全 文 ：书广 西 植 物 Ｇｕｉｈａｉａ　３２（４）：５６７－５７０　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 ２０１２年 ７ 月 　
ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００－３１４２．２０１２．０４．０２７
少花龙葵茎总黄酮提取工艺及其抗氧化性研究
贤景春，吴伟军
（泉州师范学院 化学与生命科学学院，福建 泉州３６２０００）
摘　要：采用乙醇浸提法对Ｓｏｌａｎｕｍ　ｐｈｏｔｅｉｎｏｃａｒｐｕｍ 茎总黄酮的提取工艺及其抗氧化性能进行了研究，探讨
了溶剂浓度、温度、提取时间、料液比等因素对总黄酮含量提取的影响，并采用正交实验对提取工艺进行优化。
结果表明，最佳提取工艺参数乙醇浓度为４０％，提取温度为８０℃，时间为１ｈ，料液比１∶１６（ｇ∶ｍＬ）。在此
条件下测得总黄酮含量为４．３９ｍｇ／ｇ，提取物对羟自由基具有较好的清除效果。
关键词：少花龙葵；黄酮；抗氧化性
中图分类号：Ｏ６５７．３　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１０００－３１４２（２０１２）０４－０５６７－０４
＊ Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｏｔａｌ　ｑｕａｎｔｉｔｙｆｌａｖｏｎｅ　ｆｒｏｍＳｏｌａｎｕｍ
ｐｈｏｔｅｉｎｏｃａｒｐｕｍａｎｄ　ｉｔｓ　ａｎｔｉｏｘｉｄａｔｉｏｎ　ａｃｔｉｖｉｔｙ
ＸＩＡＮ　Ｊｉｎｇ－Ｃｈｕｎ，ＷＵ　Ｗｅｉ－Ｊｕｎ
（Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　ａｎｄ　Ｌｉｆｅ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｑｕａｎｚｈｏｕ　Ｎｏｒｍａｌ　Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｑｕａｎｚｈｏｕ　３６２０００，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｏｔａｌ　ｑｕａｎｔｉｔｙ　ｆｌａｖｏｎｅ　ｆｒｏｍＳｏ－ｌａｎｕｍ　ｐｈｏｔｅｉｎｏｃａｒｐｕｍａｎｄ　ｉｔｓ　ａｎｔｉｏｘｉｄａｔｉｏｎ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｗｅｒｅ　ｓｔｕｄ－
ｉｅｄ．Ｔｈｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｏｆ　ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ　ｔｏｔａｌ　ｑｕａｎｔｉｔｙ　ｏｆ　ｆｌａｖｏｎｅ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｍｅｎｓｔｒｕｕｍ，ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ，
ｔｉｍｅ，ｒａｔｉｏ　ｏｆ　ｍａｔｅｒｉａｌ　ｔｏ　ｌｉｑｕｉｄ　ｄｉｓｃｕｓｓｅｄ．Ｍｅａｎｗｈｉｌｅ，ｔｈｅ　ｂｅｓｔ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ｆｏｒ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｗｅｒｅ　ｃｈｏｓｅｎ　ａｆｔｅｒ　ｃｏｍｐｌｅｔｅ
ｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ａｎａｌｙｓｉｓ．Ｔｈｅ　ｂｅｓｔ　ｐａｒａｍｅｔｅｒｓａｒｅ　４０％ｅｔｈａｎｏｌ　ａｓ　ｅｘｔｒａｃｔａｎｔ，ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｏｎ　８０℃，ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｔｉｍｅ　ｂｙ　１ｈ，
ｒａｔｉｏ　ｏｆ　ｍａｔｅｒｉａｌｔｏ　ｌｉｑｕｉｄ　ｏｎ　１∶１６．Ｉｎ　ｔｈｉｓ　ｃａｓｅ，ｔｈｅ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｒｅａｃｈｅｄ　ｕｐ　ｔｏ　４．３９ｍｇ／ｇ．Ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｓ．
