全 文 ：的 ,而不同的 SDS含量将会使蛋白质在电泳中产生
不同的泳动度。
6. 9　 IFE中两性电解质的加入是为了在电泳支持
物上产生“平滑”的 pH梯度 ,实践证明 ,只有在“平
滑”的 pH梯度的胶柱上 ,才能获得分辨率理想的
IFE谱带。实际应用中 ,为简化操作和节省价格昂贵
的两性电解质用量 ,同时满足“平滑” pH梯度形成
的需要 ,可在 pH= 3. 5～ 10的两性电解质中加入占
载体总量 10% 的 pH= 5～ 7的两性电解质。此外 ,
IFE中将样品液混入凝胶液中的加样方法既可简化
操作 ,加大点样量 ,同时依据 IFE技术特点 ,还可避
免样品在胶柱中单独占据的一段 pH梯度 ,从而扩
大电泳分离范围 ,提高分辨率并缩短电泳时间。另一
方面 ,由图 1可知: 正品蛇与伪品蛇的 IFE谱带尽
管它们的主带数目相同 ,但它们的 IFE弱带正品蛇
多于伪品蛇 ,且正品蛇的几个主带宽度几乎均大于
伪品蛇的宽度 ,说明这些主带的 PI值是不同的。图
3是将胶条按 0. 5米 /段切割而得到的 pH -胶柱长
度的关系曲线。实际应用中欲作更精密的测定 ,胶条
在电泳结束后可作染色、脱色处理 ,同时胶段应切割
得更小并采用袖珍型 pH计测定各胶段浸泡液的
pH值。
参 考 文 献
1　袁晓华 ,等编著 . 植物生理生化实验 . 北京:高等教育出版社 ,
1983: 36, 50
2　陈振江 ,等 .中成药 , 1996, 18( 5): 42
3　徐康森 ,等 .药物分析杂志 , 1982, 2( 4): 193
4　陈振江 ,等 .中成药 , 1998, 20( 12): 31
( 1999-07-16收稿 )
榧子蛋白高效毛细管电泳法鉴别
第一军医大学南方医院 (广州 510515)　　陈振德 　陈志良　侯连兵　许重远　郑汉臣* *
摘　要　对国产榧属植物种子进行蛋白电泳鉴别。采用高效毛细管电泳法对榧属植物种子蛋白进行分析。榧属植
物种子蛋白高效毛细管电泳谱图有明显的种间差异。 高效毛细管电泳可作为中药榧子的鉴别方法。
关键词　榧子　高效毛细管电泳　生药鉴别
Identification of Proteins from the Kernel of Torreya (Torreya Arn. ) Nut by HPCE
　　 Nanfang Hospita l, the First M ilitar y Medical Univ er sity ( Guang zhou 510515)　 Ch en Zh ende, Chen Zhiliang , Hou
Lianbing , Xu Ch ongyuan and Zheng Hanch en
Abstract　　 To identify the proteins obtained from dif ferent species of Torreya Arn. nuts by HPCE,
in o rder to distinguish thei r v arious origins. Results show ed that the electrophorog rams did show some
di fferences w hich could be used fo r the pha rmacogno stic identi fica tion o f Torreya Arn.
Key words　　 Torreya Arn. nut　 HPCE　 pha rmacogno stic identi fica tion
　　红豆杉科榧属植物 Torreya Arn. 全世界有 8
种和 8个栽培品种 ,我国有 5种 , 8个栽培品种及 1
个引进栽培种 [1, 2 ]。 该属植物种子均富含优质脂肪
油 ,可供食用或工业用 [1～ 3 ]。其中 ,榧子始载于《神农
本草经》 ,历版《中国药典》均收载 ,具有杀虫、消积、
润肠、通便之功效。经笔者调查发现 ,云南榧子、巴山
榧子等在产地也作为榧子应用 ,而《中国药典》对榧
子只有性状描述 ,没有较理想的鉴定方法。我们拟以
中药材细胞中普遍存在的、受遗传基因控制的蛋白
分子为指标 ,用高效毛细管电泳 ( HPCE)法来探索
鉴别中药榧子的可行性。
1　材料与方法
1. 1　材料: 榧子 Torreya grandis , 香榧子 T .
