全 文 ：广 西 植 物 Guihaia　Nov．２０１３,３３(６):８５２－８５８　　　　　　　　　　 http://journal．gxzw．gxib．cn　
DOI:１０．３９６９/j．issn．１０００Ｇ３１４２．２０１３．０６．０２４
周长富,姚小华,林萍,等．基于转录组测序对油茶角鲨烯合酶基因的克隆及分析[J]．广西植物,２０１３,３３(６):８５２－８５８
ZhouCF,YaoXH,LinP,etal．SqualenesynthasegenecloningandanalysisofCamelliaoleiferabasedonRNAＧSeq[J]．Guihaia,２０１３,３３(６):
８５２－８５８
基于转录组测序对油茶角鲨烯合酶基因的克隆及分析
周长富,姚小华∗,林　萍,王开良,常　君
(中国林业科学研究院 亚热带林业研究所,浙江 富阳３１１４００)
摘　要:油茶是中国重要的木本油料树种,而角鲨烯在茶籽油中含量多少是茶油品质的重要指标,为提高油茶
角鲨烯含量,以油茶种子转录组测序为基础,根据Unigene设计SQS基因RACE引物,克隆出基因全长共１４９０
bp,开放阅读框１２６６bp,编码４２２个氨基酸,将氨基酸序列与其他植物SQS进行比对,构建进化树,分析物种间
进化关系,进行蛋白质的生物信息学分析,包括蛋白质结构特点、理化性质、氨基酸组成及稳定性分析;跨膜区域
分析;信号肽识别位点;磷酸化位点;二级结构及功能;结构域分析.通过转录组测序和荧光实时定量分析了
SQS基因在油茶种子发育各时期表达量变化规律,并提取各时期油脂,测定角鲨烯含量,发现两种基因表达量分
析方法的结果有一致的变化趋势,且与各月份间角鲨烯含量有相同的变化规律.证明了转录组测序的有效性,
并推测油茶角鲨烯合酶基因的表达量变化与角鲨烯含量的多少有直接关系,为后续从分子手段提高茶籽油中角
鲨烯含量提供了理论基础.
关键词:油茶;角鲨烯合酶;转录组测序;生物信息学分析;基因表达;角鲨烯含量
中图分类号:Q７５１　　文献标识码:A　　文章编号:１０００Ｇ３１４２(２０１３)０６Ｇ０８５２Ｇ０７
Squalenesynthasegenecloningandanalysisof
CameliaoleiferabasedonRNAＧSeq
ZHOUChangＧFu,YAOXiaoＧHua∗,LINPing,WANGKaiＧLiang,CHANGJun
(ResearchInstituteofSubtropicalForestry,ChineseAcademyofForestry,Fuyang３１１４００,China)
Abstract:Camelliaoleiferaisaveryimportantwoodyoiltree,thecontentofsqualeneisoneofmostimportantfactor
toevaluatequalityofintheC．oleiferaoil,toincreasethecontentofsqualenefrommolecularbiologymethod．ChanＧ
gesofSQSrelatedUnigeneamongseedsdevelopmentwereanalyzedbasedonRNAＧSeq,changesofthesuqaleneconＧ
tentinC．oleiferaoilamongseeddevelopmentalsotested．Theresultshowedthesamevariationlaw．SoSQSgene
RACEprimersweredesignedaccordingtoUnigene,andthefullengthSQSofC．oleiferawascloned,including
１４９０bpnucleotide,andtheORFis１２６６bplong,encoding４２２aminoacidssequence,whichwasblastedwiththatof
otherplants,thephylogenetictreeweremappedandanalyzed．ThenbioＧinformaticsofSQSwerestudied,including
structure,physicochemicalproperties,aminoacidcomposition,andtransＧmembranedomain,signalpeptiderecogniＧ
tion,phosphorylationsites,functionofsecondarystructureanddomainanalysis．Thegeneexpressionchangesfrom
AugusttoOctoberweresimilartothoseofsqualenecontentinseeds．Itisconcludedthatthegenesequenceencodes
tobeSQSofC．oleiferatheoreticaly,whichwasabasisforthefurtherstudyoffunctionalverificationandimproＧ
vingsuqalenecontentinC．oleiferaseedoil．
收稿日期:２０１３Ｇ０３Ｇ０３　　修回日期:２０１３Ｇ０６Ｇ０４
基金项目:国家科技支撑课题(２００９BADB１B０１);国家科技支撑项目(２００９BADB１B００)
作者简介:周长富(１９８３Ｇ),男,湖南浏阳人,在读博士研究生,从事经济林育种研究,(EＧmail)zhouchangfu５５＠１２６．com.
