全 文 ：HPLC法测定生化软胶囊中阿魏酸含量
马民伟 1 ,周慧娟 2
( 1. 宁夏银川市中医医院 ,宁夏 银川　 750001; 2. 宁夏卫生学校 ,宁夏 银川　 750021)
　　生化软胶囊由当归、川芎、桃仁、炮姜、甘草 5
味药物组成。具有养血祛瘀的功效 ,用于产后恶露不
尽或行血不畅 ,夹有血块、小腹冷痛。当归、川芎分别
是处方中的君药和臣药 ,均含有活性成分阿魏酸。为
了对生化软胶囊进行质量控制 ,本研究采用 HPLC
法对其制剂中阿魏酸的含量进行了测定。
1　仪器与试药
　　岛津 LC-10AT高效液相色谱仪 , SPD-10A检
测器 (日本岛津公司 ) , M ET TLER AE240十万分
之一天平 (瑞士 ) ,岛津 UV-220紫外分光光度计。
阿魏酸对照品 ( 0773-9809)由中国药品生物制
品检定所提供 ;生化软胶囊 (批号: 001012、 001015、
001020)由宁夏多维药业有限公司提供。不含当归、
川芎的生化软胶囊阴性对照由宁夏多维药业有限公
司提供。所用试剂均为色谱纯。
2　方法与结果
2. 1　对照品溶液的制备:精密称取阿魏酸对照品适
量 ,加甲醇制成 0. 15 mg /mL的溶液 ,即得。
2. 2　供试品溶液的制备: 取软胶囊内容物约 1 g ,
加 60 mL甲醇 ,回流提取 30 min,过滤 ,残渣用甲醇
20 m L分次洗涤 ,合并提取液及洗涤液 ,定容至 100
m L,以微孔滤膜 ( 0. 45μm)滤过 ,即得。
2. 3　阴性对照溶液的制备: 取不含当归、川芎的样
品 ,按 2. 2项下方法制成生化软胶囊阴性对照溶液。
2. 4　色谱条件:色谱柱: Hypersil C18柱 ( 4. 6 mm×
250 mm , 5μm);室温 ;流动相:甲醇 -5% 醋酸水溶
液 ( 25∶ 75) ;流速: 0. 8 m L /min;检测波长: 320
nm。 理论塔板数按阿魏酸计不低于 2 500。
2. 5　干扰试验: 在上述色谱条件下 ,取阿魏酸对照
品溶液、供试品溶液、缺当归、川芎的阴性对照溶液
各 10μL,进行 HPLC测定 ,结果见图 1。可见阿魏
酸与其他组分达到较好分离效果 ,并且阴性对照不
干扰阿魏酸的测定。
2. 6　线性关系考察: 精密称取阿魏酸对照品约 1
mg,加甲醇溶解并定容至 100 mL,得 0. 01 mg /mL
* -阿魏酸
* -ferulic acid
图 1　阿魏酸 ( A)、供试品 (B)和阴性
对照 (C) 的 HPLC图谱
Fig. 1　 HPLC chromatograms of ferulic acid ( A) ,
sample (B) and blank (C)
的阿魏酸对照品溶液。分别精密量取阿魏酸对照品
溶液 2, 4, 6, 8, 10, 20μL依次进样 ,测定峰面积 ,以
进样量对峰面积进行线性回归 ,回归方程为 Y= 4
070 152X - 3 612, r= 0. 999 8。结果表明:进样量在
0. 02～ 0. 20μg呈良好的线性关系。
2. 7　精密度试验:精密吸取同一浓度的阿魏酸对照
品溶液 5μL,重复进样 5次 ,得阿魏酸峰面积的
RSD= 1. 09%。
2. 8　稳定性试验: 精密称取阿魏酸对 照品
1. 012 6 g ,置 100 mL棕色容量瓶内 ,以甲醇溶解并
稀释至刻度 ,分别吸取此溶液于 10 mL容量瓶内 ,
得阿魏酸对照品溶液 3份 ,第 1份蔽光室温保存 ,
第 2份室温不蔽光自然放置 ,第 3份蔽光于 50℃
水浴加热。 3份样品分别在 0, 2, 4, 6, 8 h取样 10
μL,测定 ,结果见表 1。
表 1　稳定性试验结果
Table 1　 Results of stability test
条件 阿魏酸不同时间的含量变化 /%
0 h 2 h 4 h 6 h 8 h
室温蔽光 100 103. 31 97. 98 98. 31 97. 59
自然放置 100 39. 81 38. 35 31. 63 27. 72
50℃加热 100 56. 94 39. 14 30. 53 24. 18
　　结果表明 ,阿魏酸以光线和受热不稳定。因此样
·524· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　第 34卷第 6期 2003年 6月
收稿日期: 2002-05-30作者简介:马民伟 ( 1967— ) ,男 ,河南人 ,主管中药师 , 1990年毕业于上海中医药大学 ,医学学士 ,主要从事制剂研究。
品应蔽光、冷藏。
2. 9　重现性试验 ;取同一批号样品 5份 ,分别制备
供试品溶液 ,各吸取 10μL进行测定 ,阿魏酸含量
的 RSD= 0. 45% 。
2. 10　加样回收率试验:精密称取已知阿魏酸含量
的样品 5份 ,分别加入一定量的阿魏酸对照品 ,依
法测定 ,结果平均回收率为 98. 3% , RSD= 0. 90% 。
2. 11　样品的测定: 按上述测定法 ,对 10批样品进
行了阿魏酸的含量测定 ,结果见表 2。
表 2　生化软胶囊中阿魏酸含量测定结果 (n= 3)
Table 2　Content of f erulic acid in 10 batch
