全 文 ：·1812· 中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第12期2007年12月
大孔吸附树脂对莲子心中有效成分的分离纯化研究
张吉祥·，冯冬然·，欧来良
(1．廊坊师范学院化学系，河北廊坊065000；2．生物活性材料教育部重点实验室，南开大学，天津300071)
摘要：目的研究大孔吸附树脂吸附分离莲子心中莲心碱、异莲心碱及甲基莲心碱的工艺条件及参数。方法考
察了AKS—W、AB一8和H214树脂对莲心碱、异莲心碱及甲基莲心碱的静态及动态吸附性能，并采用HPLC定量分
析莲心碱、异莲心碱及甲基莲心碱。结果AKS—W树脂对莲子心中有效成分有较好的吸附分离效果，提取物中莲
心碱、异莲心碱及甲基莲心碱的质量分数分剐提高到10．2％、6．7％和11．9_％。结论大孔型菲极性吸附树脂
AKS—W对莲子心中有效成分是一种较为理想的分离介质。
关键词：莲子心l莲心碱f异莲心碱；甲基莲心碱；大孔吸附树脂
中图分类号：R284．2；R286．02文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2007)12—1812—03
Isolationandpurlficationofel￡ectivecomponentsinPlumulaNelumbinis
bymacroporousadsorptionresi s
ZHANGJi—xian91，FENGDong～ranl，OULai-lian92
(1．DepartmentofChemistry，LangfangNormalCo lege，Langfang065000,Chma}2·KeyLaboratory
ofBioactiveMat rials，MinistryofEducation，NankaiUniversity，Tianjin。300071，China)
Abstract：ObjectiveToinvestigatethedsorptionfunctionofmacroporousadsorptionresi sforthe
separationandpurificationof heffectivecomponentsinPlumulaNelumbinis．MethodsAKS—W，AB一8，
andH214resinsweresystematicallystudiedfortheiradsorptioncapability,andthecontentsof heliensi—
nine，isoliensinine，andneferineweredeterminedbyHPLC．ResultsAKS—WResinhadapreferablead—
sorptiveandseparateiveeffectfortheffectivecomponentsinPlumulaNelumbinis．Theproductscontain—
ing10．2％iiensinine，6．7％isoliensinine，and11．§％nefe!finecouldbeobtained。ConclusionMacro-
porous—typeandnon—polaradsorptionresiAKS．WiSanidealdsorbentforthextractionoftheffective
componentsinPlumulaNelumbinis．
Keywords：PlumulaNel mbinis；liensinine；isoliensinine}neferine；macroporousadsorptionresi
莲子心在我国有悠久的药用历史，含多种有效
成分，其中最主要的有莲心碱、异莲心碱和甲基莲心
碱。它们结构相似，且均具有降血压和抗心律失常等
作用[1~3]。目前提取莲子心中莲心碱、异莲心碱和甲
基莲心碱化合物的方法主要是溶剂萃取和重结晶等
方法I-4’5]。本实验根据AKS—W、AB一8、H214大孔吸
附树脂在中药有效部位的分离上具有的独特优势，
有选择性地吸附分离莲子心中结构相似的3种有效
成分，提取工艺简化，收率提高。
1仪器与材料
Spectra—physics高效液相色谱仪(sp8810泵，
sp8456UV／Vis检测器，sp4290积分仪)，HL一2恒
流泵(上海沪西仪器厂)，BSZ一2自动部分收集器
(上海沪西仪器厂)，THZ88—1台式多用恒温震荡器
(江苏太仓鹿河生化仪器厂)，真空干燥箱(天津实验
仪器厂)，DT—l00A型分析天平(北京光光仪器厂)。
AKS—W、AB一8大孔吸附树脂均为南开大学化
