全 文 ：西藏冬虫夏草中一甘露醇的薄层扫描分析
西安医科大学药学系 汪 宝琪 庞志功
摘要 采用薄层色谱法 , 对冬虫夏草中 一甘露醇进行分离后 , 用高碘酸钾一联苯胺显色 , 采用薄
层扫描法 , 在入 、 入 的条件下进行双波长反射锯齿形扫描 , 测得 西 藏产冬虫
夏草中 一甘露醇的含量为 , 回收率为 。纬一 。
关健词 冬虫夏草 薄层扫描法 含量测定 一甘醇露
冬虫夏草 夕 户 ￡ ￡ 藏名雅杂滚 卜〔’〕, 对其化学成分 的研究表
明 , 它含有粗蛋白 、 氨华峻 、 一甘露醇 、 麦角街醇等〔“〕。 其中对 一甘露醇的测 定多采用 化
学分析中的氧化还原法〔“, ‘〕, 而用薄层扫描测定冬虫夏草中 一甘露醇含量未见报道 。
西藏的冬虫夏草生长在海拔 以上的高山草地上 , 菌座单生 , 高约 , 稍弯 曲 ,
上部稍膨大呈圆锥衫 , 紫黑色 , 下部细长 、 棕色 , 有纵直条纹 , 虫体如蚕 , 长约 , 表面
深黄色 , 内部白色 , 外表粗糙 , 背部有多数横生皱纹 , 腹部有足 对 , 中部 对较明显 , 菌柄
略显膨大黑棕色 〔“〕 , 是西藏药材 巾重要的补肺益肾 、 止血化痰 、 壮阳滋补的藏药之 一 。 性
味甘平 , 临床多用于治疗久咳虚喘 、 劳嗽咯血 、 阳痪遗精 、 腰膝酸痛等病症 。 所含甘露醇具
有利尿脱水作用 。 但由于生长的生态环境不 同 , 一甘露醇的含量各异 , 因此对西藏产 的 冬
虫夏草 中所含甘露醇 及其它有效 分 , 进行了科学的定量分析 。
本 文根据甘露醇能被高碘陡氧化 , 业在联苯胺作显色剂时 , 能在蓝色背景下出现白色斑
点的原理 , 对 冬虫夏草中的 一甘露醇经薄层分离显色 后 , 在只为 , 之 为 的
条件下进行薄层扫描 , 分别求出标准品斑点和样衍斑点的积分面积 , 按积分面积对点样量作
图绘制标准曲线 , 按回归方程求取含量 。
仪器试剂试材
一 型双波长薄层色谱扫描仪 日本 。 甘露醇标准品 中国药 品生 物 制 品 检 定
所 。 冬虫夏草 产于西藏 日喀则地区定日县雪山上 , 由西藏自治区党委办公厅周宽厚同志
提供 , 经我系生药教研室主任吕居娴教授鉴定 。 联苯胺溶液的配制 称取。 联苯胺 , 加入
的乙醇 , 振荡使之溶解 , 得。 的联苯胺乙醇溶液 。
实验方法
冬虫夏草中甘露醇的提取 精密称取干至恒重的冬虫夏草 。、 。 、 。 ,
共份 , 分别置沙氏提取器中用 乙醇 回流提取至无色 , 取提取液在水浴上浓缩至千 、
用无水乙醇溶解过滤 、 洗涤 , 将滤液置 容量瓶中用无水乙醇稀释定容待测 。
甘 露醇的分离 用微量注射器准确移取待测液 件点样于硅胶 薄板上 , 业用标准品点
样对照 , 用 号展开剂一 号展开剂 一冰醋酸 上行展开 〔号为二氧六环一乙酸异戊
醋一异丙醇一水 , 号为异丙醇一乙酸 乙醋 一水 〕待溶 剂 前 沿 达
时 , 取出薄板 , 冷风吹干 , 均匀地喷洒 的高碘酸钾的 的盐酸溶
液和 联苯胺 乙醇溶液 , 即在蓝色背景下出现白色斑点。
薄层扫描 几 , 几 , 狭 缝为 欠 , 扫描 速 度 为△ 二 ,
, , 卜 , 一
枣中草药 》 年第 卷第 期 一 ,
