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高效液相色谱法测定茄科植物废弃物中茄尼醇



全 文 :工作简报
高效液相色谱法测定茄科植物
废弃物中茄尼醇
高 敏 , 杨 磊 , 祖元刚*
(东北林业大学 森林植物生态学教育部重点实验室 , 哈尔滨 150040)
摘 要:采用高效液相色谱法对我国东北地区茄科植物废弃物马铃薯 、茄子 、番茄和辣椒的叶片
中茄尼醇进行了定性和定量分析。结果表明:马铃薯和茄子的叶片中茄尼醇质量分数较高 ,分别可
达到 0.331%和 0.207%;番茄和辣椒的叶片中茄尼醇的质量分数分别为 0.092%和 0.089%。方
法的线性范围为 0.61 ~ 6.10μg ,回收率为 99.5%~ 103.3%。
关键词:高效液相色谱法;茄科作物;农业废弃物;茄尼醇;叶
中图分类号:O657.7   文献标识码:A   文章编号:1001-4020(2007)06-0454-03
HPLCDetermination of Solanesol in Waste of Solanaceae Plants
GAO Min , YANG Lei , ZU Yuan-gang*
(Key Laboratory of Forest P lant Ecology Subsidized by the Ministry o f Ed ucation ,
Northeast Forestry University , Harbin 150040 , China)
Abstract:HPLC was applied to the identification and determination of solanesol in leaves o f so lanaceae plants
(i.e.po tato , eggplant , tomato and capsicum)g row n in the no rthea stern par t o f our countr y.I t w as found tha t
contents of so lane so l in po tato and eggplant leaves were rela tively high , achieved to values of (w)0.331% and
0.207% respectively and that only (w)0.092% and 0.089% of solanesol we re found in leave s o f tomato and
capsicum respectiv ely.Linearity r ange of the propo sed me thod was from 0.61-6.10 μg , and re sults of recovery
test w ere in the r ange from 99.5%-103.3%.
Keywords:HPLC;So lanaceae plants;Agricultural w aste;So laneso l;Leaves
  茄科植物是目前地球上第三大重要的经济作
物 ,也是目前最重要的蔬菜作物 ,与人们生活密切相
关的农作物马铃薯 、番茄 、茄子 、辣椒都属于茄科植
物。这些农作物在收获果实后 ,茎叶再无任何重要
应用价值 ,一般都被作为废弃物烧掉或自然腐烂掉 。
我国目前每年蔬菜废弃物 1亿吨 ,绝大多数没有被
作为一种资源利用 ,随意丢弃或者排放到环境中 ,使
一部分“资源”变为“污染源” ,对生态环境造成了极
大的影响[ 1] 。
收稿日期:2006-08-03
基金项目:科技部中德政府间合作项目(CHN03/ 028);科技部
 科研条件升级改造项目(JG-2004-09)资助。
作者简介:高敏(1981-),女 ,黑龙江哈尔滨人 ,主要从事天然
 产物化学研究。
*联系人
茄尼醇(Solanesol)是九聚异戊二烯伯醇 , 属四
倍半萜烯醇 ,分子式为 C45H 74O[ 2] 。茄尼醇具有独
