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HPLC测定民族药岩陀药材中岩白菜素的含量



全 文 :华西药学杂志
W C J P S 2007, 22(2):210 ~ 212   
的含量 。实验以 8 -乙酰氧基山栀子苷甲酯为对照
品 ,用聚酰胺柱除去黄酮类成分 ,并采用一阶导数法
排除干扰 ,实现了独一味药材中总环烯醚萜苷成分
含量的快速测定 ,方法简便 、快速 、稳定。
对照品 8 -乙酰氧基山栀子苷甲酯由本研究室
从独一味药材中分离纯化得到 ,在药材中含量较高 。
独一味中分离得到的环烯醚萜苷类化合物最大吸收
峰均在 232 ~ 238 nm[ 2, 3] 。因此 ,选择 8 -乙酰氧基
山栀子苷甲酯作为对照品 ,测定总环烯醚萜苷含量
可行。黄酮和环烯醚萜苷类成分是独一味中的两类
主要成分。前者对后者的测定产生较大的干扰 。黄
硐类成分具有较多的酚羟基 ,聚酰胺通过氢键对其
特异吸附 ,因此 ,用聚酰胺预柱可有效地吸附除去而
不影响环烯醚萜苷类的含量测定。
文中测得样品中总环烯醚萜苷含量较先前报道
的对二甲氨基苯甲醛显色法结果低 ,可能是黄酮 、鞣
质等还原性成分也和对二甲氨基苯甲醛显色 ,而使
结果偏高。可用聚酰胺预柱除去还原性酚性物质 ,
结果更接近于药材中总环烯醚萜苷的含量。
致谢:承兰州大学药学院 2003级硕士研究生沈涛 、2001级本
科生师立军 、铁二喜参加部分工作。
参考文献:
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收稿日期:2006 - 04
作者简介:陈文文(1982 -),女 ,四川德阳 ,正攻读中药药剂与炮制专业的硕士学位。
*通讯作者(Correspondent author), E -m ail:w cj- one@ 263. net
HPLC测定民族药岩陀药材中岩白菜素的含量
陈文文 ,黄勤挽 ,兰 雁 ,吴纯洁*
(成都中医药大学 , 四川 成都 610075)
摘要:目的 建立测定民族药岩陀药材中岩白菜素含量的方法。方法 采用 HPLC法 , K rom asil C18柱 (250 mm ×4. 6 mm ,
5 μm);流动相为甲醇 -水(25:75);检测波长 275 nm。结果 线性范围为 0. 2556 ~ 1. 2780 μg(r=0. 9999), 平均回收率为
99.59%, RSD =1. 85%。结论 所建立的方法简便准确 、灵敏度高 ,可用于岩陀药材及其制剂的质量控制。
关键词:岩陀;高效液相色谱法;岩白菜素;民族药
中图分类号:R917   文献标识码:A   文章编号:1006 -0103(2007)02 - 0210 - 02
Content determ ination of bergen in in ethnodrugRodgersia sambuc ifolia Hem s.l by HPLC
CHEN Wen -w en, HUANG Q in -w an , LAN Yan, WU Chun - jie*
(Chengdu Un iversity of T rad itiona l ChineseM edicine, Chengdu 610075, China)
Abstrac t:OBJECTIVE To estab lish am e thod fo r content de te rm ina tion o f bergen in in e thnodrugRodgersia sam bucifolia Hem s.l by
HPLC. METHOD S K rom asil C18 colum n(250 mm ×4. 6 mm , 5μm)w as used. Them ob ile phase w as composed o fme thano l -wa ter
(25:75). D e tec tion w ave leng th was 275 nm. RESULTS The linearity w as obta ined ove r the range o f 0. 2556 - 1. 2780 μg(r =
0. 9999). Them ean recovery w as 99. 59% w ith RSD of 1. 85%. CONCLUSION The me thod is sensitive, sim ple and accu ra te. I t
can be used to contro l quality ofRodgersia sambucifolia H em s.l and its preparations.
