全 文 ：类 PAF和白三烯类拮抗剂。
另外 ,在紫苏子中还发现了另一类具有抑制白三烯和组
胺的多元酚类抗过敏物质 (另文报道 ) ,即白三烯类拮抗剂和
抗组胺剂。 这两大类成分复盖了三大介质 ,即白三烯、 PAF
及组胺。
过敏介质拮抗剂类药被认为在 5大类抗过敏药中是最
有开发价值的。 故此 ,我们确定对紫苏子中脂肪酸类和多元
酚类进行新药开发立项研究 ,现已取得了阶段性成果 ,希望
能预期研制开发出对Ⅰ 型和Ⅳ型变态反应均有效而无毒的
新型抗过敏药 ,用于治疗花粉症、特异性皮炎、过敏性湿疹、
鼻炎、支气管哮喘、休克、荨麻疹、枯草热及抗药物过敏。
参考文献:
[1 ]　王永奇 ,吕　琳 ,杨　明 ,等 . n-3系列脂肪酸的研究进展 [ J] .
特种经济动植物 (国外 ) , 1993, ( 2): 28-31.
[2 ]　王永奇 ,赵宇峰 ,李曼杰 ,等 .食用油与慢性疾病 [ J] . 长白山
中医药研究与开发 , 1993, 2( 2): 56-59.
[3 ]　王永奇 ,赵宇峰 ,李曼杰 ,等 .食用油与脑及视力 [ J] . 长白山
中医药研究与开发 , 1994, 3( 4): 48-51.
[4 ]　王永奇 ,王　威 ,刘继华 ,等 .浅谈新的脂肪营养理论 [ J ] . 中
草药 , 1996, (增刊 ) : 29-31.
[5 ]　王永奇 ,赵宇峰 ,李曼杰 ,等 .具有强智健视作用的紫苏油的研
究 [M ]. 桂林:中国老年保健医学研究会会编 , 1993.
[6 ]　王永奇 ,王　威 ,刘继华 ,等 .ω-3系列脂肪酸植物资源的筛选、
研究及开发利用 [M ]. 承德:中药新药研究与开发信息交流会
会编 , 1996.
[ 7 ]　王永奇 ,王　威 ,刘继华 ,等 . 紫苏油的研究 [M ] .海南:中国
老年保健医学研究会会编 , 1996.
[8 ]　王永奇 ,王　威 ,刘继华 ,等 . 国际源于动植物三系列脂肪酸前
沿研究领域新动态 [ J] .中草药 , 1999, (增刊 ): 30-33.
[9 ]　王永奇 .富α-亚麻酸油资源筛选、基础及临床研究 [M ]. 名古
屋:日中学术交流会特别演讲 , 1998.
[10 ]　中国药典 [ S] . 1990年版 .一部 .
[11 ]　王永奇 ,赵宇峰 ,李曼杰 ,等 . 紫苏子的化学成分 [ J ] . 中草
药 , 1995, 26( 5): 236-238.
[12 ]　王永奇 ,李曼杰 ,冷　玲 ,等 .α-亚麻酸含量与品种及生态环
境关系的研究 [ J] .长白山中医药研究与开发 , 1994, 3( 4): 9-
10.
[ 13 ]　 Sak ai K, Ueno K, Ogaw a Y, et al . Fat ty acid composit ion of
plasma lipids in youg atopic patien ts [ J ]. Chem Ph arm Bul l,
1986, 34: 2914-2949.
[ 14 ]　 Ho rii T, Satouchi K, Kobayashi Y, et al . Ef fect of dietaryα-
linolenat on platelet-activ ating factor production in rat
peritoneal polym orph onuclear leukocytes [ J ] . J Immunol,
1991, 147: 1607-1613.
[ 15 ]　 Vanabe M E, Ols on S C, Nieto M L, et al . Znzymatic
s tudies of lys o platelet-activating factor acylat ion in h uman
neut rophi ls and changes upon st imulation [ J ]. J Biol Chem,
1993, 268: 7965-7975.
[ 16 ] 　 Sugiura T, Fukuda T, M asuzawa Y, et al . Ether
lys oph ospholipid-induced production of platelet-activating
in h uman polymorphonuclear leukocy tes [ J ] . Biochem
Bioph ys Acta, 1990, 1047: 223-232.