∗通讯作者:姚小华,研究员,博士生导师,从事经济林研究,(EＧmail)yaoxh１６８＠１６３．com.
Keywords:Camelliaoleifera;SQS;RNAＧSeq;bioinformaticsanalysis;geneexpression;squalenecontents
　　普通油茶(Camelliaoleifera)隶属于山茶科
(Theaceae)山茶属(Camellia),中国南方重要的木
本食用油料树种.茶油营养成分丰富,脂肪酸结构
合理,不饱和脂肪酸含量达９０％以上,优于橄榄油,
是一种健康型高级食用油(庄瑞林,２００８).油茶一
年种植,多年收获,且耐贫瘠,广泛分布在目前在中
国南方１１个省市,是一种重要的木本油料作物,为
有效破解我国食用油供应紧张、保障粮油安全起到
了积极作用,同时也是南方广阔干旱、贫瘠、板结、强
酸性红壤地区的良好生态树种(何方等,２００２).
茶籽油中含有丰富的活性物质,如αＧ生育酚、
甾醇、维生素等对油茶籽油营养保健作用以及油脂
的稳定性起着重要的作用.此外茶籽油中还含有较
高的角鲨烯含量,角鲨烯具有提高体内超氧化物歧
化酶(SOD)活性、增强机体免疫能力、改善性功能、
抗衰老、抗肿瘤等多种生理功能,是一种无毒性的具
有防病治病作用的生物活性物质,目前在生物保健
药的应用、化妆品生产得到很大的应用,其机构如图
１(赵振东等,２００４).
图１　角鲨烯结构
Fig．１　Structureofsqualene
　　角鲨烯(squalene)为类固醇生物合成途径中重
要的物质,是在角鲨烯鲨烯合酶(squalenesynＧ
thetase,SQS)的作用下催化两分子的法呢基二磷酸
结合成角鲨烯,然后在各种酶的作用下继续生成甾
醇、三萜类化合物.法呢基二磷酸是很多代谢合成
的底物,如半萜、二萜、三萜、甾醇等,因此鲨烯合酶
处于由法呢基二磷酸形成甾醇、三萜等化合物的分
支起点,催化甾醇和三萜类化合物合成的起始步骤,
其含量和活性决定了后续产物的产量,因此油茶中
角鲨烯合酶代谢活性将最终关系到茶油中角鲨烯产
量多少(图２).目前对模式生物酵母(Jenningset
al．,１９９１;Mookhtiaretal．,１９９４;Kennedyetal．,
１９９９)、拟南芥(Nakashimaetal．,１９９５;Kribiet
al．,２００４)SQS基因有较深入的研究,鲨烯合酶基因
突变对于酵母是致死的,必须依靠外源添加麦角固
醇才能存活,在烟草细胞培养物中加入真菌诱导子,
角鲨烯合酶的酶活性迅速降低,甾醇的生物合成和
积累受到抑制.目前已在多种植物中克隆并鉴定了
SQS基因,包括人参(Kimetal．,２０１１)、甘草(卢虹
玉等,２００７)、葡萄(郑祥正,２００７)、三七(吴耀生等,
２００７)、北柴胡(隋春等,２０１０)、黄芪(李振秋等,
２０１１)、青蒿(Jingetal．,２０１０)等.
图２　角鲨烯相关代谢途径
Fig．２　Metabolicpathwayofsqualene
　　当前油茶产业正以较快的速度发展,油茶品种
改良也更加受到科研工作者的重视,但目前油茶品
种培育主要侧重油茶产量和含油率的提高,对油茶
品质关注较少,且油茶品种基本是通过选优,进行无
性系测定后,选择出高产品种.然而良种选育受到
资源和环境的限制,目前已全国范围内进行多次的
选优,油茶良种选育基本进入了瓶颈期,采用杂交、
倍性育种和分子生物学手段不断提高油茶产量和品
质是将来油茶品种改良的发展方向,本研究以角鲨
烯合成关键基因角鲨烯合酶基因为研究对象,进行
基因克隆及序列分析,为今后进一步利用角鲨烯合
酶改良油茶品质打下基础.
