源均以3级种子的电导率最高。两个种源
未处理和处理过的种子电解质渗漏的趋势基本相
同,都于浸泡后4h达到第1个高峰,于浸泡后8h
达到第2个高峰。
3.3 内蒙两种源甘草未处理种子的发芽率均在
14%~24%,巴音乌素种源种子发芽率和发芽势高于
上海庙种源,而种子处理后,上海庙种源种子的发芽
率和发芽势均高于巴音乌素种源。两种源种子萌发
后,胚根的长度和粗度均与种子的大小呈正相关。未
处理和处理过的种子两种源均以3级种子的发芽率
和发芽势最高,这是否与种皮研磨受损程度有关还有
待于进一步研究。在实践生产当中,如果采用机械碾
磨的方法处理甘草种子,最好先进行种子分级,将不
同粒级的种子分别处理,以保证出苗率,减少损失。
3.4 内蒙两个种源之间和相同种源不同粒级的幼
苗生长指标之间的差异多数达到了显著和极显著水
平。上海庙种源1年生播种苗的多数生长指标略高
于巴音乌素种源,但两种源之间的差异未达到显著
水平。种源和种子大小对甘草1年生播种苗的株高、
地茎、根长、芦头粗度以及生物量均未产生显著影
响。产生这种现象的原因是因为种子的物理特性是
在苗木生长前期起作用,还是在播种苗生长过程中
环境因素的影响掩盖了种源和种子大小的影响,还
有待进一步深入系统的研究。
References:
[1]SiJ P,LiuR,CaiTA,eta1.Preliminarystudieson
heteromorphosisofMagnoliaofficinalisfromdifferent
provenancesEJ].JZhejiangForestSciTechnol(浙江林业科
技),1998,18(3):13—17.
E2]TongZK,SiJP,LiuR,eta1.Studyonvariationand
inheritanceofphenoliccompoundco centrationsinMagnol妇
officinalisofd fferents edsources[J].ForestRes(林业科
学研究),2000,13(3):257—261.
E33LiuGF,YangCP,LiuGJ,eta1.Theconfiguration
charactersandgerminationpercentagesofvariousprovenance
ofBetulaplatyphylla[J].JNorthForestUniv(东北林业大
学学报),1999,27(4):1-4.
I-4]XueP,LiBH,XiaoxH,eta1.Chemicalcomponent
variationinGingkgoof differentprovenanceleafI-J-I.
EconomicForestRes(经济林研究),2000,18(3):31—33.
[5]KuoWHJ.Delayed—permeabilityof soybeanseeds:
characteristicsandscreeningmethodology口].SeedSci
Technol,1989,17:131-142.
太子参GC—MS指纹图谱的初步研究
刘训红1,王媚1,蔡宝昌1,王玉玺2,林新艳¨
(1.南京中医药大学,江苏南京210029;2.南京军区南京总医院,江苏南京210002)
摘 要:目的 建立太子参挥发性成分GC—MS指纹图谱分析方法,为太子参质量评价提供依据。方法用GC—MS
联用技术对不同产地太子参的挥发性成分进行分析,建立其指纹图谱,确定共有指纹峰,并选用模糊聚类法分析比
较。结果太子参挥发性成分中含有12个特征性指标成分,初步建立了以此12个共有峰为特征指纹信息的GC—
MS指纹图谱。结论方法准确可靠,重现性好,可作为太子参内在质量评价的依据。
关键词:太子参;挥发性成分;GC—MS;指纹图谱
中圈分类号:R282.7 文献标识码:A 文章编号:0253—2670(2007)01—0113—04
收稿日期:2006—03—17
基金项目:江苏省自然科学基金资助项目(BK2004154)
*林新艳南京中医药大学中药资源与鉴定专业2001级实习生
万方数据
·114· 中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第1期2007年1月
GC—MSFingerprintof ootuberofPseudostellariahete ophylla
LIUXun—hon91,WANGMeil,CAIBao—chan91,WANGYu—xi2,LINXin—yanl
(1.NanjingUniversityofTraditionalChineseMedicine,Nanjing210029,China;2.Nanjing
GeneralHospitalofNanjingMilitaryRegion,Nanjing210002,China)
Abstract:ObjectiveToes ablishtheanalyticalmethodf rthefingerprintofthevolatilecomponents
intherootuberofPseudostellariahete ophyllab GC—MSandprovidethebasisforqualityassessmentof
thecruderug.MethodsThevolatilecomponentsintherootuberofP.heterophyllafromdifferent
habitatswereanalyzedanthechromatographicfingerprintsweree tablishedbyGC—MS.Thecommon
peaksweredeterminedandthefuzzyclusterwaselectedtocomparetheresults.ResultsTherew re12
maincharacteristiccomponentsinthevolatilecomponentsintherootuberofP.heterophylla.GC—MS
Fingerprintof12commonpeakswasestablishedpreliminarily.ConclusionThemethodisreliableand
accurate,andcanbeusedforqualitycontroloftherootuberofP.heterophylla.withfavourable
r印roducibility.
