全 文 ：中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第lO期2005年10月
藁本内酯的稳定性及p一环糊精包合工艺的考察
李 慧“2。边宝林1，孟繁蕴2，王一涛1
(】．中国中医研究院中药研究所，北京100700；2．北京师范大学中药资源与资源药物研究所．北京100088)
摘要：目的考察藁本内酯的稳定性．并采用p-环糊精包台，避免藁本内酯的异构化。方法 自然条件或密闭、避
光情况下，台藁本内酯的量下降显著。采用B环糊精进行包台，正交试验优选了包合的最佳工艺，采用多种方法耐
包台物的形成进行了验证。结果DSC法、红外分光光度分析、GC分析显示：按最佳工艺制得的包含物与混合物有
明显区别，藁本内酯被p一环蝴精包台在分子腔中已经形成新的物相。结论藁本内酯常温下不稳定，}环糊精包合
可以改善它的稳定性。
关键词r藁本内酯；稳定性；H-环糊精包合
中图分类号：R283．6FR286．02 文献标识码：B 文章编号：0253—2670(2005)10—1483—04
StahilityofligustilideanitsB—cyclodextrininclusionpr cess
I。IHull～，BIANBao—linl，MENGFan—yun2．WANGYi—tao‘
(1．InstituteofChineseMateriaMedica．ChineseAcademyof’Yraditiona】ChineseMedicine，BPijing100700，China；
2．InstituteofNaturalMedicineandChineseMedicinaltesource，BeijingNormalU iversity，Beijing100088，China)
Abstract：ObjectiveTostudythstabilityofligustilldeandtheinclusionpr cessin口一cyclodextrinto
avoidtsisomerization，MethodsThecontentfligustilidedroppedseverelyevenifitwaskeptawayfrom
layerandairunderroomtemperature．TheinclusionprocesswithpeyelodextrinwascarriedOUtOD
orthogonaldesign．’Fheoptimumconditionsweredeterminedandinclusioncomplexwasmadesurebv
manyways．ResultsThevalidatedtrialsbyDCS，IR，andGCcouldexhibittheobviousdifference
betweenmixtureandinclusioncomplexwhichs owedtheformofanewphase，becauseofB—cyelodextrin
andrugsinthemolecularcapsu[es．ConclusionInclusionprocesswith口cyclodextrinCallimprove
stabilityofligustilidethatisunstableinnormalsituation．
Keywords：ligustilide；stability；}cyclodextrininclusionpr ess
藁本内酯是当归、川芎挥发油中的主要有效成
分，是评价当归、川芎质量的重要指标，具有解痉、止
咳平喘、调经止痛等多种生物活性。但藁本内酯稳定
性问题十分突出，随着藁本内酯在提取物中量的不
断提高，其异构化速率加快，室温条件下放置2～4d
可下降50％以上．长时间放置还可氧化成多种复杂
产物乃至最后消失一”“。本研究针对藁本内酯的不
稳定性，采用p_环糊精进行包台，k(34)正交试验法
优选了包合工艺，结果显示，包合物中藁本内酯的稳
定性大大提高。
1仪器与材料
sH一3A双显恒温加热磁力搅拌器(北京金北
德工贸易有限公司)．ZD79一D型真空干燥箱(北京
兴争仪器设备厂)，HewlettPackard1100全自动液
相色谱仪)，98—1一B型电子调温电热套(天津泰斯特
有限公司)，5DXFTIR红外分光光度仪(Nicolet
公司)，LcT一1差示热分析仪(日本岛津)，芎归提
取物(XGRE)：按处方量将川芎、当归两味药材用超
临界CO：流体萃取法萃取，萃取物经过精制处理，
去除其中的高级脂肪酸等杂质成分，得到精制芎归
提取物，HPI，C法测定藁本内酯的质量分数大于
50％。p一环糊精(质量分数95％以上，苏州味精厂)；
藁本内酯对照品(自制，归一化法测定，质量分数
98％)，其他试剂均为分析纯。
2方法与结果
2．1藁本内酯的HPLC测定“5]
2．1．1 色谱条件ZorbaxRX—C．。(250mm×4．6
mm，5pm)柱，流动相为甲醇水(70：30)，体积流
量为1．0ml。／rain，检测波长：330nm，柱温：35C。
色谱图见图l。
2．1．2 线性范围考察：精密称取藁本内酯对照品
24．60mg于50mI。量瓶中，加入甲醇充分溶解。分
收稿日期z2004—12-02
作者简介2茇事莘筹蔷葑辜爱羹暑雾霉尝金!号雪l器景毫舞芝墓驴窄-所m博ail土,t—ih。u京iyir51i§袭羔蹇曼药物与中药资源研究所博士后，主要
