全 文 ：瑞香素在体外对蛋白激酶
和蛋白激酶
活力的影响△
中国医学科学院墓础医学研究所
北京





徐学萍

肖殿模 周文华
张俊 宝 许彩 民 潘华珍
王小 普
陈华粹
摘要 部分纯化的蛋白激酶
和蛋白激酶
, 在体外分别与瑞香素温育。 瑞香素浓 度达






’




时 , 显著抑制
型蛋白激酶
的活力 , 大于





一



时 , 抑制
型蛋白激
酶
的活力 , 而高至





“



时 , 才能抑制蛋白激酶
的活力。 结果表明 , 瑞香素对

型蛋白激酶
有较高的特异抑制作用。
关锐饲 瑞香素 蛋白激酶
蛋白激酶

瑞香素是从瑞香科瑞香属植物长 白瑞 香




 掩。








‘分 离 得 到 的 结 晶
单 体 , 化学结构为
,
一二经基香豆素 , 具扩血管 , 增加冠血流量 、 改善心肌代谢 、 抗凝
血、 抗血栓和抗炎等作用〔。 。 临床上用于治疗冠心病 、 血栓闭塞性脉管炎 、 风 湿性 关节炎
及克山病 , 据报告疗效明显
 ,
〕。 瑞香素的作用机理 , 目前了解甚少 。 本实验 观察 瑞香素
在体外对细胞信息传导过程中的关键环节—蛋白激酶
和蛋白激酶
活力的影响。
材料
瑞香素
由本所生化室提供 , 为淡黄色 粉末 , 不溶于水 , 原 液 用 二 甲 基 亚 讽 溶解