grandis cv . merrill ii于 1996年 9月 27日采自浙江
诸暨 ,采集人陈振德 ;九龙山榧子 T . jiulongshanensis于 1997年 9月 28日采自浙江遂昌 ,采集人傅秋华 ;
长叶榧子 T . jackii于 1997年 9月 24日采自浙江仙
·377·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2000年第 31卷第 5期
Address: Ch en Zhende, Nanfang Hospi tal of the Fi rs t M ili t ary Medical Universi ty, Guangzhou陈振德　男 ,博士、副教授、副主任药师、硕士生导师。 1984年大学毕业 , 1998年博士毕业。曾从事叶绿素主要降解产物紫红素 18、二氢卟吩 P6及其衍生物的制备与肿瘤光生物活性和保肝作用的研究 ,此成果正在申请两项发明专利。攻读博士学位期间主要从事中国榧属植物资源、化学和药理的研究。发表论文 20余篇 ,参编 2部专著 ,已申请发明专利 1项 ,《大蒜除臭新工艺》获军队科技进步二等奖。《中国榧属植物资源、化学成分和药理活性的研究》获 2000年度国家自然科学基金资助 ,批准号: 39970893。《中药复方防治术后腹膜粘连的新药研究》获 2000年度国家新药研究基金资助 ,批准号: 96-901-05-245。 现主要从事中药材鉴定、资源及天然药物化学等方面的研究工作。
* * 第二军医大学药学院
居 ,采集人朱志明 ;巴山榧子 T . fargesii于 1997年
9月 25日采自湖北神农架 ,采集人石世贵 ;云南榧
子 T . yunnanensis于 1996年 9月 28日采自云南洱
源 ,采集人寸润林 ;日本榧子 T . nuci fera于 1997年
9月 26日采自上海 ,采集人陈振德 ;并经作者鉴定 ,
标本存放于第二军医大学药学院生药学教研室。
1. 2　 仪 器 与 试 剂 　 美 国 BIO-RAD 公 司
BioFocus
TM
3000型 Capilla ry Ion Analy zer,配有紫
外扫描检测器。熔融石英毛细管 75μm× 60 cm (河
北永年光纤厂 )。 所用试剂均为分析纯。
1. 3　电泳条件:电解缓冲液为 150 mmol /L硼酸盐
溶液 ( pH 8. 5) ;电压为 20 kV;温度 20℃ ;紫外检测
波长 200 nm;重力进样 ,时间 5 s。 开机后先用 0. 1
mol /L氢氧化钠冲洗毛细管 2 min,再用去离子水
冲洗 5 min,然后用缓冲液冲洗至基线平稳后开始
进样。 每两次进样之间设定缓冲液冲洗 2 min。
1. 4　样品溶液的配制: 取生药样品 0. 5 g ,加入蛋
白提取液 5 mL,在冰浴中研磨成匀浆状 ,转移至离
心管内 ,以 5 000 r /min离心 20 min,取上清液备
用。 Tris-甘氨酸蛋白提取液: T ris 0. 6 g,甘氨酸
2. 88 g ,加蒸馏水溶解至 1 000 mL。 碱性蛋白提取
液: T ris-HCl 0. 1 mol /L, 0. 1% 抗坏血酸 ,巯基乙醇
10 mmol /L, pH 8. 0。 酸性蛋白提取液: 柠檬酸 80
mmol /L , Na2HPO4 32 mmol /L,抗坏血酸 5 mmo l /
L,巯基乙醇 10 mmo l /L, pH 2. 8。
2　结果
2. 1　在酸性提取液中 , 7种榧子在 4. 0～ 10. 0 min
区间都有相似的两个吸收峰;在 18. 0～ 20. 0 min区
间九龙山榧子、长叶榧子、日本榧子、巴山榧子和云南
榧子都有 1个吸收峰 ,而榧子和香榧子无此吸收峰。
2. 2　在中性提取液中 , 7种榧子在 4. 0～ 15. 0 min
区间都有较相似的两个吸收峰 ;在 15. 0～ 20. 0 min
区间九龙山榧子、长叶榧子、日本榧子、巴山榧子和云
南榧子都有 1个吸收峰 ,而榧子和香榧子无此吸收峰。
2. 3　在碱中性提取液中 , 九龙山榧子主要在 7. 61～
8. 54 min处有两个吸收峰 ,榧子与香榧子在 18. 00
min前有相似的吸收峰 ,但榧子在 18. 66 min处有
一吸收峰 ,而香榧子在 23. 65 min处有一吸收峰 ;长
叶榧子、日本榧子、巴山榧子和云南榧子在 14. 00