万方数据
·1484· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第10期2005年10月
『I小h一二。A～一
l_藁本内酿
L—tlguslilide
图1 藁本内酯对照品(A)和芎归提取物(B)的HPLC圈
Fig．IHPLCchromatogramsofligustilideref reBce
substance(A)andsample(B)
别自动吸取l、2、4、8、12、20、30pI，注入液相色谱仪
中，依据给定的色谱条件测定藁本内酯峰面积。以对
照品进样量为横坐标．峰面积为纵坐标进行线性回
归，得回归方程Y一6．279+400，43X，r=0。9998
说明藁本内酯在0．492～14．76pg与峰面积呈良好
线性关系。
2．2 自然状态下藁本内酯的稳定性：取XGRE于
自然条件下放置，HPI。C法测定藁本内酯变化情况。
以0d的质量分数为100％，放置2、4、10、15、30d
的藁本内酯的相对质量分数分别为59。82％，
53．13％、21，61％、2．87％、0。46％。结果显示：藁本
内酯的精制提取物在自然条件下十分的不稳定，放
置2--4d下降将近一半。HPLC图谱亦显示，藁本
内酯以外的杂峰数景随储存时间延长而增加。
2．3藁本内酯的异构化途径“J：藁本内酯于室温下
保存可生成多种异构化产物，其中主要产物有8种，
占异构化产物的90．81％，据推测可能的异构产物
为邻苯二甲酸酐、环己二烯一1，2-二甲酸酐、正丁烯
基苯酞、3．d一环氧藁本内酯等。
2．4影响藁本内酯稳定性的因素：针对藁本内酯异
构化的主要影响因素——光和氧，设计试验条件，定
期称样测定藁本内酯的变化。以0d测定的质量分
数为100％，计算不同条件下藁本内酯的经时变化，
结果见表1。
衰1 藁本内醢在不同条件下的变化
Table1 Contentvarietyofligustilide
underdifferentco ditions
结果表明：光和氧加速藁本内酯的异构化，室温
条件下即使避光、密闭保存，也不能保证藁本内酯的
稳定，有必要采取稳定化措施。
2．5正交试验优选包合工艺的研究“7”
2．5．1正交试验设计：为了寻求口一环糊精包台的最
佳工艺条件，在预试验的基础上选定包合时间(A)、
包台温度(B)、口CD与XGRE的比例(c)的考察因
素，每个因素各取3个水平，采用I。e(34)正交试验表
进行试验。以油的利用率和包台物得率为考察指标，
见表2～4。
裹2因素水平
Table2 Factorsandlevels
表3 L。(34)正交试验结果
Table3 ResultsofLn(34)orthogonaltest
111．43
216．62
280．06
【8552
2ll7l
210．89
26．19
17【．35
205．9l
230．85
59．50
2．5．2包合物的制备：将一定量的p—CD制成饱和
水溶液，加入XGRE，用等量无水乙醇稀释，恒温搅
拌至规定时间，放置冰箱中冷藏24h，滤过，滤饼用
定量乙醚淋洗，60c减篮干燥即得包合物。
2．5．3包合物中油利用率、包合物得率的测定：精
密稳定干燥包台物19，置装有沸石的圆底烧瓶中，
8
8
7
0
4
1
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拙扎佩嘛鼽礼吼蹶㈨
9
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3
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3：2
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i趴¨瓤，
万方数据
中草药ChineseTraditionalandHerbal]Drugs第36卷第10期2005年10胃·1485-
衰4方差分析
Table4 Variancea alysis
来源 离均差平方和自由度MeanSquareF值 显著性
Fo05(Z，2)=1900’o01‘2，2)一99-00
加蒸馏水500mI．，按《中国药典))2000版一部附录
挥发油测定法项下，连接挥发油测定器，微沸并保持
5h，至油量不再增加时停止加热，放置1h至油呈
清亮或黄色时，乙醚萃取，挥干溶剂，称定回收油的
质量，计算油的利用率、包合物得率。
油的利用率一包合物中含油量／投油量×100％
包合物得率一包合物质量／(p_cD质量十投油量)×
100％
结果分析；水平优势为A。>A。>A，，B。>B。>
Bl，C3>c2>c1，因素主次：A>C>B。
确定最佳工艺条件：由正交试验选出p环糊精
包合试验的最佳工艺条件为A。B。C，，即取XGRE加
乙醇溶解分散，按1：6的比例滴加至B—CD饱和溶
液中，设定包合温度30c，用磁力搅拌器匀速搅拌
2h即得。
2．6包合物的质量研究
2．6．1包合物的外观性状考察：分别取口一CD(I)、
pCD空白包合物(制备过程中不加入XGRE，制备
操作同包合物的制备，Ⅱ)、CD与XGRE混合物
(Ⅲ)、口CD包合物(Ⅳ)进行性状观察，并与异羟肟
酸铁试剂反应，结果见表5。
表5包台物的性状考寨
竺竺!!!!!!竺!竺!!!!!!!!!!!!竺竺!竺!