, 用时用











 缓冲液稀释成所需浓度 。 二甲基亚枫在测定
系统中的终浓度为





一 “





。 〔
一
勿〕

 购 自福 瑞 公 司 , 组 蛋 白

一 、

一

、 磷脂酞丝氨酸 、 二油酞甘油二醋 、



一纤维素 、 琉基 乙醇 、

 和




购自



公司 。 其余试剂为市售分析纯 。 大鼠



左右
由本院实验医学动 物 研 究所
供给 。

方法



蛋白激酶
提纯和活力测定
参照文献〔
〕方法 。 大鼠骨骼肌在
℃下匀浆后 , 经等 电点
沉淀 , 硫酸按盐析及



一纤维素柱层析 , 获得部分纯化的骨骼肌细胞浆
型和
型蛋白激
酶
。 以
一
组蛋白为底物 , 测定““
由〔卜舰
〕

转入组蛋白的放射性 强度 , 计算蛋白激
酶
活力。 以





 ·

蛋白表示 。



蛋白激酶
提纯和活力测定
参照文献〔
〕方法 。 大鼠脑在
℃下 , 经匀 浆 、 硫 酸 钱盐
析和



一 纤 维素柱层析, 得到部分纯化的脑细胞浆蛋白激酶
。 以
一
组蛋白作底物 ,
测定韶
由〔
一

〕


转 入 组蛋白 的放 射性强 度 , 计算 蛋 白 激 酶
的 活 力。 以






·

蛋白表示 。



蛋白质含量测定
以






 亮蓝染料结合法 , 测定蛋 白质含量〔
〕。

结果



瑞香素对
型蛋 白激酶
活力影响
部 分纯 化的
型 蛋 白激酶
基础活力为


 士














,
























 
,



























 ,







△本研究由国家自然科学基金资助
· 进修生 , 江苏扬州医学院生化教研室
《中草药》

洲年第
 卷第
期












·

蛋白
万士

,



。 该酶与不同浓度瑞 香 素 在

℃温育





后 , 活性测定显示瑞香素对酶活力呈剂量依赖性抑制作用
图
, 每个浓度点至少重复
次 ,
下同
。 瑞香素浓度达


卜



时 , 酶活力降至


士









·

蛋 白, 显著
低于基础 活力






。



瑞香素对 亚型蛋白激酶
活力影响
部分纯化的
型 蛋白激酶
基 础 活 力 为


 士
。







 ·

蛋白
了士
 ,
二


。 瑞香素对该酶亦有剂量依赖性抑制 作用
图


。 瑞香素浓度达






时 , 酶活力降至


 士








 ·

蛋 白, 显 著低
于基础活力
尸





。
瑞香素







切旧·口一习

日碱进恤落二渐酬工

名省一工。日
碱谧翅扭侧洲
瑞香素





,

图
瑞香素在体外对
型蛋白激酶
活力的影响 曰
瑞香素在体外对
型蛋白激酶
活力的影响



瑞香素对蛋白激酶
活力影响
部分纯化的蛋白激酶
基 ,础 活 力 为


 士









 ·

蛋白
万士

,


。 瑞香素在较高浓度下 , 对该酶有剂量依赖性抑制作用
图


。 瑞香素浓度达
 卜



时 , 酶活力降至


士








 ·

蛋白 , 显著低于基
础活力
尸

。。

。


声
日户。节一工彗盆越扭以

 一 」0 一 ‘
瑞香素(二o宝/乙)
了几一 , , , 公 。 , o 一 a 一1 0 , 1 0 一‘ r o 一 xo 一 ‘ 2 0 一 ,
瑞香素(二习几)
图3 瑞香素在体外对蛋白激酶C 活力的影响 图 4 瑞香素对不同蛋白激酶活力影响的比较
O 蛋白激酶A 一 1 △蛋白激酶A 一 工 口蛋白激酶C
溶剂对照 : 用等量等终浓度的二甲基亚枫溶液分别与蛋白激酶C 、 I 型 蛋白激酶A 和 l
型蛋白激酶A 温育10 m in , 测定酶活力 。 二甲基亚矾对各酶活力无任何影响 。
图4比较了瑞香素在不同浓度下对 I 型蛋白激酶A 、 I 型蛋白激酶A 和蛋白激酶C 活 力抑
制的程度 , 以受抑的百分数表示 。 引起 亚型蛋白激酶A 活力50 % 抑制的浓度IC :。为0.4卜m ol /
L , I 型蛋白激酶A 和蛋白激酶e 的IC 。。分别高达40协m o l/ L 和500卜m o l/ L 。
讨论
蛋白质磷酸化是 细胞信息传递途径的最终共同环节 。 作为激素作用的第二信 使 , 。A M P
和甘油二醋分别激活蛋白激酶A 和蛋白激酶C , 引起细胞某些特定蛋白质磷酸化 , 进 而影响
细胞生理功能〔7, 幻 。 为了研究蛋白激酶的生理作用 , 国内外学者都在寻找蛋白激酶的选择性
抑制剂 。 近年来 , 国外学者发现了少数对蛋白激酶A 活力有选择性抑制作用的 物 质 , 如K T
5720 、 强心药am rin on e和m ilrin o n e等〔9 , 1 0 〕, 但没有报道这些物质对 I 型和 亚型蛋白激酶
A 抑制作用的差别。 国内只报道过藻酸双酷钠和棉酚对两型蛋白激酶A 的抑制作用 , 但它们
对蛋 白激酶C 也有程度相似的抑制作用 , 缺乏特异性〔4 , 5 〕。 本文结果表明 , 瑞香素 对 I 型蛋
白激酶A 的抑制作用约为 I 型蛋白激酶A 抑制作用的10 倍 , 为蛋白激酶C 抑制 作用 的1250
