全 文 ：蛇足石杉生物碱成分的研究
军事医 学科学院 北京 未姗琴 冯 锐 顾 国明
摘要 从石杉科植物蛇足 石杉中分得 个生物 碱 一 。 经 光 谱鉴定 , 分 别 为 去一 一 甲基
卜 , 手 兀 , 和 一 一 经 基 一
万 。 其中碱 和 万为首次从该 植物 中分得 。
关键词 蛇足石杉 去一 一 甲基书一 一 一经基一 一
蛇足石杉 户 。 民间用 于 主治痈疖肿毒 、 跌打损伤等 。
自 年从该植物和同科植物华南马尾杉中分离出一个很强的胆碱酷酶抑制剂福定碱 即石
杉碱甲 后〔’〕, 为综合利用生产石杉碱 甲后的植物资源 , 进一步寻找生物活性成分 , 、 从中又
得 个生物碱单体 , 经光谱分析鉴定 , 分 别
为去一 一甲基甲 一 , 。
, 和 一
经基一 。 其中 和 为首次
从该植物中分得 。 它们 的化学结构式见图 。
碱 为 白色针晶 , 分子式 。 ,
分子量为 , 让竺二 一 ’ 、
、 、 、 入 。 二 ,
, 和 ‘ 乙 , 理 各 , ,
表明分子 ‘, 存 在邻位双取代的 一毗 咙酮环 。
夏
皿
图 碱 一 的化 学结构式
‘ 显示 个 碳 , 表 明 分 子 中
除 一 毗吮酮外 , 尚无不饱 和键 。 根 据 分 子式求得其不 饱和度为 , 进而判定该分子为四环
结构 。 测得分子离子及 主要碎片离子有 , , , ,
, 等 , 根据碎 节离子 士一 嫂 , 士一 , 寸一
并综合以上光谱数据 , 推断碱 结构与 类似〔“〕。 其与 一 。 的差别仅为少
一个 一 。 根据 ’“ 和 ’ 的高场分别只出现一个 一 信号 , , 。
一 , 。 , , , , 。一 。 , 而无 一 信号 , 同时碱 的分子量正
好比卜 少 一 , 推定碱 为去 一甲旅卜 。 〔〕。
碱 为白色针晶 , 分子式 , 。 , 分子 量 。 票 一 ‘ , ,
提示分子 中有经基 、 六元环饱和酮 丧。 ‘ 显示 个氢 , 其中 乙 , ,
为叔甲基信号 , 乙 , , 加 消失 为经基信号 , !
为> C H 一 O H 信 号 。 ‘“C N M R 测 得 16 个碳 , 除澎2 ]2 为sp Z默基碳外 , 均为 sPs 碳 。 结合其不
饱 和度为5, 推定该分子为四环结构 。 M s 测得其分子离子和主要碎片离子有263 ( M 士, 2 2 ) ,
2 4 6
(
1
)
,
2 2 0
(
1
)
,
2 0 6
(
1 0 0
)
,
] 7 8
(
8
) 等 , 其中220 ( M 寸一 4 3 ) , 2 0 6 ( M 士 一 5 7 )
和 175 ( M 士一 5 5 ) 为典型的lyeopod in e型特征碎 片〔2〕。 根据 W 的分子量比ly 。o p o d i n e 多一6
.A d d re ss: Y u an S lla n q :n , A e a d e m y o f M i l i t a r y M e d i e a l S c i e n e e s , B e i j i n g
《 中草药 》 1 9 9 5年第 26卷第 8 期 1 15
并综合以上光谱数据推定碱 W 为经基取代的lycopod in e型生物碱 。 从基峰为M 士一 57 推 定 ,
碱万碳基应位于 5位而不是 8位〔2〕。 碱 万D E P T 谱显示 5个sp “叔碳 , 8 个sp “仲淡进一步 提 示 ,
经基连于 sp 3 仲碳上 。 W 的‘H 一H ‘ C o s Y 谱 (碱 y · H C I ) 中 , 与经基 同碳的氢质子 护3.95)
只显示一个相关峰 , 表明其邻位只有一个氢质子 ( d 2 .35 , I H , b r · s ) , 结合其键上不应有
任何取代基推定 , 经墓只能位于 6位碳 。 根据 那的N O E 效应测定 , 确定了经基的立体构型:
当照射3.95P pm 处的6位氢时, 其邻近 的H 一7 和 H 一 8 均出现N O E 效应 , 而4位a 氢 无 N O E 效
应 , 提示H 一6 为日型 , 即6位经基为a型 , 由此确定碱 W 为6一a 一经基一ly co p .o d in e 。 以上 推定
的结构与文献6一 a 一经墓一 l y c o p o d i n e ( L : 。 ) 相符〔2〕。
1 仪器与试剂
熔点用 M P 一”型微量测定器测定 , 温度计未加校正 。 紫外光谱用岛津 U V 一2 60 型分光光