包含物 性状 紫外灯下观察异羟肟酸铁反应
2．6．2DSC法分析：用标准物质校准，剪切基线
后，取欲验证的样品适量，精密称重，作差示扫描量
热曲线。测定条件：扫描温度15～200C；气氛为：氮
气；DSC量程：土10．45mJ／s，升温速度：10c／rain。
见图2。I与Ⅲ峰基本类似，而包合物(1V)与混合物
明显不同，说明包合后fl-CD与XGRE包合物已经
形成新的物相。
2．6．3红外分光光度法分析：取XGRE、p—CD、包
／、＼一y＼＼．介＼一
图2 B·CD(A)、包合物(B)和混台物(c)的DSC曲线
Fig2 DSCcurveofB—CD(A)，inclusionomplex
(B)，andmixture(C)
合物、混合物适量进行红外光谱分析。结果显示：
XGRE在波数1747cml附近存在强烈的羰基伸缩
振动，包合物羰基呈微弱吸收。
2．6．4包合成分的GC分析：取0．1g包合物，加
甲醇2mI。，超声振荡提取30rain，滤过，挥干溶剂得
萃取油。与XGRE分别做GC分析。结果显示两者
的峰强度、峰数目都很接近。表明XGRE被}CD包
合是通过物理包合作用结合在一起的，无化学反应
发生，没有发生成分的改变。
2．7包合物的稳定性考察：为了考察包台物的稳定
性，定期精密称取p环糊精包台物0．1g，加甲醇2
mI。超声提取30rain，测定其中藁本内酯。以0d质
量分数为100％，计算B—CD包合物中藁本内酯的经
时变化，结果放置2、4、10、15、30d的包合物中藁本
内酯的相对质量分数分别为99．30％、99．42％、
96．95％、96．89蹦、90．61“。
3讨论
3．1 藁本内酯是当归、川芎挥发油中最大量的成
分，具有一定的生理活性。因此，相比药材中的川芎
嗪、阿魏酸等有效成分而言，藁本内酯的研究更有必
要深入化。
3．2制备口CD包台物时，曾采用直接混合法，优
点是过程简单，不混入溶剂，但由于是非均相反应，
需要相当长的时间。加入少量乙醇将精制提取物溶
解，制得包台物，测定挥发油含油率时结果均一、稳
定，数据变化较小。
3．3精制提取物中以藁本内酯为代表的非极性脂
溶性成分被包合后，减少了受热、湿、光和空气中的
氧等不稳定因素的影响，不但稳定性提高，还能将液
体药物粉末化，避免了有效成分的直接散失，便于进
一步制备合理的制剂。
3．4藁本内酯异构化产物发生了外观、物态的变
化，生理活性是否随之改变，还有待进一步研究。
References：
[1]LiGS，MaCJ，LiXY StudiesOntheslabilityofligustilide
andtheanalysisofitsisomerizcdpro uctsbyGCMS[J]
ChinTraditHerbDru_‘fs(中草药、，2∞O，31<6)：405-407
[2]ZhouCx，LiXH．Studies013thestahilltyofligustilidewith
solventHect[J]．ActaPharmSin(药学学报)，2001，36
万方数据
·1486· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第10期2005年lo月
‘10)：793—795．
r3]LiGS，MaCJ，I．iuZF，elu1．Extractionofessentialo I
tramAngelicaslnensisbysupercrltlcal—COzfluldincomparison
withthathysteamdistillation[JJ．ChinTraditHerbDrugs
(中草药)，Z001，32f7)；581583
n]ZhangJL，XieFz，LiN，eta1．HPLCdeterminationoftwo
mainactiveconstituentsinplantsotgenusz船ust&um[J]．
ChinPharmAnal(药物分析杂志)．2000，20(5)：301—303．
[5jChenW，WangQF，ZhangZx，eta1．Studyoffthestabitity
ofvolatileoilinFensshikangCapsulescJ]，ChinPharmAnal
(药物分析杂志)，2001，2113)：】58—160
[6]XuxI，．ZhangZR，Hezx，etⅡ，．Sludyonpreparationofp—
cyclodextrini“clusionc mplex。fvolatileoilinXiongdaa
XiaoyanC psules[J]．chinaJChinMaterMed(中国中药杂
志)t2004，29(7)：644—646