工厂产品；H214大孔吸附树脂，自制；莲子心购自河
北安国药材公司，产地江西，经笔者鉴定为莲科植物
莲Nelumbonufife,-,zGaertn．种子的幼叶及胚根；
莲心碱、异莲心碱和甲基莲心碱对照品(自制，
HPLC紫外检测为单一组分，经高分辨正离子二次
离子质谱、核磁共振谱鉴定，莲心碱、异莲心碱质量
分数99．5％以上，甲基莲心碱质量分数98．5％)；甲
醇、乙睛(色谱纯)；三乙醇胺(分析纯)。
2方法与结果
2．1 树脂的预处理：AKS—W、AB一8、H214湿法装
柱，用工业乙醇洗至加水不浑浊，然后用蒸馏水洗至
无醇，备用。
2．2 莲心碱、异莲心碱和甲基莲心碱的HPLC法测定
收稿日期：2007-02—01
基金项目：国家自然科学基金资助项目(29974015)I廊坊师范学院科学研究项目(LS200513)，南开大学创新基金项目
*通汛作者欧来良TeJ；(022)23502155E—mail：ouyll@nankai．edu，cn
万方数据
中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第12期2007年12月·1813·
z．2，1 色谱条件：ODSC。。色谱柱(250mm×4，6
inm，5弘m)；流动相：甲醇一水一乙腈一三乙醇胺(50：
30：20：0．3)；体积流量：1mL／min；检测波长：252
llm；温度：室温。
2．2．2标准兹线的绘制：精确称取3种对照品各约
100mg，置50mL量瓶中，加流动相至刻度。精密吸
取0．5、1、2、4、6、8、10mL于25mL量瓶中，流动相
稀释至刻度，混匀，取5肛L进行测定。结果3种成分
在质量浓度0．05～1．0mg／mL与峰面积线性关系
良好，以峰面积对质量浓度做图得标准曲线方程，莲
心碱：Y一7×10-6X+40410，r一0．9997；异莲心
碱：Y=7×101X+94296，r一0．9993；甲基莲心
碱：y一7×10-6X+261 3，r=0．9995。
Z．z，3莲子心上样溶液的制备；称取1000g莲子
心，以80％乙醇12L分3次冷浸，每次24h。合并
浸取液，回收乙醇，同时分次加入少量水。待乙醇回
收较完全时，所得水溶液约为600mL，滤过即得透
明上样液，以生药计质量浓度为1，70g／mL。
Z，2．4样品测定：取上样液适量经大孔吸附树脂处
理，洗脱液过0．45肛m微孔滤膜，进样测定峰面积
值，代入标准曲线方程计算质量浓度，进行相关计
算，对照品和上样液的HPLC图谱见图1。
2．3。莲子心中莲心碱、异莲心碱和甲基莲心碱的测
定：精密称量莲子心2．0g，用80％乙醇在100mL
微型索氏提取器中加热回流提取3h，共提取3次，
合并提取液测定峰面积，代入标准曲线方程，计算质
量分数。结果莲子心中莲心碱i异莲心碱寝翠基莲心
碱的质量分数分别为0．8％、0，15％、0．53％。
1一莲心碱2一异莲心碱3-甲基莲心碱
1-liensinitie2-isoliensinine3- ef rine
圈1对照昌(A)和上样液(B)的HPLC圈谱
Fig，】HPLCChromatoglgmmfthreer ferencesub—
stances(A)andextr ctingsolution(B)
2．4静态吸附和解吸试验：将1．0g湿树脂直接加
入100mL具塞锥形瓶中，加入10mL上样溶液，将
具塞锥形瓶放在20℃恒温振荡器上振荡12h，转速
120r／面in，趿附平衡后，取上清液5弘L测定莲心
碱、异莲心碱和甲基莲心碱的质量浓度。将吸附液滤
去，向达到吸附平衡的树脂中加入lOmL60％乙醇，
20℃连续振荡12h，待充分解吸后测定所得浸提溶
液中莲心碱、异莲心碱和甲基莲心碱的质量浓度，计
算吸附率和解吸率．结果见表1。
吸附率=(上样液中成分的质量浓度一吸附平衡后上清
液质量浓度)／上样液中成分的质量浓度×lOO％
解吸率=浸提液中成分的质量浓度／(上样液中成分的
质量浓度×成分妻§吸黪辜)x100％
可以看出，静态情况下，树脂AKS—W和H214
裹l静态吸附和解暇结果
Table1 Resultsofstaticadsorptionandesorptlon
对莲心碱、异莲心碱和甲基莲心碱具有较高的吸附
量，而H214的解吸效果则较差，这可能因H214在
后交联过程中部分基团被氧化成羰基，羰基则能和
莲心碱分子上的氨基产生较强的化学吸附作用，从
而影响了被吸附莲心碱的解吸效果。而对AB一8树
脂来说，随着树脂极性的增加，吸附的极性杂质相应
增多，从而导致对莲心碱等非极性有效成分的吸附
量减少。综上可以看出，AKS—W较其他两种树脂对