Keywords:therootuberofPseudostellariaeheterophylla(Miq.)PaxexPaxetHoffm.;volatile
components;GC-MS;fingerprint
太子参为孩儿参Pseudostellariaheterophylla
(Miq.)PaxexPaxetHoffm.的干燥块根,《中国
药典》收载的常用补益中药,具有益气健脾、生津润
肺之功效,临床常用于治疗脾虚体倦、食欲不振、病
后虚弱、气阴不足、自汗口渴、肺燥干咳等,尤其是治
疗A,JL脾虚而食欲不佳的要药,民间常作为强壮滋
补品。现代研究表明,太子参含有环肽类、三萜皂苷
类、多糖类以及挥发性成分等r1‘2],具有抗疲劳、抗缺
氧、抗应激、抗衰老等药理作用。一般认为太子参属
江苏道地药材。近10多年来,野生资源日渐减少,原
药材市场需求量逐年加大,安徽、福建和贵州等地也
开始大面积栽培太子参。随着太子参栽培地区扩大,
流通品系增多,药材的内在质量控制以及发展道地
药材的生产已成为当务之急。本实验在用GC—MS
法对不同产地太子参中挥发性成分分析鉴定[33的基
础上,初步建立太子参挥发性成分GC—MS指纹图
谱,为太子参药材的质量评价和GAP实施提供科
学依据。
1仪器与试药
HP6890GC/5973MSD气质联用仪(美国惠普
公司);挥发油测定装置。
乙醚为分析纯;太子参药材除7号样品2004年
10月从贵州施秉产区购得外,其他样品均为2004年7
月至10月由产区实地采集,为栽培品,经笔者鉴定均
为石竹科植物孩儿参Pseudostellariaheterophylla
(Miq.)PaxexPaxetHoffm.的块根(表1)。
2方法与结果
2.1 供试品溶液的制备:分别取10批太子参样品
200g,粉碎成粗粉,过筛(筛孔内径为0.64ram),称
量200g,加入1000mL水,浸泡10h,按《中国药
典}2005年版附录挥发油测定法提取,采用乙醚做
吸收溶剂,乙醚用量为5mL,回流提取8h,得挥发
性成分乙醚提取液,供GC—MS测试用。
表1太子参样品产地
Table1 HabitatsofroottuberofP.heterophylla
样品号 产地
1 江苏句容袁巷镇
2 江苏句容马梗
3 江苏句容天王镇朱巷村白龙地
4 江苏句容天王镇白杨村
5 福建柘荣
6 江苏句容陈武乡贺庄村
7 贵州施秉
8 江苏溧阳
9 江苏江宁
!! 垂丝星型
2.2分析条件:气相色谱条件:色谱柱为HP一5MS
弹性石英毛细管柱(Crosslinked5%PhenylMethyl
Siloxane,30.0m×0.25mm,0.25弘mFilm
Thickness);进样口温度250℃;升温程序:柱温60
℃,以5℃/rain升温至250L,C;载气为氦气,体积流
量1.0mL/min;分流进样,分流比为40:1,进样量
1扯L。质谱条件:电离方式EI;离子源温度230C;
四级杆温度150‘C;倍增器电压为1480V;电子能
量70eV;接口温度280℃;溶剂延迟2rain;扫描质
量为50~550amu。
2.3方法学考察
2.3.1 2h记录图:取太子参挥发性成分进样分
析,结果表明,50~120min没有出峰,提示50min
内挥发性成分出峰完全。
万方数据
中草焉 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第1期2007年1,El·115-
2.3.2精密度试验:取太子参(样品2)挥发性成分
进行分析,连续进样5次。结果表明:36个指标成分
群保留时间的RSD均小于0.2%,相对质量分数
RSD均小于5%,提示仪器精密度良好。
2.3.3稳定性试验:取太子参(样品2)挥发性成分
进行分析,分别在1、3、6、24、48、120h进样6次,得
36个主要特征峰保留时问、相对质量分数。结果表
明:36个指标成分群保留时间RSD均小于0.30A,
相对质量分数的RSD均小于5%,提示120h内样
品溶液稳定性较好。
2.3.4重现性试验:取同一批次太子参(样品2)5
份分别提取挥发性成分后,进样分析,得36个主要
特征峰的保留时间和相对质量分数。结果表明,36
个指标成分群保留时间的RSD均小于0.3%,相对
质量分数的RSD,均小于5%,说明重现性较好。
2.4指纹图谱建立:按选定的GC—MS条件对太子
参挥发性成分进行分析,测得所有供试品的GC—MS