度计测定 , 无水乙醇为溶剂 。 红外光谱用 N ic ol et S D X 型仪测定 , K B r 压片 。 园二色 谱 用
SA 分光光度计测定 , 无水乙醇为溶剂 。 核磁共振谱用超导傅里叶变换JN M 一G X 一4 0 型仪测
定 , 工作频率’H N M R 4 0 0 H z , ‘3 C N M R l o o H z ( C D C 1 3 和D :0 为溶剂 , 四 甲基硅 为内标) 。
质谱用M A T 一7 1 型仪测 定 。 柱层析和薄层层析所用硅胶为青岛海洋化工厂 出品 。
2 提取和分离
碱 I : 生药粗粉用 2 % H C I渗渡 , 渗滚液以阳离子交换树脂交换 , 所得总碱用硅胶G (粒
度 10 ~ 40 协 ) 柱层析低压分离 , 以乙 醇一 冰醋酸 ( 10 : 7 )为展开剂 , 按色带收集大 体 分成6
部分 。 1 ~ 3 部分再用粗硅胶柱分成5个部位 , 以无水乙 醇为洗脱剂 。 从第3部位析出一混合结
晶 , 继以制备性T L C 法分离 , 以异丙醇一丙 酮 一水 ( 7 : 3 : l) 为展开剂 。 板 层 显 示5个 色
带 , 从第3色带 中得到一单体 , 以C H C la 一M e : C O 重结晶, 得 白色针晶 。
碱 l : 上述 1~ 3部分用粗硅胶柱分成5个部位 , 从第5部位 中得到一单体 , 以 丙 酮一石油
醚重结晶 , 得到白色针晶 。
碱 l : 上述所得的1一3部分按生物碱常规方法纯化处理 , 在氯仿浓缩液中得到一混合结
晶 , 再用制备性T L C 法分离 , 以氯仿一甲醇一冰醋酸 ( 65 : 25 : 8 ) 为展开剂 , 得到2个色带 ,
从下面一色带 中得到一单体 , 以C H C 13一M e : C O 重结晶 , 得到白色鳞片状结晶。
碱W : 上述 1~ 3部分经硅胶柱得到的混合结晶再以硅胶 10 ~ 40 协柱常压分离 , 以异 丙醇
一 M e Z C O 一 H Z O ( 7 : 3
: l ) 为洗脱剂 , 按色带接收 , 大体分成5组分 , 从第4组分 中得 到一单
体 , 用 C H C 13一 M e Z C O 重结晶 , 得 白色针晶。
3 鉴定
碱 I : m p 290~ 29 一℃ 。 U V 入。 二 n m : 2 0 2 . 4 ( 1 0 9 0 3 . 0 5 ) , 2 3 1 . 2 ( 1 0 9 0 3 . 9 5 ) ,
3 : 5
.
4
(
1
0
9
0
3
.
5 6
)
。
I R v 彗牛em 一 , : 3 4 1 0 ( m ) , 3 1 0 0 ( w 一 m ) , 2 9 0 0 ( s ) , 2 6 7 0 ( 8 ) ,
2 6 0 0
(
m
)
,
1 5 5 5
(
w
)
,
1 4 5 0
(
m
)
,
1 1 4 0
(
m
)
,
5 4 5
(
m
)
。 ’H N M R ( 。p p m ) : 7 . 6 4 -
6 .4 7 ( 各 zH , A B 型 , J = 9 . 3 H z , C 3 一H , C : 一H ) , 2 . 9 6 ( 一H , b r d d , J = 1 5 , 7 H z , C e -
H
)
,
2
.
5 2
(
I H
,
d
, n ,
J
=
1 Z H
z
,
C
。一 H )
,
0
.
5 2
(
3 H
,
d
,
J
=
6
.
4 H
z
,
C
l s 一 C H 。 )
。
‘3 C N M R ( 乙P P m ) : 164 .8。 ( C ) , 一遵4 .0 6 ( C ) , 5 9 . 0 1 ( C H ) , 1 1 7 . 7 2 ( C ) , l x 7 . 3 4
(
C H
)
,
5 4
.
7 6
(
C
)
,
4 9
.
4 2
(
C H
:
)
,
4 4
.
3 4
(
C H
)
,
4 3
.
0 2
(
C H
:
)
,
4 1
.
3 6
(
C H
:
)
,
3 3
.
1 9
(
C H
)
,
2 9
.
7 7
(
C H
:
)
,
2 了. 5 2 ( C H : ) , 2 5
.
8 6
(
C H
)
,
2 5
.
6 5
(
C H
Z
)
,
2 1
.
8 3
(
C H
:
)
。
M S m /
z : 2 5 8
.
