全 文 ：栀子花根的生药学鉴定
李　江, 林　兴, 黄忠仕, 张士军, 黄仁彬Ξ
(广西医科大学 药理学教研室, 广西 南宁　530021)
　　栀子花根为茜草科栀子属植物栀子Ga rd en ia
jasm inoid es E llis 的根, 其原植物的果实作为药材栀
子早已广泛应用, 并被《中华人民共和国药典》(一
部) 收载, 而其根在我国华南地区, 尤其是广西、广
东、福建民间应用十分普遍, 有清热、凉血、解毒的功
能, 民间主要用于黄疸性肝炎、肾炎水肿、感冒高热、
出血吐血等病症的治疗, 其药材正名栀子花根来源
于《福建民间草药》的记载[1 ] , 民间别名黄枝根、山枝
根、三枝根等。目前国内外对其研究较少, 仅知其成
分主要含环烯醚萜类、齐墩果酸醋酸酯、甘露醇、豆
甾醇等。本实验首次从药材性状、组织和粉末的显微
特征、紫外光谱、薄层色谱和高效液相色谱等方面对
其进行了生药学研究, 为建立其质量标准提供科学
依据。
1　材料
原植物由笔者采于南宁市近郊, 并经广西中医
药研究所中药研究室赖茂祥主任鉴定为栀子Ga r2
d en ia jasm inoid es E llis。
XSP—18B 双目生物显微镜 (南京江南 ) ,
DM R + Q 550 病理图像分析仪 (德国莱卡) ,W aters
高效液相色谱系统 (W aters 1525 并联泵, w a2
ters2487 双波长紫外检测器, w aters B reeze 色谱工
作站) , TU 21800SPC 紫外可见分光光度计 (北京普
析通用仪器公司) , 薄层色谱用硅胶 G (化学纯, 青岛
海洋化工厂) , 齐墩果酸片 (西南制药一厂, 20 m g×
40 片, 批号: 021003) , 齐墩果酸对照品 (中国药品生
物制品检定所, 批号: 070929803) , 齐墩果酸醋酸酯
对照品为自制, 乙腈 (天津四友公司, 色谱纯) , 其余
试剂均为分析纯。
2　药材性状
根呈长圆柱形, 粗壮, 主根直径 1～ 5 cm , 长可
达 1 m 以上; 侧根常在近地面处轮状聚生或依次向
下分生, 与主根常难以区分, 侧根上又生纤维根; 茎
枝贴地面处常生有不定根。根表面灰黄色至棕黄色,
粗糙不平, 布满突起、沟纹、裂隙及栓皮脱落痕迹; 栓
皮易剥脱, 剥脱处光滑, 黄白色。质坚脆、易折断, 断
面纤维性, 木部宽广, 无髓。气香甜, 味淡。
3　显微特征
311　根 (直径 017 cm ) 横切面: 木栓层由数列至十
数列木栓细胞紧密排列而成, 细胞呈长方形, 长18～
30 Λm , 直径 7～ 11 Λm。栓内层较宽, 由类椭圆或纺
锤形的薄壁细胞组成, 长 20～ 30 Λm , 直径 7～ 10Λm , 有细胞间隙, 常为 3～ 5 条石细胞环带所分隔。
每条石细胞环带由数列圆形或类方形的石细胞聚集
堆砌而成, 石细胞直径 10～ 50 Λm , 壁增厚, 胞腔狭
小, 为最明显的显微特征, 有些药材样品石细胞几乎
完全充满栓内层, 看不到薄壁细胞。栓内层薄壁细胞
中偶可见草酸钙方晶存在。韧皮部较窄。形成层明
显, 呈波状环带。木质部宽广, 导管较大, 直径 15～
60 Λm , 紧密排列, 类年轮状纹样; 横切面上排列呈
辐射状。中央初生木质部为四原型。横切面组织见
图 1。
312　粉末及解离组织: 粉末的显微观察主要可见木
纤维和导管; 而用硝酸钾分别对周皮和木质部解离
后的解离组织进行显微观察, 木质部解离组织可见
木纤维和导管, 周皮的解离组织可见石细胞、木栓细
胞和栓内层薄壁细胞。导管多为具缘纹孔或网纹导
管, 导管分子长 80～ 240 Λm , 直径 30～ 50 Λm。木纤
维众多, 长 450～ 550 Λm , 直径 8～ 12 Λm , 两端尖,
条状, 壁木质化增厚, 胞腔狭窄。石细胞类圆形, 类方
形, 长方形或类三角形, 纺锤形。栓内层薄壁细胞类
圆形, 细胞间隙明显, 细胞壁被苏丹Ë 染成红色, 可
能存在木栓化或角质化。粉末及解离组织见图 2。
4　薄层色谱鉴别
根据文献[2 ]报道, 栀子花根含齐墩果酸醋酸酯。
笔者以齐墩果酸为原料, 用吡啶—乙酸酐法进行乙
酰化, 制备出了齐墩果酸醋酸酯。并以齐墩果酸醋酸
酯为对照品, 建立了栀子花根中齐墩果酸醋酸酯的
·9921·中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 11 期 2004 年 11 月
Ξ 收稿日期: 2004203216
基金项目: 本课题为广西科学研究与技术开发项目 (桂科攻 0322024—51)
