全 文 ：薄层扫描法测定五灵丸中五味
酉旨甲 、 丹参酮 I A 的含量
第四军医大学 ( 西安 7 10 0 32 ) 王晓娟 . 郭惠芳 王剑波
摘要 采 用 薄 层 扫 描 法 测 定了五灵 丸中五味醋甲与丹参酮 I A的含量 ,回收率分别为 98 . 3 4%,
C V = 2
.
1写 ; ” . 15 % , C V = 1 . 13 % 。 本法具有快速 、 简便 、 灵敏 、 重现性好的特点 。
关键词 薄层扫描法 五味醋甲 丹参酮 1人
五灵丸由五味子 、 灵芝 、丹参等中药组成 ,具有补肝益脾 ,改善肝血循环 ,减轻肝纤维化与
脂变 , 调节免疫的功能 。 主治急性病毒性肝炎 、 `漫性迁延性肝炎及其他原因所致的转氨酶升
高。 本文用薄层扫描法测定五灵丸中有效成分五味酷甲 、 丹参酮 l 人 的含量 ,方法重现性好 ,
简便灵敏 、 迅速 , 为该药内在质量控制提供有价值的参考 。
实验部分
1
.
1 仪器与药 品 : 日本岛津 C S一 9 0 0。型薄层扫描仪 , 硅胶及硅胶 G薄层板 ,烟 台化工科技 开
发试验厂 ; 微量定量点样管 , 美国 ; C Q 50 超声波清洗器 , _仁海 ; 五味酷 甲由 陕西省药检所提
供 ; 丹参酮 l 人购自中国药 品生物制品检定所 , 五灵丸由本科 自制 , 试剂均 为分析纯 。
1
.
2 实验条件的选择
1
.
2
.
1 对照液制备 : 精密称取五味酷甲 3 . 4m g , 置 5 m l容量瓶中 , 以甲醇溶解并稀释 至 刻
度 , 为 0 . 6 s m g / g 。
精密称取丹参酮 I 人 。 . 7 m g , 置 2m l容量瓶 ,一卜以氯仿溶解并稀释至刻度 , 为 o . 35 m g /m l 。
1
.
2
.
2 薄层条件 : 五味醋甲用硅胶G F : 。 `板 ( l o x 1c0 m )以环己烷一乙酸 乙醋 ( 7 : 4 )展 开 ,层
析结果在紫外灯 2 5 4n m 下观察 , 为无荧光斑点 ,见图 。 丹参酮 I A用硅胶 G板 ( 10 x 1 0c m ) ,
以苯一氯仿一丙酮 乏5 : 4 : 。 . 5 ) 展开 , 自然 光下显红色斑点 , 见图 。
1
.
2
.
3 扫描波长及有关仪器参数确定 : 五
OO00
味醋甲: 对照品斑点在紫外区 ( 2 0 0 ~ 40
n m ) 光谱扫描 , 最大吸收波长为 2 2 4 n m ,
最小吸收处在 3 1 0 n m , 确 定久s = 2 2 4 n m ,
孟R = 3 ] o n m , 反射法锯齿扫描 , s x = 3 , 最小
面积 x 0 0 0 。
丹参酮 I 人 : 对 照品斑点在可见区 ( 4 0
~ s o o n m ) 光谱扫描 , 最大吸收峰是通s s n m ,
为测定波长 。 反射法线性扫描 , 狭缝 6 . 4 X
l om m
,
S x = 3
, 扫描速度 Z o m m / m i n , 灵
…
}
l
1
!
卜
!一泛口 _ _ 介 _ _ _ _ 少 _ _ _ j
五员丸层析圈
敏度 x l , 最小面积 。
1
.
3 线性范围试验 : 五味脂甲 :
G F
: 5 、板上 ,按 _仁述层 沂条件展开
1 一五灵丸
圈
2
一五味子 3一五味醋甲 ` 一丹参 -5 丹参酮 五 ^
准确吸取对照液 2 、 4 、 6 、 s 、 10 、 1 2卜t l , 点 于 同 一 硅 胶
: 取出 , 凉 i几 , 住荧光灯下观察五味治甲色点位置 , _ f 机扫
.
