全 文 ：FFA, LA升高 ,心肌细胞发生一定程度损伤。 以
PQ TS预先灌注能够缓解上述变化 ,减轻氧自由基
对心肌的损伤和心律失常的发生 ,降低心肌 CPK,
LDH,提高冠脉流量 ,纠正 FFA的代谢紊乱 ,减少
乳酸堆积。表明 PQ TS对缺血再灌注心肌的保护机
制是多方面的 ,与 PQ TS负性肌力作用减少心肌耗
氧、增加冠脉流量改善心肌供血减少乳酸堆积、纠正
心肌脂肪酸代谢及抗脂质过氧化反应有关。
References:
[1 ]　Wang B X. Modern Pha rmacolog y of Trad itional Chinese
Drugs (现代中药药理学 ) [M ]. Tianjin: Tianjin Science and
Tech nology Publis hing House, 1997.
[2 ]　 Ralenk ot ter L, Dales C, Delcamp T J, et al . Cytosolic
[ Ca2+ ] , [ Na+ ] , and pH in g uinea pig vent ricular myocytes
exposed to anoxia and reoxygenat ion [ J] . Am J Physiol ,
1997, 272( 6 Pt 2): H2679-2685.
[3 ]　 M eszaros L G, Minarovic I, Zah rad nikov a A. Inh ibit ion of
the skeletal muscle ryanodine receptor calcium releas e channel
by nit ric oxide [ J ]. FEB S Lett , 1996, 380( 1-2) : 49-52.
[4 ]　 Minor T, Is selhard W . Related ar ticles role of th e hepatovas-
cu latu re in f ree radical m ediated reperfu sion damage of th e liv-
er [ J ]. Eur Surg Res , 1993, 25( 5): 287-293.
[5 ]　 Priori S G, Mantica M , Napoli tano C, et al . Early af ter depo-
larizations induced in vivo b y reperfusion of is chemic myocardi-
um. A possible m ech anism for reperfusion arrh ythmias [ J].
Circulation , 1990, 81( 6): 1911-1920.
染料木素对大鼠生殖毒性的实验研究
(Ⅰ ) 一般生殖毒性
许建宁 1 ,王全凯 1 ,崔　涛 1 ,罗玉姝 1 ,王四旺 2⒇ ,郑玉新 1
( 1. 中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所 ,北京　 100050; 2. 第四军医大学药物研究所 ,陕西 西安　 710032)
摘　要: 目的　为保证染料木素临床用药的安全 ,评价其生殖毒性。方法　 16, 160, 480 mg /( kg· d)染料木素分别
连续 ig雄、雌性大鼠 60 d, 14 d后合笼 ,雄性大鼠给药至交配结束 ,雌性大鼠给药至妊娠第 17天 ,观察染料木素对
大鼠的受胎能力、生殖系统及子代的影响。 结果　染料木素 480 mg /( kg· d)引起亲代雄性大鼠精子活动度下降 ,
但未发现睾丸病变 ,也未影响雄鼠生殖能力 ;同时使雌鼠妊娠期体重增长明显低于其他组 (P < 0. 01) ,但未影响胚
胎形成、仔鼠生长发育。 160 mg /( kg· d) 剂量对亲代和子代未引起明显的异常。 结论　染料木素 160 mg /( kg·
d)对雌、雄性大鼠无一般生殖毒性作用。
关键词: 染料木素 ; 生殖毒性 ; 胚胎
中图分类号: R286. 1　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2003) 09 0830 03
Study on reproductive toxicity of genistein I. General reproductive toxicity
XU Jian-ning
1
, WANG Quan-kai