总离子流图;再对总离子流图中的各峰经质谱扫描
后得质谱图,所有组分质谱数据经计算机处理和
NIST一98标准质谱图库检索鉴定,并与有关标准谱
图核对,初步确定出太子参挥发性成分中78种化合
物。根据太子参挥发性成分GC—MS总离子流图所
给出的峰数、峰保留时间和峰面积值等相关参数以
及成分鉴定结果,进行分析、比较,制定GC—MS指
纹图谱(图1)。
图1太子爹的GC-MS指纹图谱
Fig.1GC-MSFingerprintofRadixPseudostellariae
2.5指纹图谱分析
2.5.1共有指纹峰的标定:经对挥发性成分GC—
MS总离子流图的分析、比较,标定12个共有峰作为
太子参指纹图谱的特征峰,1~12号峰化学成分依次
为:吡咯、己醛、糠醛、糠醇、2一戊基呋喃、3一呋喃甲基
乙酸酯、4一丁基一3一甲氧基一2,4一环己二烯一1一酮、4一丁
基一3一甲氧基一2一环己烯一1一酮、未鉴定A、2一环己烯一1一
醇一苯甲酸酯、未鉴定B、正一十六烷酸。以4一丁基一3一甲
氧基一2,4一环己二烯一1一酮(7号峰)为参照峰,分别求
出各共有峰与之相比的a值(调整保留时间之比)和
各共有峰的相对峰面积(峰面积之比),见表2。
表2太子参挥发性成分中共有峰的相对保留时间a值和相对峰面积
Table2 Relativeretentionmeaandrelativepeakareaofcommonpeaks
ofvolatilecomponentsinroottuberofP·heterophylla
峰号
各批样品相对峰面积
8
o.07
o.06
O.06
O.12
O.08
O.04
1.00
O.12
0.05
O.08
o.04
O.11
10
O.19
O.08
o.12
o.08
o.09
0.03
1.00
0.12
0.05
O.10
o.04
o.16
o.18
0.20
o.22
o.27
o.43
o.44
1.oo
1.09
1.22
1.58
1.61
2.22
O.06
o.08
o.17
0.29
o.04
0.08
1.00
o.26
o.19
o.12
o.04
O.88
o.21
0.11
O.14
o.15
o.20
o.03
1.00
0.18
o.13
0.10
o.08
0.36
2.5.2指纹图谱的聚类分析:选择太子参挥发性成
分中12个比较明显的共有峰,根据表2中的数据,
用SPSS软件中的hierarchicalclusteranalysis对
10个太子参样品进行聚类分析,所用聚类方法为
averagelinkage(betweengroups),距离公式为
squareeuclideanistance,得不同样品太子参的聚
类分析图(图略)。结果显示,当距离标尺在1时,样
品2、9,样品3、4、8、10各归为一类;在2时,样品2、
9与样品3、4、8、10归为一类;在6时,样品6与样
品2、3、4、8、9、10归为一类;在7时,样品1与样品
2、3、4、6、8、9、10归为一类;样品5、7当距离标尺在
5时,归为另一类;当距离标尺在25时,样品5、7才
;一¨%昭墟∞毗∞∞∞%睨∞
一O
O
O
0
O
O
1
O
0
0
0
O.一曲加¨蛎他∞∞∞∞吣∞鹪
一O
O
O
O
O
O
1
O
O
0
0
O
万方数据
·116·+ 中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第1期2007年1月
与样品1、2、3、4、6、8、9、10全部聚为一类。可见,江
苏产太子参指纹图谱相似性较好,与5、7号外省样
品有一定的区别。
2.5.3色谱峰的重叠率:以太子参9号样品图谱为
基准,按以下公式[待测样品与标准样品共有的峰
数×2/(待测样品与标准样品峰数和)×100%]计
算,分别求得另外9种样品色谱峰的重叠率依次为
96.7%、95.1%、96.8%、95.2%、95.1%、94.9oA、
96.1%、95.3%、97.2%。结果表明:10张图谱内的
重叠率较高,均大于94.oH。
2.5.4共有峰的百分比:计算各样品中共有峰面积
之和占峰总面积的百分比依次为:74.2%、82.o%、
89.1%、93.3%、76.0%、73.3%、88.2%、75.0%、
85.4%、83.2%。
3讨论 ·
3.1 本实验在样品制备、测试条件方面都经过大量
的实验探索,通过对色谱图全貌(出峰数、分离度等)
