全 文 ：广 西 植 物 Guihaia　Jul．２０１４,３４(４):４３６－４４１　　　　　　　　　　 http://journal．gxzw．gxib．cn　
DOI:１０．３９６９/j．issn．１０００Ｇ３１４２．２０１４．０４．００２
姚绍嫦,谢月英,黄雪彦,等．广西五种绞股蓝属植物离体快繁与种质保存研究[J]．广西植物,２０１４,３４(４):４３６－４４１
YaoSC,XieYY,HuangXY,etal．StudyonrapidpropagationandgermplasmconservationinvitrooffivespeciesofgenusGynostemmainGuangxi[J]．
Guihaia,２０１４,３４(４):４３６－４４１
广西五种绞股蓝属植物离体快繁与种质保存研究
姚绍嫦１,谢月英１,２,黄雪彦１,２,余丽莹１,２∗
(１．广西药用植物园,南宁５３００２３;２．广西药用资源保护与遗传改良重点实验室,南宁５３００２３)
摘　要:以绞股蓝属植物的带芽茎段为材料,研究不同６ＧBA浓度与NAA０．０２mg􀅰LＧ１组合对其诱导、分化和增
殖的影响,并建立离体快繁体系.结果表明:MS＋６ＧBA２．０mg􀅰LＧ１＋NAA０．０２mg􀅰LＧ１最适宜初代诱导,MS
＋６ＧBA２．０mg􀅰LＧ１＋NAA０．０２mg􀅰LＧ１最适合扁果绞股蓝的增殖培养,而 MS＋６ＧBA１．５mg􀅰LＧ１＋NAA０．０２
mg􀅰LＧ１是其它四种植物增殖的最佳培养基,在１/２MS＋NAA１．０mg􀅰LＧ１上的生根率均达１００％.１/２MS与蔗
糖４０g􀅰LＧ１对五种植物的保存效果均最好;添加生长抑制剂能有效减缓生长速度,最佳生长抑制剂为ABA和
CCC,浓度均为１．０mg􀅰LＧ１,其中CCC能适合多个物种,连续保存３６０d的存活率均在９４．５％以上;PP３３３不适合
五种植物的保存.活力检测表明,各种质经保存后增殖、生根能力均未下降.
关键词:绞股蓝;扁果绞股蓝;广西绞股蓝;光叶绞股蓝;长梗绞股蓝;组织培养;离体保存
中图分类号:Q９４３．１　　文献标识码:A　　文章编号:１０００Ｇ３１４２(２０１４)０４Ｇ０４３６Ｇ０６
Studyonrapidpropagationandgermplasmconservation
invitrooffivespeciesofgenusGynostemmainGuangxi
YAOShaoＧChang１,XIEYueＧYing１,２,HUANGXueＧYan１,２,YULiＧYing１,２∗
(１．GuangxiBotanicalGardenofMedicinalPlant,Nanning５３００２３,China;２．GuangxikeyLaboratory
ofmedicinalResourcesconservationandGeneticImprovement,Nanning５３００２３,China)
Abstract:Usingstemwithbudsasexplants,experimentswereconductedtoobservetheefectsofdifferentconcentraＧ
tion６ＧBAandNAA０．０２mg􀅰LＧ１oninduction,differentiation,proliferationofGynostemmainGuangxi,inorderto
establishtheirrapidpropagationsystems．Meanwhile,diferentconcentrationsofthemineralnutrition,sucroseand
plantgrowinhibitors(CCC,ABA,PP３３３)wereresearched．Theresultsshowedthatthebestinductionmediumwas
MSmediumsupplementedwith２．０mg􀅰LＧ１６ＧBAand０．０２mg􀅰LＧ１NAA．ThesuitableproliferationmediumforG．
compressumwasMS＋６ＧBA２．０mg􀅰LＧ１＋NAA０．０２mg􀅰LＧ１andMSmediumsupplementedwith１．５mg􀅰LＧ１６Ｇ