1
, CUI Tao
1
, LUO Yu-shu
1
, W ANG Si-w ang
2
, Zheng Yu-xin
1
( 1. Institute fo r Occupational Health and Poisoning Contro l, Chinese Centr e for Disease Contr ol and Prevention, Beijing
100050, China; 2. Institute o f Materia Medica, Fourth M ilitary Medical Univ er sity , Xi an 710032, China )
Key words: g enistein; reproductive tox ici ty; embryo
　　染料木素系从豆科植物槐角 Sophora japonica
L. 的干燥成熟果实中提取的异黄酮单体成分 ,是具
有弱雌激素样作用又非雌激素类化合物 ,称之为植
物雌激素。流行病调查、动物实验和临床观察均发
现 ,异黄酮通过抑制骨吸收和促进骨形成过程 ,维持
骨代谢的动态平衡 ,有效地预防骨质疏松 [1～ 3 ]。鉴于
染料木素是治疗骨质疏松症的有效药物 ,为了保证
其安全使用 ,对其一般生殖毒性进行了研究。
1　材料与方法
1. 1　药物:染料木素由第四军医大学药物研究所提
供 ,纯度> 98% 。用蒸馏水将其配成不同浓度的混悬
液进行实验。
1. 2　实验动物:三级健康 Wista r大鼠 ,由中国药品
生物制品检定所实验动物中心提供 ,动物合格证号
为京动许字 ( 2000)第 017号。 动物饲养于中国预防
医学科学院二级动物室 (医动字第 01-4018号 ) ,室
内温度为 24℃～ 26℃ ,相对湿度为 40% ～ 60% ,
喂食军事医学科学院实验动物中心提供的清洁级繁
殖鼠料 [京许字 ( 2000) 013号 ] ,动物进入动物室后
适应环境 1周。
·830· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　第 34卷第 9期 2003年 9月
⒇ 收稿日期: 2002-11-15作者简介: 许建宁 ( 1968— ) ,女 ,副研究员 ,硕士生导师 ,主要从事化学物致突变致癌机制和化学物安全性评价方面的研究及检测工作 ,专长为遗传毒理学。
1. 3　试验方法 [4～ 6]:健康 Wistar雄、雌大鼠各 79
只 ,体重分别为 90～ 110 g和 190～ 210 g。随机分为
低、中、高 3个剂量给药组 (每组各 20只 )和 1个溶
剂对照组 (各 19只 )。 每天分别 ig 16, 160和 480
mg /kg剂量的染料木素和 5 mL /kg的蒸馏水。雄性
大鼠连续给药 60 d后与给药 14 d的雌性大鼠按
1∶ 1合笼 ,合笼时间不超过 5 d;雄性大鼠给药至交
配结束 ,雌性大鼠给药至妊娠第 17天。记录给药期
间雄、雌性大鼠一般状况和体重、动物合笼和交配情
况 ;雄性大鼠给药结束后断颈处死 ,作大体检查 ,称
睾丸、附睾的重量 ,计算重量系数 ,并检查精子活动
能力 (按Ⅰ ～ Ⅳ 级计 )和精子数量。 雌性大鼠记录
孕鼠妊娠、哺乳期间给药和体重变化情况 ,各组 1 /2
的孕鼠于妊娠第 14天处死 ,观察妊娠情况 ;另 1 /2
孕鼠自然分娩和哺乳。按公式计算活胎平均值、吸收
胎百分率及死胎百分率。每窝于仔鼠出生第 4日剔
除多余留 8只仔鼠 ,仔鼠于 28 d断乳时、 35 d各处
死 1 /2剖检 ,观察有无畸形。 各项实验数据采用
O FFICE2000的 EXCEL和 SAS软件进行统计分析。
活胎数 ( x± s)= 活胎总数 /母鼠总数
吸收胎% = 吸收胎总数 /(活胎总数+ 吸收胎总数+ 死
胎总数 )× 100%
死胎% = 死胎总数 /(活胎总数+ 吸收胎总数+ 死胎总
数 )× 100%
2　实验结果
2. 1　染料木素对亲代雄性大鼠一般状态及生殖的
影响:雄性大鼠在交配前给药期间 ,摄食、饮水等一
般状况良好。雄性高剂量组动物在给药 47 d时 1只
动物死亡 ,但尸检未见异常。各给药组动物体重与溶
剂对照组比较差异不显著 (P> 0. 05,表 1)。高剂量
组动物 Ⅰ ～ Ⅱ 级精子活动度与对照组比较差异有
显著性 (P < 0. 05,表 2) ,且随剂量增加有精子活动
度下降的趋势 ;各给药组雄鼠的交配率均低于对照
组 ,高剂量组交配率与对照组比较差异无显著性 ( P