的反复考察,认为目前所选用的测试条件较为理想。
方法学考察结果表明:仪器精密度良好,样品稳定
性、重现性亦较好,谱图中各组分色谱峰的重叠率极
高,从而说明该方法建立的指纹图谱准确可靠,特征
指纹信息丰富,专属实用,这对从挥发性成分角度判
断太子参药材的质量有一定的参考价值。
3.2不同产地太子参中均含有吡咯、己醛、糠醛、糠
醇、2一戊基呋喃、3一呋喃甲基乙酸酯、4一丁基一3一甲氧
基一2,4一环己二烯一1一酮、4一丁基一3一甲氧基一2一环己烯一
1一酮、未鉴定A、2一环己烯一1一醇一苯甲酸酯、未鉴定
B、正一十六烷酸等12种主要成分,占挥发性总成分
的80%左右,具有突出的代表性,故以此12个特征
性指标成分作为共有特征峰构建GC—MS指纹图
谱。4一丁基一3一甲氧基一2,4-环己二烯一l一酮的质量分
数高达40%以上,为最突出的指标,故以此作为参
照峰分析指纹图谱。当然以上12种主要成分是否能
完全揭示太子参挥发性成分的特征还有待进一步深
入研究,需考虑栽培条件、采收加工、贮藏等多种因
素的影响。
3.3应用模糊聚类法作分析比较,能揭示挥发性成
分中特征性成分质量分数的配比关系,更能全面、综
合、准确地反映不同产地药材GC—MS指纹图谱的
关系,结果显示江苏地产太子参指纹图谱相似性较
好,与5、7号外省样品有一定的区别,从而提示江苏
地产太子参挥发性成分中特征性指标成分呈现一种
特定的配比关系——挥发性成分的道地性特征。
3.4本实验初步建立太子参挥发性成分GC—MS
指纹图谱分析方法,为太子参药材的质量评价和
GAP实施提供科学依据。
References:
[1]LiuXH,KanYM.AsurveyofresearchofRadix
Pseudostellariae[J].ShizhenJTraditChinMedRes(时珍
国医国药),2000,11(12):1131—1132.
E2]LiangXT.BasicStudiesonChineseMateriaMedica(常用中
药基础研究)[M].VolI.Beijing:SciencePress,2003.
[3]LiuXH,WangM,CaiBC,eta1.Analysisofes ential
componentsofRadixPseudostellariaefromdiff renthabitats
byGC—MS[J].ShizhenJTraditChinMedRes(时珍国医国
药)。2007,18(1):5—7.
广藿香挥发油的合成场所及储存部位研究
冯承浩1,隋春花2,吴鸿¨
(1.韶关学院英东生物工程学院农业工程系,广东韶关512005;2.韶关学院旅游系,广东韶关512005;
3.华南农业大学生命科学学院药用植物研究中心,广东广州 510642)
摘要:目的揭示广藿香茎和叶中挥发油的合成场所、转运方式和储存部位。方法超薄切片法、组织化学法。结
果在广藿香茎内的薄壁细胞中,质体和线粒体内观察到电子致密度高的嗜锇物质,另外,在细胞质中观察到有一
些灰色小泡,在小泡的外膜上附着一些小的、电子致密高的嗜锇滴;在液泡膜外侧,聚集着大量的附着嗜锇滴的灰
泡。在叶中,情况有所不同。由于栅栏组织细胞排列紧密,体积较小,且细胞内密集大量的叶绿体,因此栅栏组织细
胞内无大液泡,质体、线粒体和小液泡相邻分布,而前两者内分布有电子致密度高的嗜锇物质。结论在广藿香茎
内,质体是挥发油的主要合成场所,合成的挥发油主要通过灰色小泡转运到液泡内储存。在叶中,叶绿体不仅行使
收稿日期:2006—03—07
基金项目:广东省中医药管理局基金项目(F01032);广东省科技攻关项目(2002c20147)
作者简介:冯承浩(1973一),男(汉族),山东省泰安市人,讲师,硕士,广东韶关学院英东生物工程学院工作,主要从事药用植物学方面的
研究。Tel:(0751)8121376E—mail:fchenghao@163.com
*通讯作者吴鸿Tel:(020)85288393E—mail:wh@seau.edu.cn
万方数据
太子参GC-MS指纹图谱的初步研究
作者: 刘训红, 王媚, 蔡宝昌, 王玉玺, 林新艳, LIU Xun-hong, WANG Mei, CAI Bao-
chang, WANG Yu-xi, LIN Xin-yan
作者单位: 刘训红,王媚,蔡宝昌,林新艳,LIU Xun-hong,WANG Mei,CAI Bao-chang,LIN Xin-yan(南京中
