全 文 ：中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第12期2005年12月· 855·
56l一562．
[6]MuteliefuG，LiuMJ，LuJ F．Effectofcistanosldecorn—
poundsonoxidativestTesSandimmunityEJ]．JChinPharm
5ci，2001，10(3)，157—160．
Z73LongaEZ，weinsteinP R，CarlsonS，etal Reversible
middlecerebralarteryocclusionw thoutcraniectomylnra博
EJ]．Stroke，1989t20(1)：84—91·
E8]XuSY，BianRLtChenX MethodologyinPharmacological
E砷er+ment(药理实验方法学)[M]3rded．Beijing：
People’sMedicalPublishingHouse．2002．
[9]WuFQCerebrovasculardementia[J]．AdvCardi+wascDis
(心血管病学进展)t1993，14(2)：90—92
[103Sk。onI．StatusofriskfactorsforvBse山rdementia[I]．
Neuroep,demiology，1998，】7(1)：26
[11]LoebC．Mentaldeteriorationelatedolacunarinfarctions
[JJ．HeartDisStroke，1994，23；758I
氧化苦参碱对豚鼠心室肌细胞动作电位和单通道钠电流的影响
陈 霞·，张文杰2，吕文伟1，李英骥2，钟国赣p
(i．吉林大学基础医学院药理教研室，吉林长春130021}2．吉林大学基础医学院生理教研室．吉林长春150021)
氧化苦参碱(oxymatrine)是从豆科植物苦参
SophoraflavescensAir．中提取的一种生物碱。氧化
苦参碱对心血管系统的作用较为显著，具有强心、抗
心律失常、抑制细胞凋亡、清除自由基及抑制豚鼠心
室肌全细胞钠电流等多方面的药理作用“。23。但关于
氧化苦参碱对豚鼠心室肌单细胞动作电位及单通道
钠电流的影响尚未见报道，因此本实验拟在细胞和
单通道水平观察氧化苦参碱的作用，为探讨氧化苦
参碱抗心律失常作用机制提供理论依据。
1材料
豚鼠，雌雄兼用，体重300～350g，由吉林大学
实验动物部提供。氧化苦参碱(质量分数>99％)
由中国药品生物制品检定所提供。CEZ--2400型膜
片钳放大器为日本产品。
2方法
2．1单细胞动作电位的记录方法：应用胶原酶常规
分离豚鼠心室肌细胞o]。将尖端直径为0．8～1．5
“m的微电极抛光后冲灌电极液，电阻为1～3Mn。
将已加正压的微电极缓缓插人浴液，直至接触心肌
细胞，去除正压，用注射器抽吸以形成0．98～1．96
kPa的负压。当电极尖端与细胞膜表面形成l～5
GI)封接电阻时，用力吸破电极尖端上的膜片，形成
全细胞记录。应用电流钳方法，给予时程10riis、每
秒1次，幅度为1～2nA的内向电流脉冲，引导出
豚鼠心室肌细胞的动作电位，并输入计算机分析动
作电位的各项指标“]。在细胞外液中加入1mmol／L
氧化苦参碱3rain后，同样的方法引导动作电位，测
量静息膜电位(RMP)、动作电位幅值(APA)、动作
电位上升最大速率(y～)、动作电位复极50％时
程(APD；。)和动作电位复极90％时程(APD。。)
等指标。
2．2单通道钠电流的记录方法：用记录单通道钠电
流的电极液充灌电极后，在显微镜下进行抛光处理，
一般电极电阻为1～1．5M12。将玻璃微电极置于细
胞的表面，通过负压吸引作用形成10Gn以上的高
阻封接，使电极尖端下的细胞膜片在电学上与周围
膜片相隔离，形成细胞贴附式的记录方式。
2．3记录动作电位及单通道钠电流所需溶液：记录
动作电位所用灌流液(mmol／I。)：NaCI137、KCI
5．4、MgCl21．0、CaCI2 1．8、HEPES5、葡萄糖10，用
5mol／LNaOH将pH值调至7．4；记录动作电位的
电极内液(mmol／L)：KCI140、MgCI22、EGTA2、
CaClz1．8、HEPES5、NazATP10，用1tool／I。KOH
将pH值调至7．2。记录单通道钠电流所用的细胞