BAand０．２mg􀅰LＧ１NAAwasbestforothers．Therootingmediumwas１/２MSmediumwith０．０２mg􀅰LＧ１NAA,
accountingfor１００％ofrootingrate．１/２MSmediumandsucrose４０g􀅰LＧ１werethemostsuitablefortheconservaＧ
tioninvitroofalspecies．Plantgrowinhibitorscouldslowdownthegrowspeedefectively,andthebestkindand
concentrationwereABA１．０mg􀅰LＧ１andCCC１．０mg􀅰LＧ１．SeveralspecieswereinhibitedbyCCC１．０mg􀅰LＧ１and
thesurvivalratewasupto９４．５％afterbeingconserved３６０d．PP３３３wasnotsuitableforalspeciestoconservein
vitro．Vigortestingshowedthattheabilityofpropagatingandrootingoftheplantletsdidn’tfaldown．
Keywords:Gynostemmapentaphyllum;G．guangxiense;G．compressum;G．laxum;G．longipes;tissuesculture;
conservationinvitro
收稿日期:２０１３Ｇ１０Ｇ１４　　修回日期:２０１３Ｇ１２Ｇ０８
基金项目:广西科技攻关项目(桂科攻１１１０７０１０Ｇ３Ｇ３)
作者简介:姚绍嫦(１９８０Ｇ),女,广西容县人,硕士,高级工程师,主要从事药用植物组织培养及离体保存技术研究,(EＧmail)yaoshaochang＠１６３．com.
∗通讯作者:余丽莹,研究员,主要从事中药资源与物种保育研究,(EＧmail)yuliying＠vip．sina．com.
　　全世界已知绞股蓝属(Gynostemma)植物有１７
种,我国产１４种２变种,其中９种为中国特有种
(Wuetal．,２０１１),多数记载有药用功效,含有近
１００种皂甙、黄酮、氨基酸和多种微量元素,具有改
善血脂代谢,降低血脂血糖水平,延长细胞寿命,抗
疲劳、抗氧化、抗肿瘤等作用(Sameretal．,２００６;
Shangetal．,２００６;杨明辉等,２００６).目前用于医
药、饮料食品、化妆品、保健烟的开发和生产,具有成
熟的市场和较好的开发前景.绞股蓝属植物在中国
主要分布于云南、广西等西南地区,其中广西分布五
种,仅次于云南省.在广西,除绞股蓝(G．penＧ
taphyllum)和光叶绞股蓝(G．laxum)为广布种外,
扁果绞股蓝(G．compressum)、广西绞股蓝(G．
guangxiense)和长梗绞股蓝(G．longipes)均为广
西特有或中国特有植物(陈秀香等,２００９).
绞股蓝属植物在自然条件下以营养繁殖为主,
易感染病虫害,易与同属物种杂交,导致种质退化
(刘敏华等,２００１).国内外学者先后对绞股蓝(刘松
青等,２０００;Chenetal．,２００５)、广西绞股蓝(刘世彪
等,２０１２)、五柱绞股蓝(G．pentagynum)(刘世彪
等,２００７)有一定研究,但迄今仍未见光叶绞股蓝、扁
果绞股蓝和长梗绞股蓝等在组培快繁方面的研究报
道.２０世纪５０~６０年代,植物组织培养技术开始
出现,并得到不断完善和发展.而离体保存(conＧ
servationinvitro)通过植物组织培养技术实现了种
质资源的异地保存.在药用植物种质离体保存中,
为避免试管苗频繁继代造成污染和种质变异及流
失,降低费用和劳动力的消耗,通常通过调整培养基
养分水平、添加生长抑制物质等(周逊等,２００８)限制
试管苗生长的方法来延长继代间隔的时间和减少继
代的次数,如广西地不容(付传明等,２００７)、巴戟天
(李锋等,２００８)、铁皮石斛(史永忠等,１９９９)等.本
研究在成功建立绞股蓝属五种植物组培快繁技术的
基础上,采用限制生长法,通过调整培养基养分、渗
透压和添加植物生长抑制剂,掌握最适合绞股蓝属
五种植物试管苗保存的培养基配方,为实现种质资
源的中长期保存与可持续利用提供相关技术,指导
绞股蓝属其它物种离体种质保存.