银杏制剂中烷基酚酸类成分研究进展
陆　瑾
⒇
,许　忻 ,宗志敏 ,魏贤勇
(中国矿业大学化工学院 ,江苏 徐州　 221008)
摘　要: 系统介绍了银杏制剂中烷基酚酸类成分在化学结构、提取分离方法、检测方法和药理作用等方面的研究进
展 ,为建立该类物质在制剂中的限量标准以及在抗菌消炎等方面的临床应用提供了科学的依据。
关键词: 银杏 ;烷基酚酸 ;毒理学 ;药理学
中图分类号: R284; R285　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2001) 01 0085 03
Progress in studies on alkylphenolic acids inGinkgo biloba preparation
LU Jin, XU Xin, ZONG Zhi-min, WEI Xian-yong
　　 ( Co lleg e o f Chemical Engineering , China Univ er sity o f M ining and Techno log y , Xuzhou Jiangsu 221008, China)
Key words: Ginkgo biloba L. ; alkylphenolic acids; tox ico logy , pharmaco log y
　　银杏 Ginkgo biloba L. 系侏罗纪的孑遗植物。鉴于该植
物在治疗心脑血管疾病及老年痴呆症等方面的独特疗效 ,进
入 80年代以来 ,银杏叶的开发研究热潮风靡全球 ,其提取物
已广泛应用于药品、保健品和化妆品 [1～ 3]。
银杏制剂质量的好坏直接影响到患者的安全和疗效 ,通
常主要从疗效和安全性的角度来考察和评价银杏制剂的质
量。 银杏制剂中含有的烷基酚酸等致敏物质毒性较大 ,应尽
量除去。 目前国际上公认的 EGb质量标准规定烷基酚酸类
物质含量不得高于 5μg /g [4 ]。国内不少制剂厂对该含量没有
控制 ,甚至高达 1 700μg /g以上 [5 ]都没能引起足够重视 ;且
目前有较大影响的有关银杏制剂质量的综述都未提及银杏
叶中有毒成分含量的测定方法、合理的限量标准及毒理学研
究。
已有研究表明 [6～ 10] ,银杏酚酸类对某些病种有一定的治
疗作用 ,因为运用辩证法的观点 ,对毒性成分来说 ,其本身就
是一种生理活性的体现。笔者对银杏制剂中烷基酚酸类成分
·85·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 1期
⒇ 收稿日期: 2000-04-26;修回日期: 2000-06-02
* Tel: ( 0516) 3885951
的性质和作用等作一介绍。
1　化学成分
银杏外种皮、果肉及叶中均含有烷基酚和烷基酚酸类 ,
属漆树酸类化合物 ,这些成分与致过敏、致突变有关 ,文献报
道了烷基酚类过敏源问题。 该类化合物包括白果酸
( ginkgo lic acid)、氢化白果酸 ( hydr oginkgo lic acid)、氢化白
果亚酸 ( ginkgo linic acid )、 白果酚 ( g inkgol )和银杏酚
( bilobal)等 [11] ,常见结构如图 1所示。该类型化合物主要溶
于非极性溶剂 ,溶解性质比较接近脂肪酸 ,难溶于低级醇类 ,
不溶于水 ,可溶于碱性水溶液。
a, b-分别为烃基取代的苯酚和间苯二酚衍生物 , c-为烃基取
代的水杨酸衍生物
图 1　烷基酚酸类成分结构图
图 1的化合物代表了银杏的主要有毒物质 ,而且在银杏
果实中分布最多 ,是过多食用白果造成中毒的主要成分 ,也
是银杏叶在长期服用时的致敏性成分。除去白果中的烷基酚
酸类可采用 “炒”的方法 ,因烷基酚酸在较高温度下能挥发
掉 ,可防止食用时中毒。
2　分离检测方法
丙酮和乙醇的水溶液常用于萃取银杏中的有机成分 ,前
者可以较好地提取黄酮苷类及萜内酯类以及原翠雀苷类 ,而
后者可较容易地将致敏物质烷基酚酸类成分提取出
来 [12～ 14]。 EGb761的标准规定长碳链水杨酸类衍生物的含量
不得高于 5μg /g ,德国 Sch wabe药厂 1991年专利提出白果
酚不高于 10μg /g[4 ] ,该专利报道了银杏酸的去除及达到 10
