全 文 ：基金项目:成都医学院 2009 年科研基金课题(CYZ09 － 011)
作者简介:吴敏，女，博士，副教授 研究方向:中药新型给药系统研究
岩白菜素在 Caco-2 细胞单层模型中的转运特性及促吸收研究
吴敏1，邓明燕2，郭锐3，王应伟1，王学凯1(1. 成都医学院药学院，成都 610081;2. 国家成都中药安全性评价中心，成都 610041;3.
四川新生命干细胞科技股份有限公司，成都 610000)
摘要:目的 研究岩白菜素透膜吸收机制及促吸收方法，为优化安全、稳定、有效的渗透泵制剂奠定基础。方法 围绕难溶性
药物渗透泵制剂设计各相关因素，测定各转运样品在 Caco-2 细胞单层模型中的表观渗透系数 Papp值及转运速率。结果 岩白
菜素 Papp值随浓度的增加变化不大，流出率 ER值均小于 1. 5。分别与 3 种挥发油及 3 种皂苷合用后，岩白菜素 Papp值及转运
速率均显著增加; 2 种制剂增溶技术及渗透泵制剂常用的两种亲水性高分子辅料对岩白菜素 Papp值没有明显影响。结论 岩
白菜素未表现出主动转运特性;本实验揭示了岩白菜素渗透泵制剂设计的可能方向。
关键词:Caco-2 细胞;岩白菜素;渗透泵;促吸收;表观渗透系数
doi: 10. 11669 /cpj. 2013. 13. 010 中图分类号:R944 文献标志码:A 文章编号:1001 － 2494(2013)13 － 1083 － 06
Transport Characteristics and Absorption Promoting Methods of Bergenin across Caco-2 cell Monolayer
Model
WU Min1，DENG Ming-yan2，GUO Rui3，WANG Ying-wei1，WANG Xue-kai1(1. Department of Pharmacy，Chengdu
Medical College，Chengdu 610081，China;2. National Chengdu Center for Safety Evaluation of Drugs，Chengdu 610041，China;
3. Sichuan Neo-life Stem Cell Biotech Inc，Chengdu 610000，China)
ABSTRACT:OBJECTIVE To study the transdermal absorption mechanism and methods of absorption promotion of bergenin so as
to optimize its safe，stable and effective osmotic pump preparation. METHODS Caco-2 cell monolayer model was used to measure
the apparent permeability coefficients(Papp)and transport rate of all samples considering the major relevant factors of osmotic pump
preparation design of insoluble drugs. RESULTS Pappvaried little while concentration of bergenin increased． The efflux rate(ER)was
smaller than 1. 5. Angelica dahurica extract，agnuside，Artemisia argyi oil，platycodin，oleanolic acid and ursolic acid had significant
effects on the Papp and transport rate of bergenin. The inclusion compound and solid dispersion techniques could enhance the absorption
of bergenin. The two common hydrophilic polymer excipients of osmotic pump preparation could not improve the membrane absorption
rate and permeability of bergenin. CONCLUSION The absorption of bergenin across Caco-2 cell monolayer model may be passive
transport. The study reveals possible directions for design of bergenin osmotic pump preparation.