ｐｈｏｔｅｉｎｏｃａｒｐｕｍｈａｄ　ｔｈｅ　ｓｔｒｏｎｇ　ａｎｔｉｏｘｉｄａｔｉｖｅ　ｅｆｆｅｃｔｉｏｎ　ｏｎ　ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ　ｈｙｄｒｏｘｙｌ　ｒａｄｉｃａｌ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｓｏｌａｎｕｍ　ｐｈｏｔｅｉｎｏｃａｒｐｕｍ；ｆｌａｖｏｎｅ；ａｎｔｉｏｘｉｄａｔｉｏｎ　ａｃｔｉｖｉｔｙ
　　少花龙葵，别名白花菜，为茄科植物，生长于山
野、荒地和田间，我国南方和北方都有分布。少花龙
葵含有酚类、鞣质、生物碱、萜类内酯、糖及其苷类、
氨基酸、蛋白质、皂苷和生物碱等（段志芳等，２００８）。
具清热解毒、利尿散血消肿之功，常用于痢疾、淋证、
目赤、喉痛、疔疮等（邓汝铭等，１９９９）。
龙葵中含有黄酮类化合物，但对其黄酮提取的
系统性研究目前还没有相关报道。黄酮具能降低血
管，改善血管的通透性，也可用于防治老年性高血压
和脑溢血、抗肿瘤、有抗癌、免疫调节、降血糖、抗氧
化、抗衰老、抗辐射等作用（黄兴贤等，２０１１；姜国芳
等，２００４）。本文以乙醇浸提法研究了少花少花龙葵
黄酮最佳提取的工艺条件及其对羟自由基的清除作
用，为少花龙葵的开发和应用提供一定理论依据。
１　材料和方法
１．１材料与仪器
少花龙葵（采自泉州师范学院山上）；芦丁（中国
药品生物制品检定所）；硝酸铝（天津市水大化学试剂
开发中心）；七水合硫酸亚铁（汕头市西陇化工有限公
司）；亚硝酸钠、３％双氧水（上海联试化工试剂有限公
＊ 收稿日期：２０１１－１１－２６　　修回日期：２０１２－０４－１８
基金项目：泉州市科技计划项目（２００７Ｎ４）［Ｓｕｐｐｏｒｔｅｄ　ｂｙ　Ｑｕａｎｚｈｏｕ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　Ｐｌａｎｎｉｎｇ　Ｐｒｏｊｅｃｔ（２００７Ｎ４）］
作者简介：贤景春（１９５５－），女，教授，吉林镇赉人，主要从事配位化学研究，（Ｅ－ｍａｉｌ）ｘｊｃ０１９＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎ。
司）。７２１Ｅ型可见分光光度计（上海光谱仪器有限公
司）；电子天平（北京赛多利斯仪器系统有限公司）。
１．２总黄酮含量的测定
１．２．１样品的浸提　将少花龙葵洗净晾干后取其
茎，在６０℃下烘干，粉碎，过６０目。准确称取处理
好的上述粉末１．００ｇ，按照实验条件进行浸提，再对
浸提后的样品进行冷却抽滤，残渣用乙醇溶液洗涤
且与滤液合并，用乙醇溶液定容于５０ｍＬ的容量瓶
中备用。
１．２．２标准工作曲线的制作　用移液管分别准确吸
取０．１０ｍｇ／ｍＬ的芦丁对照液０．００、０．５０、１．００、
２．００、３．００、４．００、５．００ｍＬ于１０．００ｍＬ容量瓶中，
分别加入０．３ｍＬ　５％亚硝酸钠溶液，摇匀，静置６
ｍｉｎ；再加入０．３ｍＬ　１０％硝酸铝溶液，摇匀，静置６
ｍｉｎ；再加入４．００ｍＬ　４％氢氧化钠溶液，用乙醇溶
液定容至刻度，摇匀，静置１２ｍｉｎ，以试剂作空白，
于５１０ｎｍ处测吸光度。回归方程：Ｙ＝－０．００４６７＋
１２．９０１０２　Ｘ，Ｒ２＝０．９９９１。
１．２．３总黄酮测定方法　由于黄酮类物质能与铝离
子生成紫红色络合物，以蒸馏水为空白组，采用可见
分光光度法测定其含量（李胜华等，２００８）。从浸提
液中用移液管量取１ｍＬ于１０ｍＬ的容量瓶，向其
加入０．３ｍＬ的 ＮａＮＯ２ 溶液，静置６ｍｉｎ，再加入
０．３ｍＬ的 Ａｌ（ＮＯ３）３ 溶液静置６ｍｉｎ，最后加入４
ｍＬ　ＮａＯＨ溶液静置１２ｍｉｎ后，在５１０ｎｍ处测其
吸光度Ａ。
１．２．４提取条件优化　对植物黄酮提取，不同条件
下测得的提取率不同，影响因素较多。在提取过程
中，主要考虑了溶剂浓度、提取温度、提取时间和料
液比４个主要因素。确定适宜水平后，进行正交试
验，对提取条件进一步优化，确定最佳提取工艺（王
敏等，２００６）。
表１　因素水平表
Ｔａｂｌｅ　１　Ｆａｃｔｏｒ　ａｎｄ　ｌｅｖｅｌ　ｏｆ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ
水平
Ｌｅｖｅｌ
