全 文 ：蛇 足 石 杉 生 物 碱 成 分 的研 究
军事医学科学院 北京 。。 末姗琴 冯 锐 顾 国明
摘要 从石杉科植物蛇足石杉中分离出个生物碱 。 经光谱分析鉴定 , 分别 为 一 !
、 和 。 其中 和 为首 次从该植物中 分
得 。
关键词 蛇足石杉 一
蛇足石杉 “ 打。 为石杉科石杉属植物 , 又名蛇 足 草 、
千层塔 。 民间主治痈疖肿毒 、 跌打损伤等 。 自 年国内首次报道该植物的生物碱在动物 实
验上有横纹肌松驰作用后 , 已从中分得 个生物碱单体〔, 〕。其中石杉碱甲 和 乙 , 一甲 基 石杉
碱甲及蛇足石杉碱是新成分 。药理实验表明 ,
石杉碱甲和 乙具有很强的抑制胆碱酶酶的活
性和提高学习记忆、 改善老年记 忆功能的效
果业能用于治疗重症肌无力〔一 “〕。 为寻找新
的生理活性成分 , 作者对蛇足石杉生物 碱 成
分继续进行了研究 , 从中分离 出 个生物碱单
体 一 , 经光谱鉴定 , 分别为 一
钾凡
, 和
其中 和 为首次从该植物中分得 。
碱 一 的化学结构式
, 其化学结构式见图 ,
仪器和试剂
熔点用 一 型微量测定器测定 , 温度计未加校正 。 比 旋 度 用一 旋光计测 定 。
紫外光谱用 岛津 一 型分光光度计测定 , 无水 乙醇为溶剂 。 红 外光 谱 用
型仪测定 , 压片。 核磁共振谱用超导傅里叶变换 一 一 型 仪 测 定 , 工作 频 率
‘ , ‘“ 为溶剂 , 四甲基硅为内 标 。 质 谱 用 一
型仪测定 。 柱层析和薄层层析所用的硅胶为青岛海洋化工厂出品。
提取和分离
碱 生药粗粉用 渗流 , 流出液用阳离子交换树脂交换 , 所得 总碱 采用硅胶
粒度 一 件 柱低压柱层分离 , 以 一冰 。 为 展 开 剂 , 按色带收集大
体分成 部分。 一 部分用粗硅胶柱层分离 , 以无水 乙醇洗脱 , 按色带接收合 并 成
组分 , 第组分再用粗硅胶柱分离 , 以 一 洗脱 , 定性合并成流份 ,
从第 流份中得到 一单体 , 用 一石 油醚重结 晶 , 得白色针晶 。
碱 上述总碱用硅胶柱层析所得 的 第部 分 以 溶 介 , 不 同 液抽提 。 取
抽提的弱碱部位 , 经硅胶千柱层 析粗 分 , 以 。一 一 ‘ 一
展开 , 大体均等切成 组份 。 将第组分再以夹板薄层层 析 法 分 离 , 以 一 一
为展开剂 , 显示出个色带 , 从第 色带中得到一单体 , 以饥 一石油醚重结
晶 , 得白色方 晶。
, ,
《中草药 》 年第 卷第 期 ·
碱 上述总碱用硅胶柱层析所得的第部分溶于 , 以 抽提。 提取物用粗
硅胶柱分离 , 以 一 为展开剂 , 用薄层定性业合并成组分 , 从第 组分
中得到一单体 , 以 一石油醚重结晶 , 得片状或针状结晶 。
鉴定
碱 白色针晶 , 一 ℃ , 其 盐 酸 盐 一 , 之。
。 ! ∀ # ∃% 一 ‘: 3 0 7 0 ( b r . m ) , 2 9 2 0 ( S ) , 2 9 0 0 ( 8 ) , 2 8 4 0 ( S ) ,
1 7 2 0
(
S
)
,
1 4 4 5
( m )
,
1 3 8 0
(
w
)
,
1 1 8 0
( m )
, 一0 4 0 ( m ) , 9 6 0 ( m ) , 7 2 0 ( m ) ,
6 0 0
( m )
。 ‘H N M R ( 碱 I · H C I 在D Zo 中测定 ) ( 占p p m ) : 7 .6 6 ( o .3 9 H , s , o H ) , 3 . 6 。
( I H , b r
.
s ,
C
: s 一H )
,
3
.
4 2 一 1 .3 7 ( Z oH , m ) , 0 . 9 2 ( 3 H , d , J = 6 . G , C , e一C H 3 ) 。
, 3
C N M R ( d
p p m )
:
2 1 5
.
