全 文 ：· 药剂与工艺 ·
克伤痛搽剂质量标准研究
浙江 省医学科学院 (杭 州 3 1 0 01 3) 毛丽珍 来 唐红芳 徐世芳
摘 要 对克伤痛搽剂中的三七 、河 蚌肉进行薄层色谱鉴 别 。 采用大孔树脂 吸附一 比色 法对本品中
三七的有效成分三七总皂昔进行定量测定 , 方法简便 , 结果准确 , 可作为该制剂 的质量控制方法 。
关键词 克伤痛搽剂 三七总皂昔 大孔树脂吸附 一比色法
克伤痛搽剂是 由三七 、 河蚌 肉等 中药组
成 。 根据浙江湖州地区流传的以鲜河蚌肉汁
水和三七末外涂止痛 的民间验方 ,经用现代
生产方法制成的搽剂 ,具有清热消肿 ,化痕止
痛之功效 , 用于关节 、 软组织扭挫伤及跌打损
伤引起的红肿疼痛 。 为了控制产品质量 , 对三
七和河蚌 肉进行了薄层鉴别研究 , 对三七进
行含量测定 。
1 仪器与试药
U V
一
2 1O A 紫外 一可见分光光度计 咬日本
岛津 ) , P B Q 一 1 型薄 层 自动铺板 器 。 硅胶 G
(青 岛海洋化工厂 ) ,所用试剂均为分析纯 。 人
参皂昔 R g l 、 R b l 和三七皂昔 R : ( 中国药 品生
物制 品检定所 ) , 氨基 葡萄糖 (上海东风生物
技术有限公司 ) 。样品由浙江湖州龙海生化有
限公司提供 。
2 样品供试液的制备
2
.
1 精密量取本品 1 0 m L , 于水浴上浓缩至
近干 , 加水溶解并移人 10 m L 量瓶 中 , 用水
稀释至刻度 , 摇匀 。 精密量取 Z m L ,加人已处
理好 的 D 10 1大孔 吸 附树 脂柱 上 , 先用 水 15
m L 洗 涤 , 弃洗 液 , 再 以 70 % 乙 醇 25 m I J 洗
脱 , 收集洗脱 液 , 于水浴上挥干 , 残渣用 甲醇
溶解 , 转人 Z m L 量瓶 中 , 用 甲醇稀 释至 刻
度 , 摇 匀 , 作 为供试液 ( I ) 。 另取人 参皂昔
R g
l 、
R b
, 及 三 七 皂 昔 R l , 加 甲醇 制 成每 1
m L 各含 l m g 的混 合溶 液 , 作为对 照 品液
( l )
。 另取缺三七的阴性对照液 10 m L ,按供
试液 ( I )方法制成阴性对照液 ( 皿 ) 。
2
.
2 取本品 2 m L , 加硫酸溶液 ( 1 m o l / L ) 8
m L
,于水浴 中加热 l h , 放冷 , 用氢 氧化钡调
节 p H 值到 7 , 离心 , 取上清液于水浴上浓缩
至适量 , 滤过 , 滤液置 Z m L 量瓶 中 , 加水 至
刻度 ,摇匀 ,作为供试液 ( VI ) 。 另取氨基葡萄
糖对照 品 , 加水制成 每 l m L 含 Z m g 的溶
液 , 作为对照品溶液 ( V ) 。 另取缺河蚌肉的阴
性对照液 Z m I J ,按供试液 ( W )方法制成阴性
对照液 ( u ) 。
3 薄层定性鉴别
3
.
1 三七的鉴别 : 分别吸取供试液 ( I ) 、 阴
性 对 照液 ( l ) 各 10 川 , , 混合 对 照 品溶 液
( n ) 5 拜L ,分别点于同一硅胶 G 薄层板上 ,
以正丁醇 一醋酸 乙醋 一水 (4 : 1 : 5) 的上层液
为展开剂 , 上行 展开 , 取 出 , 晾干 , 喷 10 %硫
酸 乙醇溶液 , 于 I O S C烘数分钟 。 供试品色谱
中 , 在与对照品色谱相应的位置上 , 显相 同颜
色斑点 , 阴性对照无干扰 , 结果见图 1一 A 。
3
.