> 0. 05,表 2) ;各给药组动物的精子数量与对照组
比较差异无显著性 (P> 0. 05,表 2) ;中剂量组睾丸
表 1　交配前雄性大鼠用染料木素后体重变化情况 (x± s)
Table 1　 Change of body weight of male rats treated with genistein before mating (x± s)
组　别 剂　量
/( mg· k g- 1 )
不同给药天数体重 / g
0 7 14 21 28 35 42 49 56 60
对照　　 - 101. 58±6. 62 153. 32± 8. 65 209. 89±10. 30 258. 37± 11. 22 298. 37± 12. 24 329. 11±11. 94 362. 26± 13. 69 378. 79±14. 96 389. 47± 22. 64 411. 89±22. 37
染料木素 16 103. 20±6. 20 156. 25± 8. 83 210. 75±11. 57 259. 30± 12. 70 301. 45± 14. 16 333. 60±16. 07 361. 65± 19. 27 382. 35±21. 41 399. 30± 24. 09 417. 30±26. 29
160 101. 20±7. 07 153. 85± 9. 62 204. 80±11. 15 252. 50± 13. 38 294. 35± 14. 74 325. 45±17. 89 353. 10± 18. 20 374. 15±20. 15 392. 20± 24. 17 411. 90±25. 46
480 105. 05±8. 29 155. 85± 10. 10 203. 30±12. 98 246. 00± 16. 60* 291. 10± 17. 36 324. 25±18. 71 352. 05± 19. 13 372. 05±20. 72 388. 58± 20. 35 401. 89±19. 87
　　　与对照组比较: * P < 0. 05
　　　* P < 0. 05 vs cont rol group
表 2　染料木素对雄性大鼠生殖功能的影响
Table 2　 Ef fect of genistein on reproductive function of male rats
组　别 剂　量
/ ( mg· kg- 1 )
动物
/只
精子计数
/ ( 105个· mL- 1 )
精子活动度 /%
Ⅰ 和Ⅱ Ⅲ Ⅳ
交配率
/%
对照　　 - 19 　　 85. 3± 20. 1 　　 28. 8 　　 30. 25 　　 41. 67 　　 100
染料木素 16 20 76. 8± 69. 2 23. 33 27. 25 48. 58 80*
160 20 109. 5± 84. 6 19. 75 26. 42 53. 83 75*
480 19 90. 3± 68. 3 12. 17* * 24. 50 63. 33 84. 21
　　　与对照组比较: * P < 0. 05　* * P < 0. 01
　　　* P < 0. 05　* * P < 0. 01 vs cont rol group
表 3　亲代雄性大鼠睾丸、附睾重量系数 (x± s)
Table 3　 Indexes of test icle and epididymis
weight of parental male rats (x± s )
组　别 剂　量
/( mg· k g- 1)
重量系数
睾丸 附睾
对照　　 - 　 0. 731± 0. 079 0. 258± 0. 022
染料木素 16 0. 701± 0. 055 0. 265± 0. 029
160 0. 657± 0. 018* * 0. 259± 0. 033
480 0. 703± 0. 078 0. 264± 0. 040
　　与对照组比较: * * P < 0. 01
　　* * P < 0. 01 vs con trol group
重量系数与对照组比较差异有显著性 ( P < 0. 01,表
3) ,其他各组动物的睾丸、附睾重量系数与对照组比
较差异无显著性 ( P> 0. 05,表 3) ,病理检查也未见
病变。
2. 2　染料木素对亲代雌性大鼠一般状态及生殖的
影响:雌性大鼠在交配前、妊娠期、哺乳期 ,摄食、饮
水状况良好 ;雌性大鼠交配前、哺乳期各给药组动物
体重与溶剂对照组比较差异无显著性 ( P> 0. 05,
表 4) ;妊娠期高剂量组动物体重与溶剂对照组比较