１　材料与方法
１．１材料
绞股蓝、光叶绞股蓝、扁果绞股蓝、广西绞股蓝
和长梗绞股蓝,外植体均于２０１０－２０１１年采自广西
药用植物园绞股蓝种质保存圃.
１．２方法
１．２．１离体快繁研究
(１)无菌材料的获得:在晴好的天气采集新萌发
的粗壮嫩枝,自来水冲洗干净后,在超净工作台内进
行灭菌,用７５％酒精中浸泡１０s后,转入０．１％
HgCl２溶液中消毒６min,无菌水冲洗５遍后,将材
料切成长１．５~２．０cm带腋芽或顶芽的茎段,接入
初代培养基中培养.
(２)初代培养:将茎段接种到 MS＋不同浓度６Ｇ
BA＋NAA０．０２mg􀅰LＧ１的初代培养基上,５０瓶/处
理,１芽/瓶,观察记录诱导情况,３０d时统计芽诱导
率,筛选适合各物种初代诱导的培养基.
(３)继代增殖培养:将初代培养获得的不定芽切
下单个芽,转接到MS＋不同浓度６ＧBA＋NAA０．０２
mg􀅰LＧ１的继代培养基中进行增殖培养,２０瓶/处
理,３芽/瓶,观察记录不定芽的生长情况,２０d时统
计观察增殖系数,并筛选各物种继代增殖的最佳培
养基.
(４)生根培养:继代芽苗高长至２cm以上时,从
基部切成单个芽,转接到生根培养基１/２MS＋NAA
１．０mg􀅰LＧ１中,２０瓶/物种,２芽/瓶.观察记录不
定芽的生根情况,２０d时统计生根率.
(５)培养条件:培养基附加蔗糖３０g􀅰LＧ１,琼脂
５g􀅰LＧ１,pH值５．８.培养室温度(２６±２)℃、光照
强度３０００μmol􀅰m
–２􀅰s–１、光照时间１２h/d.
１．２．２离体种质保存研究
(１)不同无机盐浓度对保存的影响:分别以
MS、１/２MS、１/４MS、１/６MS为培养基,不添加任
何生长调节剂.将丛芽切成两叶一心高度一致的单
芽进行接种,２０瓶/处理,３芽/瓶,培养基附加蔗糖
３０g􀅰LＧ１,琼脂５g􀅰LＧ１,pH 值５．８.培养１８０、
２７０、３６０d,比较不同无机盐浓度对保存的影响.
(２)不同蔗糖浓度对保存的影响:采用１/２MS
为培养基,分别附加０、２０、４０、６０g􀅰LＧ１的蔗糖,不
添加任何生长调节剂.将丛芽切成两叶一心高度一
致的单芽进行接种,２０瓶/处理,３芽/瓶,培养基附
加琼脂５g􀅰LＧ１,pH值５．８.培养１８０、２７０、３６０d,
比较不同蔗糖浓度对保存的影响.
(３)不同植物生长延缓剂对保存的影响:以１/
２MS为基本培养基,分别添加不同浓度的矮壮素
(Chlormequat chloride,CCC)、多 效 唑 (PaＧ
７３４４期　　　　　　　　姚绍嫦等:广西五种绞股蓝属植物离体快繁与种质保存研究
clobutrazol,PP３３３)和脱落酸(abscisicacid,ABA),
将丛芽切成两叶一心高度一致的单芽进行接种,２０
瓶/处理,３芽/瓶,培养基附加蔗糖４０g􀅰LＧ１,琼脂
５g􀅰LＧ１,pH值５．８.培养３６０d比较不同植物生长
延缓剂对保存效果的影响.
(４)保存条件及观察记录:培养室温度(２０±
２)℃、光照强度２０００μmol􀅰m
–２􀅰s–１、光照时间
１０h/d.每隔９０d观察统计植株生长情况、生根情
况及存活率.
(５)保存种质的活力检测:将保存３６０d存活的
材料转接到继代增殖和生根培养基上,观察恢复生
长的情况.