倍 。 因此 , 瑞香素可作为 l 型蛋白激酶A 的较特异抑制剂 , 可望有助于蛋白激酶生理功能的
深入研究。
瑞香素的药理作用较为广泛 , 本实验证明了瑞香素在体外能抑制蛋白激酶A 和蛋白激酶
C 的活力。 瑞香素在体内能否抑制蛋白激酶的活力 , 从而干扰细胞信息的传递过程 , 需进一
步研究 。
今 考 文 献
刘延泽 , 等. 中草药 , 1 9 87 , 18 ( 2 ) 。 32
吉林省中医 中药研究所中医研究室内科, 等 。 新
医药学杂志 , 2 9 7 7 , 4 : 1 1
傅国治 , 等 。 中西医结合杂 志 , 1 9 8 7 , 7 ( l 。) :
6 4 0
肖殿模 , 等 。 中国海洋药物 , 1 9 9 2 , 1 : 7
肖殿模 , 等 . 基础医学和临床 , 互, 0 2 , 犯: 2。
R e a d S M , e t a l 。 A n a l B i o e h m , 1 9 8 1 ,
1 1 6
:
5 3
S
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。
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:
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*
4 3 6
(
1 9 0 2 一 2一1 7 收稿 )
浮肿可用红豆消退
浙江省龙泉市卫生防疫站 ( 323700 ) 郭振东
红豆又叫赤小豆 、 饭赤豆 、 红小豆。 它不仅是
民间喜爱的豆类食品 , 而且还是一种疗效好 , 最常
用的良药 。 中医学认为 , 赤小豆味酸性平 , 有利尿
消肿 、 清热解毒等多种功效 , 常常用于治疗水肿、
脚气 、 黄疽、 腹泻及疮疡肿毒等疾病 。 赤小豆的营
养价值也十分可观 。 据分析测定 , o . sk g 红豆 含 蛋
白质108.5m g、 脂肪49 、 糖303 .5m g 、 钙380m g 、
磷1930m g 、 铁2 .5m g , 此外 , 还含有多种维生素
等营养物质。 医药工作者在实验中还发现 , 赤小豆
煎荆对金黄色葡萄球菌 、 痢疾杆菌、 伤寒杆菌等有
较强的抑制作用 , 因此对肠炎 、痢疾 、腹泻及疮疡疖
肿都具有良好的效果 。 若患有水肿、 小便量小或肠
炎腹泻 , 可用赤小豆50 一1 0 09 煎水内服或用鲜茅根
2009或千茅根50 9 , 用水洗净后 , 加水适量 煎 煮30
m in 后 , 将茅根捞去 , 再加赤小豆、 大米各 10 9 ,
继续煮成粥 , 一日内分顿食用 , 效果较好 。 用赤小
豆1009煎水内服可以治疗肾炎水肿。对于妊娠水肿 ,
可用赤小豆10 09 , 螂鱼2509水炖烂即可服食 , 一般
服5~ 7次即可见效 。
(
1 0 9 3 一0 7 一1 3 收稿 )
《中草药 》19 9 4年第25 卷第 1期
仓。o d r e P 全o d u c ib il it y .
( O r岌9 In al a rt宜elo o n p a宫e 12 )
A n a ly sis o f A e t iv e C o n s t lt u e n t s in M y c e liu m a n d F e rm e n ta t lo n
B ro t h o f L in g z h i ( G a o o d er o a lu c id “m )
L i Z h a o la n a n d Z h e n g T a o
A e t iv e c o n s ti tu e n t s in m y e e liu m a n d f e rm e n t a tio n b r o t h o f G a ” o d e r 沉a
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8 0 士 1 。 o 6 n m o l / m l r e s P e c t i v e l y 。 B o t h w e r e s i g n i f i c a n t l y d e e r e a s e d a s e o m p a r e d w i t h t h e e o -
n t r o l g r o u P ( 3 牙。 0 0 士 6 。 5 0 , L P O i , . 0 6 士 z 。 z o n m o l / m l ) 。 T h e s e r e s u l t s s i g n i f i e d t h a t t h e a n t i o x i d ·
a n t m e d i e i n a l h e r b s , e s P e c i a l l y i n e o 功P o u n d e d fo rm , m a y P r e v e n t g a s t r i e s t r e s s i n j u r y 。
( o r i g i n a l a
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