A d d r e s s
:
W
a n g x i a o j
u a n , F o u r比 M i l i t a r y M e d i e a l U n i v e r s i t y , X i · a n
《 中草药 》 19 9 5午第 2 6卷第 3 期
描 , 以斑点的面积积分值对点样量如 g )作回归分析 . 得 回归方程 Y 二 } 2 2的 . : s x + 7 8 15 . 4 ,
r = 0
.
9 9 5 6
, 线性范围 1 . 3 6 ~ 6 . 5 0协g 。
丹参酮 亚A : 准确 吸取对照液 2 、 4 、 6 、 8 、 10 州点于同一硅胶 G 薄层板上 ,按 丹参 酮 l *
的层析条件展开 , 自然光下见丹参酮 l 人斑点为红色 , 上机扫描 , 以斑点面积积分值 对点样
量 ( 卜g ) 的回归方程为 : Y = 2 0 5 6 . 0 5 4 5 X + 9 9 9 . 5 2 , 相关系数 r = 0 . 9 9 9 1 。
1
.
4 稳定性试验 : 精密吸取五味酚甲对 照液 2件 , 6口 , 分点于薄层板上 , 展开后每 隔一 定
时间扫描测定峰面积积分值 , 结果测定至 24 h依然稳定 。 精密吸取丹参酮 l 人对 照液 4口 , 8卜
分点于薄层板上 , 展开后每隔一定时间扫描 , 4 h 内斑点面积积分值稳定 。
1
.
5 回收率试验 : 采用加样回收试验 。 五味酷甲 6次测定的平均回收 率为 9 8 . 3 % , C V =
2
.
1 %
。 丹参酮 I 6^ 次测定的平均回收率为 9 . 15 % , C V = 1 . 13 % 。
1
.
6 精密度试验 : 同一薄板不同斑点扫描测定 ,峰面积积分值变异系数五味酷甲 C V = 1 . 2%
(
n = 6 )
, 丹参酮 I ^ C V = 2 . 2% ( n = 6 ) 。
1
.
7 样品测定
1
. 了 . 1 样品溶液 的制备 : 五味子供试液 : 取五味子粉 ( 过 40 目筛 ) 置具塞试管 中 , 加 70 %
乙醇 10 . 0 m l , 混匀超声 20 m in , 振摇 , 过夜 , 取上清液点样 。
五灵丸供试液 ( a ) : 取 2丸 ,剪碎 , 混均 , 称取 2 . 0 09 , 置具塞试管 中 , 加 3 . 0 m l 水 泡
20 m in
, 分散后加 7 . o o m l无水乙醇超声 20 m in , 振摇放置过夜 , 取上清液点样 。
丹参供试液 : 取丹参药材粉末 ( 过 4 0目筛 ) 1 . 0 0 9 , 加乙醇 l o . o o m l , 超声 Z o m i n , 振
摇 , 放置过夜 , 取上清液点样 。
五灵丸供试液 ( b ) : 取 2丸剪碎混匀 , 称取 5 . 0 9 , 置具塞锥形瓶 中 , 加 l m l 水 浸 泡
l o m i n 使其分散 , 加一S l n l抓仿 , 摇匀 , 超声 2 5m i n , 过滤 ,药渣继续加 一Zm l氯仿超声 Z o m i n ,
过滤 ,用少量氧仿洗涤药渣 、 滤纸 ,合并滤液
与洗涤液 , 挥去氯仿 , 残渣加少 量 氯 仿 转
溶 于 l m l量瓶中定容 , 供点样用 。
1
.
7
.
