全 文 ：　　表 1　大鼠 ig 给药后阿魏酸的药动学参数 (n= 10)
Table 1　Pharmacok inetic parameter of ferul ic ac id
in rats af ter ig adm in istration (n= 10)
药动学参数 　　单　位 　　数　值
　　A 　　m göL 　 4. 987±8. 220
　　Α 　　m in- 1 　 0. 263±0. 477
　　B 　　m göL 　 1. 309±1. 580
　　Β 　　m in- 1 0. 002 73±0. 001 27
　　K a 　　m in- 1 　 0. 489±0. 609
　　V cöF 　　L ökg 　 4. 793±3. 131
　　T 1ö2Α 　　m in 　 12. 62±12. 17
　　T 1ö2Β 　　m in 305. 04±137. 93
　　T 1ö2K a 　　m in 　 6. 54±8. 69
　　K 21 　　m in- 1 0. 070 5±0. 085 7
　　K 10 　　m in- 1 0. 008 05±0. 008 60
　　K 12 　　m in- 1 　 0. 187±0. 386
　　AU C 　　m in·m g·L 498. 89±482. 45
　　CL öF 　　mL öm in 　 6. 38±3. 64
　　T m ax 　　m in 　 22. 39±28. 71
　　Cm ax 　　m göL 　 1. 504±1. 076
3　讨论
　　阿魏酸为弱酸, 在酸性条件下更易被有机溶剂
提取完全。曾试用血浆供试品沉淀蛋白直接进样, 血
浆样品酸化后乙醚或醋酸乙酯提取等方法进行样品
处理。实验结果表明, 血浆供试品酸化后用醋酸乙酯
提取的杂质含量少且阿魏酸提取效率高。本实验所
建立的方法可测定复方制剂给药后体内的阿魏酸浓
度, 方法回收率高, 3 个浓度下测得的回收率均大于
95% ; 精密度好, 日内 R SD 小于 310% , 日间 R SD
小于 513%。方法灵敏, 阿魏酸的最小检测浓度为
012 m göL , 故本法适用于阿魏酸的血药浓度测定及
药动学研究。
　　阿魏酸单体及单方中的阿魏酸在不同动物及人
体的药动学已有报道[3～ 5 ], 多为一室模型, iv, ig 或
p o 给药后血药浓度下降迅速, T 1ö2较短, 均小于 1 h。
复方中阿魏酸 p o 后体内的分布与代谢为二室模
型[6 ]。实验结果表明, 阿魏酸以方剂口服液形式进入
大鼠体内后, 自胃肠道吸收迅速, ig 给药后平均 22
m in 即达血药浓度峰值, 随后阿魏酸在大鼠体内迅
速分布, 其药2时曲线符合二室模型, T 1ö2Α为 1216
m in, T 1ö2Β为 305 m in, 与文献报道[6 ]川芎单方中阿魏
酸的 T 1ö2Β 1115 m in 比较, 明显延长, 提示复方制剂
中多种成分可能对阿魏酸在大鼠体内的药动学过程
有显著影响。
给药后 5 h 阿魏酸的血药浓度已低于最低检出
浓度, 接近平均峰浓度的 1ö10, 基本符合新药药动
学研究对采血时程的要求。
References:
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多指标综合评分法优选葛根提取工艺
张　彤, 徐莲英, 陶建生, 姚震宇Ξ
(上海中医药大学中药学院, 上海　201203)
摘　要: 目的　优选葛根提取工艺。方法　采用正交试验法考察乙醇提取葛根的各影响因素, 以多指标综合评分法
进行数据分析, 优选工艺条件。结果　葛根乙醇提取的最佳条件为: 80% 乙醇提取两次, 第一次 12 倍量乙醇, 提取
1 h, 第二次 10 倍量乙醇提取 30 m in。结论　采用综合评分法优选葛根提取工艺能较好地保证制剂的质量。
关键词: 葛根; 葛根素; 总黄酮; 正交试验; 综合评分法
中图分类号: R 28412; R 286102　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253 2670 (2004) 01 0038 03
·83· 中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 1 期 2004 年 1 月
Ξ 收稿日期: 2003204226
基金项目: 上海市教委基金资助 (01QN 80、02CZ24)
作者简介: 张　彤 (1972—) , 男, 浙江省杭州市人, 副教授, 1993 年毕业于南京大学化学专业, 获理学学士学位, 1996 年—2003 年获上海
中医药大学医学学士、硕士、博士学位, 现为上海中医药大学教学实验中心副主任, 目前研究工艺对中药有效成分的影响, 并
在多项新药的研制中负责工艺优选和质量标准的制定。T el: (021) 51322318、51322315　E2m ail: zhangtdm j@ sohu. com
Apply ing grad ing m ethods of syn thesiz ing m ultiple gu idel ines
to optim iz ing extract technology for R ad ix P uera r iae
ZHAN G Tong, XU L ian2ying, TAO J ian2sheng, YAO Zhen2yu
(Schoo l of Ch inese M ateria M edica, ShanghaiU niversity of T radit ional Ch inese M edicine, Shanghai 200032, Ch ina)
Key words: R ad ix P uera rae; puerarin; to ta l f lavones; o rthogonal test; grad ing m ethods
　　葛根始载于《神农本草经》, 被列为中品。为豆科
野葛 P uera ria loba ta (W illd. ) O hw i 或甘葛藤 P.
