全 文 ：应用 RT -PCR检测歇马杏李属坏死环斑病毒
侯义龙 , 赵　洋 , 于亚军 , 张立娟 , 彭宗辉
(大连大学生物工程学院 ,辽宁大连 116622)
　　摘要:利用作者已建立的 PNRSV RT - PCR检测体系对辽宁省大连市地方特产歇马杏田间植株携带 PNRSV
的情况进行了调查 ,结果表明被检植株 PNRSV的感染率达 83. 33%, 但带毒程度不同。
　　关键词:RT - PCR;PNRSV;检测
　　中图分类号:S662.203. 6　　文献标识码:A　　文章编号:1002 - 1302(2006)05 - 0093 - 01
　　辽宁省大连市地方特产歇马杏属于自然产生的
芽变杏树品种 [ 1] 。歇马杏是一个优良的鲜食和加
工兼用品种 ,多次在辽宁省和大连市农产品博览会
上获得好评 ,并以其 “个大 、色艳 、味美 、仁甜”等特
点被中国农业科学院 、沈阳农业大学和辽宁省果树
研究所等权威部门和专家评价为杏中珍品 。歇马杏
不同程度地受到病毒危害 ,导致其产量和品质降低 ,
嫁接亲合力也有所下降 ,影响苗木繁育 。 PCR技术
是目前较为先进的病毒检测技术 ,该技术灵敏性 、特
异性均较强 ,且简单快速 [ 2 - 3] 。本试验结合歇马杏
组织培养脱毒快繁的研究 ,采用已建立的 PNRSV
RT -PCR检测体系[ 4]对田间栽植的歇马杏植株携
带杏树 3种主要病毒之一的李属坏死环斑病毒
(P runus necrotic ring spo t virus, PNRSV)的情况进行
了调查 ,以期为歇马杏脱毒苗的繁育服务 。
1　材料与方法
试验材料包括健康的及携带 PNRSV的指示植
物 GF305 ,取自田间的歇马杏叶片 。RNA的提取方
法见文献 [ 5] ,重复 3次 。 PCR产物在 1. 7%琼脂糖
凝胶中电泳 ,溴化乙锭染色 ,紫外灯下观察电泳结果
并照像记录。
2　结果与分析
利用作者已建立的 PNRSV RT - PCR检测体
系 ,对从大连市太平岭乡歇马村杏树园中随机抽取
的 30株成年歇马杏携带 PNRSV情况进行了调查。
PCR检测结果表明 , 其中 25株被检植株携带
PNRSV ,感染率达 83. 33%,但带毒的程度不同 ,有
的树体带毒程度重 ,有的带毒轻 ,这一点从扩增谱带
深浅即可看出 (图 1)。不带毒的植株可作为今后脱
毒快繁原始材料。
参考文献:
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收稿日期:2006 - 02 - 24
基金项目:辽宁省博士启动基金项目(编号:20021052)和辽宁省教育
厅高等学校科研项目(编号:2023901007和 2004D202)。
作者简介:侯义龙(1963— ),男 , 博士 ,教授 ,研究方向为果树病毒检
测与无病毒栽培。 E -m ai l:houyi long@126. com。
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—93—江苏农业科学　2006年第 5期DOI牶牨牥牣牨牭牳牳牴牤j牣issn牣牨牥牥牪牠牨牫牥牪牣牪牥牥牰牣牥牭牣牥牫牰