2 测定方法 : 五味醋甲 : 采用外 标 两
点法 。 准确吸取五味子 、 五灵丸供试液 ( a )
各 1 0卜 1, 点于硅胶 G F : 5 4板上 , 并随行 点 五
味酷甲对 照液 2件 l 、 6时 同标准 曲线操钧 , 五
味醋甲含量见表 。
裹 原科及不同批号五灵丸中五味醋甲
与丹参酮 l 人的含 t ( n = 3 )
样 品 五味醋甲 ( m g / g ) 丹参酮 1 人 ( m g / g )
2
。
8 6 3
五灵丸 (4 批 ) 1 . 0 3 0 . 9 9 8
0
。
67 8 0
。
8 6 1
3
。
1 4 1
0
。
19 1 0
。
2 17
0
。
2 4 5 0
。
2 2 8
丹参酮 I A : 采用外标两点法 。 准确吸取丹参供试液 10时 , 五灵丸供试液 ( b ) 6时 , 分
点样于硅胶G 薄板上 , 随行点丹参酮 I A对 照液 2 、 4卜 l , 同标准 曲线操作 , 结果见表 。
2 讨论
五味子供试液制备 , 我们用了 60 % , 70 %及 95 % 乙醇 、 甲醇 、 氯仿提取 , 扫描 结果无显
著差异 。 五灵丸为大蜜丸 , 需加少量水使其分散 , 故选用 70 % 乙醇提取 。
对丹参药材和五灵丸用氯仿 、 乙醇 、 70 % 乙醇 、 甲醇 4种溶剂进行了提取率的比较 , 除
了o %乙醇提取率偏低外 , 其余结果无显著差异 。 因氯仿提取丸药可排除蜜的干扰 , 浓缩液的
提取浓度小 , 易于点样 , 所以五灵丸用少量水分散后 氛仿提取 。
( 19 9 3
一 1 2一 0 1收稿 )
1 3 2
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.
( o r ig i n a l a r t i e l e o n P a g e 1 2 9 )
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.
3么% ( C V 二 2 . 1 % ) a n d , , . 1 5% ( C V = 1 . 1% ) r e s P o c t i v e l y 。 T h i s m e t h o d 1 5 s i m P l e a n d r a p i d 。 I t s
r e P r o d u c i b i l i t y 15 s a t l s f a c t o r y
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( o r j g i n a l a i t i c l e o n P a g e 1 3 1 )
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E x t r a e t A 拼 y d a : i ” J n s i s r a i s e d t h e l e v e l s o f P l a s 沮 3 P r o t e i n s . P l a s 吐 a a l b u m i n w a s
r a i s e d r r o m 2
.
6 7 士 0 . 4` t o 3 . 2 5 土 0 . 3 4 9 / d l a n d t h e t o r a 一 p l a s m a p r o t e i n f r o m 5 . 5 4 士 o . s a t o
6
.
7遵士 1 . 3 5 / d l . 3 H 一 T d R a n d . 3 H 一 L o u c i n e i n c o r p o r a t i o n t e c h n i q u e s w e r e u s e d t o m , a s u r e t h e
s y n t h e s e s r a t e o f D A N a n d P r o t e i n
.
T h e r a t e s w a s a e c e l e r a t e d
.
T h e s P e e i f i c a c t iv i t i e s o f D N A
a n d P r o t e i n o f l i v e r g o t u P t o 3
.
9 0 士 1 . 4 1 f r o m 2 . 4 2 t o . 7 1 d P m /卜 g , a n d 2 1 . 6 9士 4 . 8 4 f r o m 1 2 . 8 1
士 5 . 5 3 d p m /卜: g , r e s p e e t i v e l y
.
T h o s e o f s P l e e n s o t u P t o 4 1
.
8 8 士 1 8 . 4 7 f r o m l , . 0魂士 1 0 . 5 4 d P m /卜 g
a n d 2 5
.
1 2士 4 . 3 5 f r o m 1 6 . 3 4士 7 . 0 1 d P m /协 g , r e s P e e t i v e l y
.
E x t r a c t A 协 y j a s i o e ” s ` 5 h a d n o e f f -
e c t o n D N A s y n t h o s i s o f b
o n e m a r r o w c e l l s a n d d i d n o t r a i s e t h e h e 血 o g l o b i n l e v e l i n m i c e .
T h e r o s u l t s s u g g e s t t h a * E x t r a e t A 爪夕d a s f ” e o s i s h a s b i o a e t i v e s u b s t a n e e t h a t a c c e l e r a t e
s y n t h c s e s o f D N A a n d P r o t e i n
。
( 0 r i g i n d l a r t i e l e o n P a g e 1 3 8 )
E f f e e t s o f S i n i D e e o c t i o n o n l s c h e m i c ( A
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P丁 o t e e t i v e e f f e e t s o f S D o n i s e h e m i c ( a n o x i c ) m y o c a r d i u m m a y b e r e l a t e d t o t h e s i g n i f i c a n J
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。
( o r i g i n a l a r t i c l e o n P a g e 1 4 1 )
S t u d i e s o n t卜e P h a r m a e o ! o g y 时 C a j a n i n P r e Pa r a t i o n
S u n S h a o m
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