特的链状隔离多烯结构 ,是合成多种心血管疾病治
疗药物 、抗癌药物和抗溃疡药物的重要中间体 ,如合
成辅酶 Q 10 、维生素 K 2 和茄呢胺类化合物等[ 3-5] 。
茄尼醇本身还具有抗菌 、消炎和止血作用 ,茄尼醇目
前主要是通过从茄科植物(Solanaceae)烟草的叶片
中提取分离而获得[ 6 , 7] 。文献[ 8 , 9] 报道马铃薯这
种茄科植物的叶片中含有茄尼醇 ,但未见产业化报
道以及同科其他植物茄尼醇含量情况报道 。本文通
过高效液相色谱法(HPLC)对我国东北地区茄科植
物废弃物马铃薯 、茄子 、番茄和辣椒的叶片中的茄尼
醇进行了定性和定量分析 ,确定不同品种 ,不同状态
茄科植物废弃物叶片中茄尼醇含量 ,并以烟叶为对
照比较茄科植物废弃物作为茄尼醇生产原料的潜在
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理化检验-化学分册 高敏等:高效液相色谱法测定茄科植物废弃物中茄尼醇
开发价值 。
1 试验部分
1.1 主要仪器与试剂
DK-98-Ⅰ电子恒温水浴锅;Waters 1525 型高
效液相色谱仪;Water s 2487 型紫外检测器检测;
RE-52A 型旋转蒸发水浴槽;SHB-Ⅲ循环水式多用
真空泵。
乙腈和异丙醇为色谱纯 ,其余试剂均为分析纯 。
1.2 样品的制备
取干燥茄科植物叶片粉碎并筛分 , 取 300 ~
450 μm粉末 ,加入平底烧瓶中 ,然后按料液质量比 1
∶5.3加入石油醚(60 ~ 90 ℃),于 70 ℃水浴回流
提取 2 h ,提取 5次 ,合并 5次提取液 , 50 ℃减压浓
缩至提取液的三分之一 , 再加入同体积的 30 g ·
L
-1氢氧化钠甲醇溶液 ,70 ℃水浴皂化 3 h ,冷却静
止分层 ,液液分离 ,甲醇加入等量石油醚萃取 3次 ,
合并石油醚相 ,备用 。
1.3 测定条件[ 10]
HiQ sil C18W 色谱柱(4.6 mm ×250 mm ,
5μm)色谱柱 ,乙腈 、异丙醇(以体积比 8比 7)等度
洗脱 ,洗脱流速为 1.5 mL·min-1 ,柱温为30 ℃,检
测波长 215 nm ,进样体积 10 μL。
2 结果与讨论
2.1 线性关系
移取 0.61 g · L-1茄尼醇标准溶液 1 , 3 , 5 , 7 ,
10 μL依次进样进行测定 ,对茄尼醇的浓度(x)与对
应的峰面积(Y)进行线性回归 , 回归方程为:Y =
11 225 531.0 x +19 873.9 , r=0.999 0。茄尼醇的
质量浓度在 0.61 ~ 6.10μg范围内呈线性。
2.2 重现性与精密度
称取同一品种的马铃薯叶 5 份 ,按 1.2 节方法
制备样品 。按色谱工作条件进行分析 ,以峰面积定
量 ,相对标准偏差(n=6)为 0.23%。
取同一品种马铃薯叶的样品溶液按色谱条件 ,
每次进样 5 μL , 重复进样 6 次进行测定 ,平均值
(n=6)为 0.427 g · L-1 , 标准偏差为 0.012 g ·
L-1 ,RSD为 2.8%。
2.3 回收率试验结果
分别吸取马铃薯叶样品溶液 2.5 mL ,分别加入
0.137 0 ,0.274 0 , 0.412 0 , 0.549 0 ,0.686 0 mg 茄
尼醇标准品溶液 ,定容至 5 mL ,离心取上清液 ,进样
分析 ,茄尼醇的加样回收率为 99.5%~ 103.3%。
2.4 茄科植物废弃物叶片中茄尼醇含量
不同茄科植物废弃物叶片的 HPLC谱图如图 1
所示 ,5种叶片的谱图均为在相同吸光度(纵坐标)范
围下测得的 ,茄尼醇的保留时间为7.312 min。从图 1
可以看出 ,所选的几种茄科植物废弃物叶片中均不同
程度含有茄尼醇 ,其中烟叶(4.37 mg ·g-1)、马铃薯
叶(3.31 mg · g-1)和茄子叶(2.07 mg ·g-1)中含量
较 高 , 而 辣 椒 叶 (0.89 mg ·g-1)和 番 茄 叶
(0.92 mg ·g-1)中含量较低 。马铃薯在我国种植广
泛 、集中 ,收集容易 ,以马铃薯叶片作原料生产茄尼醇