[7]NaaarsenkerMS．M shramRN·RamprakashG，Sotid
dispersionoehydroxypropylbeta—cycle,dextrinandketoro|acl
enhancementofinvit,,Jdissolutionfates，improvementinanti—
inflammatoryac ivityandreductioninulcerogeaicityinrats
n]．．，PhⅡr7nPharmacal，2000，52(81t 949—9S6．
叶黄素酯的生物转化研究
陈龙胜。忻呖，周斌
(安徽省分析测试中心，安徽合肥230031)
摘要：目的对叶黄索酯进行微生物降解。以获得游离态叶黄京。方法采用青霉菌摇瓶发酵转化法，并考察了
pH、发酵时间、接种量对转化结果的影响。结果青霉菌在pH值为6．0．接种量为2菌塞，发酵24h叶黄素酯转化
彻底，所得叶黄素纯度为91．6“，延长转化时间使叶黄素纯度增加，但是叶黄素质量浓度降低。结论青霉菌在发
酵过程中会产生能转化叶黄素酯为游离态叶黄紊的酶+发现制备叶黄索的一种新方法。
关键词，叶黄紊；叶黄素酯；生物转化；青霉菌
中图分类号：R282．15；R286．02文献标识码：A 文章编号：02532670(2005)101486—03
Biotransformationfluteinesters
CHENI。ong—sheng，XINYang，ZHOUBin
(AnhuiAnalysisandTestCenter，Hefei230031，China)
Keywords：lutein；luteinesters；biotransformation；Penicilliumsp．
叶黄素是一种优良的抗氧化剂，在预防年龄相
关性视黄斑退化．降低结肠癌发病率，预防心血管疾
病的发生等方面有着广泛应用ill。自然界中叶黄素
主要以酯形式存在于金盏菊中。目前都是通过在强
碱性甲醇溶液皂化金盏菊提取物中叶黄素酯分离得
到游离态叶黄素o]，反应产率不高，同时由于大量使
用有毒溶剂，造成极大的环境污染，也使得产品难以
达到食品标准。生物转化是利用微生物培养过程中
释放一此酶体系对外源化学成分进行结构改造，有
底物选择性高，无环境污染、反应条件温和及成本低
廉等优点。叶黄索生产工艺研究也集中在化学转
化o]。本实验通过青霉菌摇瓶发酵转化法制备叶黄
素，研究了pH值、发酵时间和接种量等发酵条件对
转化过程的影响。
l仪器与材料
HPLC色谱仪：Waters600ESystemcontro—
tier，KnauerK--2501紫外可见检测器，Shimadzu
C R6A色谱数据处理机{叶黄素对照品(Sigma公
司)，叶黄素酯由长沙华欣科技有限公司提供，青霉
菌种由中南大学矿物工程学院提供；去离子水(自
制)，甲醇、乙腈、醋酸乙酯为色谱纯，其他试剂均为
分析纯。
(诱导产酶)培养基：2．0gNH+NO。，2．0g
K2HP。，1．0KH2PO。，0．2gMgSOt，0．14g
CaCI2·2H20，0．2gNaCI，去离子水1．0L，以
triton100为分散剂，叶黄素酯溶于其中，质量浓度
为26．7mg／mL。
2方法与结果
2．1色谱条件：色谱柱：KnauerEurospher一100C18
(300nlm×3．9rflm，4．6um)}流动相；乙腈一甲醇一
醋酸乙酯(45：10：45)；体积流量：1．0mL／min；检
测波长：460mm；进样量：10止；柱温：25C。文献
譬鐾品智：眢紧量复羿划。。。。。。。，。。。。。，
作者筒介，陈龙胜(1980一)．男，安徽省安庆市人，硕士研究生，从事天然产物的提取与衔生研究。Tet：(0551t514 89
E—nlall：lormatHKy州tom·com
万方数据
藁本内酯的稳定性及β-环糊精包合工艺的考察
作者： 李慧， 边宝林， 孟繁蕴， 王一涛， LI Hui， BIAN Bao-lin， MENG Fan-yun， WANG
Yi-tao
作者单位： 李慧,LI Hui(中国中医研究院中药研究所,北京,100700;北京师范大学中药资源与资源药物
研究所,北京,100088)， 边宝林,王一涛,BIAN Bao-lin,WANG Yi-tao(中国中医研究院中药
研究所,北京,100700)， 孟繁蕴,MENG Fan-yun(北京师范大学中药资源与资源药物研究所
,北京,100088)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2005,36(10)
被引用次数： 4次

参考文献(7条)