μg /g以下的质量规格。具体方法为: 100 kg干叶粉加 750 kg
60% 丙酮于 57℃～ 59℃下强烈搅拌 30 min后离心过滤 ,
如此提取 2次 ,滤液减压浓缩到 30% ～ 40% ,丙酮含量 5%
以下 (干浸膏含银杏酸 13 g /kg ) ;加 2倍量水稀释 , 12℃ 冷
却 ,离心除去沉淀 ,滤液 (干浸膏含银杏酸 320μg /g )加 30%
量的硫酸铵 ,以丁酮 -丙酮 ( 6∶ 4～ 1∶ 1)液 -液萃取 ,萃取液
浓缩至 50% ～ 70% ,加水稀释到含干物质 10% 的溶液 ,以
其一半体积的正丁醇提取 ,正丁醇层减压浓缩至含干物质
50% ,再恒沸蒸馏 ,所得水液加水和乙醇至含干浸膏 10% ,
含乙醇量 30%。以其 1 /3体积的正己烷脱脂 ,水层减压浓缩
干燥 ,得含水量低于 5% 的 EGb 2. 7 kg ,其中黄酮苷 2% ～
26% ,银杏内酯 2% ～ 4. 5% ,白果内酯 2. 0% ～ 4. 0% ,烷基
酚酸 10μg /g 以下 (特别可达到 1μg /g 以下 ) ,原花青素
5%。
Hideji [15 ]将外种皮粗粉以甲醇提取 ,加适量水用氯仿萃
取 ,萃取物分别经硅胶柱 (氯仿 -甲醇 , 9∶ 1)和氧化铝柱 (苯 -
醋酸乙酯 , 1∶ 1)处理 ,硅胶柱处理后再经 ODS柱 洗脱得 3
种酸性成分 ,氧化铝柱处理后经 ODS柱精制得总银杏酚和
总白果酚。
赵成林 [16]对外种皮中酸性成分的提取进行了探讨 ,将
粉碎的银杏外种皮在室温下用乙醚提取回流 3次 ,提取液浓
缩回收溶剂 ,而后以 10% Na2CO3水溶液分 4次从乙醚中抽
提 ,水层用稀盐酸中和 ,再用乙醚从水层抽提 ,乙醚干燥蒸发
后得褐色油状物 ,即为银杏外种皮总酸性成分。经柱层析 ,甲
醇-醋酸洗脱 ,分离出 3种 6-链烯基十五碳水杨酸。
检测方法有用正己烷萃取或者超临界 CO2萃取后
HPLC分离 , UV 254 nm检测 ;或是用 HPLC检测 ,用作定
性分析。但液相色谱的灵敏度低 ,只能用作半定量分析。因此
有人用 GC-M S分析 ,但样品需经硅烷化处理 ,操作步骤较
繁琐 [17, 18]。 Gellerman报道 [19 ]用 GC分析其酯 ,用作含量测
定 ,这是一种较为简便易行的方法。陈仲良等发现用 TLC法
与对照品混合银杏酸比较能被用于银杏酸的限量分析 [5]。意
大利人采用超临界 CO2萃取 ,毛细管 GC-MS脱机分析 ,用
于分离和鉴别有毒酚性化合物 [20 ]。
3　毒理学研究
3. 1　白果: 元朝吴瑞在《日用本草》中记载: “多食壅气动风 ,
小儿多食昏霍 ,发惊引疳”。 明朝李时珍在《本草纲目》中指
出: “银杏……食多则收令太过 ,令人气壅胪胀昏顿”。这与近
代临床研究资料是一致的。婴儿连食 10枚左右核仁即可死
亡 ; 3～ 7岁儿童连食 10～ 50枚即可引起中毒 ,有的可发生
严重中毒甚至死亡 ;成人连食 20～ 300枚即可引起中毒。给
小鼠用药后 ,出现惊厥症状 ,继而延髓麻痹 ,呼吸、心跳停止
而死亡。白果的肉质外种皮中含有银杏毒 ,能引起皮炎 ,该毒
性物质还可从皮肤吸收 ,通过肠与肾排泻 ,引起胃肠炎和肾
炎 ,并有溶血作用 [11 ]。 其中毒机制目前尚不清楚 ,一般认为
与损害中枢神经系统有关。
3. 2　银杏叶: 银杏叶提取物的 LD50 ,静脉给药为 ( 1 202. 5±
141. 3 ) μg /g ,相当于生药 ( 7. 8± 0. 9) g /kg;灌胃给药为
( 17. 9± 1. 0) g /kg ,相当于生药 ( 116. 4± 6. 5) g /kg[17]。给狗
注射临床常用量 10～ 40倍的药物 1周 ,出现恶心、呕吐、腹
泻、食欲减退等现象 ,组织切片发现小肠粘膜分泌亢进 ,麻醉
狗、家兔的肠蠕动增强 ,注射给药局部血管变硬 [18 ]。
银杏叶制剂毒副作用较小 ,少数患者用药后有食欲减
退、恶心、腹胀、口干及头晕等反应 ,但对血象、肝、肾功能无
影响。
4　药理学研究
4. 1　抗菌消炎作用: 许丽丽报道 [6] ,银杏甲素 (氢化白果酸 )
20 mg /kg ip对二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀 ,角叉菜胶所致