外液(mmol／L)：KCl140、NaCI4．s、MgCl。·
6H200．5、EGTA1．0、葡萄糖5．5、HEPES5．0，用
KOH将pH值调至7．3。记录单通道钠电流所用的
电极液(mmol／L)：NaCl140．0、KCI4．0、MgCIz·
6H201．o、CaCl20．1、葡萄糖5．5，用NaOH将pH
值调至7．3。
2．4 数据的采集和统计处理：在实验中应用
Pclamp6．01程序记录出原始的单通道钠电流图形，
应用Fetchan和Pstat程序分析单通道钠电流记录
中得到的64条原始曲线，用单指数曲线拟和统计
瓣嚣鬻糍愁篡薯饕曼煮莲骥铡怒，慧紫药槲。脑血管系坑的影响及其机制研究作者筒介2襞1：宅譬器?磊j巍j吉营烹嚣煮毫垒：景志喾ij§篓’毒摹鉴事药物对心脑血管系坑的影响及其机制研究
万方数据
·1856· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第12期2005年12月
钠通道的开放时间、关闭时间与开放概率。实验中所
有数据均以；土s表示，各组数据间采用两样本均数
t检验，用MicrosoftExcel完成。
3结果
3．1氧化苦参碱对豚鼠心室肌细胞动作电位的影
响：见表1。结果表明，1mmol／L氧化苦参碱可略降
低RMP水平，但无统计学意义i能减小APA值，
降低y⋯，并缩短APDso和APD。o，与对照组相比差
异显著。
3．2氧化苦参碱对豚鼠心室肌细胞单通道钠电流
裹1 氧化昔参碱对豚鼠心塞肌细胞动作电位参数的影响“士s，Ⅳ一8)
一
Table1 Effectsofoxymatrlneonactionpotentialparametersofventrlcularmyocytesinguineapig(xfl-s，n28)
与对照组比较：一P
的影响：应用细胞贴附式膜片钳方法观察了l
mmol／L氧化苦参碱对单通道钠电流的影响。实验
中保持电位为一100mV阶跃至一40mV、持续时
间为20ms，记录单通道钠电流后，向浴液中加入1
mmol／L氧化苦参碱。通过单指数曲线拟和开放和
关闭时间分布直方图，结果表明1mmol／L氧化苦
参碱可使单钠通道的开放时间缩短、关闭时间延长、
开放概率降低，结果见表2。
表2氧化苦参碱对豚鼠心窒肌细胞单钠通道的影响
(；士，．^一8)
Table2 Effectsofoxymatrineonsinglesodiumchannelof
ventrieularmyocytesInguineapig(；士5，n一8)
开救时I可／ms 开放概率
0rain 15rain 0rain 15rain
与对照组比较：。P<0．05
“P<0⋯05controlgroup
4讨论
心肌细胞动作电位(AP)是心肌兴奋过程中由
Na+、K+、ca”和Cl一等跨膜转运而形成的，因此
AP的参数能在一定程度上反映跨膜离子流的变
化。0相去极化是由Na+的快速内流所形成，这种细
胞膜电位的急剧变化在心室肌可触发兴奋的传导和
肌肉的收缩，是影响心肌兴奋性、传导性最基本的因
素之一，而V⋯则是反映0相去极化的指标。本实验
结果表明，氧化苦参碱能明显减少APA，降低y⋯，
提示氧化苦参碱对心肌细胞Na+电流具有抑制作
用。此外，AP的另一个参数APD反映了心肌细胞
的复极化过程。其中APD。。代表复极化前期即平台
期，主要反映有效不应期；而APD。o中除去APDso的
部分则代表复极化后期的时程，主要反映相对不应
期。Na+、K+、ca”和cl一等多种离子参与了心肌细
胞的复极化过程，本实验中氧化苦参碱缩短APD。
APD。。的作用，可能是氧化苦参碱通过作用于其他
离子通道而对APD产生影响的“⋯。
本实验还采用单通道膜片钳技术，观察了氧化
苦参碱对心肌细胞单通道钠电流的作用，发现氧化
苦参碱可降低单钠通道的开放时间和开放概率，而
不影响单钠通道的电流幅值，从分子水平观察了氧
化苦参碱对心肌细胞钠通道的作用。表明氧化苦参
碱对AP的影响部分是由于钠通道的开放概率降低
所致。
References：
[1]Chenx，LiYJ，ZhangWJ，eta1．EffectsofoxymatrineoH
sodiumcurrentinisolatedventrieularce lsinguineapig口]．JⅣ。⋯Beth“nPU ivMedSci(白求恩医科大学学报)．
2001，27(1)：41—43．
