全 文 ：4种堇菜科植物中绿原酸含量的比较
黄美娥 , 卓儒洞 , 晏 丽　(吉首大学城乡资源与规划学院 ,湖南张家界 427000)
摘要　[目的 ]比较 4种堇菜科植物中绿原酸的含量 ,为充分利用堇菜科植物资源提供必要的理论依据。 [方法 ]采用紫外可见分光光
度法 ,于 325nm波长处测定 4种堇菜科植物中绿原酸含量。 [结果]绿原酸含量在 0～ 0.024mg/ml范围内呈现良好的线性关系(R2 =
0.999 0),平均加样回收率为 92.26%。 4种堇菜科植物中绿原酸的含量分别为:辽宁堇菜 19.40mg/g、毛堇菜 17.09mg/g、紫花地丁
14.09mg/g、深山堇菜 10.95mg/g。 [结论] 4种堇菜科植物中辽宁堇菜绿原酸含量最高 ,达 19.40mg/g。
关键词　堇菜科;绿原酸;含量比较
中图分类号　S567.23+9　　文献标识码　A　　文章编号　0517-6611(2009)34-16851-02
StudyonDeterminationofChlorogenicAcidinFourKindsofViolaceae
HUANGMei-eetal　(ColegeofResourcesandPlanningSciencesofJishouUniversity, Zhangjiajie, Hunan427000)
Abstract　[ Objective] ThechlorogenicacidcontentsinfourkindsofViolaceaewerecompared, whichprovidedanessentialtheoreticalrefer-
enceformakinguseofViolaceaeresource.[ Method] ChlorogenicAcidcontentwasdeterminedatthewavelengthof325nmbyUV-visible
spectrophotometry.[ Result] Thecalibrationcurveshowedgoodlinearityintherangeof0to0.024mg/ml(R2 =0.999 0), theaveragespike
recoverywas92.26%.Thecontentsofthechlorogenicacidwere19.40 mg/ginViolarossiHemsl., 17.09mg/ginViolaconfuseChamp.,
14.09mg/ginViolaphilippicaCav.(ViolayedoensisMakino), 10.95mg/ginViolaselkirkiPursh.[ Conclusion]Thehighestcontentofchloro-
genicacidwas19.40mg/ginViolarossiHemsl.
Keywords　Violaceae;Chlorogenicacid;Contentcomparision
基金项目　湖南省科学技术厅科技计划项目(05JT1075)。
作者简介　黄美娥(1974 -), 女 ,湖南张家界人 , 副教授 ,从事植物资
源开发与利用研究。
收稿日期　 2009-07-22
　　堇菜科植物多数功效相似 ,具有清热解毒 、凉血消肿之
功效 ,民间广泛用于痈疽疮毒 、毒蛇咬伤 、狗咬伤;还可用于
治疗风热咳嗽 、肺痨 、哮喘 、鼻炎 、角膜炎 、咽炎 、乳腺炎 、风湿
病等 [ 1] 。堇菜科植物中含有黄酮类 、香豆素 、萜类 、有机酸 、
酚性成分 、甾醇 、糖类 、氨基酸 、多肽 、黏液质 、蜡 、挥发油等多
种成分 [ 2] 。其中有效成分绿原酸具有促进胃液分泌 、利胆 、
清除自由基和抗脂质过氧化等药理学作用 [ 3-5] 。笔者对 4
种堇菜科植物中绿原酸的含量进行比较 ,旨在为充分利用堇
菜科植物资源提供理论依据。
1　材料与方法
1.1　材料　野生毛堇菜 、辽宁堇菜 、深山堇菜 、紫花地丁 ,均
于夏季采集生长于湖南省张家界市的植物全草 ,清洗后分别
将其表面水分沥干 ,置恒温干燥箱中 40 ℃干燥至恒重 ,粉碎
过 40目筛 ,保存 ,待用。
绿原酸标准品(湖南省林产化工重点实验室提供)、乙醇