医药大学,江苏,南京,210029), 王玉玺,WANG Yu-xi(南京军区南京总医院,江苏,南京
,210002)
刊名: 中草药
英文刊名: CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年,卷(期): 2007,38(1)
被引用次数: 12次

参考文献(3条)
1.Liu X H;Kan Y M A survey of research of Radix Pseudostellariae[期刊论文]-时珍国医国药 2000(12)
2.Liang X T 常用中药基础研究 2003
3.Liu X H;Wang M;Cai B C Analysis of essential components of Radix Pseudostellariae from different
habitats by GC-MS[期刊论文]-时珍国医国药 2007(01)

本文读者也读过(8条)
1. 张振明.许爱霞.葛斌.袁逸铭.ZHANG Zhen-ming.XU Ai-xia.GE Bin.YUAN Yi-ming 太子参水提物的抗氧化活性
[期刊论文]-中国医院药学杂志2006,26(2)
2. 刘训红.李伟东.蔡宝昌.黄明辉 太子参的毛细管电泳指纹图谱研究[期刊论文]-南京中医药大学学报(自然科学
版)2007,23(4)
3. 唐宝莲.辛绍祺.蔡宝昌.刘训红.陈斌 太子参HPLC指纹图谱的初步研究[期刊论文]-南京中医药大学学报(自然
科学版)2005,21(3)
4. 滕杰.李庆 太子参与其伪品的鉴别[期刊论文]-时珍国医国药2006,17(2)
5. 刘伟祥.胡海云.刘喜纯.段启.LIU Wei-xiang.HU Hai-yun.LIU Xi-chun.DUAN Qi 太子参HPLC色谱指纹图谱研究
[期刊论文]-中草药2007,38(5)
6. 刘义宁.易骏.陈体强.LIU Yi-ning.YI Jun.CHEN Ti-qiang 太子参挥发油化学成分研究[期刊论文]-时珍国医国
药2009,20(1)
7. 刘训红.居文政.蔡宝昌.黄明辉.LIU Xun-hong.JU Wen-zhen.CAI Bao-chang.HUANG Ming-hui 太子参HPLC-MS指
纹图谱的初步研究[期刊论文]-中成药2008,30(2)
8. 张健.李友宾.王大为.殷志琦.段金廒.ZHANG Jian.LI You-bin.WANG Da-wei.YIN Zhi-qi.DUAN Jin-ao 太子参
化学成分研究[期刊论文]-中国中药杂志2007,32(11)

引证文献(12条)
1.宋建平.曾艳萍.刘训红.唐旭倩 不同产地太子参HPLC指纹图谱分析[期刊论文]-江苏中医药 2008(10)
2.刘训红.居文政.蔡宝昌.黄明辉 太子参HPLC-MS指纹图谱的初步研究[期刊论文]-中成药 2008(2)
3.宋建平.曾艳萍.刘训红.张月婵 太子参道地产区生态环境分析[期刊论文]-时珍国医国药 2008(12)
4.李仕海.刘训红.黄明辉 太子参药材的HPCE指纹谱分析[期刊论文]-时珍国医国药 2007(4)
5.房克慧.刘训红.曾艳萍 太子参栽培土壤环境的质量评价[期刊论文]-药学与临床研究 2007(6)
6.张卓曼.贺静静.张兰 太子参挥发性成分的GC-MS分析[期刊论文]-福州大学学报(自然科学版) 2008(3)
7.宋建平.刘训红.张月婵 太子参道地药材指纹图谱的构建[期刊论文]-中华中医药学刊 2008(9)
8.唐晓丹.秦早.杨冉.陈晓岚.范璐.屈凌波.黄纪念.张勋 不同香型芝麻油中挥发性风味成分的研究[期刊论文]-中
国油脂 2013(6)
9.季春 药用植物太子参指纹图谱研究进展[期刊论文]-化学工程与装备 2010(4)
10.王文凯.贾静.丁仁伟.刘红宁 太子参近年研究概况[期刊论文]-中国实验方剂学杂志 2011(12)
11.王文凯.贾静.丁仁伟.刘红宁 太子参近年研究概况[期刊论文]-中国实验方剂学杂志 2011(12)
12.彭华胜.刘文哲.胡正海 太子参的生物学与化学成分的研究进展[期刊论文]-中草药 2008(3)


本文链接:http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical_zcy200701040.aspx