１　材料与方法
１．１材料
研究材料采自浙江省金华市东方红试验林场６
３５８６期　　　　　　　周长富等:基于转录组测序对油茶角鲨烯合酶基因的克隆及分析
年生油茶林.分别于５~１０月下旬采集 “长林４
号”品种的种子,及时剥取种仁,保存于液氮中备用.
１．２RNA提取及cDNA的合成
采用trizol法分别提取６个时期植物材料的
RNA,采用Nanodrop２０００及琼脂糖凝胶电泳检测
RNA质量,保证RNA样品浓度≥４００ng/μL,２８S:
１８S大于１．８;每个月份分别以RNA为模板,用inＧ
vitrogenSuperScriptTMFirstＧStrandSynthesisSysＧ
temforRTＧPCR进行一链反转录用于荧光实时定
量.基于转录组测序分析,８月份角鲨烯合酶表达
量最高,因此将８月份样品用clontech公司的
SMARTerTMRACEcDNAAmplificationKit试剂
进行一链反转录用于角鲨烯合酶基因的克隆.
１．３角鲨烯合酶基因的克隆
将转录组测序结果的油茶角鲨烯合酶基因cDＧ
NA 片段进行 blastn,设计５′RACE 引物为 ５′Ｇ
GACCACGCCTCATTTTTACAACACCTCＧ３′,巢
式引物为５′ＧTACCACATGAAA AATGCCAGTＧ
CACGGTＧ３′;３′RACE 为 ５′ＧCAGAGGTGTTGＧ
TAAAAATGAGGCGTGGＧ３′,巢 式 引 物 ５′ＧCTＧ
GCTTTTTCGGAGCTTGGGAGAGGTTＧ３′.
第一轮PCR以反转录的cDNA为模板,采用
touchdown程序进行反应:①５cycles:９４℃３０s,７２
℃３min;②５cycles:７０℃３０s,７２℃３min;③２７
cycles:９４℃３０s,６８℃３０s,７２℃３min.第二轮
巢式PCR以第一轮PCR产物为模板,用巢式引物
进行反应,程序与第一轮一样.
１．４同源性分析及聚类分析
将克隆的油茶SQS基因编码区翻译成氨基酸序
列,采用ClustalX软件,对目前已经克隆SQS的植物
进行氨基酸序列进行了比对,并构建了SQS蛋白的
系统进化树,分析各物种SQS进行相似度大小.
１．５角鲨烯合酶基因生物信息学分析
选择生物学软件或网络服务器有针对性地进行
分析.用ProtParam 对基因编码的蛋白质结构特
点、理化性质、氨基酸组成及稳定性分析;用 TMＧ
pred工具分析跨膜区域分析;用signalP分析信号
肽识别位点;采用NetPhos２．０软件磷酸化位点;根
据 PredictProtein 工 具 二 级 结 构 及 功 能;interＧ
ProScan为分析工具结构域分析.
１．６基因表达量分析及油茶角鲨烯含量相关分析
以 Tublin alphaＧ３(TUBαＧ３)(引 物:FP:
５′ＧCCATGCC TTGGATCACATTTＧ３′;RP:５′Ｇ
TGGGGCCATTAATGTAGACGＧ３′)和 celulose
synthetaseA (CESA)(引物:FP:５′ＧAAGGACＧ
CGCTGATACTCGAAＧ３′;RP:５′ＧACACCATGＧ
GCCTGGAAATAAＧ３′)为内参,设计SQS的实时
定量引物(FP:５′ＧTTTCGCCCTCGTAATTCAACＧ
３′;RP:５′ＧCATGAAAAATGCCAGTCACG),在
ABI７３００RealTimePCRSystem(AppliedBiosysＧ
tems,FosterCity．CA,USA)进行荧光实时定量,
反应体积为２０μL,(１０μL２×SYBR􀆿PremixEx
TaqTM (Takara,Tokyo,Japan),０．４μL５０×RO×
referencedye,２μL稀释１５倍的一链cDNA,１０
μmol/L上下游引物各０．４μL和６．８μL超纯水).
反应程序为:at９５℃,３０s;９５℃for５sand６０℃
for３４s４０个循环,然后６０~９５℃做溶解曲线,每
０．３℃读取一次.
