全 文 ：R P
一
H P L C 法测定降糖清胶囊中马钱素的含量
南京 中医 药大 学 (2 10 0 2 9) 李吉峰 “ 潘 扬 秦小 荣 张 弦
摘 要 建立 了测 定降糖 清胶囊 中马 钱素含量的 R P一H PI一 法 , 固定相 为 S p er iso br 一 cl : 【4 . 6 m m
( id ) 只 2 5 0 m m ]色谱 柱 , 流动相为 甲醉 一水 (3 o : 70) , 检测波长 为 2 36 n m ; 马钱素的平均加样回 收率
为 9 6 . 5 2% 。 本法快 速 、 专 一 、 重现性 好 , 为降糖清胶囊质控提供 了可靠的检测手段 。
关键词 降搪清胶囊 马钱素 R P 一 H PI 子C
D e t e r m i n a t i o n o f L o g a n i n i n J i a n g t a n g q i n g C a P s u l e b y R P
一 H P L C
I
J门 if e n g , P a n Y a n g , Q in X ia o r o n g , e r a l . ( N a n ji n g U n iv e r s it y o f T r a d it io n a l C h in e s e M e d ie in e a n d M a -
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2 1 0 0 2 9 )
A bs t
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a s e H P I C m e r h o d w a s d e s e r i b e d f o r t h e d e t e r m in a r io n o f lo g a n i n i n J ia n g
-
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n e s e h e r b a l d r u g s i n e l u d i n g 〔 b r n u s o fj i` i , , a l i、 S io b . e t
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K e y w o r d s Ji a n g t a n g q in g C a 一〕 s u le lo g a n i n R P 一H P L C h y p o g ly e e m i e C h i n e s e p r e s e r ip t io n
降糖清胶囊是南京中医药大学徐士清教 U 6 K 进 样 器 , 4 86 可 调 紫 外 检 测 仪 ;
授的经验方 , 原方 由山茱英 、 麦冬 、 僵蚕 、 地骨 S p e r i s o r b一 C I。柱 , 4 . 6 m m ( id ) x 2 5 0 m m ( 中
皮 、 鬼箭羽等 12 味药材组成 ,诸药经煎煮 、 浓 科院大连化学物理研究所 ) ; 江申通用汉化色
缩 、 纯化 、 干燥 、 制粒等制剂过程制成胶囊 。本 谱工作站 fo r W in do w s , 版本号 : 3 . 2 0( 大连
品临床主要用于治疗 l 型糖尿病 。 其主要组 江 申分 离技术公 司 ) ; S ih m ad uz .iI br or A E L
成药物之一 山 茱英 为山 茱英 科植物 C or 。 , : 40 SM 电子 天平 ; S Y Z 一 A 石英亚沸高纯水蒸
口刀奋c i n a l i , S i e d . e t Z u e e . 除去种子 的成熟果 馏器 (江苏信达仪器厂 ) ; H 6 6 0 2 5 超声波清洗
实 , 除含熊 果酸 、 齐墩 果酸等三 菇类成分外 , 机 。
主要含马钱素 (l 。 g a in n ) 、 马 鞭草昔等环烯醚 1 . 2 试剂 与药品 : 甲醇 ( 分析纯 ) ; 水 (重蒸
菇昔类化合物 〔 , 几。 山 茱英中熊 果酸的定量方 馏 , 临用前制备 ) 。
法药典 已有收载 ` 2 , 而马钱 素的定量方 法也 马钱素 ( fo g a in n ) 为本实验室提取分离 ,
有薄层扫描法 〔 3二、 高效液相法 `二 , 我们探索用 经 U V , IR , `H N M R , ’ 3C N M R 及 L D 一 M s 确
灵敏 、 专属的高效液相 色谱法对降糖清胶囊 定结构 。
中的马钱素进行含量测定 。 山茱英购于浙江省临安县药材公 司 ,经
1 仪器和材料 鉴 定 为 山 茱 英 科 植 物 oC rn u , 口刀奋cl’ n al is
1
.
1 仪器 : W a t e r s 高效液相 色谱仪 5 1 0 泵 , S i e b . e t Z u e e . 除去种子的成熟果实 ; 降搪清
师
星
A d d r e s s
:
L I J
一fe n g , N a n J一n g U n : v e r s i t y o f T r a d i t i o n a l C h in e s e M e d i e in e a n d M a t e r i a M e d i e a
,
N a n j i n g
李吉峰 男 , 1 98 8 年毕业 于南 京中医 药大学中药学 院 , 主管中药师 , 现为南京 中医药大学制药厂生产技术 厂长 , 总工 程曾先后有十几篇文 章发表在 各类 专业杂志上 , 现主要从事中药 外用药物 的研 制与开发 , 作为 主要研制者的新 药“ 复方南
止痛青 ” 获国家级新产品证 书 。
△江苏省 中医管理 局资助项 目
.
8 2 0
-
胶囊及其阴性对照品 (按全方去 山茱英配制 )
由本校制药厂试制 。
2 方法和结果
2
.
