全 文 ：3　讨论
3. 1　经多种比例流动相比较 ,甲醇 -水 -磷酸 ( 46∶
53. 8∶ 0. 2)的效果最佳。
3. 2　结果表明 ,采用 HPLC直接测定清泻丸中黄
芩苷含量 ,方法简便快速 ,结果可靠 ,可作为清泻丸
的质量控制方法。
参考文献:
[ 1]　宋宁宁 . 高效液相色谱法测定复方鱼腥草颗粒中黄芩苷的含
量 [ J ]. 药物分析杂志 , 1999, 19( 5): 351-352.
[2 ]　中国药典 [ S] . 2000版 .一部 .
[3 ]　陈发奎 . 常用中草药有效成分含量测定 [M ]. 北京:人民卫生
出版社 , 1997.
高效薄层色谱分离苦豆子生物碱的体系优化
秦学功 ,元英进
(天津大学化工学院 制药工程系 ,天津　 300072)
　　苦豆子 Sophora alopecuroides L. 为我国西北
常见的野生植物 ,其主要成分生物碱品种多、含量
高 ,而且具有广泛而显著的药理作用 [1 ]。由于毛细管
色谱只能用于个别生物碱的分析 [2 ] ,而高效薄层色
谱由于苦豆子生物碱分离须二次展开 [3 ] ,不仅繁琐 ,
更重要的是重现性差。所以 ,本研究以苦豆子生物碱
为对象 ,对高效薄层色谱法的分离体系进行了优化。
1　器材与试药
高效硅胶薄层板 ( E. Merck Art 5633) ; XY双
底展开槽 (上海信谊仪器厂 ) ; 1μL定量点样管 (日
本岛津 ) ; 8种生物碱样品为本实验室制备与纯化 ,
HPLC分析含量均在 98%以上 ;试剂均为市售分
析纯。
2　实验方法
2. 1　改进实验:根据文献 [ 3] ,选择第一次展开剂为
苯 -丙酮 -甲醇 ( 8∶ 3∶ 0. 5) ,二次展开剂在第一次展
开剂中追加 1. 5 mL甲醇 ,展距减半。为考察一次展
开的可能性 ,仍采用 3种溶剂 ,在两展开剂极性强度
之间 ,进行探索试验。 根据文献 [4 ]计算 ,第一次展开
剂极性强度 P1为 3. 430,第二次展开剂极性强度 P2
为 3. 623。在 P1与 P2之间 ,以不同配比的苯 -丙酮 -
甲醇展开 8种生物碱混合液。 经过多次试验 ,发现
苯 -丙酮-甲醇 ( 9∶ 3∶ 2)极性强度为 3. 557,一次展
开即可达到原展开体系二次展开效果 ,如图 1-A。
但是 ,该展开剂中丙酮挥发性较强 ,展开槽不易
密封 ;苯与甲醇毒性问题亦须解决。 因此 ,必须寻求
新的展开体系。
2. 2　优化研究
2. 2. 1　组分的优化确定:采用 Gla jch三角形法 [5 ] ,
从以聚类分析的 8类试剂中选择位于三角形内相距
a-槐果碱　 b-苦参碱　 c-槐胺碱　 d-槐定碱　 e-苦豆碱
f-金雀花碱　 g-氧化苦参碱　 h-氧化槐果碱
A-改进的展开剂　 B-优化的展开剂　 C-苦豆子提取物
图 1　 TLC图谱
尽可能远的Ⅱ、Ⅵ 、Ⅷ 三类 ,试剂尽可能无毒性。最后
确定以Ⅱ类中的乙醇 ,Ⅵ 类中的乙酸乙酯和Ⅷ 类中
的浓氨水进行试验。
2. 2. 2　配比的优化试验: 依据改进的展开剂强度 ,
选择乙酸乙酯用 3, 4, 5 m L,乙醇用 1, 2, 3 mL,浓氨
水用 0. 1, 0. 3, 0. 5 mL进行正交试验设计 ,仍以主
要的 8种生物碱混合液为样品 ,采用可以分离的组
分个数作指标 ,经过综合分析 ,发现乙酸乙酯-乙醇-
浓氨水 ( 5∶ 1∶ 0. 5)效果最好。正交设计表见表 1,
2,分离效果见图 1-B。
表 1　优化的展开剂的因素水平表
水　平 因　素 ( m L)
A乙酸乙酯量 B无水乙醇量 C浓氨水量
1 3 1 0. 1
2 4 2 0. 3
3 5 3 0. 5
·513·中草药　 Ch inese Tradi tional and Herbal Drugs　 2002年第 33卷第 6期
收稿日期: 2001-10-31
表 2　 L9 ( 34 )正交设计表
试验号 A B C 指标 (组分个数 )
1 1 1 1 4
2 1 2 2 3
3 1 3 3 2
4 2 1 2 5
5 2 2 3 4
6 2 3 1 4
7 3 1 3 8
8 3 2 1 6
9 3 3 2 5
2. 2. 3　优化展开剂的应用:取按文献方法 [6 ]制备的
1份苦豆子提取物 ,采用优化的展开剂展开 ,结果见
图 1-C。
3　讨论
　　优化试验时 ,展开前饱和 10 min,展距 8 cm,约
20 min, 8种主要生物碱即能达到分离。
优化展开剂分离苦豆子提取物时 ,由于涉及到
量及高效薄层板精密度 ,因此只分离出 6种已知生
物碱 ,同时出现 5个其他成分的斑点 ,具体原因有待
进一步研究。
参考文献:
[1 ]　仲仁山 . 苦豆子的研究及其应用 [M ] . 银川: 宁夏人民出版
社 , 1983.