1.Li G S;Ma C J;Li X Y Studies on the stability of ligustilide and the analysis of its isomerized
products by GC-MS[期刊论文]-中草药 2000(06)
2.Zhou C X;Li X H Studies on the stability of ligustilide with solvent effect[期刊论文]-药学学报
2001(10)
3.Li G S;Ma C J;Liu Z F Extraction of essential oil from Angelica sinensis by supercritical-CO2
fluid in comparison with that by steam distillation[期刊论文]-中草药 2001(07)
4.Zhang J L;Xie F Z;Li N HPLC determination of two main active constituents in plants of genus
Ligusticum[期刊论文]-药物分析杂志 2000(05)
5.Chen W;Wang Q F;Zhang Z X Study on the stability of volatile oil in Fengshikang Capsules[期刊论文]
-药物分析杂志 2001(03)
6.Xu X L;Zhang Z R;He Z X Study on preparation of β-cyclodextrin inclusion complex of volatile oil
in Xiongdan Xiaoyan Capsules[期刊论文]-中国中药杂志 2004(07)
7.Nagarsenker M S;Meshram R N;Ramprakash G Solid dispersion of hydroxypropyl beta-cyclodextrin and
ketorolac:enhancement of in vitro dissolution rates,improvement in antiinflammatory activity and
reduction in ulcerogenicity in rats[外文期刊] 2000(8)

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论文]-中国医院药学杂志2006,26(3)
3. 周长新.李新华 藁本内酯的稳定性与溶剂化效应的关系[期刊论文]-药学学报2001,36(10)
4. 杨彩琴.丁里玉.林玉龙.吴海燕.王超 相溶解度法研究羟丙基-β-环糊精对齐墩果酸的增溶效果[期刊论文]-中
成药2005,27(8)
5. 宋洪涛.郭涛.张跃新.韩薇.王志远.何进.何仲贵.SONG Hong-tao.GUO Tao.ZHANG Yue-xin.HAN Wei.WANG Zhi-
yuan.HE Jin.HE Zhong-gui 2-羟丙基-β-环糊精对大蒜油溶解度及稳定性的影响[期刊论文]-中草药2006,37(2)
6. 李慧.王一涛 藁本内酯稳定性的影响因素及稳定化措施[期刊论文]-江西中医学院学报2003,15(1)
7. 陈国广.张慧颖.李学明.韦萍.CHEN Guo-guang.ZHANG Hui-ying.LI Xue-ming.WEI Ping 2-羟丙基-β-环糊精对
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1.刘洋.胡连栋.唐星 川芎挥发油中藁本内酯在大鼠体内的药动学研究[期刊论文]-中草药 2009(2)
2.常美玲.薛彦朝.粘立军.卢会芬.齐亚放.孙琳琳 β-环糊精包合物质量检测研究进展[期刊论文]-中国中医药现代
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3.李志浩.李鹏.朱雪松.郑芳 藁本内酯脂质体制备工艺的研究[期刊论文]-中草药 2010(4)
4.YANG Jin-ying.CHEN Hu-hu.WU Jiang.GONG Su-xiao.CHEN Chang-qing.ZHANG Tie-jun.WANG Min-jie
Advances in Studies on Pharmacological Functions of Ligustilide and their Mechanisms[期刊论文]-中草
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