２　结果与分析
２．１高频再生体系研究
２．１．１初代培养　由表１可知,不同浓度的６ＧBA均
能使带腋芽茎段诱导出丛生芽,但芽诱导率各异.
培养７d左右,接触培养基的部分开始出现少量愈
伤组织,且腋芽开始恢复生长.培养１０~１５d时,
在叶腋处诱导出具有４~５个小芽的丛生芽.切口
处出现的少量愈伤组织不分化形成芽.培养２０~
２５d时,形成３~５cm高的丛生芽丛.当６ＧBA为
２．０mg􀅰LＧ１时,丛生芽的诱导率最高,除广西绞股
蓝外,其它物种的诱导率均达１００％,且所需的时间
最短,芽生长速度快,无玻璃化现象.但当６ＧBA浓
度进一步增加到２．５mg􀅰LＧ１时,诱导率呈下降趋
势,广西绞股蓝和长梗绞股蓝开始出现玻璃化现象.
因此 MS＋６ＧBA２．０mg􀅰LＧ１＋NAA０．０２mg􀅰LＧ１
是对五种植物均适宜的初代诱导培养基.
２．１．２继代增殖培养　将初代培养的丛芽切成带单
芽、长约１cm茎段,接种于添加０．５~２．５mg􀅰LＧ１
６ＧBA和０．０２mg􀅰LＧ１NAA的 MS培养基中,培养
２０d结果表明(表２):各处理均能促进芽增殖,同一
物种各处理间的差异达到显著水平(P＜５％).６Ｇ
BA浓度为１．５~２．０mg􀅰LＧ１增殖较快,各物种的增
殖系数均超过６．６７,其中绞股蓝的最高(１４．２４).当
６ＧBA浓度为１．５mg􀅰LＧ１,除扁果绞股蓝外,其它的
物种均获得最高的增殖系数(图１:AＧE).当６ＧBA
浓度为２．０mg􀅰LＧ１,扁果绞股蓝获得最高的增殖系
数(１０．８６),其它物种的增殖系数反而降低.当６Ｇ
BA浓度为２．５mg􀅰LＧ１,各物种的增殖系数均进一
步降低.因此,MS＋６ＧBA１．５mg􀅰LＧ１＋NAA
０．０２mg􀅰LＧ１是绞股蓝、光叶绞股蓝、广西绞股蓝和
长梗绞股蓝增殖的最适培养基,而 MS＋６ＧBA２．０
mg􀅰LＧ１＋NAA０．０２mg􀅰LＧ１最适于扁果绞股蓝.
表１　不同质量浓度６ＧBA对绞股蓝属五种植物丛生芽诱导的影响
Table１　Effectsofdifferentconcentrationsof６ＧBAonclusterbudsinducingonfivespeciesofGynostemma
６ＧBA浓度 (mg􀅰LＧ１)
Concentration
of６ＧBA
NAA浓度 (mg􀅰LＧ１)
Concentration
ofNAA
芽诱导率 Rateofbudsinduced(％)
绞股蓝
G．pentaphyllum
光叶绞股蓝
G．laxum
扁果绞股蓝
G．compressum
广西绞股蓝
G．guangxiense
长梗绞股蓝
G．longipes
０．５ ０．０２ ８３．３３ ６６．６７ ５０．００ ４０．００ ３１．５４
１．０ ０．０２ １００．００ ８０．００ ６３．３３ ６６．６７ ５３．６７
１．５ ０．０２ １００．００ ８６．６７ ８３．３３ ７６．６７ ８６．６７
２．０ ０．０２ １００．００ １００．００ １００．００ ８６．６７ １００．００
２．５ ０．０２ １００．００ ９３．３３ ９６．６７ ８０．００ ７１．３３
２．１．３生根培养　绞股蓝属植物试管苗均较易生根,
绞股蓝等五种植物在１/２MS＋NAA１．０mg􀅰LＧ１的
培养基上均可长根,且根数量较多,粗壮,生长快,分
叉多,叶片平展浓绿,有利于试管苗的移栽(图１:
F).不同物种之间生根情况无明显差别.
