全 文 ：· · 中草药 第 卷第 一 期 年 月
一 法测定朱砂莲胶囊中马兜铃酸 的含量
崔晓红 ‘ · , 哀志芳 ‘ , 万永 占 , 张兰桐 ‘’
河北 医科大学 药物分析教研室 , 河北 石家庄 河北 医科大学第二医院 , 河北 石家庄
摘 要 目的 建立 法测定朱砂莲胶囊中马兜铃酸 的方法 。 方法 采用 一 法测定 。 用
。色谱柱 , 拌 , 以甲醇 一水 一冰醋酸 为流动相 , 体积流量为 , 检测波长
为 , 柱温为室温 , 进样量为 拜 。 结果 马兜铃酸 的保留时间约为 , 与其他峰的分离度大于 。
马兜铃酸 的线性范围为 卜 , 一 , 最低检测 限为 , 平均 回收率为 一
。 结论 该方法简便快速 , 结果准确可靠 , 可用于朱砂莲胶囊中马兜铃酸 的测定 。
关键词 朱砂莲胶囊 马兜铃酸 高效液相色谱
中图分类号 文献标识码 文章编号 一 一 一
一
一 ” , 一 ‘ , 一 , , ! 一 ’
· , , ,
, , ,
朱砂莲胶囊是 以朱砂莲为原料提取制得的中药
制剂 , 具有清热解毒 、消肿止痛的作用 。 适用于热毒
蕴结所致的牙痛 、 咽喉肿痛 、 泻痢腹痛 、 痈疖肿痛等
症 。 朱砂莲块根中含有马兜铃酸 。 马兜铃酸
具有蓄积毒性 , 长期或大量服用可导致严重 的肾毒
性 、 肝毒性等 , 因此 , 监测马兜铃酸 对于保障朱砂
莲胶囊 的用药安全性具有重要的意义 。 本实验在建
立朱砂莲胶囊 中马兜铃酸 鉴别的基础上 , 采用
法测定了其含量 。
仪器与试药
美 国 高效液 相色谱仪 , 检测
器 , 浙江大学 色谱工作站 。 硅胶 青岛海洋化工
厂 , 甲醇为色谱纯 , 其他试剂均为分析纯 。朱砂莲胶
囊由四川松鹤药业有限公司生产 , 马兜铃酸 对照
品购于中国药品生物制品检定所 。
方法和结果
色谱 条 件 色 谱 柱 型 液相 色 谱 柱
, , 火 , 拜m ) (北京分析
仪 器厂 );流动相 :甲醇 一水 一冰醋酸 (5 9 : 40 , 1 ) ; 体
积流量 :1.0 m IJ/m in ;检测波长 :315 nm ;柱温 :室
温 ;进样量 :20 可J。
2
.
2 对照 品溶液 的制备:取 马兜铃 酸 A 对 照 品
1.52 m g , 精密称定 , 置 5 m L 量瓶 中 , 加 甲醇溶解并
稀释至刻度 , 摇匀 。 精密量取上述溶液 1. 0 m L , 置 5
m L 量瓶 中 , 加甲醇稀释至刻度 , 摇匀 , 即得 。
2
.
3 供试品溶液的制备:取朱砂莲胶囊内容物细粉
(4 o 目)约 1.03 0 0 9 , 精密称定 , 置索氏提取器中 ,
加 甲醇 70 m L , 加热回流提取 s h 。取 甲醇提取液 , 蒸
干 , 残渣加 0. 5环氢 氧化钠溶 液 15 m L 使溶 解 , 6
m ol /
L 盐酸溶液调节 pH 至 2 , 转移至分液漏斗中 ,
氯仿振荡提取 4 次 (5 、 1 0 、 1 0 、 1 0 m L ) , 合并氯仿提
取液 , 蒸干 , 残渣加适量甲醇使溶解 , 移至 25 m L 量
瓶中 , 加 甲醇至刻度 , 摇匀 。 精密 吸取此溶液 2.5
m l, , 置 10 m L 量瓶中 , 加甲醇至刻度 , 摇匀 , 即得 。
2
.