的大鼠足肿胀 ,乙酸所致的小鼠腹腔毛细管通透性增高等早
期的炎性渗出性水肿及毛细管通透性增加 ,对完全福氏佐剂
所致的免疫性炎症和棉球所致的肉芽组织增生均具有明显
·86· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 1期
的抑制作用。 它与阳性对照药地塞米松作用相似。
杨世林等发现 [7]: 银杏叶水煎液对金葡菌、痢疾杆菌及
绿脓杆菌均有抑制作用 ,有效成分为接有不同侧链的漆树
酸 ,可用于烧伤、烫伤、放射病等的急救。
4. 2　抗过敏作用 [8]: 银杏甲素 (氢化白果酸 ) 20 mg /kg ip
对小鼠被动性皮肤过敏反应 ( PCA)、对大鼠颅骨骨膜肥大
细胞脱颗粒释放具有抑制作用 ;当浓度为 50, 100μg /mL时
对抗原 (卵白蛋白 )诱发的致敏豚鼠回肠最大收缩反应有抑
制作用 ,其抑制率为 52% (P < 0. 01)和 76% (P < 0. 01) ;
当剂量在 50μg /mL , P < 0. 01时对过敏介质组胺 ( HA) 和
慢反应物质 ( SPS-A) 所引起的豚鼠回肠收缩有拮抗作用。
4. 3　抑制真菌作用:徐立春研究表明 [9 ]: 0. 1%银杏甲素抑
制真菌生长有效率为 92% (P < 0. 01) , 0. 5% 克霉唑为
68% (P < 0. 05) ,还发现银杏甲素抑制新隐球菌 A使其不
生长 ;抑制猪小孢子菌、新隐球菌 C、新隐球菌 E、副克柔氏
念球菌、克柔氏念球菌等浅表和深部真菌均使其不生长 ;对
许兰氏毛藓菌、奥杜盎氏小孢子菌、紊状表皮藓菌、伪热带念
球菌、热带念球菌等亦有极明显的抑制作用。
楼凤昌等研究表明 [10 ]: 白果酸对赤霉菌、镰孢霉菌、轮
枝霉菌、根霉菌和疫霉菌均有不同程度的抑制作用 ,对赤霉
菌、根霉菌和疫霉菌的作用优于多灵菌 ;不同浓度的白果酸
对镰孢霉菌和轮枝霉菌的抑制率高于 80% ,而多灵菌对它
们无效。
4. 4　酶抑制作用 [7]: 研究表明 ,银杏中的漆树酸为甘油 -3-
磷酸脱氢酶的抑制剂。
4. 5　驱虫、杀虫作用: 白果外种皮中的酸性成分可替代农药
防治蚜虫、蛴螬、菜青虫、红蜘蛛、桑蟥、稻螟及其它咀嚼口器
的昆虫 ,可减少化学农药的污染。
5　结束语
综上所述 ,银杏提取物在作为药品使用特别是制成食品
时 ,为降低其毒副作用应尽快建立其限量标准 ,并通过严格
炮制和检验 ,否则不可批量上市。 应进一步对毒性成分进行
研究 ,并加强在杀虫、抗菌等方面的临床应用 ,以提高银杏的
综合利用价值。
参考文献:
[ 1 ]　 Rapin J R, Yoa R G, Bouvier C, et al . Ef fects of repeated
t reatm ents w i th an ex tract of Ginkgo biloba ( EGb 761 ) and
bi lobalide on liver and m uscle glucogen con tents in th e non
insulin development res earch [ J ] . Drug Dev Res , 1997, 40
( 1): 68-74.
[ 2]　 Imd ronai M , Marcocci L. Perox yl radica scavenging activi ty of
Ginkgo biloba ext ract EGb 761 [ J ] . Bioch em Ph armol, 1995,
49(11): 1649-1655.
[3 ]　李兆龙 ,胡季强 ,卢耀明 . 银杏的开发利用 [M ] . 上海:上海科
学技术出版社 , 1996.
[ 4 ]　 Schw abe K P. Ex t racts f rom Ginkgo biloba leaves wi th high
con tent of f lav one glycosides and ginkg olides but wi th low
alkylph enols con tent [ P] . DE: 3940092 A, 1991-06-06.
[ 5 ]　陈仲良 ,殷梦龙 ,茅　翔 ,等 . 银杏提取物的化学成分和质量
[ A] .北京: ’ 97银杏国际研讨会论文集 [ C] . 1997: 89-91.