具有良好的发展前景。
1.辣椒叶片(the leaves of capsicum)
2.番茄叶片(the leaves of tomato)
3.马铃薯叶片(the leaves of potato)
4.茄子叶片(the leaves of eggplant)
5.烟草叶片(the leaves of tobacco)
图 1 茄科植物废弃物叶片中茄尼醇的色谱图
Fig.1 Ch romatogram of solanesol in leaves
of solanaceae plants
2.5 不同产地 、不同品种的马铃薯叶片中茄尼醇
含量
试验结果表明:辽宁鞍山地区种植的马铃薯叶
片中茄尼醇含量最高 ,吉林榆树地区种植的马铃薯
叶片中茄尼醇含量次之 ,黑龙江哈尔滨地区种植的
马铃薯叶片中茄尼醇含量最低的趋势 。由此可以推
断东北地区范围内马铃薯叶片中茄尼醇含量有受地
域纬度或气温影响的倾向 ,即低纬度地区或温暖地
区的茄尼醇质量分数较高 ,高纬度地区或寒冷地区
的茄尼醇质量分数较低 。由实验室实验园种植的马
铃薯的测定结果可看出 ,马铃薯品种不同 ,茄尼醇质
量分数也有所不同 。克新 13 号为 3.31 mg · g-1 ;
鲁引 1号为 2.18 mg · g -1 ;早大白为 3.12 mg ·
g-1 ;东农 303 为 2.55 mg · g-1 ;克新 4 号为
2.92 mg · g-1 ;兴加 1号为 2.02 mg · g-1 ;克新 12
号为 3.11 mg ·g -1 ;紫花白为 1.80 mg · g-1 ;大西
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理化检验-化学分册 高敏等:高效液相色谱法测定茄科植物废弃物中茄尼醇
洋为 2.73 mg · g-1 ;内薯 3号为 2.64 mg · g-1 。
2.6 马铃薯的不同部位中茄尼醇的含量
分别取马铃薯早大白和克新 1号的叶 、侧茎 、主
茎和根各 30g 进行试验 ,结果见表 1 。结果表明 ,马
铃薯叶片的茄尼醇含量最高 ,且远大于侧茎 、主茎和
根中的茄尼醇含量。
表 1 马铃薯的不同部位中茄尼醇的含量(n=3)
Tab.1 The content of solanesol in different parts of potato
品种
Variety
植物部位
Part of plan t
茄尼醇总含量
Total solanesol content
w/(mg· g -1)
早大白 叶 3.12
侧茎 0.96
主茎 0.83
根 0.20
兴加 1号 叶 2.02
侧茎 0.96
主茎 0.18
根 0.19
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(上接第 453页)
2.5 校准曲线
按试验条件 ,利用扩散电流对辛硫磷进行测定 ,
辛硫磷浓度在 4×10-5 ~ 8×10-4mol· L-1之间与
其峰电流 Ip 呈线性关系 。回归方程(c为 10-4mol
· L-1)为:Ip =8.128 c +14.46 , 相关系数为
0.997 6 。
2.6 样品的测定结果
称取市售辛硫磷颗粒剂 0.198 7 g ,用酒精溶
解 ,过滤 ,用酒精稀释至 50 mL 作为样品溶液 。取
样品溶液 2 mL ,加入 B-R缓冲液 2 mL , 0.1 mol ·
L-1氯化钾溶液 2 mL ,稀释至20 mL ,在最佳条件下
测定扩散电流 ,共测定 6次。校准曲线法计算结果 ,
样品中辛硫磷的质量分数(n=6)为 3.42%, RSD 为
1.7%;同时进行辛硫磷标准加入回收试验 ,加入
5.0 mg ·L-1辛硫磷 标准 , 回收率 (n =4)为
98.6%~ 103.6%。
用电感耦合等离子发射光谱法进行结果对
照[ 6] ,测得辛硫磷的质量分数为 3.34%,与本法结
果基本一致。
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