[ 2]　刘丛盛 ,刘文英 ,盛龙生 .毛细管气相色谱法测定苦参及其制
剂中苦参碱的含量 [ J ]. 中草药 , 1993, 24( 8): 405-406.
[ 3]　齐宗韶 ,王忠效 ,韩　静 .高效薄层扫描法测定苦豆籽中生物
碱含量 [ J ]. 中草药 , 1989, 20( 11): 15-16.
[4 ]　孙毓庆 . 薄层扫描法及其在药物分析中的应用 [M ]. 北京:人
民卫生出版社 , 1990.
[5 ]　 Jos eph L, Glajch. Optimization of solvent s t reng th and selec-
tivi ty for rev ers ed-ph ase liquid chromatog raph y using an in ter-
activ e mix ture-design s tati s tical techniqu e[ J ]. J Chromatogr,
1980, 199: 57.
[6 ]　秦学功 ,元英进 . 苦豆子种子中生物碱的冷浸提取实验研究
[ J] .中草药 , 2001( 7): 604-606.
超临界 CO2萃取当归中藁本内酯工艺条件研究
黄宝华 ,张　 　周晓辉* ,彭兰乔
(广东工业大学轻工化工学院 ,广东 广州　 510090)
　　当归 Angel ica Sinensis ( Oliv . ) Diels为伞形科
植物 ,有补血活血 ,调经止痛等功效 ,美誉为“妇科要
药 ,血中圣药” ,用于心血管系统、消化系统、内分泌
系统和免疫系统等疾病的治疗。 其提取物中含有多
种易挥发的物质 ,目前已知其挥发油成分有 38
种 [1 ] ,而含量较高的为藁本内酯是主要活性成分之
一 ,具有解痉止痛、平喘等作用 [2 ]。 本实验采用超临
界流体萃取法 ( SFE)对藁本内酯 ( ligustilide )的提
取条件进行了正交试验研究。
1　仪器与药品
美国 ISCO 100DX, 100D注射泵 , SFX2-10M
超临界萃取器。 北分 -Varian SP-3400气相色谱仪 ,
HP6890 GC /HP 5973 M SD气质联用仪。
当归头片购自广州市药材公司 ,产地甘肃。藁本
内酯对照品: 参照文献 [2 ]从当归中索氏提取 ,经硅胶
柱多次层析分离纯化 ,经 GC /M S鉴定。无水乙醇、
石油醚等溶剂均为分析纯 ,气相色谱定量内标物正
十八烷为色谱纯。
2　方法与结果
2. 1　提取方法:准确称量已在 40℃干燥并粉碎的
当归粉 ( 20～ 40目 ) 0. 5 g于萃取仓中 ,设定萃取温
度、压力 ,设定限流管温度 90℃。待系统达到设定萃
取温度 ,打开 CO2钢瓶总阀 ,系统压力平衡时 ,开始
萃取 ,同时记下起始 CO2消耗量 ,当达到预定值时 ,
停止萃取。产品以盛有无水乙醇的 5 mL具塞刻度
试管吸收 ,萃取结束后以无水乙醇定容至 5 mL,摇
匀 , GC /M S定性 , GC定量测定藁本内酯的含量。
2. 2　正交试验法:为了找到超临界 CO2萃取当归
中藁本内酯的较佳工艺条件 ,我们选用不同萃取温
度、压力、 CO2消耗量作为考察因素 ,每个因素各取
3个水平 (表 1) ,采用 L9 ( 34 )正交表进行试验 ,以藁
本内酯的收率为考察指标 ,结果见表 2。进行统计学
处理 ,方差分析见表 3。
　　从表 2, 3可知 ,各因素对萃取效果影响大小次
序为萃取温度 ( A)> 压力 ( B)> CO2消耗量 ( C)。 表
3结果表明 A因素各水平间差异具有显著性。 CO2
消耗量在所考察范围内影响很小。 各因素最佳水平
组合为 A2 B2 C3。
·514· 中草药　 Ch inese Tradi tional and Herbal Drugs　 2002年第 33卷第 6期
收稿日期: 2001-09-16
作者简介:黄宝华 , ( 1963-) ,女 ,福建南安人 ,副教授 ,硕士 , 1984年获北京大学化学系学士学位 , 1989年 ,获暨南大学化学系色谱分析专
业硕士学位 ,主要从事分析化学、天然产物提取等的研究。 Tel: 020-37626613　 E-mai l: huangbaoh@ 163. com
* 本校实验研究中心