２．２离体种质保存研究
２．２．１不同无机盐浓度对保存的影响　在不添加植
物生长调节剂的情况下,观察发现各物种对于无机
盐浓度的需求规律呈现一致的趋势(表３).保存
１８０d时,各物种在 MS和１/２MS这两种无机盐营
养水平下的保存效果差异不大,植株生长都较高大,
叶色绿,生长较好,存活率均在９０％以上,而当无机
盐浓度降至１/４MS和１/６MS时,各物种均表现出
植株纤细,叶色发黄,逐渐死亡的现象.继续保存至
２７０d与３６０d,MS和１/２MS均有存活的植株,但
从存活率来看１/２MS对保存最好.
２．２．２不同蔗糖浓度对保存的影响　从表３看出,不
同物种对蔗糖浓度的要求无明显差别,随着蔗糖浓
度的增加存活率均呈先上升后下降的趋势,当蔗糖
浓度为４０g􀅰LＧ１时保存１８０d均达到了最高的存活
率(１００％),继续保存至２７０d与３６０d时,存活率一
直保持最高.当蔗糖浓度增加到６０g􀅰LＧ１时,各物
８３４ 广　西　植　物　　　 　　　　　　　　　　　　　　３４卷
表２　不同质量浓度６ＧBA对绞股蓝属五种植物丛生芽增殖的影响
Table２　Effectsofdifferentconcentrationsof６ＧBAonclusterbudsinducingonfivespeciesofGynostemma
６ＧBA浓度 (mg􀅰LＧ１)
Concentration
of６ＧBA
NAA浓度 (mg􀅰LＧ１)
Concentration
ofNAA
增殖系数Proliferationcoefficient
绞股蓝
G．pentaphyllum
光叶绞股蓝
G．laxum
扁果绞股蓝
G．compressum
广西绞股蓝
G．guangxiense
长梗绞股蓝
G．longipes
０．５ ０．２ ３．９２e １．６７e ３．１６d １．６７e １．００e
１．０ ０．２ ６．５０d ３．４０d ２．５３e ３．３３d ６．３３c
１．５ ０．２ １４．２４a １０．５４a ６．６７b １２．１６a ８．６７a
２．０ ０．２ １３．１８b ８．６７b １０．８６a １０．４７b ７．６７b
２．５ ０．２ ７．３３c ６．９８c ５．１２c ８．００c ２．８０d
　注:同列数据后不同字母表示差异显著(P＜５％).
　Note:Datafolowedbydifferentletterswithinsamecolumnaresignificantlydifferentat５％level．
图１　绞股蓝属五种植物丛生芽增殖与生根情况
Fig．１　ClusterbudsinducingonfivespeciesofGynostemma
种的植株较矮小,叶色浓绿而且叶缘出现皱缩,存活
率均反而下降.在无蔗糖的培养基上,植株矮小细
弱,不生长,叶色黄,１８０d时植株已全部死亡.因
此,绞股蓝等５个不同物种在保存培养基中最适合
的蔗糖浓度为４０g􀅰LＧ１.