2 河蚌 肉的鉴别 : 分别 吸取供试液 ( W ) 、
阴性对照液 ( VI ) 各 4 拼L , 氨基葡萄糖对照品
溶液 ( V )2 川一 ,分别点于同一硅胶 G 薄层板
上 , 以正丁醇 一醋酸乙醋 一异丙醇 一醋酸一水 (7 :
15
:
12
: 6 : 5) 为展开剂 , 上行展开 , 取 出晾
干 ,喷 苯胺 一邻苯二 甲酸试 液显色 。供试品色
谱 中 , 在 与对 照品色 谱相 应位 置上 , 显相同
颜 色的斑 点 , 阴性 对照无干扰 , 结果 见图 1 -
B
。
,
A d d r e s s
:
M a o L i z h e n
,
Z h e ji a n g A e a d e m y o f M e d i e a l S e i e n e e s
,
H a n g z h o u
·
6 6 2
-
0 0
液 0. 2 mL , 高氯酸 0 . 8 m L , 于 60 ℃水浴 中
保温 15 m in ,取 出立即置冰水浴冷却 s m in ,
加冰醋 酸 s m L , 摇匀 , 放 置 I O m i n , 在 5 4 5
n m 波长处立即测定吸收度 。 经计算 , 回归方
程 C = 3 3 . 4 6 A + 0 . 3 3 7 , r = 0 . 9 9 9 9 , 人参皂
营 R g l 在 1 . 8 8 拼g /m L ~ 18 . 8 5 拌g /m L 范围
内线性 良好 。
4
.
5 样品测定法拟定 : 按上述 2 . 1 中供试液
( I )方法进行样 品前处理 。 精密量取该溶液
4 0 拜L 置 1 0 m L 具塞试管 中 , 于水浴 上挥去
溶剂 , 自“ 加人新配制 5%香草醛冰醋酸溶液
0
.
2 m I
J 起 , 照标准 曲线制备项下操作 , 以 回
归方程计算含量 。
4
.
6 重现性试 验 : 取 同一批 号 ( 9 5 0 2 0 8 ) 样
品 ,一式 6 份 , 依法测定 ,测得三七总皂昔 (以
人参皂 昔 R g , 计 ) 的均值 为 .1 31 3 m g /m L ,
R S D 为 1 . 2 4% 。
4
.
7 回收率试验 : 精密量取已知含量的样品
( 9 5 0 2 0 8 ) 1 m L
, 置蒸发皿 中 , 精 密加 人浓度
为 .1 1 31 m g /m L 的人参皂昔 R g l 对照品溶
液 l m L , 水浴 蒸干 , 残渣 用 Z m L 水溶解并
移人 已处理好 的 D 1 0 1大孔 吸附树脂柱上 , 依
法测定 , 一式 5 份 , 结 果 了 一 9 7 . 9 1% , R S D
= 0
.
9 4 % ( n 一 5 ) 。
4
.
8 样品测定 : 取 6 批样 品 , 依法测定 , 结果
见表 1 。
表 1 样品测定结果
0OO口
。O。。
.
O
000
·
2
Q
·
z
A
一三七
1
一
R g 一 R 一 R b z
2一样品
3一阴性对照
B
一河蚌 肉
1一氨基 葡萄糖
2一样品
3一阴性 对照
O曰月了tQ“89自几j勺乙0山51tl…01工1.1?ú
图 1 T L C 鉴别
4 含量测定
4
.
1 洗脱剂用量的选择 : 供试 品上柱 , 先用
15 m L 水洗去糖类和无机盐杂质 , 继以 70 %
乙醇洗脱三七总皂昔 。 每份 Z m l 一 ,逐段收集 ,
按法测定每份洗脱液的吸收度 。结果表明 ,洗
脱至第 12 份可将柱上吸附的三七总 皂昔几
乎 全部洗 脱下来 , 因此 洗脱 液用 量选 用 25
m I
J 。
4
.
