全 文 ：《食品工业》2012 年第33卷第 7 期 131
HPLC法测定矮地茶中岩白菜素的含量
张志平1*，潘兆广2，张金平3
1. 广东科贸职业学院（广州 510430）；2. 广东环境保护工程职业学院（广州 528200）
3. 泸州医学院基础医学院（泸州 646000）
摘 要 建立了矮地茶中岩白菜素的含量测定方法。以岩白菜素作为测量指标，采用高效液相色谱法（HPLC
法），Venusil XBP-C18色谱柱（φ 4.6×250 mm，5 μm），以V(甲醇)∶V(水)=70∶30为流动相，流速为1.0 mL/
min，检测波长为275 nm，柱温为室温。结果表明：岩白菜素在0.56 μg到2.80 μg范围内线性关系良好，平均回
收率为99.39%（n=5），RSD=1.56%。说明该方法简便、快捷，可用于矮地茶的质量控制。
关键词 矮地茶；岩白菜素；HPLC
The Separation and Detection of Bergenin from Herba Ardisiae Japonicae
Zhang Zhi-ping1,*, Pan Zhao-guang2, Zhang Jin-ping3
1. Guangdong Vocational Collage of Science and Trade（Guangzhou 510430）；
2. Guangdong Vocational Collage of Environmental Protection Engineering （Guangzhou 528200）
3. Department of Pathobiology of Luzhou Medical Colleage （Luzhou 646000）
Abstract Establish the method of determination of bergenin in Herba Ardisiae Japonicae. Use bergenin as the marker,
and HPLC was used to determine the contents of bergenin in Herba Ardisiae Japonicae. The chromatograph column was
Venusil XBP-C18 (φ 4.6×250 mm, 5 μm), the mobile phase was methanol-water (70:30, v:v), the fl ow rate was 1.0 mL/
min, the detection wavelength was 275 nm with the column at room temperature. The results indicated that the standard
curves of bergenin showed a good linear relationship from 0.56 μg to 2.80 μg and the average recovery was 99.39% (n=5),
RSD=1.56%. The conclusion was that the method was simple, accurate and repeatable, and could be used as the quality
control for Herba Ardisiae Japonicae.
Keywords Herba Ardisiae Japonicae; bergenin; HPLC
矮地茶（Herba Ardisiae Japonicae）为紫金牛科植
物紫金牛Ardisia japonica (Thunb) Blume的干燥全草，
为常绿小灌木，高100~300 mm，基部常匍匐状横生，
暗红色，有纤细的不定根。生于林下、谷地、溪旁阴
湿处，产于长江流域以南各省区，在华东、中南诸省
均有分布，其味苦、平，归肺经，具有祛痰止咳、利
湿、活血、解毒等功效。经广泛的临床验证，对治疗
慢性支气管炎有稳定疗效，用于新久咳嗽，痰中带
血，湿热黄疸，跌打损伤等症，收载于《中华人民共
和国药典》（2005年版）一部[1-4]。矮地茶中主要化
学成分为岩白菜素（Bergenin，3,4,8,10-Tetrahydroxy-
2-hydroxymethyl-9-methoxy-3,4,4a,10b-tetrahydro-2H-
Pyrano[3,2-c]isoehromen-6-one），其化学结构式如图
1所示[4-7]。岩白菜素测定方法目前主要采用紫外吸收
法，薄层扫描法等，较为粗糙，针对这种情况，对
HPLC对矮地茶中岩白菜素的测量进行了研究。
1 材料与方法
1.1 材料与仪器
矮地茶：购买于亳州中药材市场，为矮地茶的干
燥叶与带叶嫩枝；岩白菜素标准品：纯度99.9%，广
东省质检所提供；甲醇为色谱纯，水为重蒸水，其它
试剂均为分析纯。
紫外可见分光光度计WFZ -UV-2102 PCS型：
尤龙柯（上海）仪器有限公司；高效液相色谱仪
（GX-281型）：法国吉尔森有限公司。
图1 岩白菜素结构
1.2 试验方法
1.2.1 岩白菜素检测波长的选择
1.2.1.1 标准溶液的配制
准确称取在120 ℃下烘至恒重的岩白菜素标准品
10.00 mg，于烧杯中用40%乙醇溶解，溶解完毕后转
移至100 mL容量瓶中，用40%乙醇定容，摇匀，得浓
度为0.1 mg/mL的岩白菜素标准溶液[8-10]。
1.2.1.2 紫外吸收光谱图的绘
准确吸取岩白菜素标准溶液1.0 mL于10 mL容量
瓶中，分别用40%乙醇定容，以40%乙醇作为空白对
分析检测
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照，在波长200~600 nm范围内对岩白菜素标准品试样
进行紫外光谱扫描，结果如图2所示，岩白菜素在216
nm与275 nm的波长处有最大吸收。由于216 nm接近末
端吸收，故选275 nm为检测波长[11-12]。
图2 岩白菜素对照品溶液紫外吸收光谱图
1.2.2 岩白菜素的提取及纯化