[2]ChenX．LiYG，GeJY，eta1．Effectsofoxymatrineoilac—
tionpotentialofnor～lratandarrhythmicratinducedby
aconltineEJ]JJilinU iv：MedSci(吉林大学学报：医学
版)，2004，30(5)：8264·
[3]XuSY，BianRL，ChertX．MethodologyinPharmacological
Experimentf药理实验方法学)[M]．Beijing：People’s
MedicalPublishiragHouse，1994．
[4]WangJL，NongY，YaoWX，eta1．Effectsofliensinineon
actionpotentialandIN⋯Ici inguineapigventrieularmy—
ocytes[J]．ChinTrad tHerbDrugsf中草药)，2000，31
(3)：193195．
[5]SatohH．Cardiacele trophyslol091calm dulationbyNS7·a
．ovelneuroprotecdvedrug，ofguineapigventrieularm scles
[J]L掘Sci，2003，72：1039—1048．
[8]PacheraP．Bagiaz，Lako’Futo’z·etal Cardiacele tro—
physiologicaleffectsofcitalopraminguineapigpapillary
musclecomparisonwithclomipramine[J]＆nPharntacol，
2000．34：17—23．
万方数据
氧化苦参碱对豚鼠心室肌细胞动作电位和单通道钠电流的影
响
作者： 陈霞， 张文杰， 吕文伟， 李英骥， 钟国赣
作者单位： 陈霞,吕文伟(吉林大学基础医学院,药理教研室,吉林,长春,130021)， 张文杰,李英骥,钟国
赣(吉林大学基础医学院,生理教研室,吉林,长春,130021)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2005,36(12)
被引用次数： 2次
参考文献(6条)
1.Chen X;Li Y J;Zhang W J Effects of oxymatrine on sodium current in isolated ventricular cells in
guinea pig[期刊论文]-白求恩医科大学学报 2001(01)
2.Chen X;Li Y G;Ge J Y Effects of oxymatrine on action potential of normal rat and arrhythmic rat
induced by aconitine[期刊论文]-吉林大学学报(医学版) 2004(05)
3.Xu S Y;Bian R L;Chen X 药理实验方法学 1994
4.Wang J L;Nong Y;Yao W X Effects of liensinine on action potential and INa,Ica-L in guinea pig
ventricular myocytes[期刊论文]-中草药 2000(03)
5.Satoh H Cardiac electrophysiological modulation by NS-7,a novel neuroprotective drug,of guinea pig
ventricular muscles[外文期刊] 2003(9)
6.Pachera P;Bagia Z;Lako-Futo Z Cardiac electrophysiological effects of citalopram in guinea pig
papillary muscle comparison with clomipramine[外文期刊] 2000
引证文献(2条)
1.胡海波 氧化苦参碱对心血管疾病的药理作用及其机制研究进展[期刊论文]-中国药业 2012(13)
2.董珉翔.白音夫 苦参心血管药理作用的研究进展[期刊论文]-西北药学杂志 2013(2)
本文链接：http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical_zcy200512038.aspx