4 色谱系统性试验 :照上述色谱条件 , 分别取对
照品溶液 、供试品溶液 , 注人液相色谱仪 , 记录色谱
图 , 结果见图 1 。 可见 , 供试品色谱 中 , 在与对照品色
谱相应位置上 , 有相同保留时间的色谱峰 。马兜铃酸
A 的保 留时间约为 15 m in , 对称 因子为 0. 96 , 理论
板数 以马兜铃酸 A 峰计不低于 4 50 , 马兜铃酸 A
与杂质峰的分离度大于 1 · 5 。
2
.
5 线性关系考察:取马兜铃酸 A 对照品适量 , 精
密称定 , 置 10 m L 量瓶 中 , 加适量 甲醇溶解并稀释
至刻度 , 摇匀得 。. 1 3 m g / m L 马兜铃酸 A 储备液 。
收稿 日期 :2003一 1 2 一 3 1
基金项目:河北省科学研究与发展计划资助项 目(0 4 27 6 1125)作者 简介 :崔晓红(1965一) , 女 ,硕 士 , 副主任药师 , 主要从事中药有效成分 的研究和临床药学工作 。
, 通讯作者 T el: (0321) 6265625 Fax : (0311) 6052053 E 一 m a i l : z h a n 只la n t o n g @ 2 6 3 . n e t
中草药 C hinese T raditionaland H erbalD rugs 第 35 卷第 10 期 2004 年 10 月 · 1 1 1 9 ·
A 1 5
.
2 3 2 B 1 5
.
2 9 6
0
一6一,一LR
J,4一八曰,山一6一,一乍只一下4
时间 r/m 一n
* 一马兜铃酸 A
开 一a r i s t o l o e h i e a e i d A
图 1 马兜铃酸 A 对照 品 (A )和朱砂莲
胶班(B )的 H PL C 图谱
F ig. 1 H P L C ehrom atogram s of aristoloehie aeid A
(A ) and Z hushalian C aPsule (B )
分 别精 密 吸取 上述 溶 液 0.05 、 o · 2 、 O · 4 、 0 · 8 、 1 · 0
m L
, 置 s m L 量瓶中 , 加 甲醇至刻度 , 摇匀 。 按上述
色谱条件依法进样 , 测定峰面积 。 以峰面积 为纵坐
标 , 马兜铃 酸 A 的质量浓度为横坐标绘制标 准曲
线 , 得 回归 方 程 Y 一 。. 4 10 S X + 0. 8 71 4 , r -
0
.
9 9 9 5
。 结果表明 , 马兜铃酸 A 质量浓度在 1.3 ~
26 . 6 拌g / m L 与峰面积有良好的线性关系 。
2
.
6 最低检测限 :在信噪 比 S /N 一 3 时 , 最低检测
限为 l, 3 3 n g / m L 。
2
.
7 重现性考察 :取同一批 (批号为 02 0106) 样品 5
份 , 制备供试品溶液 , 注人液相色谱仪 , 依法测定 , 结
果马兜铃酸 A 的 R S D 为 2.8 % 。
2
.
8 精密度试验:精密吸取供试品溶液 20 拜L , 重
复进样 5 次 , 测定峰面积 , 结果马兜铃酸 A 的峰面
积 R S D 为 1.8 % 。
2
.
9 稳定性试验:取供试品溶液 , 每隔 Z h 注人 20
拼L , 记录峰面积 。 结果表明 , 供试品溶液在 s h 内基
本稳定 , 马兜铃酸 A 峰面积 R S D 为 1.9 % (n 一 5) 。
2
.
10 回收率试验:采取加样回收法 。精密量取批号
为 0201 066 的样品 0. 5 9 5 份 , 分别加人马兜铃酸 A
对照品溶液适量 , 制备供试品溶液 , 进样 , 按上述色
谱条件测定峰面积 , 计算 回收率 , 结果 马兜铃 酸 A
的平均回收率为 98.6 % , R S D = 0 . 3 % ( n = 5 ) 。
2
.