of Shenghua Sof t Capsule ( n= 3)
批号 阿魏酸含量 /( mg· 粒 - 1 )
001016 0. 202 1
001108 0. 200 3
001109 0. 180 0
001113 0. 184 1
001219 0. 179 6
001220 0. 187 7
001225 0. 156 6
001226 0. 181 0
001227 0. 205 2
001228 0. 181 0
3　讨论
3. 1　流动相的选择: 曾参考有关文献 [1～ 3 ]采用甲
醇-水 ( 4%醋酸 )及乙腈 -水乙酸 ( 25∶ 75∶ 1)作为
流动相。实验证明 ,以本实验所采用流动相分离效果
最好。
3. 2　提取方法的选择:曾参考文献 [1, 4 ]采用超声提
取法、萃取法等方法 ,经加样回收率试验证明 ,以本
实验中所用提取方法最好。
3. 3　经稳定性试验证明 ,虽然样品溶液在室温光照
和加热的情况下不稳定 ,但是样品溶液配制好后 ,避
光、冷藏 , 8 h内进行测定基本不受影响。因此 ,本方
法可以作为控制生化软胶囊的质量标准。
References:
[1 ]　 Zh ang L K, Ch en X W , Zou A Q. Determination of ferulic
acid and ligus t razhine in com pound fo rm ula preparations by
HPLC [J ]. Ch in Trad it Herb Drugs (中草药 ) , 1996, 27( 4):
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[2 ]　 Wang H J, Sh en X, Yang J, et al . Determination of ferulic
acid in Dangg ui Buxue Decoction by HPLC [ J] . Ch in J E xp
Trad it Med Form (中国实验方剂学杂志 ) , 1998, 4 ( 5): 9-10.
[ 3 ]　 Yang N L, Yang W Y, Yang Z H. Determination of ferulic
acid in Sh engh uatang Oral Liquid by HPLC [ J] . Ch in J Hosp
Pharm (中国医院药学杂志 ) , 1999, 19( 2): 88-89.
[4 ]　 Yu J, Jiang Y Y, Zh ang X. Determination of ferulic acid in
Danggui Inject ion by HPLC [ J] . J Anhu i Coll Tradi t Chin
Med (安徽中医学院学报 ) , 1999, 18( 5): 67-68.
HPLC法测定西洋参茎叶总皂苷降解物中 20 (S)-人参皂苷 Rg3的含量
孟　勤 1 ,尹建元 1 ,赵俊艳 2 ,梁　迪 1
( 1. 吉林大学药学院 ,吉林 长春　 130021; 2. 吉林大学制药厂 ,吉林 长春　 130021)
　　西洋参 Panax quinquefolium L.为五加科人参
属植物 ,根部入药。 1998年尹建元等从野山参茎叶
皂苷中首次分离得到人参皂苷 Rg3 [ 1 ]。 2002年孟勤
等从西洋参叶中首次分离得到人参皂苷 Rg3 [ 2]。人
参皂苷 Rg3具有明显抑制乙酰胆碱刺激牛肾上腺素
嗜铬细胞分泌儿茶酚胺的作用 [ 3] ,并且人参皂苷
Rg3毒性小 ,生物活性强 ,是很具有开发价值的天然
活性成分 ,但人参皂苷 Rg3在自然界存在甚少。为了
获得大量人参皂苷 Rg3 ,我们采用西洋参茎叶提纯
总皂苷并制备二醇组皂苷 [ 4] ,再将二醇组皂苷进行
降解制备人参皂苷 Rg3。本实验采用 HPLC法测定
了西洋参降解物中 20( S) -人参皂苷 Rg3的含量。
1　仪器与试药
美国 Waters 600E双泵头柱塞往复泵 , Waters
2478双波长紫外检测器 , ch romsta tion数据处理系
统 ; 20 ( S ) -人参皂苷 Rg3对照品由本室自制 ,经高
效液相色谱归一化法测定其含量为 98%以上。甲醇
为色谱纯 ,水为双蒸水 ,其余试剂均为分析纯。
2　方法与结果
2. 1　总皂苷降解物的制备: 二醇组皂苷在 150℃ ,
p H值为 12的条件下 ,水解 3 h后 ,得西洋参茎叶皂
苷降解物。按以上条件制备 3批西洋参茎叶皂苷降
解物 ,批号分别为 010429, 010608, 010715。
2. 2　色谱条件: 色谱柱为惠普产 Zorbax ODS柱
( 4. 6 mm× 250 mm, 5μm);流动相: 甲醇 -水 ( 84∶
16) ;流速: 1. 0 mL /min;柱温: 40℃ ;检测波长: 203
nm。在此条件下 20 ( S) -人参皂苷 Rg3与其它峰分
开 (图 1)。
·525·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　第 34卷第 6期 2003年 6月
收稿日期: 2002-04-24