K ey words:Rodgersia sambucifolia H em s.l ;HPLC;Be rgen in;E thnodrug
CLC num ber:R917  D ocum ent code:A Artic le ID:1006 - 0103(2007)02 -0210 - 02
  岩陀为白族 、苗族及傈族民间习用的民族药 ,为
虎耳草科植物羽叶岩陀 Rodgersia pinnata Franch.或
岩陀 Rodgersia sambucifolia Hem s.l的干燥根茎 [ 1] 。
药材的傈僳文名为埃陀 ,苗文名为都绍阿路嘎 ,白族
DOI牶牨牥牣牨牫牫牱牭牤j牣cnki牣wcjps牣牪牥牥牱牣牥牪牣牥牫牱
则习称散药 。以前民间草药医生用其汤 、散剂治疗
感冒头痛 、风湿骨痛 、肠炎 、菌痢和外伤出血等 。岩
陀根茎中主要含有糖类 、鞣质 、岩白菜素 、槲皮素及
山奈酚等黄酮类成分[ 2] ,未见其含量测定方法的报
道 。为此 ,特采用 HPLC法测定岩陀药材中岩白菜
素的含量 ,该方法灵敏 、准确 ,为岩陀药材及其制剂
的含量测定提供了新的检验方法。
1 实验部分
1. 1 仪器 、试剂与药材
LC - 2010液相色谱仪包括 SPD - 10Avp紫外
检测器 、C lass - vp色谱工作站 (日本岛津 );TU -
1901双波束紫外分光光度仪 (北京普析通用仪器有
限责任公司 );AS5150A超声波清洗器 (天津奥特赛
恩斯仪器有限公司 );TGL - 16G高速离心机 (上海
安亭科学仪器有限公司)。岩白菜素对照品 (中国
药品生物制品检定所 ,批号:1532 - 200202);甲醇为
色谱纯;水为重蒸馏水;其他试剂均为分析纯。岩陀
药材(市售 )经成都中医药大学生药鉴定教研室鉴
定为虎耳草科植物岩陀 Rodgersia sambucifolia
Hem s.l的干燥根茎。
1. 2 方法与结果
1. 2. 1 色谱条件 色谱柱为 K romasil C18柱 (250
mm ×4. 6 mm , 5 μm);柱温 30℃;流动相为甲醇 -水
(25:75);流速 1. 0m l m in- 1;检测波长 275 nm。此
条件下 ,岩白菜素与其他组分均能较好分离 (图 1)。
图 1 岩白菜素对照品(A)和供试品(B)溶液的 HPLC色谱图
F ig 1 Chroma togram so f bergen in standard so lution (A) and sam-
p le so lution (B)
1. 2. 2 溶液的制备 精密称取 10 mg岩白菜素对
照品 ,置 10m l量瓶中 ,加甲醇定容 ,摇匀 ,即为岩白
菜素贮备液;精密量取 1 m l贮备液 ,置 10 m l量瓶
中 ,加甲醇定容 ,摇匀 ,即得 0. 1 mg m l- 1对照品溶
液 。取 250mg药材细粉 ,精密称定 ,置 50 m l量瓶
中 ,加甲醇适量 ,超声处理 (300W , 25 kHz)40m in,放
冷 ,加甲醇定容 ,摇匀 ,过滤 ,离心 ,即得供试品溶液 。
1. 2. 3 线性关系的考察 将岩白菜素贮备液稀释
成 25.56、51.12、76.68、10.22、12.78 μg m l- 1的对
照品溶液各 10 μl,进样 ,按 “ 1. 2. 1”项下条件测定
峰面积;以峰面积积分值为纵坐标 ,进样量为横坐标
绘制标准曲线 ,其回归方程为:Y =1.3719×106X +
5. 0176 ×103(r =0.9999), 岩白菜素在 0. 2556 ~
1.2780μg范围内 ,线性关系良好(图 2)。
1. 2. 4 精密度试验 精密吸取同一对照品溶液
(63.90μg m l-1)重复进样 6次 ,每次 10 μ1。测得
对照品峰面积的 RSD =0.55%(n =6),表明进样精
密度良好 。
1. 2. 5 稳定性试验 按 “ 1. 2. 2”项下方法分别制
备供试品溶液与对照品溶液 ,室温下保存。于制备
完成后 0、2、4、8、16 h ,分别精密吸取 10 μl进样。
结果对照品峰面积的 RSD =0.69%(n =5),供试品
峰面积的 RSD =1.46%(n =5)。表明供试品溶液
及对照品溶液在配制后 16 h内稳定。
1. 2. 6 重复性试验 取岩陀细粉 5份 ,精密称定 ,
按 “ 1. 2. 2”项下方法制备供试品溶液并测定。结果
岩白菜素的平均含量为 26. 97 mg g -1 , RSD =
1.78%(n=5),表明分析方法重复性良好 。
1. 2. 7 加样回收试验 取已知含量的岩陀 (26. 97
mg g- 1)药材细粉 6份 ,分别添加岩白菜素对照品
溶液适量 ,按 “ 1. 2. 2”项下方法测定 。结果平均回
收率为 99. 59%, RSD =1. 85%。
1. 2. 8 含量测定 分别精密吸取对照品溶液及供
试品溶液 10μl,按 “ 1. 2. 1”项下条件测定 ,采用峰
面积外标法计算含量 , 3批样品的含量分别为
29.33、23.17、26.42 mg g- 1。
2 讨论
取岩白菜素对照品及供试品溶液进行 200 ~
370 nm紫外扫描 ,在 275 nm处均有最大吸收 ,故选
择 275 nm作为检测波长。试验比较了超声提取和
回流提取两种方法所得岩白菜素的含量 。结果表
明 ,超声提取 40m in和回流提取 1 h均能提取完全 ,
最终选择超声提取 40 m in。曾用甲醇 -水 (40:
60)和甲醇 -水 (22:78)[ 3, 4]为流动相进行试验 ,结
果均未达到满意的分离效果 , 后采用甲醇 -水
(25:75),被测组分分离度较好 ,结果稳定。
参考文献:
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收稿日期:2006 - 03
211第 2期 陈文文 ,等 。HPLC测定民族药岩陀药材中岩白菜素的含量