1 1 样 品 测宁 :取 朱砂撑 胶囊 (批号 为0 20 10 6 ,
0 2 0 1 0 8
,
0 2 1 1 2 3 )
, 分别制备供试品溶液 , 按上述色谱
条件进行分 析 , 根据外标法计算 马兜铃酸 A 的含
量 。 3 批朱砂莲胶囊中马兜铃酸 A 的质量分数分别
为 42 .30 、 4 0 . 2 3 、 4 5 . 0 1 拜g / g 。
3 讨论
3. 1 将马兜铃酸 A 溶 于确定的流动相 中 , 于分光
光度计上进行光谱扫描 , 测定结果显示 , 马兜铃酸 A
在 31 5 nm 波长处有最大吸收 , 故选用此波长作为
测定波长 。
3
.
2 实验以 甲醇一水为流动相 , 马兜铃酸 A 色谱峰
易拖尾 , 对称度差 , 于流动相中加人适量的冰醋酸可
抑制其拖尾 , 并可改变峰形 。
3
.
3 本实验参考文献仁, 一5〕, 并结合实验 , 确定样品
中甲醇索氏提取 s h , 马兜铃酸可 以提取完全 , 且重
现性 良好 。 再经酸化 , 氯仿萃取 , 可消除其他物质对
马兜铃酸 A 色谱峰的干扰 。
3
.
4 美 国 FD A 发布通告指 出 , 所有含有或怀疑含
有马兜铃酸 A 的天然药物均被禁止使用 。 虽然我国
还没有作出相应 的限制 , 但医务工作者不可掉 以轻
心 。本实验确定的方法简便 、快速 , 准确可靠 , 灵敏度
高 , 可用于检测朱砂莲胶囊 中马兜铃酸 A 的含量 ,
以确保该药的安全 、合理使用 。
R e f e r e n e e s :
〔l〕 L I H , Y o u j i S , S h i n g o M , e t a z . C o n s t i t u e n t s o f 八ristol oc h ia
cin na b a ri n a [J〕. A cta B ot S in (植物学报 ) , 1 9 9 5 , 3 7 ( 9 ) :
7 4 5
.
[ 幻 L iu Y , w a n g B Q . D e t e r m i n a t i o n o f a r i s t o l o e h i e a e i d A i n
A
r i st o l oc h
i a c o , t o rt
a
b y H P L C 〔J〕. Ch in Z , r a d it H ‘王rb Dr u g s
( 中草药 ) , 1 9 9 0 , 2 1 ( 6 ) : 1 5 .
〔3〕 Z hao N , L a i J F , B i K 5 . De t e r m i n a t i o n o f a r i s t o l o e h i C a e i d A
i
n
d
r u g s f
r o
m A
ris
t o
le
c
h i
a
b y R p
一
H p L C [ J 〕· J S h e 恻angP harm U niv (沈阳药科大学学报) , 2 0 0 1 , 1 8 ( 2 ) : 5 6 一5 7 ·
[
4 〕 Z hang Y P , X u n G J , J i n R L , 。t a z . oe t e r m sn a t io n o f
a r is t o lo e h ic a e id A in A 八st o loc h ia b y R P
一
H P L C [ J 〕. J Ch inaP harm U niv (中国药科大学学报) , 1 9 9 3 , 1 8 ( 2 ) : 5 6 一 5 7 .
〔5〕 Z hao N , L a i J F , B i K 5
De
t e r
m i
n a t i
o n o
f
a r
i
s t o
l
o e
h i
C a e
i d A
i
n
R
a
di
x A
r i s t ol oc h
i a e b y R P
一
H P L C [ J〕. J S he即a , 9 P h a rm
U
n
iv ( 沈 阳药科大学学报) , 2 0 0 1 , 1 8 ( 2 ) : 1 2 5 一 1 2 7 .
肿节风注射液 H P L C 指纹图谱的研究
王钢力 ’ , 郑笑为 ‘ , 陈道峰 “ , 林瑞超‘
(l
. 中国药品生物制品检定所 , 北京 100050; 2. 复旦大学药学院 , 上海 200032)
肿节风 为金粟 兰科 草 珊瑚 S arc a nd ra g la bra
(T h u nb . ) N akai的干燥全株仁‘〕, 具有抗菌 、 消炎 、 止
痛及肿瘤抑制作用 。其主要化学成分为倍半枯 、 黄酮
及香豆素类化合物[2j 。 肿节风注射液为肿节风药材
收稿 日期 :2 00 3一 1 2 一 1 8