2
( C )
,
7 7
.
2
(
C
)
,
7 4
.
4
(
C H
)
,
5 2
.
3
(
C H
:
)
,
5 0
.
2
(
C H
Z
)
,
4 1
.
5
(
C
)
,
3 8
.
6
(
C H
:
)
,
3 5
.
2
(
C H
:
)
,
3 2
.
5
(
C H
)
,
3 2
.
0
(
C H
:
)
,
2 4
.
9
(
C H
:
)
,
2 2
.
1
(
C H
:
)
,
2 1
.
7
(
C H
3
)
,
2 1
.
0
(
C H
)
,
2 0
.
7
(
C H
Z
)
,
1 9
.
a
(
C H
:
)
。
M S m /
z :
2 6 3
.
1 5 7 7 ( M
+ ,
C
: 。H z o N O
: ,
1
)
,
2 3 5
( M
+ 一2 8 , 2 0
)
,
2 2 0
(
2
)
,
2 1 a
(
3
)
,
2 5 5
(
1 1
)
,
1 5 2
(
1 0 0
)
,
1 5 0
(
2 7
)
,
1 2 5
(
6
)
,
1 2 2
(
e
)
,
1 1 0
(
3
)
,
9 7
(
8
)
。 以上光谱数据 与文献
〔7 , 8冲的s一d e o x y s e r r a t i n i n e 一致 。
碱 I : 白色方晶 , m p l l 9 一220℃ 。 〔a 〕2告, 刃 .8 “ ( e , 0 . 1 8 , E t o H ) , 元素分析 ( % )
C 79.48 , H g . 1 9 , N l l . 了1 ; 计 算 值 ( % ) : C 79 .29, H g . 1 5 , N l l . 5 6 。 U V 几二a二 n m :
2 0 4
.
4 ( 1
0 9 : 4
.
1 )
,
2 6 5
.
2
(
1
0
9
0
3
.
9
)
,
2 7 5
.
5
(
1
0
9
0
3
.
5
)
。
I R ( K B
r
)
c m
一 , : 3 2 4 0
(
8
)
,
2 9 4 0
(
8
)
,
2 9 2 0
(
9
)
,
1 5 5 0
(
S
)
,
2 4 4 0
(
8
)
,
2 3 5 0
( m )
。 ‘H N M R ( d p p m )
: 0 . 7 9
( 3 H
,
d
,
J
= 5
.
5 6
,
C
: 。一C H 。 )
,
7
.
1 5
(
I H
,
d d
,
J
=
4
.
3 9
,
7
.
5 2
,
C
: 一H )
,
7
.
5 7
(
I H
,
b
r
.
d
,
J
=
7
.
3 2
,
C
3 一H )
,
8
.
4 0
(
I H
,
d d
,
J
=
4
.
8 7
,
1
.
4 7
,
C
, 一H )
。 “C N M R ( 占p p m ) :
15 8 .7 ( C ) , 2 4 7 . 0 ( C H ) , 1 3 5 . 5 ( C ) , 1 3 3 . 3 ( C H ) , 1 2 一6 ( C H ) , 5 6 . 3 ( C ) ,
5 2
.
3
(
C H
:
)
, ‘4
.
5 ( C H )
,
4 3
.
5
(
e H
Z
)
,
4 x
.
3
(
e H
Z
)
,
3 5
.
3
(
C H
:
)
,
3 3
.
5
(
C H
)
,
2 7
.
5
(
C H
Z
)
,
2 6 一 ( C H : ) , 2 5 . 5 ( C H ) , 2 2 . 1 ( C H 3 ) 。 M S m / z : 2 4 2 . 1 7 5 5 ( M : ,
C
, 。H 2 2 N
: ,
l 。 ) , ; 9 9 ( M : 一4 3 , 2 ) , 1 5 6 ( 1 5 ) , 1 5 5 ( M 言一 5 7 , 1 0 0 ) , 1 5 3 ( 2 ) ,
1 5 8
(
2
)
,
1 5 7
( M 屯一5 5 , 2 4 ) , 一5 6 ( 2 ) , 9 2 ( 2 ) 。 以 上 光谱数据与文献〔6, 。〕报道的
lyeodin e相一致 。
碱 l : 白色片晶 , m p 1 4 s 一 15 0℃ , 分子式C :。H : s N o : , 分子量为26 1. 1752 。 U V 几m ax
n m :2一0 . 4 ( 一。 g : 5 . 0 1 ) , 2 5 4 . 0 ( l o g c 3 . 9 9 ) , 加N ao H 不变 xR ( K B r)cm 一 , : 2 5 5 0 一30 00
( 9 ) , x 6 9 5 ( 凡 ) , 1 6 4 5 ( s h ) , 1 6 2 5 ( 8 ) , 1 4 2 0 ( m ) 。 ’H N M R ( 占p p m ) : 4 .05 ( IH ,
m
,
C
g 一H )
,
3
.