对转录组测序结果进行分析,比较 RPKM
(ReadsPerkbperMilionreads)在个月份间变化
情况.
RPKM＝
１０６C
NL/１０３
设RPKM(A)为UnigeneA的表达量,则C 为
唯一比对到 UnigeneA的reads数,N 为唯一比对
到所有 Unigene的总reads数,L 为 UnigeneA的
碱基数.RPKM 法能消除基因长度和测序量差异
对计算基因表达的影响,计算得到的基因表达量可
直接用于比较不同样品间的基因表达差异(MorＧ
tazavietal．,２００８).
由于７月份之前果实很难提取出油脂,所欲将
８~１０月的油茶种子烘干后正己烷提取种仁粗脂
肪,皂化油茶粗脂肪后,用气相色谱检测角鲨烯含量
(钟冬连等,２０１１).
２　结果与分析
２．１角鲨烯合酶基因的克隆
以cDNA为模板进行５′和３′端RACE,结果如
图３.３′端长５５６bp,５′端长４８８bp,然后重新设计
SQS上下游引物(分别为FP:５′ＧTCTACATTCGTＧ
GTCCGTCTCＧ３′;RP:５′ＧTGAGTTGAACTGCＧ
CAATCAGＧ３′),最后连接成完整的油茶角鲨烯合
酶基 因 cDNA 全 长 １４９０bp(genebank 编 号
JX２９０２０７),５′非编码区１６５bp,３′非编码区２３１bp
(不包括polyA),开放阅读框１２６６bp,编码４２２个
４５８ 广　西　植　物　　　 　　　　　　　　　　　　　　３３卷
氨基酸.
图３　油茶SQS基因１％琼脂电泳图
(左到右分别为:３′端RACE、５′端RACE和全长)
Fig．３　１％ AgargelelectrophoresisofSQSgene
２．２氨基酸序列同源性和聚类分析
利用DNAstar将油茶SQS基因核苷酸序列开
放阅读框翻译为氨基酸序列,全长４２１个氨基酸序
列(图４).
　　将油茶SQS氨基酸序列与其他植物序列进行
比对,通过比对发现各物种SQS间有８５．４６％的一
致性,其中８个长度大于５个氨基酸序列完全一致
(阴影区),最长为２００~２３８共３７个氨基酸,从３８１
~４２２为高度可变区(框格区),一致性非常低.图５
是各物种SQS系统发育树,从结果可以发现油茶与
柿的相似度最高,达到８８％,其次是葡萄和蓖麻,相
似度为８７％和８６％,与豆科的百脉根、大豆、黄芪、
甘草、苜蓿相似度为８５％,与三七、人参、北柴胡、刺
五加、葱木等五加科物种的相似度为８４％,与番茄、
马铃薯、墨西哥辣椒、烟草、睡茄等茄科物种相似度
为８２％、与远志科的远志相似度为８１％,与唇形科
的丹参相似度８０％、与石竹科的金铁锁、锦葵科的
陆地棉、菊科的黄花蒿和青蒿相似度为７９％,十字
花科的拟南芥相似度为７７％.
图４　氨基酸序列
Fig．４　Aminoacidsequence
２．３油茶角鲨烯合酶结构分析
２．３．１蛋白质理化性质分析　利用ProtParam对油茶
SQS进行理化性质分析,分析结果表明油茶SQS由
４２２个氨基酸组成,５０个负电荷氨基酸,５２个正电荷
氨基酸,其他３１９个氨基酸为中性,分 子 式 为
C２１６０H３４０３N５６９O６１２S３１,分子量为４８１２９．０,等电点是７．９
(碱性氨基酸多于酸性氨基酸);其中亮氨酸４３个含
量最高,占总量的１０．２％,丝氨酸仅有４个,占总量的
０．９％;不稳定系数为４６．７２,大于４０,较不稳定.
２．３．２跨膜区分析　利用TMpred工具分析油茶角
鲨烯合酶,发现该酶有两个跨膜区域,分别为２８９~
３１１和３９３~４１５个氨基酸残基,中间的３１２~３９２
个氨基酸残基位于膜内,其他氨基酸残基位于膜外
(图６).
