全 文 :银杏内醋和银杏叶提取物对纹状体和边缘系统
多巴胺及其代谢产物含量的影响
沈阳药科大学 吴春福 游 松 刘 雯 徐 勇猛 李逢利 姚新生
摘要 应用高效液相色谱电化学检测方法 , 发现银杏内醋 给大鼠灌胃 , 能够升高纹状体
多巴胺 含量和 与二经苯乙酸 和高香草酸 比值 , 降 低 边缘系 统
含量 , 但升高 , 比值 。 银杏叶提取物 给大鼠灌胃 , 对纹
状体和边缘系统 比值有升高作用 。 提示银杏内醋和银杏叶提取物对大鼠纹状体和 边缘
系统 代谢有一定抑制作用 。
关键词 银杏内醋 银杏叶 提取物 多巴胺 纹状体 边缘系统
在银杏叶提取物中除含有较多黄酮贰类化合物外 , 银杏内醋也是其中一组具有较强生物
活性的菇类化合物〔 。 临床研究和实验室研究均证明银杳叶提取物能够促进大脑循 环 代 谢
〔 〕, 改善记忆功能〔一 〕, 抗动物实验性抑郁症〔〕等 。 银杏叶提取物还能够增加大鼠纹状体
含量 , 降低海马核一经叫噪乙酸含量〔 〕。 然而 ,有报道指出〔〕, 银杏叶对多种机体功能失
调的治疗作用似乎主要受其所含的银杏内醋与机体内活性物质相互作用的影响 。因此 ,研究银
杏内醋是否具有与银杏叶相似的作用及其在银杏叶治疗作用中的地位 , 对进一步 开发利用银
杏叶及阐明银杏叶的作用机理很有意义 。 今主要研究银杏内醋和银杏叶提取物对大鼠纹状体
多巴胺含量的影响 。
材料与方法
动物 雄性 大鼠 , 体垂 , 由沈阳药科大学实验动物室提供 。
给药与取材 大 鼠 只 , 随机分为 组 , 每组 只 。 分别灌胃给予溶媒 , 银杏内
醋 、 和银杏叶提取物 。 每天灌胃给药 次 , 连续 。 末次给药后 , 将
大鼠断头 , 迅速取出大脑 , 在冰台上分离出纹状体和边缘系统 包括中隔核 , 伏核和嗅核等部
位 。 称重后立即放入 卜冰冷的 高氯酸 中 含 和 半
胧氨酸 〔〕, 匀浆后高速离心 , , ℃ , 取上清液 卜直接注入高效 液
相色谱电化学检测系统 , 同时测定 及其代谢产物 和 含量 。
生化测定 测定条件如前报道〔‘”〕。 应用外标法定量 。
药物与试剂 银杏内醋 含量 以上 , 银杏叶提取物 含总黄酮 , 银杏 内 酷
由本校天然药物化学教研 室制备 。 用前 以 竣甲基纤维素钠混悬 。
盐酸多巴胺为瑞士 产品 , 二经苯 乙酸为 日本 产地 , 高香草酸为
美国 产品 。 其它所川试剂均为市售分析纯 。
结果
银杳内酚 灌胃给药 , 显著增加大 鼠纹状体 含量及 ,
比值 。 银杏内醋 及银杏提取物 对纹状体 含量仅呈增加趋势 尸
, 但使 比值升高 表 。
, ,
,
《中草药 》 年第 卷第 期 二 ·
银杏内菌和银杏叶提取物对大鼠纹状体含且的影响 协 湿组织 夕士
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人 人 人
对照组
银杏 内醋
银杏叶提取物
士 。
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士
。 士 。
。 士 。
。 士 。
。 士 。
。 士 。
。 士 。
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。 士 。
。 士0 。 1 4
1 3
。
3 6 士 1 。 8 2
1 3
。
1 2 士 1 。 7 5
2 1
。
1 1 士 7 。 4 5
1 5
.