8 5
(
r H
,
m
,
C
: 一H )
,
3
.
1 9 一 1.3 9( 18 H , m ) , 2 . 0 6 ( 3 H , d , J = 7 H z ,
c
; 。一C H 3 )
。 ‘3 C N M R ( 占p p m ) :2 07 .3 ( e ) , 1 7 3 . 2 ( C ) , 1 7 1 . 6 ( C ) , 1 4 2 . 6 ( C ) ,
5 1
.
0
(
C H
:
)
,
5 0
.
9
(
C H
:
)
,
4 r
.
1
(
C H
)
,
4 0
.
5
(
C H
:
)
,
4 0
.
6
(
C H
:
)
,
3 5
.
4
(
C H
Z
)
,
2 5
.
5
(
C H
Z
)
,
2 7
.
0
(
C H
)
,
2 6
.
5
(
C H
:
)
,
2 5
.
6
(
C H
Z
)
.
2 2
.
3
(
C H
Z
)
,
1 9
.
6
(
C H
Z
)
。
M s m /
z : 2 6 1
.
1 7 5 2 ( M 士, C : 。H : : N O : , 1 0 0 ) , 2 4 6 ( 2 7 ) , 2 3 3 ( 1 6 ) , 2 1 9 ( 6 ) , 1 9 1
(
1 0
)
,
1 9 0
(
2 8
)
,
1 了s ( 2 0 ) , 1 7 6 ( 1 9 ) , 1 6 2 ( 1 4 ) , 1 5 0 ( 3 、 ) , 1 2 3 ( 1 8 ) , 1 2 2
(
1 2
)
。 以上光谱数据与文献〔10〕报道的ph legm a riu rin e B相符 。
致谢: 原植物 由本室 马其云鉴 定 , 红外和紫外由 本所刘 荫堂 、 金素琴分别代浏 , 质谱 、
旋光 和元 素分析均由 本院仪 器中心 代浏 。 ( 下转 第47 3页 )
. 45 4 .
表2 灵芝对水浸应滋牲益疡的作用任土 s。)
组 别 剂 盆(g /k g · d )
点状溃疡数
减少百分
串 ( % ) 演疡数
减少百分
串 ( % )
O山,目一匕…O材行一0
0 。 4
1
。
0
芝灵
对照阿托品
C M C
31。 4 士 8 。 7 .
1 3 。 7 土 7 。 7 …13。 7 士 了。 1 申 中
4 。 5 士 3 。 9 巾 巾
3 3 。 6 士 1 3 。 1
2 0
。
2 士 5 。 4 甲
8 。 l 士5 。 8 . * .
6
。
8 士 4 。 1 中 . *
1 。 8 土 2 。 0 * 二
21 。 1 士 8 。 8
4 。 3
6 1
。
6
6 7
。
8
9 1
。
5
* 尸> O 。 0 5 二 申 尸< 0 。 01
2
.