2 最大吸收波长的选择 : 将 供试品溶液 、
人参 皂昔 R b : 对 照 品溶液 和缺三七 的阴性
对 照液 , 在 7 0 0 n m 一 4 2 0 n m 波长 范围内扫
描 ,从 3 种溶液的吸收图谱可见 ,前两种溶液
的最大 吸收波长在 ( 5 4 5士 1) n m , 而 阴性对
照液在此波长处无吸收 ,故本 法测定波长选
择 ( 5 4 5士 1 ) n tn 。
4
.
3 稳定性 试验 : 供试 品溶 液按法立 即测
定 , 然后每隔 s m in 重复测定其吸收度 , 结果
提示 ,显色 10 m in 后 开始稳定 , 这以后 的 15
m in 内吸收度无 明显变化 ( R S D ~ 0 . 59 % ) ,
一般 比色法操作在 15 m in 内可完成 , 因此在
测定法上规定为 “ 加冰醋酸 s m l 才 ,摇匀 , 放置
1 0 m i n
,立即测定吸收度 ” 。
4
.
4 标准 曲线 的制备 : 精密 吸取 人参皂昔
R g
l 对照 品适量 , 加 甲醇制 成每 1 m L 含 1
m g 的溶液 。 精密吸取 1 0 、 2 0 、 3 0 、 4 0 、 6 0 、 8 0 、
1 0 0 拼L 分置 10 m L 具塞试管中 ,于水浴 中挥
去溶剂 , 加人新配制的 5 %香 草醛冰醋酸溶
《中草药 》 1 9 9 8 年第 29 卷第 1。 期
批 号
9 5 0 2 0 6
9 5 0 2 0 7
9 5 0 2 0 8
9 7 0 1 0 2
9 7 0 10 6
9 7 0 10 9
含量 ( m g / m L ) R S D ( % )
1
.
3 15
1
.
3 9 2
1
.
3 1 3
1
.
5 8 3
1
.
5 9 0
1
.
6 0 3
5 讨论
5
.
1 河蚌 肉的蛋白质含量和多糖成分的测
定均受到三七所含氨基酸和多糖的干扰而失
去质控意义 , 因此选择三七总皂昔为本品的
质控指标 。 据《本草纲 目 》记载 , 三七能 “ 止血 ,
散 血 , 定痛 , 金刃 箭 伤 , 跌 打杖 创 , 血 出不止
者 ,嚼烂涂或为末渗之 ” 。现代药理研究证明 ,
.
6 6 3
.
三七总皂昔对 中枢神经 系统有 明显抑制作
用 〔门 和镇 痛作 用 〔 2〕 ,说 明三七总皂昔是本 品
的有效成分之一 , 是针对性进行含量测定的
依据 。
5
.
2 三七总皂昔的组分 , 据杨崇仁报道 〔 3〕从
根中分离鉴定了 12 种单体皂昔 ,对三七各单
体皂昔测得值表 明 , 三七根和根茎的皂昔均
以人 参 皂昔 R g l 和 R b , 为 主 , 尤 以 R b l 最
多 。 刘珍等报道 以 〕 , 人参皂昔 R g , 显色后的吸
收图谱与三七总皂昔基本一致 。 本文的实验
结果也 证 明了这一点 , 鉴此 , 选定人参 皂昔
R g
, 作为三七总皂昔测定 的对照品 。
5
.
3 三七总皂昔含量测定方法有 : 大孔树脂
吸附 一 比色法 〔 5〕 , 薄层扫描法 , 高效液相色谱
法 , 超临界流体色谱法等 。 比较这些方法 , 本
文选择 了设备简易 ,方法可靠 ,易于掌握应用
的大孔树脂吸附 一比色法 。
5
.