thom son ii Ben th. 的干燥根。目前, 在我国为药食两
用的植物。它具有解肌退热、生津止渴、透发麻疹、升
阳止泻的功能。葛根中主要含有葛根素 (puerarin)、
大豆苷 (daidzin) 和大豆苷元 (daidzein ) 等异黄酮类
有效成分。葛根在制成制剂前一般要提取有效成分,
而提取工艺是否合理将直接影响制剂的难易及疗效
的发挥。目前常用的提取方法为水煎、醇提法[1～ 3 ],
通常以葛根素或总黄酮为指标进行工艺优选。本实
验采用正交试验优选葛根醇提取工艺, 以葛根素、总
黄酮含量以及浸膏得率为指标, 综合评分优选工艺
条件。
1　材料和仪器
　　葛根药材购于上海雷允上药业西区有限公司中
药饮片供应站, 经上海中医药大学生药教研室鉴定
为豆科植物野葛 P. loba ta (W illd. ) O hw i 的干燥
根。流动相用甲醇为色谱纯, 其余均为分析纯; 葛根
素对照品购于中国药品生物制品检定所。
　　H P 1100 型高效液相色谱仪 (美国惠普公司) ,
H P 8453 紫外分光光度计 (美国惠普公司)。
2　方法和结果
211　葛根素含量的 H PL C 测定[4 ]: 色谱条件: 色谱
柱为H ypersil OD S C18柱 (20 mm ×416 mm , 5 Λm )
(大连依利特科学仪器有限公司) , 检测皮长为 250
nm , 柱温为室温, 流动相为甲醇2水 (25∶75) , 流速
为 110 mL öm in。理论塔板数按葛根素峰计算应不
低于 4 000。
　　精密称取葛根素对照品 8142 m g 置 10 mL 量
瓶中, 以甲醇溶解定容。以此为母液, 依次配成
01021 0, 01042 1, 01084 2, 01168, 01337 m gömL 5
个浓度梯度的对照品溶液。分别吸取上述对照品溶
液各 5 ΛL , 按上述色谱条件进行测定。以峰面积积
分值为纵坐标, 葛根素对照品浓度为横坐标, 绘制标
准曲线。计算得回归方程: Y = 116+ 20 87017X , r=
01999 96。葛根素在 01021 0～ 01337 m gömL 时峰
面积积分值与浓度线性关系良好。
212　葛根总黄酮含量的UV 测定[3 ]: 精密称取葛根
素对照品 8123 m g 置 10 mL 量瓶中, 以甲醇溶解定
容。以此为母液, 依次配成 2106, 4112, 6118, 8124,
1013 ngömL 5 个浓度梯度的对照品溶液。分别测定
250 nm 处的吸光度值。以吸光度值为纵坐标, 葛根
素对照品浓度为横坐标, 绘制标准曲线, 计算得回归
方程: Y = 691597X + 01014 63, r= 01999 8。总黄酮
以葛根素计在 01002 1～ 01010 3 m gömL 线性关系
良好。
213　浸膏得率的测定: 取葛根的提取液 50 mL , 置
已干燥至恒重的 100 mL 蒸发皿中, 水浴蒸干后, 置
烘箱内 105 ℃干燥 3 h, 取出置干燥器内冷却 30
m in, 迅速精密称定质量。
214　不同提取方法比较: 取葛根饮片 20 g 置 800
mL 烧杯中, 加 200 mL 水, 浸泡 30 m in, 煮沸 1 h, 纱
布滤过, 药渣用 160 mL 水再煮沸 30 m in, 纱布滤
过, 合并两次的滤液, 作为水煎提取液。取 3 份 20 g
的葛根饮片, 置 500 mL 圆底烧瓶中, 分别以 30% ,
60% , 90% 乙醇 200 mL 回流提取 1 h, 纱布滤过, 药
渣再用 160 mL 溶剂再回流提取 30 m in, 纱布滤过,
合并两次滤液, 作为乙醇回流提取液。结果见表 1。
可见, 从葛根总黄酮和葛根素的提取率来看, 以
60% 乙醇为溶剂的提取率较高。
表 1　不同提取方法比较结果
Table 1　Compar ison by differen t extracting methods
提取方法 总黄酮提取率ö% 葛根素提取率ö% 浸膏得率ö%
水煎提取 7. 67 3. 59 29. 20
30% 乙醇提取 7. 30 3. 39 22. 12
60% 乙醇提取 13. 20 4. 33 23. 94
90% 乙醇提取 6. 52 3. 25 15. 84
215　乙醇提取工艺优选: 以上试验表明选取 60%
乙醇提取较为合适。在整个提取过程中, 提取所用乙
醇的浓度和量以及提取时间对葛根有效成分的影响
较大, 故采用正交试验进一步优选醇提的最佳条件。
按L 9 (34)正交表进行试验, 因素水平见表 2。
　　称取葛根各 20 g, 按L 9 (34) 正交试验设计表的
条件进行试验。提取液滤过后合并, 分别测葛根素、
葛根总黄酮、浸膏得率, 并进行多指标综合评分。评
分时以各指标的最大值为参照将数据进行归一化,
再给出不同的权重。葛根素和总黄酮的权重系数设