(化学纯)。
WT-150粉碎机 、CS101-3D电热鼓风干燥箱 、4504MP-微
量电子天平 、B-8200超声波处理仪 、DSY-2-4孔电热恒温水
浴锅(北京国华医疗器械厂)、岛津 UV-160A分光光度计 。
1.2　方法
1.2.1　溶液的配制 。
　　(1)对照品溶液的制备。精密称取绿原酸标准品 5.30
mg于 100 ml容量瓶中 ,用浓度 60%乙醇定容至浓度为 0.053
mg/ml,备用 。
(2)供试品溶液的制备。称取样品 2.00 g,加入浓度
60%的乙醇 20 ml,超声处理 30 min,过滤 ,定容至 100 ml,
备用。
1.2.2　最大吸收波长的确定 。取一定量的标准品和样品溶
液分别放入 25ml的容量瓶中 ,用浓度 60%乙醇定容 ,摇匀 ,
用 UV-160A型紫外分光光度计在 200 ～ 800 nm范围内扫描
鉴别 ,得紫外光谱图。
1.2.3　标准曲线的建立。分别吸取对照品溶液 0、2.00、
4.00、6.00、8.00、10.00、12.00ml于 25ml容量瓶中 ,定容 ,摇
匀 ,于 325nm波长处测吸光度。以对照品浓度为横坐标 ,吸
光度为纵坐标 ,绘制标准曲线。
1.2.4　样品溶液的制备。称取 2.00 g样品 3份 ,加入浓度
60%乙醇 30 ml,超声波提取 20min,过滤 ,定容 ,备用 。
1.2.5　稳定性试验。取样品溶液 2ml于 25ml容量瓶中 ,用
浓度 70%乙醇定容 ,摇匀 ,测定 0 ～ 5 h内吸光度值的变化
情况。
1.2.6　精密度试验。取对照品溶液 1 ml共 5份 ,分别于 25
ml容量瓶中 ,用浓度 70%乙醇定容 ,摇匀 ,测定吸光度 ,计算
相对标准偏差(RSD)。
1.2.7　回收率试验。将已知含量的样品溶液中加入一定量
的标准品 ,按以上比色方法测定吸光度 ,计算加样回收率。
1.2.8　重现性试验 。称取 2.00 g样品 5份 ,按供试品溶液
制备方法制备 5份样品溶液 ,测定其吸光度 ,计算 RSD。
1.2.9　4种堇菜科植物样品中绿原酸含量的测定。采集野
生毛堇菜 、辽宁堇菜 、深山堇菜 、紫花地丁 4种堇菜科植物样
品 ,经预处理后 ,分别称取其粉末 ,加入浓度 60%乙醇 24 ml,
超声提取 30 min,过滤 ,定容至 100 ml,取 1ml定容至 25ml,
于 325 nm处测定吸光值 ,计算绿原酸的含量 。
2　结果与分析
2.1　最大吸收波长的确定结果　由图 1可知 ,样品液图谱
与标样液图谱均在 325 nm附近有一最大吸收峰 ,说明样品
液中含有绿原酸成分 ,且其检测波长可选 325 nm。
2.2　标准曲线的建立结果　按条件绘制标准曲线(图 2),
其曲线方程 Y=50.071 0X-0.018 9, R2 =0.999 0。结果表
明 ,标准品的浓度在 0 ～0.024mg/ml的范围内与吸光值有良
好的线性关系。
安徽农业科学 , JournalofAnhuiAgri.Sci.2009, 37(34):16851-16852 责任编辑　张杨林　责任校对　傅真治
DOI :10.13989/j.cnki.0517-6611.2009.34.087
图 1　紫外扫描结果
Fig.1　Ultravioletabsorptiondetectorresults
图 2　标准曲线
Fig.2　Standardcurve
2.3　稳定性试验结果　稳定性试验结果表明 ,当反应时间
为 0、1、2、3、4、5 h时 ,吸光度分别为 0.397、0.408、0.411、
0.412、0.428、0.429。可知紫花地丁中绿原酸含量测定值随
着时间的延长呈上升趋势 ,但在 5 h内其含量测定值变化极
小(RSD=2.976%),表明样品溶液在 5 h内稳定。
2.4　精密度试验结果 　精密度试验结果表明 , RSD为
0.777%,说明试验精密度高 ,数据精确可靠。
2.5　回收率试验结果　由表 1计算得知 ,该方法的平均回
收率为 92.26%,说明回收率较高 ,用紫外分光光度法测定紫
花地丁中绿原酸含量的过程中绿原酸损失的量较少 ,该法所
得结果较好。
表 1　绿原酸回收率的测定结果