作者简介: 李　江 (1970—)男, 四川金堂人, 1993 年毕业于桂林医学院药学系药学专业, 2004 年获得广西医科大学药理学专业硕士学
位, 现任桂林医学院附属医院药剂科副主任, 主管药师。研究方向为中药新药的研制开发。　T el: (0773) 28825063 通讯作者　T el: (0771) 5358272, 5358014　E2m ail: huangrenb in518@ sohu. com
12木栓层　22石细胞环带　32栓内层　42韧皮部
52次生木质部及导管　62初生木质部
12phellem　22circu lar belt of sclereids　32phelloderm
42pho lem　52secondary xylem and vessels　62p rim ary xylem
图 1　栀子花根横切面
F ig. 1　Photogram of tran sverse section
of G1 j asm inoides root
薄层鉴别方法。
411　齐墩果酸醋酸酯对照品的制备: 将齐墩果酸片
20 片研碎, 无水乙醇 400 mL 回流提取 1 h, 滤过, 回
收乙醇, 提取物经薄层色谱验证与齐墩果酸对照品
R f 相同, 经UV 光谱扫描与齐墩果酸对照品光谱图
相同, 同样在 207 nm 处有最大吸收峰。将提取物置
具塞锥形瓶 110 ℃干燥 30 m in, 加入醋酸酐和吡啶
各 10 mL , 密塞, 放置过夜。加入纯化水约 200 mL ,
随即析出大量白色沉淀, 滤过, 再用水洗涤沉淀数
次, 除去过量的吡啶和醋酸酐。沉淀用氯仿溶解, 滤
过, 干燥, 即得。经UV 光谱扫描, 产物在 207 和 254
nm 有两个吸收峰, 经薄层色谱验证与齐墩果酸不
在同一位置上。
412　供试品的制备: 称取本品的干燥粗粉 30 g, 加
入无水乙醇 150 mL , 回流提取 1 h, 滤过, 滤液蒸干,
用氯仿 50 mL 和水 100 mL 分数次交替转移至分液
12木质部导管　22木纤维　32木栓层细胞 (正面)
42石细胞　52栓内层薄壁细胞
12vessels of secondary xylem　22xylem fiber
32phellem cell　42sclereids　52parenchym al cell
图 2　栀子花根粉末及解离组织照片
F ig. 2　Photogram of powder and dissoc ia ted tissue
of G1 j asm inoides root
漏斗内, 加入饱和氯化钠溶液 20 mL , 振荡萃取, 分
取氯仿层。同法再用蒸馏水萃取洗涤 2 次, 每次 100
mL。分取氯仿层, 回收氯仿, 残渣用甲醇 10 mL 溶
解, 制成供试品。
413　齐墩果酸醋酸酯薄层色谱鉴别: 取齐墩果酸和
齐墩果酸醋酸酯对照品分别加甲醇制成 1 m g 的溶液
作为对照溶液, 与薄层色谱鉴别用供试品一起点于同
一硅胶 G 薄层板上 (自制)。以丙酮2氯仿2环己烷2冰
醋酸 (5∶15∶30∶1) 为展开剂, 展距 15 cm , 取出吹
干, 喷以 10% 硫酸乙醇液于 110 ℃烘干约 15 m in, 结
果供试品在与齐墩果酸醋酸酯对照品相应的色谱位
置上, 显相同的紫红色斑点 (a 点) ; 但在与齐墩果酸
对照品相应的位置上, 斑点呈棕褐色, 而齐墩果酸对
照品斑点为紫红色 (b 点)。薄层色谱图见图 3。
5　高效液相色谱鉴别
色谱条件: 色谱柱 Symm etry C 18 (150 mm ×416
mm , 5 Λm ) ; 流动相: 甲醇2乙腈2水2冰醋酸 ( 72∶
13∶ 15 ∶ 014 ) , 检 测 波 长: 210 nm ; 灵 敏 度:
0101AU FS; 体积流量: 110 mL öm in; 柱温: 35 ℃。
供试品进样 20 ΛL 测定色谱图, 同时以齐墩果
酸和齐墩果酸醋酸酯对照品的甲醇溶液进样作对照
色谱图。齐墩果酸和齐墩果酸醋酸酯的保留时间分
别为 11110 和 22183 m in。H PL C 色谱图见图 4。
6　紫外光谱鉴别
从薄层色谱鉴别用供试品中取 1 mL , 用甲醇稀释
·0031· 中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 11 期 2004 年 11 月
　12齐墩果酸(Rf=
0. 57)　22供试品
32齐墩果酸醋酸
酯(Rf= 0. 80)
12o leano lic acid