1 了2 7 ( M 寸, C , 。H : : N : 0 , 1 4 ) , 2 1 5 ( 3 ) , 2 0 2 ( 1 6 ) , 2 0 1 ( 1 0 0 ) , 1 7 3 ( 1 5 ) 。
碱 I : m p 115~ 116℃ , 其盐酸盐m p ZGo℃ ( 丁}华 ) 。 U V 入 、 、 n 二 : 2 0 1 . 2 ( 1 0 9 0 3 .5 1) ,
1 1 6
。 ( l《) 9 0 3
.
: ; )
。
! R 、含袅e ,二 一 ’: 2 0 2 ·。 ( s ) , 2 8 6 0 ( S ) , ] 、。。 ( S ) , 1 4 6 0 ( , n ) ,
1 4 4 0
(
m
)
,
l : 1 。 ( m ) , 1 2 2 0 ( m ) , 1 2 2 0 ( m ) , 1 1 0 0 ( m ) 。 ‘H N M R ( 占p p m ): 3 .37
( IH , d d d , J = 1 4 , 4 , 4 H z , C l 一H ) , 3 . 2 4 ( I H , b r · t , J 二 2 2 , 1 2 H z , C 。一 H ) , 2 . 8 5 ( I H -
d d
,
J
=
1 2
,
3 H
z ,
C
。一H )
,
2
.
6 5
(
I H
,
m
,
C
‘一H )
,
2
.
6 0
(
I H
,
d
,
J
=
4 H
z ,
C
; 一H )
,
2
.
5 6
一 0.9 2 ( 17H , m ) , 0 . 8 5 ( 3 H , d , J = 6 H z , C ,。一 C H 。 ) 。 “ C N M R ( 占p p m ) : 2 1.3 (C ) ,
6 0
.
0
(
C
)
,
4 7
.
2
(
C H
Z
)
,
4 6
.
5 5
(
C H
:
)
,
4 4
.
7 7
(
C H
)
, 理2 .9 6 ( C H ) , 4 2
.
9 1
(
C H
Z
)
,
4 2
.
7 6
(
C H
:
)
,
4 2
.
3 2
(
C H
:
)
,
3 6
.
6 6
(
C H
)
,
2 5
.
5 9
(
C H
)
,
2 5
.
3 0
(
C H
:
)
,
2 5
.
0 1
(
C H
:
)
,
2 2
.
7 9
(
C H
3
)
,
1 9
.
3 5
(
C H
:
)
,
2 5
.
7 1
(
C H
Z
)
。
M S m /
z
( % )
: 2 4 7
.
1 9 3 1
( M 士, C , 。H Z o N O , x o ) , 2 0 4 ( 一) , 1 9 1 ( 4 ) , 1 9 0 ( 1 0 0 ) , 1 6 2 ( 5 ) 。 以上数据 与 文
献 〔2 , 遵〕的lyeopod in e的光谱数据完全吻合 。
碱 班: m p 18 1一 rss℃ 。 园二色谱入29 2n m A o 4.5 ( 。 , 1 . 0 2 ) 。 U V 入二 。 二 n m : 2 0 一 0 ( 10 9 8
3 . 5 8 ) , 2 2 2 . 6 ( 1 0 9 0 3 . 2 。 ) 。 I R v 毖六em 一 , : 3 2 2 0 ( S ) , 2 0 6 0 ( S ) , 2 9 2 0 ( S ) , 2 8 7 0
(
m
)
,
1 7 0 5 贬S ) , 2 4 6 0 ( m ) , 1 4 2 0 ( m ) , 9 6 0 ( 8 ) , 弓10 ( m ) , ’H N M R ( 占p p m ) :
3 .23~ 3 . 15〔ZH , m , C , ( I H ) 一卜 C 。 ( I H ) 〕, 3 . 1 2 ( I H , s , O H , 加D :O 消失 ) , 2 . 9 2
一 2.30 ( 19H , n l ) , 。. 8 3 ( 3 H , d , J = 1 6 H z , C H 。 ) 。 M S m / z ( % ) : 2 6 3 . 1 5 9 0 ( M 士,
C
l a
H
2 5
N O
Z ,
1 0 。 ) , 2 4 6 ( 5 6 ) , 2 3 5 ( 2 1 ) , 2 2 0 ( 3 4 ) , 2 0 6 ( 1 7 ) , 1 9 2 ( 3 6 ) , 1 9 0
(
5 8
)
,
1 7 5
(
2 4
)
,
1 5 1
(
4 2
)
,
2 2 3
(
4 7
)
。 数据与文献〔5 , “〕的lyeod olin e 的 一致 。
碱 那: m P 255一 255℃分解 ( 24 5℃升华 ) , 其盐峻盐m p216 ( 升华 ) 。 U V 入二。 二 n m :
2 0 1
.
