全 文 ：中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第12期2006年12月· 801·
肿节风的HPLC指纹图谱的研究
王钢力1，翟为民2，姚令文1，椿瑞超1
(1．中国药品生物制品检定所，北京100050}2．国家药典委员会，北京100061)
摘要：目的考察不同产地肿节风的质量。方法收集不同产地肿节风药材20批，采用HPLC法测定药材的指
纹图谱，以AgilentElipseXDB-Cts色谱柱，乙腈一0．1％磷酸溶液(含2．5“乙腈)为流动相进行梯度洗脱，检测波长
344nm，柱温38℃；采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统A版》，以1#样品为模版，计算各被测样品的HPI。C
指纹图谱的整体相似度。结果其他19批被测样品的色谱指纹图谱的整体相似度在0．334～0．999。结论本法操
作简便，重现性好，可用于不同产地药材的指纹图谱的测定和质量评价。由于不同产地肿节风药材指纹图谱差异较
大，有必要对原料药材的产地进行考察。
关键词：肿节风；高效液相色谱；指纹图谱
中圈分类号：R286．02 文献标识码：B 文章编号；0253—2670(2005)12～1801—03
HPLCfingerprintofSarcandraglabra
WANGGang—lil，ZHAIWei—min2，YAOLing—wedl，LINRui—cha01
(1．NationalInstituteforheControlofPharmaceuticalandBiologicalProducts，Beijing100050，China
2．ChinesePharmacopoeiaComm ssion，Beijing100061·China)
Keywords：Sarcandraglabra(Thunb．)Nakai；HPLC；fingerprint
●
肿节风又名九节茶、接骨木，系金粟兰科植物草
珊瑚Sarcandraglabra(Thuob．)Nakai的干燥全
株，为《中国药典))2000年版一部收载品种。味苦、
辛，性平，具清热凉血、活血消斑、祛风通络等功效，
用于治疗血热紫斑、紫癜，风湿痹痛，跌打损伤等症。
肿节风具有抗菌消炎、抑制流感病毒、抗肿瘤、促进
骨折愈合及镇痛等多种活性；而且肿节风及其提取
物具有较好的安全性，急性毒性试验结果属实际无
毒，动物精子畸形试验、小鼠骨髓细胞微核试验、
Arues试验均为阴性，未发现致突变作用。治疗肿瘤
(晚期胰腺癌、消化系统恶性肿瘤和鼻部恶性肿瘤、
自血病等)、细菌性痢疾、骨折及多种口腔疾病取得
良好的治疗效果。
许多中成药都使用肿节风作为原料药材，如：复
方草珊瑚含片、肿节风片、血康口服液等。目前，肿节
风药材的来源基本上都是靠野生资源。但由于年需
求量大，肿节风的野生资源正面临日趋减少的局面。
面对上述情况，几年前已有制药企业在江西信丰和
浙江龙泉等地展开了肿节风人工栽培的研究，并取
得令人满意的进展。但由于药材的人工栽培涉及的
因素较多，短时间内人工栽培的药材还难以替代野
生品。从长远看，人工栽培品替代野生品势在必行。
肿节风的全草含有酚类、鞣质、黄酮苷、香豆素、
收稿日期：2005～0213
内酯和有机酸类成分。现行肿节风药材质量标准测
定项下是测定药材中异秦皮啶。为全面控制药材的
质量，保证肿节风注射液产品质量的均一、稳定，本
实验建立HPLC法测定肿节风的色谱指纹图谱。
1仪器与材料
Waters2695高效液相色谱仪，WatersZ996
PDA检测器，Empower色谱工作站；《中药色谱指
纹图谱相似度评价系统A版》(国家药典委员会发
行)。
异秦皮啶对照品(中国药品生物制品检定所)；
乙腈(色谱纯)，磷酸(分析纯)，Milli—Q水。
收集20批不同产地肿节风药材(主产地或商
品)，经中国药品生物制品检定所张继副主任药师
鉴定。
2方法与结果
2．1色谱条件：采用AgilentZorbaxEclipseXDB
C18色谱柱(150mill×4．6mlll，5pm)；A(乙腈)一B
(0．I％磷酸溶液，含2．5％乙腈)为流动相，进行梯
度洗脱，o～13rain，100％B，体积流量为0．5mL／