KEY WORDS:Caco-2 cell;bergenin;osmotic pump;absorption enhancement;apparent permeability coefficient
岩白菜素(bergenin，BN)是《中国药典》2010 年
版一部收载的提取物［1］，为虎耳草科(Saxifragace-
ae)植物岩白素(Bergenia purpurascens)、落新妇
(Astilbe chinensis)及紫金牛科(Myrsinaceae)植物紫
金牛［Ardisia japonica(Thumb). Blume］矮地茶(Her-
ba ardisiae japonicae)等中提取的具有止咳、祛痰及
免疫增强作用的有效成分，治疗慢性支气管炎疗效
好、不良反应小。BN制剂临床上被广泛用于治疗慢
性支气管炎、胃炎、胃及十二指肠溃疡。BN 是一个
难溶、体内外稳定性差，体内低渗透性且代谢迅速的
药物［2］。前期研究［3］中笔者报道了体外释放良好
的 BN包合物渗透泵片的处方及制剂工艺研究结
果。通过 BN包合物渗透泵片的 Beagle 犬体内药动
学研究(论文待发表)发现，BN 包合物渗透泵片较
之 BN普通片显著提高了 BN 的体内吸收。本实验
围绕难溶性、低渗透性中药 BN 渗透泵片处方及工
艺设计的合理性、有效性问题，采用 Caco-2细胞单层模
型，从制剂增溶技术、渗透泵制剂常用高分子辅料及源
于中药的吸收促进剂 3 方面考察该药跨膜转运机制、
促口服吸收机制与方法，为进一步完善渗透泵片设计
及确定安全有效的复方配伍奠定基础。
1 材 料
1. 1 药品与试剂
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DMEM (dulbecco ＇ s modified eagle medium，
DMEM)高糖培养基(Hyclone 公司) ;胎牛血清
(FBS，Gibco 公司) ;转运介质:不含 FBS 的 DMEM
高糖培养基，pH 7. 2 ～ 7. 4;非必需氨基酸(Gibco 公
司) ;L-谷氨酰胺(北京欣经科生物技术有限公司) ;
荧光素(成都科龙化工试剂厂) ;普萘洛尔、盐酸维
拉帕米(中国药品生物制品检定所) ;非索非那定
(Sigma 公司) ;Hank ＇s 缓冲溶液(Hank ＇s banlanced
salt solution，HBSS) ;BN 对照品 (批号:111532-
200202，纯度 ＞ 99. 0%，中国药品生物制品检定所) ;
BN原料药(批号:20070311，含量 99. 1%，西昌杰象
药物原料有限公司) ;β-环糊精(β-CD，成都科龙化
工试剂厂) ;羟丙基-β-环糊精(HP-β-CD，淄博千汇
精细化工有限公司) ;磺丁基醚-β-环糊精(SBE-β-
CD，淄博千汇精细化工有限公司) ;PEG 6000(成都
科龙化工试剂厂) ;白芷油、牡荆油与艾叶油(含量
100%，美国百欧迈斯大药厂) ;桔梗皂苷(成都思科
华生物技术有限公司) ;甲醇为色谱纯;其他试剂均
为分析纯;实验用水为超纯水。
BN对照品贮备液:取 BN对照品约 10 mg，精密
称定，置 10 mL棕色量瓶中，甲醇溶解，稀释定容至
刻度，摇匀，4 ℃冷藏保存;
BN贮备液:取 BN约 220 mg，精密称定，置 100
mL棕色量瓶中，加入适量 DMEM，超声溶解，稀释
定容至刻度，摇匀，4 ℃冷藏保存。
1. 2 仪器与材料
U3000 高效液相色谱仪(美国 Dionex公司);F －
4500荧光分光光度计(日本日立公司);Power Wave
XS2酶标仪(美国 BioTek 公司);Millicell-ERS 电位仪
(美国 Millipore 公司);TranswellTM培养板(美国 Milli-