5 ( 1
0 9 0 3
.
5 。) , 2 1 7 一 ( 10 9 : 3 .4 1 ) 。 I R 、彗叉eln 一 ’: 3 4 八 。 ( w ) , 3 0 4 0 ( m ) , 2 9 6 0
一 254 0 ( S ) , 2 6 6 。 ( m ) , 1 7 0 6 ( S ) , 1 4 4 0 ( m ) , 1 3 3 0 ( m ) , 1 2 7 0 ( m ) , 1 0 9 0 ( I n ) ,
2 0 6 0
(
m
)
,
l ( ) 5 。 ( *n ) , 6 1 0 ( m )
。 ’H N M R ( 占P p m ) : 3 .80 ( IH , b r · s , > C H -
O H
)
,
3
.
3 9
~
3
.
2 2
(
3
H
,
m
)
,
:
.
7 5
(
I H
,
b
r
· s , 一O H , 加D ZO 消 失 ) , 2 . 6 3 ~ 0 . 9 1
(
1 7 H
,
m 、 , 0 . 5 通 ( 3 H , d , J = 5 . 6 H z , C , 。一C H 3 ) 。 其盐酸盐 , H N M R 峭p pm ): 3.95(zH ,
b
r
· S ,
> C H
一O H ) , 3
.
8 5 一 1.15 ( ZoH , m ) , ( ) . 5 9 ( Z H , d , J = 5 . 3 H z , C , 6一C H 。 ) 。
‘3 C N M R ( 占p p ln ) ( 盐酸盐 ) : ? 12 .6 ( C ) , 了8 . 1 ( C H ) , 6 7 . 4 ( C ) , 4 9 . 7 ( C H : ) ,
4 8
.
6
(
C H
Z
)
,
4 5
.
0
(
C H 、 , 4 3 . 3
(
C H
)
,
4 2
.
0
(
C H
)
,
4 1
.
2
(
C H
:
)
,
.
3 9
.
5
(
C H
Z
)
,
2 7
.
9
(
C H
)
,
2 5
.
4
(
C H
:
)
,
2 5
.
3
(
C H
:
)
,
2 3
.
5
(
C H
3
)
,
1 9
.
0
(
C H
:
)
,
1 5
.
7
(
C H
Z
)
。
M S m /
z : 2 6 3
.
1 8 5 了 ( M 士 , C : 6 H 2 5 N O : , 2 2 ) , 2 4 6 ( l ) , 2 3 4 ( 2 ) , 2 2 0 ( l ) ,
2 0 7
(
l 连) , 2 0 5 ( 1 0 0 ) , 1 9 0 ( 3 ) , l : 8 ( s ) , 1 7 7 ( 3 ) , 2 6 0 ( 3 ) 。
致谢: 原植物 由 本室 马其云 鉴 定; 红外和紫外由 本所刘 荫堂 、 金素琴分别 代测 ; 质谱由
本院仪器 中心 代刚; 园二 色谱 由 巾 国 医 学科学院药物研 究所代 刚 。
参
L985 , 1 0 : 2 6 3
2 1
( 5 )
:
3 8 6
C h
e
m
,
1 9 8 9
。
考 文 献
徐择邻 , 等 . 解放 军医 学杂志 ,
奕新慧 , 等 . 药 学学报 , 1 9 8 6 .
W
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6 7
:
1 0 7 7
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,
1 9 6 3
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:
2 5 1 4
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1 9 6 9
,
4 7
:
4 4 9
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s , 1 9 8 5
,
2 6
:
2 4 1
(
一9 9 3一0 7 一2 7 收稿 )
C hem , 1 9 6 4
《中草药 》1 9 9 5 年第26 卷第 8 期 . 1 !7 。
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e s t r u c t u r e s o f t h 。一e
a l k a l o i d s , e r e i d e n t i f i o d a s d o s · N 一 m e t h y l 一 日一 o b s e u r i n e ( I ) , l y e o p o d i n e ( 且 ) , l y c o d o l i n e ( 班 ) ,
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l y e o p o d i n e ( W ) b y m
e a n s o f s p e e t r a l a n a l y s i s ( u V
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L ia n g q io n g , L i M e i r o n g , Y a n g Z h i b i a o , e t a l
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f o r t h e f ir s t t im e 。
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v a r 。 a u s t r a l i
s
( D i
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.
b y e o l u m n e h r o 位a to g ra p h y .T h e str ue tu re 平a s id e n t if ie d o n t h e -
b 51 5 o f xR , ’H , ’习 C N M R , F A B 一 M S , a c i d i e h y d r o l y s i s a n d b a s i 。 h y d r o l y s i s a s 3 一 。 日一 D 一 x y l o -
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《中草药》 l, 9 5年第 26 卷第3 期