２．２．３　植物生长延缓剂对保存的影响　经植物生
长延缓剂处理的材料比未处理的生长速度明显减
慢,在未添加延缓剂的 MS培养基上,材料生长快,
节间长,植株高,叶片由下部开始逐步往上变黄死
亡,２７０d统计全部死亡.从表４看出,不同物种的
存活率随PP３３３浓度的增加均不断提高,随CCC和
ABA浓度的增加均先提高再下降.当CCC浓度为
１．０mg􀅰LＧ１时,不同物种的植株均生长缓慢,节间
较短,叶片绿,存活率高,其中绞股蓝、光叶绞股蓝和
广西绞股蓝保存３６０d的存活率达１００％.当ABA
浓度为１．０mg􀅰LＧ１时,不同物种的植株生长缓慢,
叶浓绿,不定根较多,存活率在８８．４％以上.添加
PP３３３虽然也能延缓试管苗的生长,但是与 CCC、
ABA相比效果较差,植株节间较短,侧根和根多且
根发生畸形膨大,叶片皱缩、下垂,植株衰老较快,存
活率较低.因此,１/２MS＋ABA１．０mg􀅰LＧ１最适
合扁果绞股蓝的保存,其它的品种在１/２MS＋CCC
９３４４期　　　　　　　　姚绍嫦等:广西五种绞股蓝属植物离体快繁与种质保存研究
表３　不同浓度无机盐与蔗糖对绞股蓝属五种植物保存效果的影响
Table３　Effectsofdifferentconcentrationsofthemineralnutritionandsucroseon
conservationinvitrooffiveGynostemmaspecies
处理
Treatment
存活率Survivalrate(％)
绞股蓝
G．pentaphyllum
１８０d ２７０d ３６０d
光叶绞股蓝
G．laxum
１８０d ２７０d ３６０d
扁果绞股蓝
G．compressum
１８０d ２７０d ３６０d
广西绞股蓝
G．guangxiense
１８０d ２７０d ３６０d
长梗绞股蓝
G．longipes
１８０d ２７０d ３６０d
无机盐
Mineral
nutrition
MS １００ ６８．３ ６．８ １００ ５７．３ ９．３ １００ ５１．８ １３．７ １００ ３６．７ ０ １００ ４２．５ １６．７
１/２MS ９５ ７５．６ １３．６ ９５ ６０．５ ２６．７ ９０ ５３．６ ３３．６ ９０ ４７．３ １１．６ ９５ ５３．５ ２３．５
１/４MS ７４．５ ３３．６ ０ ６６．８ ０ ０ ６７．３ ０ ０ ５６．４ ０ ０ ５８．２ ０ ０
１/６MS ５６．３ １５．７ ０ ３３．２ ０ ０ ２７．５ ０ ０ ３４．６ ０ ０ ３５．７ ０ ０
蔗糖
Sucrose
(g􀅰LＧ１)
０ ０ ０ ０ ０ ０ ０ ０ ０ ０ ０ ０ ０ ０ ０ ０
２０ ９４．２ ０ ０ ６８．２ ０ ０ ７５．９ ０ ０ ７７．１ ０ ０ ６５．５ ０ ０
４０ １００ ４６．８ ２５．６ １００ ５６．７ ３１．６ １００ ５７．３ ３５．２ １００ ６５．３ ３７．５ １００ ５４．２ ３３．６
６０ ８７．９ ３２．４ １３．３ ７８．２ ４８．４ １７．２ ８８．２ ５０．６ ２０．５ ８２．５ ３８．４ １８．４ ８３．１ ３６．８ １５．７
表４　CCC、PP３３３、ABA对绞股蓝属五种植物离体保存的影响
Table４　EffectsofCCC、PP３３３、ABAonconservationinvitrofiveGynostemmaspecies
种类 Type
浓度
Concentration
(mg􀅰LＧ１)
存活率 (３６０d)(％)
绞股蓝
G．pentaphyllum
光叶绞股蓝
G．laxum
扁果绞股蓝
G．compressum
广西绞股蓝
G．guangxiense
长梗绞股蓝
G．longipes
对照(CK) ０ ０ ０ ０ ０ ０
CCC
０．５ ３７．３ ３３．４ ３８．５ ４０．２ ３６．２
１．０ １００．００ １００．００ ８６．９ １００．００ ９７．４
２．０ ９５．４ ９０．７ ７４．２ ９３．５ ８８．６
PP３３３
０．５ ３１．７ ３６．６ ４２．３ ４３．５ ３５．３
１．０ ５８．１ ６９．２ ６６．７ ５６．２ ７４．５
２．０ ６９．４ ８７．３ ７１．２ ６８．３ ８３．６
ABA
０．５ ７２．５ ７７．０ ８０．０ ７５．３ ８８．１
１．０ ９０．３ ８８．４ ９４．５ ８６．３ ９１．２
２．０ ８５．６ ９１．７ ８０．３ ７８．５ ８３．１
１．０mg􀅰LＧ１均达到最佳保存效果.