·831·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　第 34卷第 9期 2003年 9月
差异有显著性 ( P < 0. 05,表 4) ;各给药组孕鼠的受
孕率、平均黄体数、着床数、活胎数、死胎率和吸收
胎率与溶剂对照组比较差异无显著性 (表 5)。
2. 3　染料木素对子代生长发育的影响:各给药组的
出生仔鼠体重、存活率、死亡率、性比 ,第 35天哺乳
存活率与对照组比较差异无显著性 (表 6) ;高剂量
组有一窝仔鼠体重明显低于其他仔鼠 ,仔鼠生长情
况良好 ,也未观察到仔鼠畸形 ;各组第 28, 35 d处死
的仔鼠均发现少数雄性仔鼠存在肾脏积水、雌性仔
鼠有子宫充水或水肿的现象 ,但差异无显著性。
表 4　雌鼠体重变化情况 (x± s )
Table 4　 Change of body weight of f emale rats (x± s)
组　别 剂　量
/( g· kg- 1 )
交配前
0 7 14
妊娠期
0 3 6 12 14
对照　　 - 214. 55± 7. 56 223. 75± 9. 52 238. 30± 11. 53 242. 37± 10. 45 251. 95± 10. 81 262. 32± 11. 83 283. 68± 11. 85 294. 32± 14. 99
染料木素 16 216. 10± 8. 43 223. 20± 7. 58 237. 55± 10. 00 243. 15± 10. 47 253. 50± 16. 56 265. 15± 13. 26 284. 70± 19. 03 294. 95± 17. 45
160 216. 00± 9. 84 224. 60± 10. 75 237. 85± 11. 18 241. 42± 14. 98 249. 68± 14. 64 257. 16± 14. 66 278. 37± 16. 51 283. 32± 15. 36*
480 213. 85± 10. 35 223. 95± 10. 96 232. 80± 9. 08 234. 95± 11. 03* 243. 42± 11. 86* 250. 42± 12. 09* * 271. 26± 12. 75* * 279. 79± 16. 71* *
组　别 剂　量
/( g· kg- 1 )
妊娠期
17 20
哺乳期
0 4 7 14 21 28
对照　　 - 323. 33± 13. 09 365. 89± 15. 22 279. 56± 12. 86 300. 44± 18. 32 305. 22± 14. 27 313. 89± 15. 30 293. 44± 12. 81 285. 22± 14. 75
染料木素 16 318. 70± 16. 08 357. 10± 16. 64 280. 78± 17. 75 293. 89± 18. 01 307. 89± 18. 74 322. 78± 15. 12 291. 78± 15. 34 284. 00± 13. 33
160 321. 67± 8. 63 355. 44± 17. 69 289. 44± 38. 12 298. 79± 15. 27 310. 33± 19. 02 318. 78± 14. 96 300. 44± 12. 02 283. 89± 8. 78
480 306. 67± 19. 18* 348. 22± 18. 59* 272. 78± 14. 58 287. 00± 14. 75 298. 67± 16. 85 315. 44± 20. 40 287. 89± 18. 13 269. 89± 36. 55
　　　与对照组比较: * P < 0. 05　* * P < 0. 01
　　　* P < 0. 05　* * P < 0. 01 vs cont rol group
表 5　染料木素对胚胎形成的影响
Table 5　 Effect of genistein on development of embryo
组　别 剂　量
/ (mg· kg- 1)
母鼠
/只
黄体数
( x± s )
着床数
(x± s)
　　　　　活胎　　　　　 　　吸收胎　　 　　死胎　　
总数 /只 x± s 总数 /只 /% 总数 /只 /%
对照　　 - 10 15. 3± 3. 0 15. 1± 2. 1 139 13. 9± 2. 9 0 0 12 7. 95