2 拮抗乙酞胆碱对离体肠的作用: 取出豚鼠回肠 , 置于20 m l器官浴槽内 , 恒温通气 , 通
过弹力换能器描记肠肌收缩出线 。 测定浴槽内不同浓度的灵芝对抗乙酞胆碱对肠肌的收缩作
用 。 当灵芝浓度为2.5 x 10 ’‘ 、 5 . 0 X l o “‘、 1 . 0 欠 1 0 “ ”和2 .o x lo“ 3 9 / m l 时 , 抑制 乙酞胆碱收缩
的百分率分别为8 % 、 34 % 、 58 % 和83 % 。 每一 抑制百分率为5次实验的均值 。 算得灵芝IC 60
为51.5 x 10一 4 9 / m l 。
3 讨论
束缚水浸造成应激性溃疡 。 此溃疡形成机制被认为是精神和躯体在应激情况下 , 中枢内
下丘脑和副交感神经系统过度兴奋所致 , 特别是迷走神经由过度活动起了重要的作 用 〔2 , 3 〕。
当迷走神经功能亢进时 , 胃壁肌神经性痉挛 , 压迫粘膜血管 , 粘膜发生贫血性坏死 , 再受到
过多胃液分泌的作用而形成溃疡〔‘〕。 抗胆碱药在外周阻断乙酸胆碱对腺体 、 胃肌和血管的作
用 , 可使处在异常状态的分泌 、 肌痉挛和血流障碍得到缓解或消除 。 因此阿托品对应激性溃
疡有明显的防治作用 c5 〕。 本实验表明 , 灵芝 口服剂量1.09/kg和2 .0 9/k g时 , 如同阿托 品 一
样有明显的抗应激性溃疡作用 。 某些中枢抑制药如氯丙嚓 、 眠尔通对应性溃疡也有一定抑制
作用〔幻 。 林春等报道 , 当灵芝 口服剂量超过29/k g时 , 才呈现对中枢神经系统的抑制作用 , 小
鼠自发活动减少或加强催眠药的作用〔。。 因此本实验灵芝抗应激性溃疡的有效剂量范围 内 ,
很少有中枢作用的参与 , 主要表现为外周作用 。
从灵芝抗应激性溃疡效应和在离体肠拮抗乙酸胆碱的作用 , 可以认为灵芝在外周具有阻
断副交感神经系统功能的作用 。
, 考 文 献
林春 , 等 . 中成药, 1 9 9 2 , 14 ( 了 ) : 31
T a k a g i K , e t a l . C h e m P h a r m B u l l ,
1 9 6 4
一 1 2 一 4 6 5
D a i S , e t a l
。
E u r J P h
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m
,
1 9 7 5
,
3 0
:
8 6
G
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,
1 9 6 8
-
5 2
:
2 2 7
H
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M
,
1 6 6
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.
D i g D i
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S e i
,
1 9 8 6
,
3 1
*
(
1 9 9 卜10一0 8 收稿 )
( 上接第454页 ) 参 考 文 献
张秀尧 ,
王月娥,
1 1 0
张慈禄 ,
张宋圭 ,
程源深,
架新慧,
等 。 中草药 , 1 9 9 0,
等 . 中国药理学报 ,
2 1 ( 4 )
*
2
1 9 8 6
,
7 ( 2 )
等 . 新药与临床 , 1 9 8 6
等 . 新药与临床 , 1 9 8 5
等 。 新药与临床 , 1 9 8 6
等. 药学学报 , 1 9 8 6,
5 : 2 60
4 : 4 3
5 : 1 97
21 ( 5 )
: 3 86
李军, 等 。 中草药, 1 , a 7 , l a ( 2 ) : 2
犬伏康夫 , 等 。 药学杂志〔日〕, 1 9 6 了, 5 7 : 1 3 , 4
A n
e t F A L
, e t a l
.
C
a n J C h
e
m
,
1 9 5 5
,
3 6 : 9 0 2
伶绍华 , 等 . 植物学报 , l g a ‘, 2 6 ( 4 ) : 4 1 1
(
1 9 9 3 一 0 4 一2 3 收稿 )
《 中草药 》i , g ‘年第 25卷第 , 期 · 4 7 3 .
, c h e d
e s e r t i
c o l
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T u P e n g f o i
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.
T h o y a r e i d e n t i f i e d a s 6 一 d e o x y e -
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( o r ig in a l a r t ic le o n P a g e 4 5 3 )
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l i c ( IV )
, 刀一 s i t o s t e r o l · g l u c o s i d e ( V ) a n d g a l l i c a c i d ( Vl ) b y m e a n s o f s p e c t r a l a n a l y s i s a n d
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h
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一c a l c o n s t i t u e n t s
w i n e w a s d i s c u s s e d
o f s o m e o f t h e m e d i e i n a l h e r b s u s e d
w i n e , s u e h a s , f r u i t o f L y e i 。二 e h io e n s e M i ll . f r u i t o f P s o ra le a e o r 夕Iff o lia L . , r h i z o 位e
犷la d‘价ir ia s o u l蓄e i ( F r a n c h 。 ) L i n g . A H P L C m e t h o d w a s u s e d i n t h e d e t e r m i n a t i o n o f i c a , i i n e 。
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H ig h P e r f o r m a n c e L iq u id C h r o m a t o g r a p h ic A s s a y o f
T e t r a m e t h y lp y r a z in e in a F u b i d o u G r a n u le ”
J ia n g Z h ir o n g
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