4 实验结果表明 , 本法的回收率高 ,重现
性好 , 结果稳定 , 设备简易 , 适用于该产品的
质量控制 。
参 考 文 献
l 赵雅玲 . 中国药理 通讯 , 19 8 6 ; 3 ( 2) : 13
2 雷伟亚 ,等 , 中成药研究 , 1 9 8 2 ; ( 2 ) : 3 7
3 杨崇 仁 ,等 . 药学通 报 , 1 9 8 5 ; 2 0 ( 6 ) : 3 3 7
4 刘 价 , 等 . 中医药 学报 , 1 9 9 2 ; ( 6 ) : 5 0
5 章观德 , 等 . 中草药 , 1 9 8 1 ; 1 2 ( 1 1 ) : 2 3
( 1 9 9 8
一
0 2
一
1 1 收稿 )
S t u d i e s o n t h e Q u a l i t y S t a n d a r d o f K e s h a n g t o n g L i n im e n t
M
a o L i
z h e n
,
T a n g H
o n g f a n g a n d X u S h if a n g ( Z h e ji
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e d i e a l S e ie n e e s
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3 1 0 0 1 3 )
A b s t r a e t K
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a n g t o n g li n im e n t ( K T L ) 15 a t r a d i t io n a l f o l k r e e ip e e o n t a i xi i n g P a n a x p s e u d o
一
g i n s e n g
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. 儿 o t o g i n s e n g ( B u r k ) H o o e t T s e n g S a n e h i a n d f r e s h w a t e r m u s s e l a s it s m a i n i n g r e d ie n t
.
I t a e t s b y e le a r
-
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a y h e a t a n d r e m o v i n g b lo o d s t a s is t o q u e n e h in f l a m m a t i o n a n d a l le v i a t e p a i n
.
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e p r e s e n e e o f i t
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e n t if i e d b y T L C a n d t h e t o t a l n o t o g i n s e n g s a p o n in d e t e r m i n e d b y m a e r o p o r o u s r e s i n
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·
M
e a n r e e o v e r y o f t h
e a s s a y w
a s 9 7
·
9 1 % ( R S D 一 o · 9 4 % ) · T h e n i e t h o d s w e r e s im p le w it h s t r o n g
s p e e i f ie i t y a n d g o o d r e p r o d u e i b i li t y
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o r m u la t i o n o f a q u a l i t y s t a n d a r d o f K T L
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K e y w o
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n im e n t t o t a l s a p o n i n s o f P
.
P
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9 1, , s e n g v a r
.
n o t o g i n s e n g ( B u r k
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) H o o
e t T s e n g S a n e h i m a e r o P o r o u s r e s in e o l o r im e t r y
赤芍总普的生产工艺条件研究
中国药 品生物制 品检定所 (北京 1 0 0 0 5 0)
国家 中药 品种保护 审评 委员 会
马双成 带
邓少伟
摘 要 赤芍 以 70 % 乙 醇 回流提取 , 减压 浓缩 , 过 大孔 吸 附树脂 柱 , 先用 水洗 , 再 用 20 % 乙 醇洗
脱 , 收集醇洗脱液 , 减压浓缩 得赤芍总昔 , 收率 为 5 . 0 % ,其中芍药昔 的含 量 占本品的 75 % 以上 。
关键词 赤芍总昔 提取 分离 大孔树脂 芍药 昔
赤芍 为毛莫科植 物芍 药 P a e o n i a l a c t i- fl o ar P a l l . 或川赤芍 P . v e i t c h i i L y n e h 的干
A d d r e s s
:
M a S h u a n g e h e n g
,
N a t i o n a l In s t i t u t e f o
r t h e C o n t
r o l o f P h a r m a e e u t i e a l a n d B i o l o g i e a l P r o d u e t s
,
B i e ji n g
·
马双成 男 , 31 岁 , 1 9 9 2 年 7 月于 中国药品生物制 品检定所 研究 生毕业 , 获医学硕士学位 。 现在中国药品生物制品检定所中药室工作 ,助理 研究员 。 主要从事 中成药 出 口检验 , 中草药 有效成 分的提取 、 分离 、 结构鉴定 , 新药质量标准研究 , 新药制
备工艺研究 ,药效学 研究 以 及其它一些技术性工作 。 参加 了 “ 八 · 五 ” 、 “ 九 · 五 ” 攻关课题 和国家科委课题的研 究工作 , 其 中
,’j 、 · 五 ” 攻关课题 获国家科 技进步三等奖 。 近年在国 内知名刊物上发表学术论 文近 30 篇 , 并参加 了 1 9 9 5 版 中国药典英文版的编译工作 ,任 《中药 现代 研究与临床作用 》一书编委 。
.
6 6 4
-