岩白菜素作为矮地茶中主要有效成分，能否被成
功地提取纯化直接影响着矮地茶药用价值的大小，岩
白菜素的提取方法很多，主要包括有水煎煮法、碱
水浸提法、乙醇回流法、超声辅助甲醇提取法等[13]，
采用乙醇-水体系作为提取溶剂，对影响岩白菜素提
取效果的因素进行考察。通过单因素考察及正交试
验分析，确定了最佳提取工艺条件：提取溶剂为40%
乙醇、液料比为10 mL/g、提取温度为50 ℃，提取两
次，每次2 h。
在以上条件下得岩白菜素提取液，利用乙醇加氨
水去除鞣质，并利用岩白菜素热水溶性去除脂溶性杂
质，得岩白菜素纯化液，烘干后即为岩白菜素提取纯
化物[14]。
1.2.3 高效液相色谱法测定岩白菜素含量
色谱条件为：色谱柱为Venusil XBP-C18色谱
柱（φ 4.6×250 mm，5 μm），流动相为甲醇-水
（70:30，V:V），流速为1.0 mL/min，进样量为10
μL，检测波长为275 nm，柱温为室温[15-16]。
2 结果与分析
2.1 对照品溶液
准确称取在120 ℃下烘至恒重的岩白菜素标准品
14.00 mg，于烧杯中用甲醇溶解，溶解完毕后转移至
20 mL容量瓶中，用甲醇定容，摇匀，得到浓度为0.7
mg/mL的岩白菜素对照品溶液，作为储备液。精密量
取储备液2.0 mL，置10 mL容量瓶中，加甲醇定容至刻
度，摇匀，即得浓度为0.14 mg/mL的岩白菜素对照品
溶液。
2.2 供试品溶液
称取岩白菜素提取纯化物5 mg，置10 mL容量瓶
中，加甲醇适量，振摇使完全溶解并定容至刻度，作
为供试品溶液待用。
2.3 岩白菜素含量测定
在1.2.3的色谱条件下，分别吸取岩白菜素对照品
溶液、供试品溶液各进样10.0 μL测定，结果如图3和
图4所示。
图3 岩白菜素对照品HPLC色谱图
图4 岩白菜素提取纯化物HPLC色谱图
由图可见，岩白菜素对照品的保留时间为3.7289
min。相同的色谱条件下，岩白菜素提取纯化物溶
液，在与岩白菜素相同的保留时间出现明显色谱峰，
表明提取纯化物中均含有岩白菜素。
通过计算，紫茶药材提取纯化物及紫花杜鹃提取
纯化物中岩白菜素含量为72.65%。
2.4 线性关系考察
在1.2.3的色谱条件下，精密称取浓度为0.14 mg/
mL的岩白菜素标准品溶液4，8，12，16，20 μL，注
入液相色谱仪中，按照上述色谱条件进样测定，以标
准品质量X（μg）为横坐标，以峰面积积分值Y为纵
坐标，作线性回归，结果如图5所示。
图5 岩白菜素线性关系考察
回归方程为：Y=85 995X-2 324.7，R2=0.999 62，
表明岩白菜素在0.56~2.80 μg范围内线性关系良好。
2.5 精密度考察
在1.2.3的色谱条件下，精密进样岩白菜素标准品
溶液10 μL，进样5次，分别测定其峰面积积分值。结
果如表1所示，由表可知，岩白菜素峰面积积分值的
相对标准偏差RSD=0.08%，精密性良好。
2.6 重现性考察
取同一批次的矮地茶提取物5份，分别按样品测
分析检测
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定法制备供试液，配制其浓度为1.0 mg/mL左右，在
在1.2.3的色谱条件下进行测定。其测定结果如下表所
示。由表2可知，其相对标准偏差RSD=0.06%，重现
性良好。
表1 精密度考察结果
RT/min 编号 标准品质量/μg 峰面积积分值 RSD/%
1 1.40 118 168.115 2
2 1.40 118 071.322 4
3.7289 3 1.40 118 203.055 8 0.08
4 1.40 118 005.966 5
5 1.40 117 968.853 2
表2 重现性考察结果
编号 取样量/mg 岩白菜素含量/% 平均含量/% RSD/%
4 10.2 72.64
2 10.5 72.68
3 9.80 72.65 72.65 0.06
4 10.0 72.70
5 10.3 72.59
2.7 稳定性考察
取浓度为0.2 mg/mL的样品供试液，每隔1.5 h进样
一次，进样量为10 μL，共进样6次，在1.2.3的色谱条件
下，并测定其峰面积积分值。其结果如表3所示。
表3 稳定性考察结果
时间/h 峰面积积分值 RSD/%
0 185 100.402 5
1.5 185 110.583 5
3.0 185 981.204 5
4.5 185 995.483 2 0.26
6.0 185 105.135 2
7.5 185 991.896 2
9.0 185 998.964 3
由表3可见，峰面积积分值的RSD=0.26%，表明
矮地茶提取纯化物供试品溶液在9 h内基本稳定。
2.8 样品回收率试验
取已知岩白菜素含量的矮地茶提取物，配置溶
液，精密加入7.0 mL浓度为0.14 mg/mL的岩白菜素标
准品溶液，摇匀，分别进样10 μL，在1.2.3的色谱条
件下测定，计算回收率。测定结果如表4所示。
表4 样品回收率考察结果
项目 1 2 3 4 5
取样量/mg 1.50 1.55 1.45 1.60 1.40
样品含量/μg 1.09 1.13 1.05 1.16 1.02
加入量/μg 0.98 0.98 0.98 0.98 0.98
实测量/μg 2.08 2.10 2.01 2.15 1.98
回收率/% 101.02 98.98 97.96 101.02 97.96
平均回收率/% 99.39
RSD/% 1.56
由表4可见，样品平均回收率为99.39%，相对标
准偏差RSD=1.56%，回收率良好。
3 结论
在色谱条件Venusil XBP-C18色谱柱（φ 4.6×250
mm，5 μm），以甲醇:水（70:30，V:V）为流动相，
流速为1.0 mL/min，检测波长为275 nm，柱温为室
温下进行试验考察，岩白菜素在0.56~2.80 μg范围
内线性关系良好，平均回收率为99.39%（n=5），
RSD=1.56%。说明采用高效液相色谱法（HPLC法）
对矮地茶中岩白菜素进行测定，方法准确可靠。
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