pore公司);KJ －201A型振荡器(江苏康健医疗用品有
限公司);ZHWY －200B摇床(上海智城分析仪器制造
有限公司);BS 224S电子天平(德国 Sartorius公司)。
1. 3 细胞株
Caco-2 细胞株(中国科学院上海生命科学研究
院细胞资源中心)。
2 方 法
2. 1 Caco-2 细胞单层模型的建立与验证
Caco-2 细胞单层模型的建立见文献［4］。本实
验所用细胞代数在 42 ～ 50 代。将对数生长期细胞
用完全培养液制成浓度为 4 × 105个·mL －1的细胞
悬液，按每孔 1 mL 接种于 Transwell 6 孔板中，培养
21 ～ 25 d 后，测得跨上皮细胞电阻大于 500 Ω·
cm2。对所建立的 Caco-2 细胞单层模型，从细胞单
层通透性与 P-糖蛋白(P-gp)表达两方面进行验证。
在验证细胞单层通透性时，以荧光素作为细胞旁外
漏标志物，以普萘洛尔作为跨细胞转运吸收良好标
志物。在验证 P-gp表达时，以非索非那定作为 P-gp
表达的底物。荧光素的表观渗透系数(apparent per-
meability coefficient，Papp)值为 0. 60 × 10
－6 cm·s － 1，
普萘洛尔的 Papp值为 72. 17 × 10
－6 cm·s － 1，非索非
那定的流出率 ER 值为 2. 81。结果表明，3 种标志
物 Papp值或 ER值均在参考值范围之内，表明细胞单
层通透性及 P-gp表达正常，所建立的细胞单层模型
可用于转运实验的研究。
2. 2 样品溶液的配制
2. 2. 1 BN 的吸收转运特性实验 分别精密量取
BN贮备液适量，加入适量空白转运介质溶解定容为
0. 35 × 10 －2 (样品 1)、0. 175 × 10 －2 (样品 2)和
0. 087 5 × 10 －2(样品 3)mol·L －1的转运实验供试
液。在 BN的外排特性实验中，分别精密量取 BN贮
备液适量，并精密称取盐酸维拉帕米适量，其浓度按
参考文献［5］确定，加入适量空白转运介质溶解定
容为含 BN 0. 35 × 10 －2mol·L －1、盐酸维拉帕米 0. 3
mol·L －1(样品 4、样品 5)的转运试验供试液。
2. 2. 2 制剂增溶技术对 BN 吸收转运的影响试验
对照组溶液的配制同“2. 2. 1”项下 BN 的吸收转运
特性实验样品溶液的配制方法。样品溶液配制中所
采用的 BN β-CD包合物(样品 1)及 BN固体分散体
(样品 4)按文献［3，6］方法制备。BN HP-β-CD(样
品 2)和 SBE-β-CD(样品 3)包合物采用饱和水溶液
法制备。方法为:按物质的量之比为 BN-HP-β-CD
(1∶ 1)和 BN-SBE-β-CD(1∶ 1)称取药物与包合材料，
BN以适量甲醇于 60 ℃水浴溶解并保温，HP-β-CD
和 SBE-β-CD取适量纯化水同法溶解并保温，将 BN
甲醇液缓缓滴入 HP-β-CD 和 SBE-β-CD 溶液，继续
搅拌 1 h，取出包合物悬液置于旋转蒸发器中，于 60
℃除去大部分溶剂，冻干。精密称取 BN β-CD、HP-
β-CD、SBE-β-CD 包合物冻干粉末和 BN 固体分散
体适量，加入适量空白转运介质超声溶解定容为含
BN 0. 35 × 10 －2mol·L －1的转运实验供试液。
2. 2. 3 渗透泵制剂常用高分子辅料对 BN 吸收转
运的影响实验 对照组溶液的配制同“2. 2. 2”。配
制样品溶液时，分别精密量取 BN贮备液适量，并精
密称取 PEO(样品 1)及 PVP K30(样品 2)适量，加入
适量空白转运介质超声溶解定容为分别含 PEO
0. 97 mg·mL －1、PVP K30 0. 49 mg·mL
－1，含 BN
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0. 35 × 10 －2mol·L －1的转运实验供试液。