22p roduct fo r
experim en t
32acetic ester of
o leano lic acid
图 3　栀子花
根薄层色谱图
F ig. 3 　 TLC
chromatogram
of G1 j asm in
oids root
定容于 25 mL 量瓶, 制成紫外光谱
鉴别用供试品, 在 190～ 800 nm 之
间进行光谱扫描, 供试品在 221 和
277 nm 处有两个吸收峰(图 5)。
7　讨论
栀子花根的原植物为木本植
物, 根组织特征中次生结构非常发
达, 在横切面上次生木质部占了绝
大部分比例, 木质部导管的排列类
似年轮状; 周皮厚且十分坚硬, 与
其栓内层宽阔的石细胞环带有很
大关系, 这些特征十分明显, 可作
为显微鉴别该药材的依据。
齐墩果酸乙酰化生成齐墩果酸
醋酸酯的反应为脱水缩合反应, 应该
尽量控制在无水条件下操作, 反应过
程应在密闭容器内进行, 吡啶和醋酸
酐应采用新启封的试剂或重新蒸馏
干燥后使用, 齐墩果酸的 32OH 的乙
酰化反应较容易, 反应条件温和, 放
置过夜即可反应完全。
该药材民间习用于治疗肝炎,
根据目前研究资料判断, 其作用可
能与其活性成分齐墩果酸醋酸酯
A 2对照品　B2供试品
　　A 2reference substances　B2p roduct fo r experim en t
12齐墩果酸 (R t= 11. 10 m in)　22齐墩果酸醋酸酯
(R t= 22. 83 m in) 　32未知物峰 (R t= 10. 30 m in) 　42未知
物峰 (R t= 14. 57 m in)
12o leano lic acid 　 22acetic ester of o leano lic acid 　 32un2
know n substances　 42unknow n substances 　 52unknow n
substances
图 4　栀子花根高效液相色谱图
F ig. 4　HPLC chromatogram of G1 j asm inoides root
有关, 故在考虑以成分作为鉴定依据时选择了以齐
墩果酸醋酸酯为研究指标, 但却同时检出了齐墩果
酸, 这在以前的文献中未见报道。
图 5　栀子花根紫外光谱图
F ig. 5　Ultrav iolet spectrum of G1 j asm inoides root
　　以硅胶 G 为固定相, 丙酮2氯仿2环己烷2冰醋酸
为展开剂, 齐墩果酸醋酸酯为对照进行薄层色谱展
开, 重现性好, 斑点明显, 分离度较好, 可以作为栀子
花根质量控制中薄层鉴别的条件采用。笔者亦考察
了丙酮、氯仿与环己烷的各种配比, 以 5∶15∶30 比
例分离效果最佳。薄层色谱法尽管存在与齐墩果酸
对照品相对应的斑点, 但颜色不同, 判断该斑点应为
混合成分形成的斑点, 无法用于确证齐墩果酸的存
在, 但在H PL C 法中得到了初步确证。
在建立H PL C 鉴别方法的过程中, 笔者起初研
究了甲醇和水组成的流动相的各种配比, 如甲醇2水
(80∶15)、甲醇2水 (80∶20) 和甲醇2水 (90∶10) 等,
在齐墩果酸保留时间处均有一个明显的色谱峰, 但
在建立某制剂的齐墩果酸含量测定方法时发现, 许
多薄层鉴别明显没有检出齐墩果酸的药材 (如半枝
莲、天胡荽、六月青等) , 在以甲醇2水为流动相测定
H PL C 色谱图时, 在齐墩果酸出峰的保留时间处也
有一个明显的色谱峰, 证明此流动相条件下齐墩果
酸峰存在干扰, 可能为混合峰, 于是通过在流动相中
加入乙腈来调整选择因子, 通过空白实验验证了此
流动相条件下齐墩果酸出峰处干扰峰不再存在。冰
醋酸为离子抑制剂, 可明显改善峰形, 认为 014% 冰
醋酸比较合适, 不仅可以显著改善峰形, 且流动相的
pH 值在 316 左右, 符合 C 18柱对流动相 pH 值的要
求, 栀子花根的H PL C 色谱图中不仅显示有保留时
间分别为 11. 10 和 22. 83 m in 的齐墩果酸和齐墩果
酸醋酸酯的两个最主要的供鉴别用的色谱峰, 还同
时存在有保留时间分别为 10. 30 和 14. 53 m in 的两
个明显的未知物的色谱峰, 可供辅助鉴别用。
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·1031·中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 11 期 2004 年 11 月