Ａ浓度
Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ
（％）
Ｂ温度
Ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ
（℃）
Ｃ时间
Ｔｉｍｅ
（ｍｉｎ）
Ｄ料液比
Ｒａｔｉｏ　ｏｆ　ｍａｔｅｒｉａｌ
ｔｏ　ｌｉｑｕｉｄ（ｇ∶ｍＬ）
１　 ３０　 ６０　 ６０　 １∶１２
２　 ４０　 ７０　 ９０　 １∶１６
３　 ５０　 ８０　 １２０　 １∶２０
１．２．５抗氧化性试验　参照Ｆｅｎｔｏｎ反应的方法（林
丹英等，２００７），在１０ｍＬ的容量瓶中依次加入９
ｍｍｏｌ／Ｌ的 硫 酸 亚 铁，８．８ ｍｍｏｌ／Ｌ 双 氧 水，９
ｍｍｏｌ／Ｌ的水杨酸—乙醇溶液各１ｍＬ，加蒸馏水定
容，并在３７℃的超级恒温槽恒温１５ｍｉｎ，取出在
５１０ｎｍ处测吸光度Ａ０。取５个同样为１０ｍＬ的容
量瓶，依次分别加入９ｍｍｏｌ／Ｌ的硫酸亚铁，８．８
ｍｍｏｌ／Ｌ双氧水，９ｍｍｏｌ／Ｌ的水杨酸—乙醇溶液各
１ｍＬ，再分别加入０．５、１、１．５、２、２．５ｍＬ的少花龙
葵茎提取液，加蒸馏水定容至１０ｍＬ，在３７℃恒温
１５ｍｉｎ，在５１０ｎｍ处测吸光度ＡＸ。清除率＝（Ａ０－
ＡＸ）／Ａ０×１００％。
２　结果与分析
２．１乙醇浓度对黄酮提取的影响
用４０％，５０％，６０％，７０％，８０％的乙醇溶液，在
温度为６０℃，料液比为１∶１５（ｇ∶ｍＬ），浸提９０
ｍｉｎ，乙醇浓度对黄酮提取的影响如图２所示。由
图可知，随着乙醇浓度的提高，黄酮含量是先增加后
减小，当乙醇浓度为４０％时出现峰值，较适浓度范
围为３０％～５０％。
２．２料液比对黄酮提取的影响
料液比为１∶８、１∶１２、１∶１６、１∶２０、１∶２４ｇ／
ｍＬ，温度为６０℃，乙醇浓度为５０％，时间９０ｍｉｎ，
料液比对黄酮提取的影响如图２所示。随着料液比
的提高，黄酮提取量先增加后减小，在料液比为１︰
１２时出现了最大值。
２．３提取时间对黄酮提取的影响
在温度为６０℃，乙醇浓度５０％，料液比为１∶
１５，提取３０、６０、９０、１２０、１５０ｍｉｎ。提取时间对黄酮
提取量的影响如图１所示。随着提取时间的延长，
黄酮提取量先增加后减小，在提取时间为９０ｍｉｎ时
最大值。
２．４温度对黄酮提取的影响
在乙醇浓度５０％，料液比为１∶１５，时间为９０
ｍｉｎ，温度为４０、５０、６０、７０、８０℃的条件下提取，温
度对黄酮提取的影响见图１。可以看出，随着提取
温度的提高，总黄酮的提取量先增加后减小，在提取
温度为７０℃时为最大。
２．５正交试验结果
正交试验结果见表２。从表２可看出，不同因
素对总黄酮提取影响的大小顺序是：Ｃ（时间）＞Ｂ
（温度）＞Ｄ（料液比）＞Ａ（乙醇浓度）。最佳工艺是：
Ａ２Ｂ３Ｃ１Ｄ２，乙醇浓度４０％，温度８０℃，提取时间６０
ｍｉｎ，料液比１∶１６。为了考察最佳条件的可靠性和
合理性，在此条件下，进行三组平行实验，测得黄酮
８６５ 广　西　植　物　　　 　　　　　　　　　　　　　　３２卷
图１　浓度、时间、温度、料液比对黄酮提取的影响
Ｆｉｇ．１　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｅｔｈａｎｏｌ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ，ｔｉｍｅ，ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ａｎｄ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ｓｏｌｉｄ　ｔｏ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ　ｏｎ　ｔｏｔａｌ　ｆｌａｖｏｎｅ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ
表２　正交试验结果
Ｔａｂｌｅ　２　Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ｔｅｓｔ　ｆｏｒ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ
编号
Ｎｏ． Ａ　 Ｂ　 Ｃ　 Ｄ
黄酮含量
Ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ
ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ（ｍｇ／ｇ）
１　 １　 １　 １　 １　 ４．２８９
２　 １　 ２　 ２　 ２　 ４．０５７
３　 １　 ３　 ３　 ３　 ３．７８５
４　 ２　 １　 ２　 ３　 ３．９７９
５　 ２　 ２　 ３　 １　 ３．７４７
６　 ２　 ３　 １　 ２　 ４．５２２
７　 ３　 １　 ３　 ２　 ３．７４７
８　 ３　 ２　 １　 ３　 ３．７８３
９　 ３　 ３　 ２　 １　 ４．２５０
Ｋ１ １２．１３１　１２．０５１　１２．５９４　１２．２８６
Ｋ２ １２．２４８　１１．５８７　１２．２８６　１２．３２６
Ｋ３ １１．７８０　１２．５５７　１１．２７９　１１．５４７
ｋ１ ４．０４４　 ４．０１７　 ４．１９８　 ４．０９５
ｋ２ ４．０８３　 ３．８６２　 ４．０９５　 ４．１０９
ｋ３ ３．９２７　 ４．１８６　 ３．７６０　 ３．８４９
Ｒ　 ０．１５６　 ０．３２４　 ０．４３８　 ０．２６０
平均提取量为４．３９２ｍｇ，优化结果比较理想。
２．６对羟基自由基的清除作用
按照１．２．５的方法测定了提取物对羟基自由基
的清除作用，结果见图２。当黄酮浓度为０．０２２８ｍｇ／
ｍＬ时，清除率可达７０．３０％，说明清除能力较强，比
一般的二色补血草花、大蓟刺儿菜花高，与金色补血
草花、大蓟刺儿菜花要高些（吴冬青等，２００８）。
图２　少花龙葵提取物对自由基的清除效果
Ｆｉｇ．２　Ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　Ｓｏｌａｎｕｍ　ｐｈｏｔｅｉｎｏｃａｒｐｕｍ
ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｏｎ　ｈｙｄｒｏｘｙｌ　ｒａｄｉｃａｌ
３　结论
本研究表明，少花龙葵中含有较多的黄酮类化
合物。浓度、温度、时间和料液比对黄酮提取均有较
大影响。影响的大小顺序为：时间＞温度＞料液比
＞乙醇浓度。最佳工艺是：乙醇浓度４０％，温度８０
℃，提取时间６０ｍｉｎ，料液比１∶１６。少花龙葵茎提
取物的抗氧化性进行证实，该植物对羟基自由基有
很好的清除作用，进一步为少花龙葵可作为新的天
然植物药用资源提供了科学依据。
９６５４期　　　　　　　　　贤景春等：少花龙葵茎总黄酮提取工艺及其抗氧化性研究
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檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽
５１４－５１７
（上接第５１５页Ｃｏｎｔｉｎｕｅ　ｆｒｏｍ　ｐａｇｅ　５１５）
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旱秧大田期需水特性与节水灌溉指标研究）［Ｊ］．Ｓｃｉ　Ａｇｒｉｃ
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（不同灌水方式对水稻结实期一些生理性状和产量的影响）
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ｅｎｃｅｓ　ｉｎ　ａｍｙｌｏｓｅ　ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ｏｆ　ｍａｊｏｒ　ｅｎｚｙｍｅｓ
ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｓｔａｒｃｈ　ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｄｕｒｉｎｇ　ｇｒａｉｎ　ｆｉｌｉｎｇ　ｉｎ　ｒｉｃｅ（水稻
籽粒灌浆过程直链淀粉的积累及其相关酶的品种类型间差
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ａｎａｌｙｓｉｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｐｒｏｃｅｓｓ　ｏｆ　ｇｒａｉｎ　ｆｉｌｉｎｇ　ｉｎ　ｒｉｃｅ（水稻籽粒灌浆的生长
分析）［Ｊ］．Ａｃｔａ　Ａｇｒｏｎ　Ｓｉｎ（作物学报），１４（３）：１８２－１９２
０７５ 广　西　植　物　　　 　　　　　　　　　　　　　　３２卷