2. 2. 4 源于中药的吸收促进剂对 BN 吸收转运的
影响试验 对照组溶液的配制同“2. 2. 2”。配制样
品溶液时，分别称取白芷油(样品 1)、牡荆油(样品
2)、艾叶油(样品 3)和桔梗皂苷(样品 4)、齐墩果酸
(样品 5)、熊果酸(样品 6)2 mg，加入适量 DMSO 与
BN贮备液 5. 2 mL，加入适量空白转运介质溶解定容
为分别含白芷油、牡荆油、艾叶油、桔梗皂苷、齐墩果
酸、熊果酸 0. 20 mg·mL －1、含 DMSO 1. 0 %、含 BN
0. 35 ×10 －2mol·L －1的转运实验供试液。
2. 3 转运实验中 BN 受试浓度与供试液溶剂的确
定
通过 MTT法［7］检测药物对细胞活性和增殖的
影响以确定转运实验中药物的安全浓度并确定供试
液增溶剂及溶剂。实验中所设置 BN 浓度分别为
0. 6 × 10 －2，0. 35 × 10 －2，0. 175 × 10 －2，0. 087 5 ×
10 －2，0. 044 × 10 －2，0. 022 × 10 －2，0. 011 × 10 －2，
0. 005 × 10 －2mol·L －1;增溶剂聚山梨酯-80 浓度分
别为 1. 1%、0. 9%、0. 7%、0. 5%、0. 3%;溶剂无水
乙醇浓度分别为 15%、10%、5%;溶剂 DMSO 浓度
分别为 1. 5%、1%、0. 5%。用酶标仪在波长 490 nm
处读取吸光度(A)。按下式求出细胞存活率(IC) :
IC(%)=(实验孔 A均值 /对照孔 A均值)× 100%。
求出 98 % 的细胞存活所对应的药物、增溶剂与溶
剂浓度(IC98) ，作为转运实验中药物的受试浓度与
BN的增溶剂或溶剂。
2. 4 转运实验研究方法
参照文献［8］方法，Caco-2 细胞培养约 21 d后，
测定细胞单层的跨膜电阻值(TEER)大于 500，则可
用来做转运实验。将 Transwell 小室放入 6 孔板中，
分为两组，每组 3 个孔。做吸收研究(AP 侧→BL
侧)时，在 BL 室加入 3. 0 mL 空白转运介质，使 AP
室外表面完全浸透;然后在 AP室加入 2. 5 mL 供试
液;做排放研究时，在 BL 室中加入 3. 0 mL 供试液，
AP室加入 2. 5 mL空白转运介质。此时记为测定零
时刻，分别于 15、30、45、60、90、120 min 时从 AP、BL
室精确取样 0. 15 mL，不补液，2 h 后中止实验。所
收集样品溶液于 － 20 ℃条件下保存，避光操作。分
别用 HPLC测定 AP室和 BL室样品中药物浓度，计
算剩余药量和转运药量以及吸收参数。
2. 5 供试液中 BN浓度测定
超声溶解冻存样品，15 000 r·min －1离心 5
min，取上清液 10 μL注入 HPLC定量分析。色谱条
件为:色谱柱为 Welchrom-C18(4. 6 mm × 250 mm，5
μm，美国月旭公司) ;流动相:含 0. 02%磷酸的甲醇-
水(22∶ 78) ;流速:1 mL·min －1;柱温:30 ℃;测定波
长:273 nm。
2. 6 数据处理
BN的 Papp值按下式进行计算:Papp = dQ /dt × 1 /
A × 1 /ρ。式中，Papp单位为 cm·s
－ 1;dQ /dt 为通透
速率，以累计吸收药量作纵坐标，时间作横坐标得到
一条曲线，曲线斜率即为渗透速率，单位为 μmol·
s － 1;A为转运膜面积，本实验中 A = 4. 71 cm2;c0:供
给室初始药物浓度，单位为 μmol·cm －3。BN 的流
出率 (ER)的 计 算 方 法 为:ER = Papp(BL→AP)/
Papp(AP→BL)。统计学处理采用两均数比较的 t 检验，