[ 6 ]　许丽丽 . 银杏甲素的抗炎作用 [ J ]. 扬州医学院学报 , 1992, 4
( 1): 19-21.
[ 7 ]　杨世林 ,徐立珍 ,杜力军 ,等 . 银杏研究概况及复方的研究
[A ].北京: ’ 97银杏国际研讨会论文集 [C ]. 1997: 43-49.
[ 8 ]　许丽丽 . 银杏甲素的抗过敏药理作用 [ J ] . 中药药理与临床 ,
1990, 6( 4): 35-37.
[9 ]　徐立春 . 银杏甲、乙素对真菌生长抑制效应研究 [ J ]. 中药材 ,
1990, 13( 12): 40-42.
[ 10 ]　楼凤昌 ,王国艳 .银杏外种皮的化学成分研究 [ A] . 北京: 97
银杏国际研讨会论文集 [ C] . 1997: 73-83.
[ 11 ]　周维书 ,黄振安 ,郑爱云 . 银杏叶及其制剂 [M ] .北京:化学
工业出版社 , 1995.
[12 ]　 Boral N. Ginkg olides chemis try, biology, pharmacology and
clinical perspect ives [ M ] . v ol 1. J R prous s cience
pub li sh ers , 1988.
[ 13 ]　 K. H. 斯通弗 . EGb761的药物质量与提取物规范 [ A ] . 北
京: ’ 97银杏国际研讨会论文集 [C ]. 1997: 20-28.
[ 14]　 Feudis F. Pharmacological activit ies and clinical applications
[M ]. chapter 2. France: Elsevieer publish ing house, 1991.
[15 ]　 Hid eji Itokawa. Ant itumor principles f rom Ginkgo bi loba L.
[ J ]. Chem Pharm Bull , 1987, 35( 7): 3016-3020.
[16 ]　赵成林 . 银杏叶外种皮中酸性成分的提取与药用探讨 [ J ].
中草药 , 1997, 28( 4): 250-251.
[ 17 ]　 T. A. 万伯克 . 银杏叶及其标准提取物的分析及质量控制
[A ]. 北京: ’ 97银杏国际研讨会论文集 [C ] . 1997: 92-100.
[ 18]　谢培山 . 银杏叶标准提取物 EGb761及银杏叶制剂的质量评
价 [ J ]. 中国中药杂志 , 1999, 24( 1): 3-5.
[19 ]　 Gellerman J L. Methods for is olation and determination of
anacardic acids [ J ]. Anal Ch em , 1968, 40( 4): 739-743.
[ 20]　谢培山 . 银杏叶标准提取物 EGb761及银杏叶制剂的质量评
价 [ J ]. 中国中药杂志 , 1999, 24( 2): 116-118.
邮 购信 息
①中华人民共和国药典 ( 2000版 ,药典委编 ) 670元 ;②国内外药典 (制剂 )对照手册 (药典委编 ) 98元 ;③中药粉末显微鉴
别彩色图谱 (药典委编 ) 248元 ;④中华本草 (国家中医药管理局编 , 40卷 10册 ) 2560元 ;⑤中药新制剂开发与应用 (二版 ,谢秀
琼编 ) 86元 ;
执业药师资格考试复习指导: ①考试大纲 ( 12元 ,共用 ) ;②药事管理 ( 20元 ,共用 ) ;③药事法规汇编 ( 34元 ,共用 ) ;④药学
综合知识与技能 ( 31元 ,药学类 ) ;⑤药理学 ( 40元 ,药学类 );⑥药剂学 ( 43元 ,药学类 );⑦药物分析 ( 43元 ,药学类 );⑧药物化
学 ( 41元 ,药学类 );⑨考试试题与解答 ( 65元 ,药学类 ) ;10中药学综合知识与技能 ( 42元 ,中药师用 ) ;1中药药剂学 ( 36元 ,中
药师用 ) ;12中药化学 ( 34元 ,中药师用 );13中药学 ( 28元 ,中药师用 ) ;14中药鉴定学 ( 28元 ,中药师用 ) ;15考试试题与解答 ( 47
元 ,中药师用 ) ;16全国执业药师资格考试应试习题集 (谢惠民编 ) 38元 (药学类 )。
邮购办法: ①按书定价汇款 ,挂号发书 ,保证安全 ,发票随书寄。 汇款时注明所购书名。
②汇款地点: 邮编 300070　天津市和平区蛇口道同发里底商 11号 ,金卫医学书店收　电话: ( 022) 23522444
·87·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 1期