２．３．３信号肽识别位点分析　利用signalP３．０采用
neuralnetworks(NN)方法对油茶SQS氨基酸序列
进行信号肽可能性分析,原始剪切 位 点 分 值
(Cscore)最高在第５３个氨基酸位置,分值为０．１２１,
综合剪切点分值(Yscore)在也第５３个氨基酸处最
大,为０．１２０,信号肽分值(Sscore)最大在第４９个氨
基酸位置,为０．１５０,第１~５２个氨基酸的平均
Sscore为０．１０８,１~５２个氨基酸平均信号肽与最大
剪接位点分值的平均为０．１１３,未达到阈值０．４５,因
此推断油茶SQS蛋白没有信号肽,不是分泌型蛋白
(图７).
２．３．４磷酸化位点分析　采用NetPhos２．０软件分析
SQS氨基酸中的丝氨酸(Serine)、苏氨酸(Threonine)
和酪氨酸(Tyrosine)翻译后一般磷酸化位点修饰.分
析结果表明,油茶SQS蛋白丝氨酸磷酸化位点１１个
(第４８、１８７、１９６、１９８、２５６、２８８、３３６、３５６、３６５、３７７、３８５
位),苏氨酸磷酸化位点５个(第７８、８３、１６１、３２５、３３４
位),酪氨酸磷酸化位点５个(第１５、１６５、２４３、２８０、３９４
位),序列中磷酸化位点见图８.
２．３．５二级结构及功能分析　根据PredictProtein工
具,分析出油茶角鲨烯７１％为螺旋结构,１．４％为直
链,２７．６％为loop环.共有１２个可能的二硫键形
成位点.
亚细胞定位于内质网膜上,参与甾醇生物合成、
５５８６期　　　　　　　周长富等:基于转录组测序对油茶角鲨烯合酶基因的克隆及分析
图５　SQS系统进化树
Fig．５　PhylogenetictreeofSQS
图６　油茶SQS跨膜区分析
Fig．６　TransmembraneregionofSQSinC．oleifer
异戊二烯生物合成、类固醇生物合成和脂类生物合
成的过程,也定位于细胞外参与分泌途径.
图７　油茶SQS信号肽识别位点分析
Fig．７　SignalpeptiderecognitionsitesofSQSinC．oleifera
图８　油茶SQS磷酸化位点分析
Fig．８　PhosphorylationsitesofSQSinC．oleifera
共检测出７种蛋白质功能位点,分别为３５４位
(NKSD)和３９５(NSTL)位起始的４个氨基酸为N糖
基化位点(NＧglycosylationsite),３８２(KRKS)位起始４
个氨基酸的cAMP、cGMP依赖的蛋白磷酸激酶位点
(cAMPＧandcGMPＧdependentproteinkinasephosphoＧ
rylationsite),１４４(TMR)、２５６(SVK)和３２５(TAK)位
３个氨基酸起始的蛋白激酶C磷酸化位点(CaseinkiＧ
naseIIphosphorylationsite),７８(TVED)、１６１(TIDD)、
１８７(SGSE)、３３４(TMSD)和３６５(SRLE)位起始４个氨
基酸的络蛋白激酶II磷酸化位点,第９(KHPDDF)位
起７ 个 氨 基 酸 始 的 络 氨 酸 激 酶 磷 酸 化 位 点,
２(GSLGAI)、１４８(GAGMAK)、１７７(GLGLSK)位起
始６个的氨基酸N酰基化位点,最显著的功能位点
是１６８(YCHYVAGLVGLGLSKL)为起始的１６个氨
基酸鲨烯、番茄红素合成酶位点.
２．３．６结构域分析　结构域是蛋白序列的功能、结构
和进化单元 ,本文以interProScan为分析工具,进
行序列比对方法分析油茶角鲨烯合酶结构域.
通过结构域分析,油茶SQS氨基酸序列有两个
主要功能结构域,４５~３２１号氨基酸序列的鲨烯/茄
６５８ 广　西　植　物　　　 　　　　　　　　　　　　　　３３卷
红素合成酶结构域,其中１６８~１８３具有极高的保守
性;３９４~４１４号氨基酸序列为跨膜结构域(图９).