Table1　Measuresresultsofrecoveryratioofchlorogenicacid
序号Serialnumber
样品中绿原酸的量∥μgSamplecontentofchlorogenicacid
加入量μgAdditionaccount
测得量∥μgDetectedaccount
回收率∥%Recoveryratio
1 67.80 55 118.6 92.36
2 67.11 55 119.0 94.35
3 71.26 55 121.4 91.16
4 48.66 55 98.8 91.16
2.6　重现性试验结果　重现性试验结果表明 ,用紫外分光
光度法测定绿原酸含量 , RSD为 1.379%,说明结果重现性较
好 ,数据可靠 。
2.7　4种堇菜科植物样品中绿原酸的含量　试验结果表明 ,
4种堇菜科植物样品中绿原酸含量差别较大 ,毛堇菜 、辽宁堇
菜 、深山堇菜和紫花地丁中绿原酸含量分别为 17.09、19.40、
10.95、14.09mg/g,其含量高低依次为辽宁堇菜 >毛堇菜 >
紫花地丁 >深山堇菜。辽宁堇菜绿原酸含量最高 ,而深山堇
菜含量最低。
3　结论
利用紫外分光光度法比较测定 4种堇菜科植物中绿原
酸成分 , 4种堇菜科植物中绿原酸的含量差别较大 ,以辽宁堇
菜绿原酸含量最高 。该测定方法样品处理简单 ,线性关系和
重现性好 ,结果可靠 ,操作简单快速 ,可应用于堇菜科植物资
源开发利用方面的研究。
参考文献
[ 1] 王旭红 ,秦民坚 ,佘国奠.堇菜属药用植物资源研究概况与资源利用前
景 [ J].中国野生植物资源 , 2003, 22(4):36-37.
[ 2] 姚霞,罗秀珍,谢忱.堇菜属植物化学成分和药理作用研究进展 [ J].医
药导报 , 2008, 27(7):782-786.
[ 3] 全国中草药汇编编写组.全国中草药汇编(上册)[ M] .北京:人民卫生
出版社 , 1978:553-554.[ 4] 陈启洁,吴姝菊 ,李君霞, 等.紫花地丁的开发利用与栽培技术研究
[ J].国土与自然资源研究 , 2004(1):95-96.
[ 5] 杜桂玲.紫花地丁治疗早期疖肿体会[ J] .江西中医药 , 1996(2):101.
(上接第 16831页)
[ 4] 李智辉,王新颖,李天来 ,等.新铁炮百合花芽分化及发育的研究 [ J] .沈阳农业大学学报 , 2008, 39(2):228-230.
[ 5] 宁云芬, 龙明华,陶劲 ,等.新铁炮百合花芽分化过程的形态学观察
[ J].园艺学报, 2008, 35(9):1368-1372.
[ 6] 徐祖明.光周期调控 白`天鹅 松果菊开花的初步研究 [ D].武汉:华中
农业大学 , 2008:34-37.
[ 7] 李和平.植物显微技术 [ M].2版.北京:科学出版社 , 2009.
[ 8] ADAMSSR, PEARSONS, HADLEYP.Anappraisaloftheuseofrecipro-
caltransferExperiments:assessingthestagesofphotoperiodsensitivityin
chrysanthemumcv.Snowdon(ChrysanthemummorifoliumRamat.)[ J].
ExpBot, 1998, 49(325):1405-1411.
[ 9] LYONSRE, BOOZE-DANIELSJN.CharacteristiesofthephotoperiodicresponseofCaliforniapoppy[J].AmerSoeHortSei, 1986, 111:593-596.
[ 10] SAWHNEYS, SAWHNEYN.FloralinductionbyGibberelicAcidin
ZinniaelegansJacq.undernon-inductivelongdays[J] .Planta(Berl.),
1976, 131:207-208.
16852 　　　　　　　　　　安徽农业科学　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　2009年