1 色谱条件的选择 : 对马钱素甲醇溶液进
行紫外扫描 , 发 现其 在 2 36 n m 处有最大 吸
收 ,故选择 2 3 6 n m 为样品的检测波长 。 固定
相 : S p e r i s o r b 一 C , 8柱 ; 流动相 : 甲 醇 一水 ( 3 0 ,
7 0 ) ; 流量 : 0 . 8 m L /m in ; 理论塔板数按马钱
素计算应不低于 3 0 0 0 。 在此条件下 , 马钱素
与其它组分均能达到良好分离 (图 1 ) 。
上 4 口 J 、川 1 吕之 「 ’ 7 , 引 曰
时间 : ( ,。 r、 、
1 1 % 5 ! 了飞〕 2 3 0自
A
一 马钱素 、 B 一降糖清胶囊 、 C 一 阴性对照
马钱素 A 一 r咬一 8 . 5 4 1 m i n ; B 一 t泛一 8 . 8 ( )7 m t : 1 ; C 一不 出峰
图 1 样 品 H P L C 图
2
.
2 马钱素对照品纯度检查 : 精密称取马钱
素标准品 1 0 . 。。 m g , 用甲醇溶解并定容至 10
m L
, 吸取 上述溶液 20 拜L , 注人 H P L C 仪测
定 , 归一化法计算 , 结果表明 : 马钱素对照 品
纯度为 9 6 . 8 9% ( n = 5 ) 。
2
.
3 提取条件选择 : 取供试品约 1 9 , 置具塞
离 心管 内 , 加 3 0 %甲醇 s m L 超 声提 取 巧
m i n
,
3 0 0 0 r /m i n 离 心 5 m i n , 倾 取上 清液 ,
过滤 。 同上操作共 4 次 , 每次滤液定容至 10
m L
,按 上述实 验条件进样 , 测定 ,计算 , 结果
表明 : 经 4 次提取后即可完全提尽 。
2
.
4 线性关系考察 : 精密称取马钱素标准品
1 0
.
0 2 m g
, 用 甲醇溶解 并定容成 10 m L , 作
为贮备液 ; 吸取上液 0 . 25 m I J , 用流动相稀释
并定容成 25 m L , 作为对照品液 。 吸取 6 , 9 ,
1 2
,
1 5
,
1 8 和 2 1 拌L , 注入 H P L C 仪测定 , 以
进 样量 X 印 L ) 为横 座标 , 峰 面积 Y 为纵座
标 , 计算 回归方 程为 Y 一 4 0 2 4 + 5 6 3 8 2X , r ~
0
.
9 9 9 9
,表明马钱素在 6 0 . 1 2 ~ 2 1 0 . 4 2 n g 范
围内线性关系 良好 。
2
.
5 精 密度试验 : 精 密吸取上述 对照品液
10 拜L , 注人 H P L C 仪 , 重复进行 5 次测定 ,
《中草药 》 1 9 9 9 年第 3 0 卷第 1 1 期
计算马钱素峰面积的 R S D 为 1 . 5 8% 。
2
.
6 稳定性 试验 : 精密吸取上述对 照品液
1 0 拌L ,分 别于 o , 1 , 4 , 8 , 1 2 , 2 4 , 3 6 h 时进样
测定 ,计算马钱素峰面积的 R S D 为 3 . 87 % 。
2
.
7 加样 回收率试验 : 取 已知含量供试品 ,
分成 5 份 , 每份 1 9 , 精密称定 ; 加人对照品贮
备液 0 . 8 rn I J (相当于 马钱素 0 . 8 0 1 6 m g ) ,照
“ 样品测定 ” 项下方法分别制备供试品液 , 进
样测 定 , 计 算 马钱素 的平均 加样 回 收 率为
9 6
.
5 2 % ( R S D = 3
.
3 8月 ) 。
2
.
8 样品测定 : 取供试品 1 9 (药材 0 . 5 9 ) ,
精密称定 , 用 3 0% 甲醇 20 m L 分 3 次 (每次
1 5 m in )超声振荡提取 ,滤过 ,弃去滤渣 , 合并
滤液 , 用 3 0 % 甲醇定容至 25 m L (药材溶液
含量太大须稀释 3一 5 倍 ) , 微孔滤膜滤过 ,弃
去初滤液约 3 m L ,取滤液 s m L 作为供试品
液 。 取上液 5 衅J , 注人 H P L C 仪 , 测定 , 计算 ,
即得 。 结果见表 1 。
表 1 供试品中马钱案的含 , 侧定
样品 来源及批号
平均含量
( mg /g )
备注
山茱英 浙江临安 8 . 71 生品 (烘干 )
山茱英 浙江临安 5 . 12 炮制品
降糖清胶囊 本校制药厂 97 09 10 0 . 73 炮制品
降糖清胶囊 本校制药厂 97 09 1 0 . 78 炮制品
降糖清胶囊 本校制药厂 97 09 12 0 . 72 炮制品
2
.