染料木素 16 10 16. 7± 3. 1 16. 2± 1. 8 149 14. 9± 2. 2 1 0. 62 12 7. 41
160 9 13. 6± 1. 8 13. 0± 3. 4 111 12. 3± 3. 1 0 0 6 5. 13
480 10 13. 3± 2. 2 13. 6± 3. 5 125 12. 5± 4. 2 1 0. 74 10 7. 35
表 6　染料木素对胎鼠存活能力的影响
Table 6　 Effect of genistein on survival ability of fetuses
组　别 剂　量
/( mg· k g- 1) 母鼠 /只
　　　　仔鼠　　　　
总数 平均
仔鼠体重
/g
　仔鼠存活　 　　死仔　　 仔鼠性比　哺乳存活　
/只 /% /只 /% ∶♀ /只 /%
对照　　 - 9 114 12. 7± 1. 3 5. 94± 0. 63 109 95. 62 5 4. 38 1∶ 1. 48 106 97. 25
染料木素 16 10 131 13. 1± 1. 4 5. 85± 0. 40 129 98. 47 2 1. 53 1∶ 1. 08 127 98. 45
160 9 124 13. 8± 2. 7 5. 84± 0. 60 122 98. 39 2 1. 61 1∶ 1. 09 121 99. 18
480 9 119 13. 2± 1. 6 5. 74± 0. 43 114 95. 80 5 4. 20 1∶ 0. 80 113 99. 12
3　讨论
　　本研究从动物交配前开始给药 ,目的是评价生
殖细胞接触受试物后对受胎能力、生殖系统以及子
代有无影响 ,结果表明染料木素 480 mg /kg剂量引
起亲代雄性大鼠精子活动下降 ,但未发现睾丸病变 ,
也未影响雄鼠生殖能力 ,同时使雌鼠妊娠期体重增
长明显低于其他组 ,但未影响胚胎形成、仔鼠的生长
发育 ; 160 mg /kg剂量未见对亲代和子代有明显的
异常影响。 本实验结果表明 ,染料木素 160 mg /kg
剂量对雌、雄性大鼠无一般生殖毒性作用。
References:
[1 ]　Xu J N, Wang Q K, Wang S W , et al . Study on m utagenici-
ty of genistein [ J] . Chin Tradi t Herb Drugs (中草药 ) ,
2003, 34( 4): 353-355.
[2 ]　 Blarir H C, Jordon S E, Peters on T G. et al . Variable ef-
fects of ty rosione kinase inhibi tor on avian os teocals tic activi-
ty and red uction of bone loss in ovariectiomized rats [ J] . J
Cell B iochem , 1996, 126: 161-167.
[3 ]　 Onoe Y, Miyaura C, Oh ta H, et al . Ex pression of es trogen
receptorβ in rat bone [ J] . Endocrinology , 1997, 138: 4509-
4512.
[4 ]　 Guidel ine on the Stu dies of the Trad it ional Chinese Medicine
(中药新药研究指南 ) [ S ]. 1993.
[5 ]　 Yuan B J, Wang Z Q. Precl inical S afety Evaluat ion and
Practice of Pharmaceu ticals (新药临床前安全性评价与实践 )
[M ] . Bei jing: M i lit ary M edical Sciences Press , 1997.
[6 ]　 Li Y, Zhang T B. Th e Method of Study and th e Tech nology
of Exper iment of Developmenta l Tox icology (发育毒理学研
究方法和实验技术 ) [M ]. Bei jing: Bei jing Medical Universi-
ty Press , 2000.
·832· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　第 34卷第 9期 2003年 9月