min；13min以后，体积流量改为0．7mL／min，
13～43min，A—B(5I 9 )；43～48min，A—B
(20l 80)，48min以后，A—B(70：30)；柱温38℃；
检测波长344Dm。
万方数据
·1802· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第12期2005年12月
2．2溶液的制备
2．2．1供试品溶液的制备：取药材粗粉0．5g，加水
15mL，煎煮0．5h，滤过，用水将滤液补足至15
mL，加乙醇35mL，摇匀，置冰箱中冷藏过夜；取上
清液10mL，离心5mln(4000r／min)，小心吸取上
清液置蒸发皿中，蒸干，残渣加1mL0．1％磷酸溶
液(含2．5％乙腈)溶解，离心5min(12000r／
min)，小心吸取上清液，即得。
2．2．2参照物溶液的制备：称取异秦皮啶对照品适
量，加0．1％磷酸溶液(含2．5％乙腈)溶解，制成含
异秦皮啶10p．g／mL的溶液作为参照物溶液。
2．3方法学考察
2．3．1稳定性试验：取肿节风供试品溶液在0、4、
8、16、20h分别进样分析，记录10个主要色谱峰面
积(图1)。各主要色谱峰的保留时间和峰面积的
RSD均小于lo％。结果表明：供试品溶液在20h之
内稳定。
止 I6 7 8 lL上^．锄
0 8ll 1623 2434 3245 4057
，／min
5异秦皮啶
5-isofraxid／n
图1 方法学考察用样品HPLC色谱囤
Fig1 HPLCchromatogramofsamples
formethodoIogIcaIstudy
2，3．2精密度试验：取肿节风供试品溶液重复进样
5次，记录10个主要色谱峰面积，结果各主要色谱
峰的保留时间和峰面积的RSD均小于10％。
2．3．3重现性试验：称取同一批江西药材样品5
份，制备供试品溶液，在上述色谱条件下分析，记录
10个主要色谱峰面积，结果各主要色谱峰的保留时
间和峰面积的RSD均小于10％。
2．4样品测定：分别吸取上述供试品溶液各lo
”I。，注入液相色谱仪，按照上述色谱条件测定，记录
色谱图。采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统A
版》对各样品色谱图的原始数据文件(输出格式为
edf)进行分析，以20批样品生成的对照谱图(平均
值法和中位数法)作为对照模版，计算各色谱图的整
体相似度。20批被测样品的指纹图谱见图2，测定结
果见表1。
．． 1
I
1一
}_#_聿=诮I蠢州冀“—“t：=兰
_S8
=g扫L翳
t／mlil
圈2 20批不同产地肿节风药材的液相指纹图谱
Fig．2Fingerprintsof20batchesoftested
samplesfromdifferenthabitats
衰1样品来源及测定结果
Table1 Sourcesandresultsoftestedsamples
2．5推荐产地原料药材指纹图谱及对照谱图：由于
肿节风药材为天然野生产品，其化学成分受生长环
境及加工、储存等环节因素的影响，为便于企业在日
后原料采购的需求，现提供3批推荐产地药材指纹
图谱及药材对照指纹图谱(图3，4)，供原料质量控
制参考。
3讨论
3．1试验方法的选择
3．1．1提取方法的选择：为使肿节风药材的指纹图
万方数据
中草药ChineseTraditionalandrierbalDrugs第36卷第12期2005年12月· 803·
000 567 1333 20 0 26 73333 4000 4567
r／mm
圈3推荐产地药材指纹田谱
Fig．3Fingerprintofsamplesfrom
recommendedsource43
Ln一。从
000 6 52 130419562609 326 39134565
r／mlo
图4推荐产地药材的模式指纹圈谮
Ftg．4Patternfi gerprintofsamples
fromrecommendedsoorce$
谱能表现与肿节风注射液指纹图谱所呈现的化学成
分相关性，采用类似成品生产工艺的药材提取方法
制备供试品溶液。
3．1．2 色谱条件的选择：色谱柱的选择：选用