9 重现性试验 : 取供试品 , 分成 5 份 , 每份
1 9
, 精密称定 , 照 “ 样 品测定 ” 项 下方 法分别
制备供试品液 ,进样测定 ,计算 ,样 品 5 次马
钱素含量测定的 R S D 为 1 . 87 % 。
3 结论与讨论
3
.
1 从上述结果可 以看出 , 山茱英及其制剂
中均含有一定的 马钱素 , 生品的马钱素含量
比炮制品的略高 , 提示炮制过程对 马钱素含
量有所影响 ; 而降糖清胶囊处方中山茱英用
炮制品 ,因此 . 有必要加强对原料炮制质量的
控制 。
3
.
2 马钱素等环烯 醚菇昔类化合物是山茱
英 的主要成分 ,其具有增强机体免疫能力等
药理作用 ` 5 · 6〕 ,对糖尿病的治疗是有益 的 , 以
其作为降糖清胶囊的含量测定指标具有一定
·
8 2 1
.
李克明 , 等 . 中国 中药杂志 , 19 91 , 19 : 7 3 8
原田 正 敏 ( 日 ) . 国外医学 · 植物药分册 , 1 9 91 , 6 ( 1 ) : 2 0
赵武述 , 等 . 中草药 , 1 99 0 , 21 : 17
赵武述 , 等 . 中 日友好医 院学报 , 1 9 9 1 , 5 : 17 , 13 9
( 1 9 9 9
一
0 4一 0 9 收稿 )
nJ.皿L户乃浦h意义 。
参 考 文 献
1 黄泰康 . 常用 中药成 分与药理手 册 . 北京 : 中国医药科
技 出版社 , 1 99 4 : 3 68
2 中华人民 共和国药典一部 . 19 9 苏: 21
中药止痛胶囊中芍药昔的 H P L C 含 l 测定
天 津计 划生育研究所 (3 0 0 19 1) 邵长凤 ’ 陈 坚 杨吉田 张 颖
摘 要 用 H P L C 法 , 超声波提取 , 对中药止痛胶囊 中主药 白芍中芍 药昔含量进行测定 。 其平均 回
收率为 1 0 0 . 72 % , 相对标 准偏差为 1 . 2 3 % 。 结果表 明 : 用本法测定该止痛 胶囊中芍药昔含量 ,结果
准确 、 灵敏 、 方法简便 , 且有适用性 。
关健词 H P L C 中药止痛胶囊 芍药昔
D e t e r m i n a t i o n o f P a e o n i f l o r i n i n A n a l g e s i c Z h i t o n g C a P s u l e b y H P L C
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,
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, s e n s i t iv e a n d g a v e s a t is f a e t o r y r e s u lt s
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K e y w o r d s H P I
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o r in a n a lg e s ie Z h i t o n g C a p s u le
白芍 系 P a e o n i a l a c t l’f o r a P a l l . 多年生
草木植物 , 有平肝止痛 、 养血调经之功 , 可用
于头痛眩晕 、 胁痛 、 腹痛 、 四肢挛痛等 ,芍药中
芍药昔显示 了较强的生理活性 。 新研制的中
药止痛胶囊是以 白芍为主要药味及其它中草
药经精制而成 。 芍药昔在止痛胶囊 中含量多
少对药效起着致关重要的作用 。 中药止痛胶
囊中芍药昔含量测定方法 尚未见报道 。 本文
采用 H P L C 法 , 用超 声波萃取 , 对该止痛 胶
囊中芍药昔含量进行测定 .l[ 2〕 , 其平均回收率
为 10 0 . 7 2% ;相对标准偏差为 1 . 23 % 。 表明
本法测定该止痛胶囊 中芍药昔含量 , 结果准
确 、 灵敏 、 方法简便易行 。
l 仪器 、 试药
1
.
1 仪器 : 日本 岛津 L C 一 6 A 高效液相色谱
仪 ; 上海 C S F一 3 A 超声波发生器 。
1
.
2 试药 : 甲醉 、 乙睛色谱纯 , 醋酸分析纯 ,
超纯水 ; 对照品 : 芍药昔购于中国药品生物制
品检定所 ; 中药止痛胶囊样品 : 由天津医药科
学研究所提供 。
2 色谱条件
色 谱 柱 : 岛 津 S h im p a e k C L C 一 O D S 柱
( 1 5 c m X 6 m m )
, 流动相 : 甲醇 一乙睛 一醋酸 -
水 一 ( 1 5 : 7 . 5 : 2 : 7 5 . 5 ) ; 检测 波长 : 2 4 5
n m ; 流速 : 1 . 4 m L /m i n ; 纸速 : 1 m m / m i n 。
实验表明 , 在上述选择的色谱条件下中
药止痛胶囊中 , 其它组分对芍药昔组分峰无
干扰 ,分离好 , 能够满足该止痛胶囊 中芍药昔
A d d r e s s
:
S h a o C h a n g f e n g
,
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-