２．４角鲨烯合酶基因表达量变化分析
对油茶种子７~１０月份转录组测序分析,共检
测出两条角鲨烯合酶相关 unigene,分别是 uniＧ
gene２９９４７和unigene６３５５９.表达量情况如图１０,
两个unigene各月份表达量变化趋势完全一致,从
７~８月份逐渐升高,从８~１０月一直下降.以
CESA和TUBαＧ３为内参对SQS进行荧光实时定
量的两个结果基本一致,结果表明,５~６月份稍微
降低,然后一直上升,到８月份达到最高峰,再逐步
下降,直到１０月种子成熟.结果表明荧光实时定量
和转录组测序从７月开始,变化趋势基本一致.
提取８~１０月份油茶籽种仁的油脂,并检测油
脂中角鲨烯含量,分析结果如图１１.从图１１中可
以看出,８月份角鲨烯含量为２５９１μg/g,９月为
１２３９μg/g,１０月份成熟时为３２６μg/g.随着种子
成熟,角鲨烯含量呈下降趋势.
图９　油茶SQS结构域功能分析
Fig．９　DomainsofSQSinC．oleifera
图１０　油茶种子各月份SQS表达变化图　A．以CESA、TUBαＧ３及两个内参平均后的SQS荧光
实时定量相对表达量;B．转录组测序结果中两个unigenesRPKM值.
Fig．１０　SQSexpressionofC．oleiferaseedsfrom MaytoOctober
３　结论与讨论
油茶SQS基因克隆是基于油茶种子各生长期
转录组测序结果为基础,转录组测序出两条SQS相
关的unigene,通过比对,两者具有重叠部分,且克隆
出全长SQS后发现,两条unigene都能完全比对到
SQS上,说明提取RNA过程中,可能存在RNA断
裂,或测序不完全、拼接不对等原因,导致转录组测
序结果中不同的unigene其实为只是cDNA中不完
全的一部分.
通过氨基酸序列比对,发现８个长度大于５个
氨基酸序列的完全保守区域,这也与功能位点和结
构域分析得到应正,大部分功能位点都定位在高度
保守的区域,其中典型的功能位点鲨烯、番茄红素合
成酶位点长度为１６个氨基酸,比对的３０个物种中
这１６个氨基酸序列完全一致.
对分属五桠果、蔷薇、石竹和菊亚纲的１５个科３０
个物种SQS进行系统进化树分析,按科分类,SQS进
化树与形态分类学中物种亲缘关系结果基本吻合,以
８７．５％相似度为分割点,可将３０个物种划分为１４类,
除油茶与柿外,其他１３类各为一个科,油茶和柿同属
于五桠果亚纲,且在分类系统中,柿科为山茶科有很
近的亲缘关系,因此油茶SQS与柿SQS同源性也最
高,划为一类.按照亚纲来分类,SQS与形态学分类
有较大的分歧,油茶所属的五桠果亚纲与蔷薇亚纲葡
萄、豆科和五加科物种的SQS相似度很高,但与五桠
果亚纲的绞股蓝、陆地棉和拟南芥却相似度相对较
低.推测SQS在进化过程中速度与形态上不完全一
致,但同属科的物种SQS保守性很高,进化极慢.
７５８６期　　　　　　　周长富等:基于转录组测序对油茶角鲨烯合酶基因的克隆及分析
图１１　８~１０月油茶油脂中角鲨烯含量
Fig．１１　SuqlanencontentsfromAugusttoOctober
inC．oleiferaseedsoil
通过对油茶SQS生物信息学分析,发现油茶
SQS是一种中性偏酸性的蛋白质,稳定性不高,C端
有一段跨膜区域,附着与膜上,主要的功能位点和结
构域都在膜外起作用,功能蛋白,N端没有信号肽识
别位点,不属于分泌性蛋白,共有２１个可能的磷酸
化修饰位点,从而敏感可逆调节油茶SQS在不同组
织,不同时期发挥功能大小.
通过油茶种子转录组测序SQSunigene的RPＧ
KM值及荧光实时定量相对表达量的变化趋势基本
吻合,间接说明油茶种子转录组测序有效性.与角
鲨烯浓度变化规律比较表明,从８~１０月份基因表
达量与角鲨烯浓度变化完全一致,说明角鲨烯含量
的大小很大程度由SQS基因表达来决定,后期应人
工构建油茶SQS基因不同的表达载体,转化到模式
生物中,以超表达和干扰的形式控制基因表达,进一
步确定油茶SQS基因的功能及表达模式.
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