6 8 士2 。 3 4
1 1
。
7 2 士 0 。 8 8
1 4
。
3 1 士2 。 3 2 .
1 5
.
8 9 土0 。 7 2 * 申
1 3
.
5 5 士 1 . 7 2 ,
注 : n 二 6 , 与对照组比较中尸< 0 . 05 中 ’尸< 0 .01 t检验 ( 下同 )
银杏 内醋及银杏叶提取物对边缘系统D A 水平无明显影响。 银杳内酷 10 m g/kg使 H V A
水平显著下降 , 对 D A /D O P A C 和 D A / H v A 比值有明显升高作用 。 s m g / k g 及银杏叶提取
物50 m g/ kg对边缘系统D A /H V A 有 明显升高作用 (表2 ) 。
裹 2 银杏内亩和银杏叶提取物对大限边缘系统O A含t 的影晌 ( 卜g /g 湿组织 )
组别 剂t
(过g / k g )
D A D O P A C H V A D A / D O P A C D A /H V A
对照组
银杏 内醋
10
银杏叶提取物 50
2 。 0 8 士0 。 2 3
2
。
2 7 士0 。 2 6
2
.
2 6 士 0 。 7 0
2
.
2 1 士0 。 4 5
0
。
2 1 土 0 。 0 5
0
。
2 3 士 0 。 0 4
0
。
1 9 士 0 .0 6
0 。 2 0 士 0 。 0 3
0
。
2 5 士 0 。 0 2
0
。
2 2 士 0 。 0 3
0
.
1 9 士0 .0 5二
0 。 2 2 土 0 。 0 8
9 。 9 8 士1 。 3 2
] 0
。
2 0 士1 。 7 0
1 1
.
8 4 士1 .2 8 .
1 1 。 2 5 士2 .0 6
8 . 2 4 士 1 。 0 7
1 0
.
3 4 士1 .2 1 二
11 .88 士2 .4 9 中 中
1 0 . 3 9 士 1 .8 3 申
3 讨论
神经递质与其代谢产物的比值可作为神经递质代谢的一个指标〔1 〕。 递质/代谢产物比值
的降低意味着递质更新率的增加c1 2〕。 结果显示银杏内酷或银杏叶提取物能够显著增加 D A /
D O P A C 和/或 D A /H V A 比值 , 提示银杏内醋和银杏叶提取物对纹状体和边缘系统D A 代谢
具有一定抑制作用 。
尽管许多研究证明银杏叶提取物可影响中枢神经系统功能〔‘~ “〕及大鼠脑中单胺 递 质 的
代谢〔7〕,然而对被称为血小板激活因子拮抗剂的银杏内酷在此方面的作用 的研究却很少 。 C I一
os t r e 〔13〕报道 ,银杏内醋的标准提取物B N 52063对强迫游泳所致小鼠行为绝望的不动时间具
有缩短作用 ,提示银杏内酷具有抗忧郁作用 。小鼠的这种绝望行为与中枢儿茶酚胺系统功能有
关〔1峨〕。 D A 拮抗剂 , 日一肾上腺素能拮抗剂 , 5 一经色胺能激动剂和拮抗剂均能对抗B N 52063对小
鼠绝望行为的影响〔, ”〕, 从 而 提 示 银杏内酷的抗忧郁作用与中枢单胺能神经系统有关 。 然
而 , 目前尚无证据显示银杏内酷对卜 , D A 或 5一经色胺受体结合有影响 , 对B N 52063的这 种
作用只能用血小板激活因子受体与 cA M P代谢系统的关系来解释 , 因为应用磷酸二醋酶 抑
制剂异丁基黄嚓吟增加脑内 。A M P 含量可以加强B N 52063的作用〔13〕。我们的实验结果 首次
表明银杏内醋能够干扰大 鼠脑中D A 代谢 , 尽管产生这种作用的机理尚不清楚 。 银杳内醋作
为公认的血小板激活因子拮抗剂 , 是否能通过影响血小板激活因子的膜效应而影响多巴胺能
系统的功能 , 值得进一步研究 。
本研究应用的银杏叶提取物含有6% 的银杏内醋 。 银杏叶提取物50 m g/k g对大鼠纹状体
和边缘系统的作用与银杏内醋sm g/k g的作用相似 。 因此推测在银杏叶提取物对中枢多巴胺
( 下转 第262页 )
. 254 .
