全 文 ：参 考 文 献
1　刘诗平 ,陈尚猛 ,朱卫东 .中草药 , 1991, 22( 4): 182
2　中国医科院药物研究所编 .中草药有效成分的研究 . 北京:人民
卫生出版社 , 1972: 330
3　丁维功编 . 中国医学化学进展 .上海:百家出版社 , 1996: 72
4　方　冶 .中草药 , 1999, 30( 7): 526
5　李益新 ,方允中 . 生物化学与生物物理进展 , 1983( 2): 59
6　方允中 ,刘智峰 ,李益新 ,等 . 科学通报 , 1986, 31( 5): 356
( 2000-01-18收稿 )
HPLC-ELSD法在注射用七叶皂苷钠质量控制中的应用
浙江省医药管理局 (杭州 310012)　　李　菁
中国药科大学　　　　　　　　 　　叶文才
摘　要　 HPLC测定七叶皂苷钠 ,并用蒸发光检测器 ( ELSD)检测 ,得到 HPLC-ELSD指纹图谱。对不同注射用七
叶皂苷钠样品的比较研究表明 , HPLC-ELSD指纹图谱准确的显示了样品的质量 ,结果直观 ,可靠。
关键词　高效液相色谱　蒸发光检测　指纹图谱　七叶皂苷钠
Application of HPLC-ELSD on Quality Control of Aescin for Injection
　　 Pha rmaceutical Administ ration of Zhe jiang ( Hang zhou 310012)　 Li Jing
　　China Pharmaceutical Univ er sity　 Ye Wencai
Abstract　　 A finger print of HPLC based on evapo ration light-scat tering detection ( ELSD ) fo r
Aescin has been described. The HPLC-ELSD finger print can intui tiv ely suggest the quali ty info rmation of
Aescin and may be of practical v alue for the quali ty cont rol o f samples of sodium aescina te for injection.
Key words　　 HPLC　 evapo ra tion light-sca t tering detection ( ELSD)　 finger print　 sodium aescinate
　　七叶皂苷钠是从中国药典收载的娑罗子中药中
提取所得的总皂苷 ,主要有效成分为七叶皂苷 A,
B, C和 D(见图 1) ,根据德国 DAC的 定义七叶皂
苷 A, B称为 β-七叶皂苷 ,七叶皂苷 C和 D称为 α-
七叶皂苷。
R1 R2 R3
七叶皂苷钠 A(β ) -巴豆酰基 -COCH3 -4H
七叶皂苷钠 B(β ) -当归酰基 -COCH3 -4H
七叶皂苷钠 C(α) -巴豆酰基 -H -COCH3
七叶皂苷钠 D(α) -当归酰基 -H -COCH3
图 1　七叶皂苷钠结构示意图
目前测定七叶皂苷钠总皂苷的方法主要有三氯化铁
比色法 [1 ]和酸碱滴定法 [2 ] ,用于注射用七叶皂苷钠
的含量测定。研究表明 ,目前上市的注射用产品除主
要含有七叶皂苷钠 A, B, C和 D外 ,还含有少量的
糖元、苷元、脱乙酰基的降解产物和其它杂质。由于
比色法和滴定法专属性差 ,因而测定结果偏高 ,不能
反映产品的真实质量。本文提出了用 HPLC分离、
蒸发光检测器 ( ELSD)检测注射用七叶皂苷钠 ,并
将得到的色谱图定义为七叶皂苷钠 HPLC-ELSD
指纹谱图。指纹图谱简单明了 ,在质量标准中引入指
纹图谱可以提高制剂的质量控制水平。方法可靠 ,实
用。
1　仪器与材料
美国 Tsp的 Specta System P1000泵 ,进样器 ,
Alltech 500型蒸发光检测器 ( ELSD) 和 Anasta r