AgilentZorbaxEclipseXDBC18、AgilentZorbax
SB—ClB、AlltechAlltimaC18色谱柱试验。结果表明
AngilentZorbaxEclipseXDB—C18对肿节风供试品
溶液的分离效果最好。流动相的选择：选用乙腈一水、
甲醇一水、乙腈一0．1％磷酸作为流动相进行试验。结
果表明乙腈一0．1％磷酸对肿节风供试品溶液的分离
效果最好。检测波长的选择：根据异嗪皮啶的紫外吸
收光谱特征，210、344nm波长处应为最佳波长选取
点。但由于肿节风注射液的质量标准中，指纹图谱的
检测波长为344Dm，故选其作为指纹图谱的检测
波长。
3．2样品测定结果分析：从20批不同产地药材的
指纹图谱可以看出，来自不同产地的野生药材中化
学成分差异较大。这将直接影响成品化学成分及指
纹图谱的稳定性。在没有大量人工栽培品的情况下，
有必要相对固定肿节风的产地，以保证制剂质量的
稳定和均一。但由于肿节风注射液的生产企业数量
较多(现为7家)，且该品种既没有专利保护，也不是
中药保护品种，今后可能还会有其他生产企业仿制
该品种。因此，将肿节风原料药材固定在一个产地不
是非常现实。考虑到药材产地的地理位置、企业的年
度需求量、传统用药习惯及维护资源的可持续利用
等因素，暂定原料产地为广西贺川县、浙江龙泉县和
江西信丰县。-
由于原料药材来源的限制，以及天然药物生长
环境及加工、储存等环节因素的不确定性，导致药材
化学成分的差异较大，现暂不规定原料药材指纹图
谱的标准，待日后人工栽培技术成熟和规模扩大，能
够满足注射液原料需求时再作规定。建立企业在采
购原料药材时，应对其指纹图谱加以考察，以保证产
品质量的均一性和稳定性。
在对照谱图生成的方式中，《中药色谱指纹图谱
相似度评价系统A版》提供了中位数和平均值两种
计算方法。本实验同时使用了这两种方法进行计算，
结果见表1。对于同一样品而言，两种算法得到的计
算结果有一定的差别。考虑到药材为野生的天然产
物，受环境、气候、生长条件等因素影响较大，对于过
于离散的样品应该降低其在对照谱图生成中的权
重，故笔者认为，选择中位数法应较平均值法合理。
References：
[1]c^P(中国药典)[s]．VolI．2000．
[2]WangGL，ChenDF，LinRC Advancesinchemicaland
qualitycontrolstudies。ⅡHerbaSacandrae[J]ChinTradn
HerbDrugs(中草药)，2003，34(8)：一一xi．
敬告读者
《中草药》杂志编辑部尚存部分过刊合订本．包括：19741975年、1976年、1979年、19851994年(80元／
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年(200元／年)、2004年(220元／年)。1996 增刊(50元)、1997年增刊(45元)、1998年增刊(55元)、1999年
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万方数据
肿节风的HPLC指纹图谱的研究
作者： 王钢力， 翟为民， 姚令文， 林瑞超， WANG Gang-li， ZHAI Wei-min， YAO Ling-wen
， LIN Rui-chao
作者单位： 王钢力,姚令文,林瑞超,WANG Gang-li,YAO Ling-wen,LIN Rui-chao(中国药品生物制品检定
所,北京,100050)， 翟为民,ZHAI Wei-min(国家药典委员会,北京,100061)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2005,36(12)
被引用次数： 4次

参考文献(2条)
1.中华人民共和国药典(一部) 2000
2.Wang G L;Chen D F;Lin R C Advances in chemical and quality control studies on Herba Sacandrae
2003(08)

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