min前有相似的吸收峰 ,但长叶榧子在 20. 07 min
有一吸收峰 ,日本榧子在 16. 35 min和 20. 47 min
处各有一个吸收峰 ,巴山榧子在 14. 40 min 和
18. 55 min处各有一个吸收峰 ,而云南榧子只在
19. 04 min处有一吸收峰。
综合 3种提取液所检测的图谱 , 7种榧子有一些
相似的特征峰 ,又有各自之间的差别 ,容易加以区别 ,
详见表 1和图 1,特别是中药榧子与同属其它种子有较
大差异。 可见 , HPCE可作为中药榧子的鉴别方法。
　　 A-榧子　 B-香榧子　 C-九龙山榧子　 D-长叶榧子
E-日本榧子　 F-巴山榧子　 G-云南榧子
　　 1-酸性提取物　 2-中性提取物　 3-碱性提取物
图 1　榧属植物种子蛋白 HPCE图谱
表 1　榧属植物种子蛋白电泳图谱中各峰的迁移时间 (min)
　名　称 　酸性提取液 　　中性提取液 　　　　　碱性提取液
榧子 5. 28, 7. 38, 19. 37 5. 12, 5. 68, 6. 86, 7. 50～ 14. 00 5. 35, 5. 96, 7. 43, 8. 25, 8. 60, 8. 70～ 18. 00, 18. 66
香榧子 5. 10, 5. 60, 7. 00 5. 04, 5. 58, 6. 71, 7. 10～ 15. 00 5. 10, 5. 58, 6. 83, 7. 81～ 18. 00, 23. 65
九龙山榧子 7. 13, 7. 33, 19. 55, 22. 24 5. 50, 7. 23, 7. 62, 7. 97, 20. 05 7. 61, 8. 54, 23. 17
长叶榧子 5. 27, 7. 46, 19. 73 5. 28, 6. 29, 7. 10～ 14. 80, 19. 70 5. 36, 6. 51, 7. 05, 7. 39, 7. 45～ 18. 00, 20. 07
日本榧子 5. 38, 7. 24, 7. 33, 19. 71 5. 25, 6. 14, 7. 00, 7. 10～ 13. 80, 18. 20 5. 80, 6. 57, 7. 10, 7. 20～ 14. 00, 16. 35, 20. 47
巴山榧子 5. 24, 7. 12, 18. 70 5. 32, 6. 20, 7. 08, 7. 00～ 15. 00, 18. 25 5. 34, 6. 34, 6. 84, 7. 60～ 14. 00, 14. 40, 18. 55
云南榧子 5. 35, 7. 23, 18. 77 4. 79, 5. 47, 6. 42, 7. 00～ 13. 80, 19. 87 5. 14, 6. 45, 6. 9, 7. 50～ 14. 00, 19. 04
·378· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2000年第 31卷第 5期
3　讨论
3. 1　 HPCE是近年来迅速发展起来的一种重要分
离技术 ,已在多肽、蛋白质、核酸、手性化合物等生物
活性物质的分离分析方面显示了极为广阔的前
景 [4 ]。 1997年胡平等报道提取菟丝子种子植物蛋白
用 HPCE法进行生药鉴定 ,结果表明不同种间成分
和含量上存在明显差异 ,认为根据种子植物蛋白的
电泳图谱 ,可有效地鉴别菟丝子的来源 [ 5]。 1998年
张朝晖等报道对 12种海马、海龙类药材采用 HPCE
进行鉴别 ,结果表明种间区别较明显 ,认为该法速度
快 ,分辨力强、重现性好 [6 ]。
3. 2　榧子与同属其它种子的 HPCE图谱有明显的
差异 ,可有效地加以区别。因此 , HPCE可作为中药
榧子的鉴别方法之一。
参 考 文 献
1　中科院中国植物志编辑委员会 .中国植物志 (第七卷 ) . 北京:科
学出版社 , 1978: 456
2　陈振德 ,等 .国外医药· 植物药分册 , 1996, 11( 4): 150
3　云南省植物研究所 . 云南经济植物 . 昆明:云南人民出版社 ,
1974: 77
4　胡　平 ,等 .药学学报 , 1997, 32( 7): 549
5　李红旗 ,等 .生物工程进展 , 1995, 15( 6): 40
6　张朝晖 ,等 .中国中药杂志 , 1998, 23( 5): 259
( 1999-05-19收稿
1999-10-15修回 )
盐碱地麻黄种植试验研究初报△