色谱工作站 ;乙腈: 色谱纯 (天津四友生物医学技术
有限公司 ) ,三氟乙酸为 Acros试剂 ,注射用七叶皂
苷钠样品 1～ 7分别来自武汉爱民 ( 971210)、烟台
绿叶制药有限公司 ( 990528)、德国 M ADAUS
( 806974 )、 武 汉 生 化 ( 990523 )、 南 京 大 学
( 9904204)、长春天诚 ( 990601)、无锡生化 ( 980513)
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Address: Li Jin , Zh ejiang Pharmaceutical Adiminis t ration, Hang zh ou
等。
2　测定方法
2. 1　色谱条件:美国 SU PELCO公司的 DiscoverTM
C-18柱 ( 250 mm× 4. 6 mm, 5μm) ,柱温为室温 ;流
动相:乙腈 -0. 05% 三氟醋酸 ( 36∶ 64) ,流速: 1. 0
m L /min; 漂移管温度: 110℃ ; 载气流速: 3. 0
SLPM。
2. 2　测定方法:将七叶皂苷钠的粉针剂样品溶于甲
醇配成约 2 mg /mL的溶液 ,取 20μL注入色谱仪 ,
测定 ELSD色谱图。
3　结果与讨论
3. 1　七叶皂苷的 HPLC-ELSD指纹图谱: 在本文
制定的色谱条件下 ,测得样品 1的 HPLC-ELSD谱
图见图 2样 1。图中 20 min至 40 min之间的 4个主
峰为七叶皂苷钠 A, B, C和 D, 15 min左右的两个
主峰为七叶皂苷钠 E和 F。 10 min以前的色谱峰为
无机盐、苷元、糖元及其它杂质。直观的显示了样品
中主要有效成分七叶皂苷 A, B, C和 D、降解产物
E, F和其它杂质的含量水平 ,不同样品具有不同形
状的色谱图。研究表明 ,当 β型七叶皂苷钠 A和 B
与 α型七叶皂苷钠 C和 D比例约为 7∶ 3时 ,综合
药效好 ,刺激性小。 而具有这种组成的七叶皂苷钠 ,
其 HPLC-ELSD指纹谱中七叶皂苷 A, B, C和 D的
色谱峰呈台阶式下降 (图 2-样 2)。
综上所述 ,一个质量好的注射用七叶皂苷钠的
HPLC-ELSD指纹谱图首先应该是杂质峰尽可能的
少且小 ,其次应如图 2那样 ,七叶皂苷钠四个主峰
形状呈台阶式下降。
图 2　样品的 HPLC-ELSD图
3. 2　不同样品的指纹图谱:样 1～ 7是不同来源样
品的 HPLC-ELSD谱图。这些样品按比色法均为合
格上市产品。比较各图可知 ,样品 2和样品 3杂质
峰较小 ,其它产品杂质含量均很高 ;表 1列出了归一
化法测得不同样品中主要有效成分七叶皂苷钠 A,
B, C和 D、降解产物及其它杂质的含量。由表中数据
可得到上述相同的结论。
4　结论
七叶皂苷钠的 HPLC-ELSD指纹谱图直观准
确的反应了产品的质量 ,如应用于药品的质量控制 ,
将大大提高药品的质量控制水平 ,方法准确可靠 ,具
有较好的应用前景。
参 考 文 献
表 1　不同厂家生产的粉针剂中七叶皂苷钠
A、 B、 C、和 D的含量
生产厂 批号 A, B, C和
D含量之和
E和 F
含量之和
其它杂质
含量之和
样品 1 971210 41. 4 3. 94 54. 7
样品 2 806974 61. 9 1. 93 36. 2
样品 3 990528 86. 5 1. 77 11. 7
样品 4 990523 22. 6 3. 74 73. 7
样品 5 9904204 45. 4 4. 33 50. 3
样品 6 990601 36. 9 6. 99 56. 1
样品 7 980513 32. 1 17. 47 50. 4
1　鲁 /WYB 02-97,注射七叶皂苷钠
2　德国药典 ( Deutsch es-Arzneimi t tel-Cod ex) , Aescin , A-030, 1997
( 1999-12-15收稿 )
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