△ , 线性参数 , 双波长反射法锯齿形扫描 , 测定斑点的积分面 积 , 求取含量 。
测定结果 根据同一扫描条件下斑点的峰面积 , 用回归方程求得含 量见表 。
讨论
线性范围考察 用微量注射器分别取 的标准溶液 、 。、 、 、 。、
、 时点样于同一薄板上 , 按实验方法薄层展开 , 展开后取 出薄板晾 干 , 喷晒显色剂 ,
在同一条件下进行扫 漪求得不 同的斑点面积 , 以斑点面积对 一甘露醇点样量作图得 标 准曲
线 , 其回归方程为 ! , , 线性范围在 产扩 协 之间 。
精密度实验 分 别在同一薄板上点样个 相 同 浓 度 一廿露醇和在 块薄板上点样个相
同浓度的 一甘露婷 , 所得结果板内 为 笼, 板 间 为 既 。 表明板内差小于板间
差 。 点样量越大误差越大 。
薄层分离条件的选择 先后选 月不 同
的固定相和流动相进行薄层分离 , 结果见表
显色剂的选择 本文先后用碘蒸气 、
荧光素钠的甲醇溶液 、 高锰酸钾醉 溶 液 进
表 浏定结果
样品
纷咨号 饥亨 含氢‘ ’ 平均含量
‘一一一一一 一一一一一 一 一一一 一 , 。 。 。 。 。
‘ 曲 易仗 目云 ‘ ‘‘ ‘ , , 几 别二口公 ‘ 刁‘ ‘七 曰‘ 肠动曰‘ 吮 ‘曰国 ‘ 口 “妇 皿 ‘一 一 ‘ ‘ 一 ‘‘‘‘ 一
表 固定相和流动相的选择
固定相
硅胶
硅胶
硅胶
硅胶
流动相 效 果
号展开刘
号展开剂
号展开剂
号展开剂 一 号展开剂 一冰酷酸 。 ’
板脆易断 , 分离效果不好
斑点拖尾 , 无法定量
溶剂前沿不整齐 , 边缘效应明显
前沿整齐 , 斑点明显 , 分离效果好
行显色 , 有的重现性不好 , 有的斑点不清晰 , 只有用高碘酸钾和联苯胺显色 , 才有良好的
显色效果 。
消除薄层扫描斑点误差的几个技术问题 点样量不宜太大 , 曾以 、 、 时分别点
样 , 结 果 表 明 , 斑 点 拖尾 , 产生较大的误差 。 原点直径不宜超过 一 , 斑点直径
太大会产土锯齿形斑点 , 在 扫描仪 上 出现几重峰形成正误差 。 。 点样的样品溶剂应是易挥
发 的有机溶剂 , 不应为水 , 甘露醇虽是水溶性物质 , 但不宜用水作溶剂 , 由于不易挥发 , 点
样原点易于扩大造成误差 。 本文选用无水 乙醇作样品溶剂 , 边点样边用 电吹风吹干溶剂 , 减
少原点扩大 , 使斑点成椭圆形 , 减少误差 。
回收试验 在 已知浓度样品液中 , 加入 一甘露醇标准液 、 、 、 林 , 点于同一
薄层板上 , 按实验力 法薄层分离 , 上机扫描 , 得 回 收 率 为 98.6写 ( 97 % ~ 工01 . 6 % ) 。
参 考 文 献
i仁国药典 . 一部 . 1990. 81
肖家庆 , 等 . 中药通报 , 1 9 8 3
钟裕容 , 等 . 中国中药杂志 ,
3 9
黄和意 , 等. 中草药 , 1 9 8 0 ,
5 西藏自治区卫生局 , 西藏军区后勤部卫生处编 。
,
8
(
2
)
:
3 2
1 9 9 0
,
1 5 ( 4 )
西藏常用中草药. 拉萨: 西藏人民出版社
340
( 1 6 9 3 一 1 2 一2 7 收稿 )11(10 ): 435
190