·93·中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 1 期 2004 年 1 月
为 014。在有效成分明显的前提下, 浸膏得率越高则
纯度越低, 因此设负权重系数为- 012。以综合值进
行统计分析, 结果见表 3 和 4。其中综合评分 Y =
014X 1×100ö13012+ 014X 2×100ö51103- 012X 3×
100ö01260 4。
表 2　正交试验因素水平
Table 2　Factors and levels of orthogonal test
水平
因　　素
A 乙醇 B 乙醇加入量ö倍 C 提取时间öm in
浓度ö% 第一次 第二次 第一次 第二次
1 60 8 6 60 30
2 70 10 8 60 60
3 80 12 10 90 60
表 3　L 9 (34)正交试验结果
Table 3　Result of L 9 (34) orthogonal test
编
号
A B C D
(误差)
总黄酮
提取率
X 1ö% 葛根素提取率X 2ö% 浸膏得率X 3ö% 综合评分Y
1 1 1 1 1 10. 64 4. 639 0. 231 7 51. 26
2 1 2 2 2 9. 417 3. 825 0. 238 8 40. 57
3 1 3 3 3 11. 64 5. 103 0. 260 4 55. 76
4 2 1 2 3 10. 78 3. 977 0. 221 0 47. 32
5 2 2 3 1 9. 821 3. 988 0. 252 8 42. 02
6 2 3 1 2 13. 02 4. 111 0. 244 6 53. 44
7 3 1 3 2 10. 46 4. 243 0. 199 2 50. 09
8 3 2 1 3 9. 495 4. 163 0. 191 4 47. 10
9 3 3 2 1 10. 41 4. 634 0. 213 2 51. 93É 147. 59 148. 67 151. 79 145. 20Ê 142. 77 129. 69 139. 82 144. 10Ë 149. 13 161. 13 147. 87 150. 18
R 　6. 36 31. 44 11. 97 　6. 08
表 4　正交试验方差分析
Table 4　Var iance analysis of orthogonal test
方差来源 离差平方和 自由度 均方 F 值 P
A 　7. 38 2 3. 66 1. 05
B 167. 09 2 83. 55 23. 90 < 0. 05
C 24. 84 2 12. 42 3. 55
误差 6. 99 2 3. 49
　　F 0. 05 (2, 2) = 19. 0
　　直观分析表明, 以综合评分为标准, 在所选因素
水平范围内, 乙醇的加入量对葛根的提取效果影响
最大, 乙醇浓度影响较小, 而提取时间影响最小。方
差分析表明, 因素B (乙醇的加入量) 为主要影响因
素, 具有显著性, 因素A 和C 不显著。故选取最佳提
取条件为A 3B 3C 1, 即 80% 乙醇提取两次, 第 1 次 12
倍量 1 h, 第 2 次 10 倍量 30 m in。
216　验证试验: 根据筛选得到的最佳工艺A 3B 3C1,
进行正交验证试验, 得葛根总黄酮提取率为
1013%、葛根素提取率为 4162%、浸膏得率为
2019% (n= 3)。
3　讨论
　　葛根主要含有葛根素、大豆苷和大豆苷元等异
黄酮类有效成分, 都具有增加脑血流、改善微循环等
功效, 以单一指标成分进行工艺优选与中药多组分、
多靶点的作用特点有一定的距离。本实验以葛根素、
总黄酮含量以及浸膏得率为指标, 综合评分优选醇
提工艺条件, 符合减小服用剂量、提高疗效要求, 可
以较好的保证制剂的质量。
　　用多指标正交试验进行工艺优选时, 首先要解
决指标间量纲不一致和指标间的矛盾问题。然后针
对指标间的重要性差异给出各指标权重, 综合评分
后再进行统计分析。应用多指标综合评分法时, 如何
设置指标的权重, 需要根据具体情况具体分析。在有
效成分明确的前提下, 浸膏得率越高则纯度越低, 因
此本实验设为负权重系数; 如果指标成分不明确, 以
浸出物多少来代表有效成分时, 浸膏得率的权重系
数应相应增大, 并设为正权重系数。这样进行方差分
析的, 优先出的工艺条件更加合理。
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更正:
2003 年第 34 卷增刊第 32 页:“孕马尿甾体成分的研究”一文第一作者张兰兰的单位为中国科学院新疆
理化技术研究所, 现在天津天士力集团中药研究所工作。
·04· 中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 1 期 2004 年 1 月