量达1.65kg , 与P o7。相似 , 见表1。
2
.
2 获荃切片质量 比较: 从外观色泽 、
看 , F :均和2个亲本相似 , 无明显区别 ,
表1 胜合株与亲本的产t 比较
组织致密度 、 透明度 、 传统饮片收购等 级 等 项 来
见表2 。
表2 胜合株与亲本往等切片质 , 比校
菌株
号
最大个菩
(k g )
单窖最高产量(k g )
均产
(k g /窖)
空窖率
(% )
P 1 10
F 1 10
P .7a 10
0 。 5 5
1
。
6 5
l
。
5 5
0
.
fi 0 0
。
5 0 1 0
2
。
2 5 1
。
7 3 0
5
。
7 5 2
。
2 0 0
编号
P i
F -
P 一 , -
色泽
纯白
纯白
纯白
细密度
细密
细密
细密
透明度
半透明 网纹状
同上
同上
等级
1
1
窖数
注: 切片厚度1~ Zm m
3 讨论
鉴定融合菌株 , 我们除采用统计融合菌种菌丝体与亲本菌丝体的形态和生理状况的差异
外 , 还采 用了同功酶谱电泳分析法 。 同功酶是基因表达的直接产物 , 对不 同品系和个体其同
功酶可存在差异 。本试验用的融合种 ( F , ) , 在相 同条件下 , 出现浅色新谱带 , 在相 同谱 带
中 , 也有加深加宽的结果 , 显示了与亲本的差异 , 因而证明为融合种 。 从栽培试 验 的 结果
看 , 融合种的产量介于2个亲本之间 , 平均每窖产鲜荃 1.73 k g , 明显高于P l, 其个体成形好 ,
质量坚实 , 结荃大 , 但产量仍低于P 57 。 , 而P l则没有显示其以往栽培试验中的优势〔1〕, 显示
性状不够稳定 , 分析其原因可能与 1991 年栽培季节正遇安徽遭到特大洪灾 , 大别山区困于雨
水过 多 , 荃场条件变劣有关 。 由于杂种优势是一复杂的遗传现象 , 是多基因的综合结果 , 即
使在原生质 体融合技术中 , 我们筛选了异核体 , 并保证了它的纯度 , 但在多大比重上 , 实现
了基因重组或互补 , 并能在野外栽培试验中 , 稳定地 、定向表达出具有2个亲本的优良性状 , 成
为希望得到的 “ 目的融合子” , 还待进一 步探索 。
参 考 文 献
朱泉娣 , 等
王岳五 , 等
中草药 , 1 9 9 2
生物工程学报
23 ( 11 ) : 5 97
1988 , 4 ( 3 ) : 2 3
(
2 9 0 4
一0 2一 2 5收稿 )
(上接第254 页 )
代谢的影响中 , 银杳内醋可能起重要 作用 。
致谢: 陈大 为副教授 为本研完给予 大力 支持。
参
1 游 松 , 等. 沈阳药学院学报 , 1 9 8 8 , 5 : 14 2
2 L
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,
考 文
认
献
B areelona i, J . R . P r o u s S A , 1 9 8 8 ,
1
:
l
张林魁 , 等. 药学学报 , 1 9 5 7 , 2 2 ( 8 ) : 5 9 1
吴春福 , 等. 中药药理与临床 , 1 9 9 2 , 8 : 5
S
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1 9 7 9
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5 7
,
2 0 1
(
1 9 9 4
一0 5一0 7 收稿 )
. 262 .