莲心碱的分离更具优势。
2，5 动态吸附和洗脱试验：考察树脂AKS—W对3
种有效成分的动态吸附性能。将10mL树脂以湿法
装入内径1．2cm的交换柱，洗净。吸附液以1BV／h
的流速过柱，同时分段收集流出液，测其中莲心碱、
异莲心碱和甲基莲心碱的质量浓度，并绘制树脂对
各组分的吸附曲线，见图2。任一组分开始泄露时即
停止吸附，先用蒸馏水淋洗至中性，再用60％乙醇
洗脱，分部收集，同时对流份进行HPLC检测，结果
见图3。可以看出，AKS—W对3种莲心碱均具有良
好的吸附和解吸性能。在以60％乙醇为洗脱剂的情
况下，3BV已经基本完全洗脱3种莲心碱样品，且
万方数据
·1814· 中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第12期2007年12月
f
冒
誊
杂
烂
咖
蜓
体积／BV
1一甲基莲心碱2一莲心碱3一异莲心碱
1-neferine2—．1iensinine3．．isoliensinine
图2莲子心提取物在AKS—W树脂上的动态吸附曲线
Fig．2DynamicadsorptioncurveofPlumula
NelumbinisextractonAKS—Wresin 图3
洗脱峰均较集中。
2．6洗脱剂体积分数的选择：取上述经预处理的树
脂各20mL分别装入3支交换柱，分别取上样溶液
各100mL通入，控制流速1BV／h，吸附完毕后，用
蒸馏水洗至中性，然后分别用30％、60％、90％乙醇
脱附，得洗脱液，浓缩、真空干燥得淡黄色粉末，结果
体积／BV
1一甲基莲心碱2一莲心碱3一异莲心碱
1-neferine2diensinine3-isoliensinine
莲子心提取物在AKS—W树脂上的洗脱曲线
Fig．3DynamicdesorptioncurveofPlumula
Nelui嚏binisextractonAKS—Wresin
中目标成分的质量分数相应降低，30％乙醇作为洗
脱剂虽然得到了质萤分数较高的产品，但却牺牲了
产率。90％乙醇虽然在产率上有相应提高，但从经济
方面考虑，60％乙醇是较为理想的洗脱剂。
见表2。结果表明，随着乙醇体积分数的提高，产品 2·7 AKS—W树脂的分离纯化试验结果：对AKS一
表2不同体积分数洗脱剂对产品的质量分数和产率的影响
Table2 Effectofeluentconcentrationsoncontentsandyields：ofproducts
w树脂纯化、动态吸附洗脱产物干燥称量，分析其
中莲心碱、异莲心碱和甲基莲心碱的质量分数。通过
AKS—W树脂的吸附分离，得产品1．2g，收率
1．2％，其中莲心碱、异莲心碱和甲基莲心碱的质量
分数分别为10．2％、6．7％和11．9％，质量分数分别
提高到原药材中相应成分的17．6、44．7、22．5倍。
3讨论
吸附容量、吸附选择性、洗脱性能是衡量一种树
脂吸附性能的主要指标，本实验对具有不同极性和
比表面积的AKS—W、AB一8和H214树脂吸附性能
进行了考察，发现大孔型非极性树脂对于莲子心中
的莲心碱、异莲心碱和甲基莲心碱有较好的吸附分
离效果。H214作为非极性后交联树脂，比表面积比
AKS—W大得多，应该有较高的吸附容量，但事实恰
好相反，其原因可能与H214的孔径较小有关，-后交
联树脂的特点就是比表面积增大，而树脂的孔径较
小。另外，非极性树脂对莲子心的非极性有效成分的
吸附分离最为有利，这是由于极性树脂会吸附较多
的极性杂质。本实验通过几种树脂吸附性能的比较
研究，发展大孔型非极性吸附树脂AKS—W对莲子
心的有效成分的分离是一种较为理想的分离介质。
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6
4
2
O
一，_g∞邑、燃爱捌蜂
万方数据
大孔吸附树脂对莲子心中有效成分的分离纯化研究
作者： 张吉祥， 冯冬然， 欧来良， ZHANG Ji-xiang， FENG Dong-ran， OU Lai-liang
作者单位： 张吉祥,冯冬然,ZHANG Ji-xiang,FENG Dong-ran(廊坊师范学院,化学系,河北,廊坊,065000)
， 欧来良,OU Lai-liang(生物活性材料教育部重点实验室,南开大学,天津,300071)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2007,38(12)
被引用次数： 2次

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