甘肃省治沙研究所 (武威 733000)　　杨自辉 　王继和　胡明贵　刘虎俊　边克俭
摘　要　在盐碱地上进行麻黄种植试验 , 0～ 30 cm土壤全盐量 1. 2%时 ,麻黄生长良好 ,全盐量 1. 6%以上时生长
受抑制。 中度盐碱地种植麻黄是可行的。
关键词　盐碱地　麻黄　种植
Experiments on the Cultivation of Chinese Ephedra (Ephedra sinica ) on
Saline-Alkaline Soil
　　 Institute fo r th e Desert Contro l in Gansu Prov ince (Wuwei 733000)　 Yang Zih ui, Wang Jihe, Hu M inggui, Liu Hujun
and Bian Kejian
Abstract　　 Experimenta l cul tiv ation of Ephedra sinica Stapf on saline-alkaline soil was at tempted to
reliev e the ever decreasing supply of this natural herbal drug. The g round was turned over and w ashed fo r
several y ears until the salt content decreased from 2% to≤ 1. 2% . Furrow s wi th a depth of 1～ 2 cm were
ploughed and diammonium hydrogen phosphate fertili zer applied. It w as covered wi th a layer of 0. 5～ 1 cm
sand af ter sow ing w ith repeated w atering. Resul ts show ed that E. sinica can g row bet ter on a soi l layer of
0-30 cm with≤ 1. 2% salt content , but less satisfacto ry when the sal t content ex ceed 1. 6% . It could be
concluded tha t E . sinica may be cul tiv ated successfully on saline-alkaline soil wi th medium sal t content.
Key words　　 saline-alkaline soil　Ephedra sinica Stapf　 cultiva tion
　　麻黄 Ephedra sinica是经济价值很高的药用植
物 ,在广大的干旱沙区均有栽培 ,盐渍化沙地种植麻
黄还未见有报道。 麻黄在盐碱地的栽培与麻黄的抗
干旱、耐瘠薄的特性有其共同的地方 ,因此 ,我们在
临泽小泉子盐碱地进行了麻黄栽培试验研究。
1　试验区现状
试验区位于河西走廊中部临泽小泉子盐渍化沙
地 ,属冲积洪积扇缘的潜水溢出带 ,土壤为灰棕漠
土 ,盐化普遍 ,土壤全盐量 0～ 120 cm的深度为
30%～ 0. 1% ,主要盐分组成类型为 SO2-4 、 Cl- 、
Ca2+ 、Na1+ [1 ]。地下水位 1～ 2 m ,常处在地下水临界
深度线上 ,故土壤盐分年动态变化规律是: 4月中旬
盐分上升 , 5月有一个小的回落 ,夏季盐分下沉 ,在 8
月达到最小 ,全年盐分 10月达到最大。
该区主要的植物有盐爪爪 Kalidium foliarum、
猪 毛 菜 Salsola ikonnikov ii、 芦 苇 Phragmites
communis、赖草 Leymus secalinus等 ,属盐生植物和
草甸植物类型。
试验区经过多年的淡水洗盐、排盐和翻晒改良 ,
土壤含盐量有所下降 ,从 1994年的 2%下降到 1997
·379·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2000年第 31卷第 5期
Address: Yang Zih ui , Gansu Ins ti tute of Desert Con t rol ,Wuw ei△“九· 五”国家重点科技攻关项目 ( 96-017-01-03)的部分内容