２．２．１保存种质的活力检测　不同物种经３６０d离
体保存后其增殖系数和生根能力均未受显著影响,
继代第二代均能恢复原来水平.不同物种经８~１０
d继代培养均开始恢复生长,培养２０~２５d,各物种
的平均芽高为４~５cm,增殖系数为３~４,再将芽进
行第二次继代培养,培养２０~２５d时,平均芽高５~
６cm,增殖系数在７．４以上,达到了离体保存前的增
殖水平.将材料转接到生根培养基后,生根率均达
１００％.因此,ABA、CCC能用于绞股蓝等５个不同
物种离体种质的中长期保存.
３　讨论与结论
NAA０．０２mg􀅰LＧ１最利于绞股蓝的丛生芽诱
导及增殖(刘世彪等,２０１２;吴峰等,２００５).本研究
结果表明,６ＧBA浓度较高(１．５~２．０mg􀅰LＧ１),且丛
生芽诱导的６ＧBA浓度略高于增殖的,获得较好的
诱导和增殖效果.另外,除长梗绞股蓝的增殖系数
较低(８．６７)外,其它四种的均超过１０,其中以绞股蓝
的最高(１４．２４),大大超过了前人在绞股蓝组织培养
上的增殖系数(６~８).说明该属植物对６ＧBA比较
敏感,在一定范围内适当提高６ＧBA浓度可大大提
高绞股蓝属植物的增殖系数.
植物生长发育依赖外界养分的供给,如果养分
供应不足,植物生长缓慢,植株矮小.采用降低培养
基中的养分水平可有效地抑制细胞生长,达到保存
的目的.在红根草离体保存培养过程中,分生组织
培养的小植株在１/２培养基上保存３６０d存活率仍
达６７％(付传明等,２００７).在铁皮石斛的保存过程
中也出现了类似的现象(史永忠等,１９９９).本研究
也证明了１/２MS培养基是绞股蓝属５个不同物种
离体保存的最好培养基.
在离体保存过程中,糖类物质除了可提供培养
物生存和生长所需的碳源,还可调节培养基的渗透
压.培养基的渗透压较高时,可抑制培养材料的生
０４４ 广　西　植　物　　　 　　　　　　　　　　　　　　３４卷
长(潘瑞炽等,１９９５).在一定范围内,蔗糖浓度越
高,试管苗保存效果越好(周逊等,２００８).在不外加
蔗糖保存材料时,咖啡(Kartha,１９８１)、铁皮石斛(史
永忠等,１９９９)等能长时间成活,但试管苗素质差;添
加一定浓度蔗糖后,能明显改善试管苗素质,大大提
高成活率.本研究不加蔗糖时,５个物种的试管苗
均不生长,且逐渐死亡;在蔗糖浓度为４０g􀅰LＧ１下
试管苗生长健壮,３６０d时存活率仍达２５％;蔗糖浓
度为６０g􀅰LＧ１时,叶片下垂且皱缩,叶色浓绿,原因
可能是高浓度的蔗糖导致培养基的渗透强度过大,
试管苗吸水困难,说明此浓度不利于试管苗保存.
在培养基中添加适当的生长抑制剂,能达到抑
制试管苗生长的效果,延长培养物的保存时间,提高
试管苗素质和促进试管苗转接后恢复(潘瑞炽,
２００６).本研究不添加生长抑制剂,培养２７０d时试
管苗全部死亡.添加１．０mg􀅰LＧ１浓度的CCC或
ABA时,５个物种保存３６０d后存活率均在８６．３％,
原因可能是CCC与ABA能有效抑制细胞伸长生长
而使植株变矮、茎秆变粗,从而延长保存时间.
本研究通过比较绞股蓝等５个不同物种在组织
培养与离体保存上的培养基配方,发现除扁果绞股
蓝略有不同外,其它四种均可使用相同的培养基配
方进行组培快繁与离体保存,说明同属的不同植物
之间种质差异不大,现有的研究报道也表明五柱绞
股蓝等绞股蓝属植物在组织培养上的培养基配方与
本研究结果类似.因此,本研究结果还可以用于指
导绞股蓝属其它物种的组织培养与离体保存.
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