以 P ＜ 0. 05 作为具有统计学意义的标准。
3 结 果
3. 1 转运实验中 BN受试浓度与供试液溶剂的确定
结果表明，实验浓度的 BN 供试液对细胞活性
和增殖的影响均较小，考虑转运试验药物检测及药
物溶解的需要，在所考察的浓度范围内，选择较高浓
度(0. 35 × 10 －2 mol·L －1)的 BN 溶液进行转运研
究。在受试浓度范围内，聚山梨酯-80、无水乙醇与
聚山梨酯合用时对 Caco-2 细胞有明显的毒性作用;
当 DMSO浓度≤1 %时，对细胞活性和增殖的影响
较小。综合无水乙醇、聚山梨酯-80 及 DMSO 的考
察结果，转运试验中供试样品的溶剂确定用水及
DMSO。
3. 2 BN定量分析方法的建立
用 DMEM空白转运介质配制系列标准工作液，
建立标准曲线方程为:y = 197. 29x － 5. 098 1(r =
0. 999 5)。在 16. 4 ～ 1148 μg·mL －1内，BN 峰面积
与浓度有良好的线性关系。BN 在所建立方法条件
下，峰形良好，与样品溶液中其他成分分离度 ＞ 1. 5，
色谱图见图 1。可见，BN 的保留时间约为 10. 4
min，空白转运介质在此条件下不干扰测定。
取 BN对照品贮备液不同体积，置 10 mL 棕色
量瓶中，用空白转运介质稀释定容至刻度，得 21. 6，
5. 4，0. 54 μg·mL －1的供试品溶液，按“2. 5”项下所
述方法分别进样测定 5 次。以测定浓度与加入浓度
之比计算回收率为(97. 94 ± 1. 15)%，(100. 15 ±
2. 82)%，(103. 78 ± 3. 04)%。
取回收率项下 3 个浓度的溶液，各测定 5 次，连
续测定 3 d，得到日内 RSD 和日间 RSD 分别为
0. 51%，0. 32%，3. 34%和 0. 51%，0. 16%，3. 91%。
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图 1 空白转运液(A)，BN 对照品溶液(B)，样品溶液(C)
的 HPLC色谱图
Fig. 1 HPLC chromatograms of blank(A)，control(B)and
sample(C)
3. 3 BN的吸收转运特性与外排特性
在 BN的吸收转运特性实验中，将“2. 2. 1”项下
样品按照“2. 4”中方法进行转运实验;在外排特性
实验中，样品 4 加在 AP 侧，样品 5 中 BN 加在 BL
侧，盐酸维拉帕米加在 AP侧。以“2. 6”中方法计算
不同浓度 BN 2 h的 Papp与 ER值，见表 1。结果各浓
度 BN Papp均小于 10 × 10
－6 cm·s － 1，ER 值均小于
1. 5。在 AP→BL 方向上，BN 不同浓度 Papp值之间
无显著差异(P ＜ 0. 05) ，加入盐酸维拉帕米对 BN
Papp值没有显著影响(P ＜ 0. 05)。表明 BN 透膜性
较差，未表现出主动转运特性。
3. 4 制剂增溶技术对 BN吸收转运的影响
拟探索包合技术与固体分散技术对 BN 吸收
转运的影响，结果见表 2。与对照组相比，β-CD、
SBE-β-CD 包合物及固体分散体均增大了 BN 的
P app值(P ＜ 0. 05) ，但该值仍小于 10 × 10
－ 6 cm·
c － 1，表明 2 种制剂增溶技术对 BN 透膜吸收没有
根本改善。
3. 5 渗透泵制剂常用高分子辅料对 BN 吸收转运
的影响
拟探索渗透泵制剂常用高分子辅料对 BN 吸收
转运的影响，结果见表 3。与对照组相比，其 Papp均
小于 10 × 10 －6 cm·s － 1，表明两种高分子辅料对 BN
透膜吸收没有显著促进作用。
3. 6 吸收促进剂对 BN吸收转运的影响
本部分拟探索中药挥发油与皂苷类成分对 BN
吸收转运的影响。将“2. 2. 4”项下样品按照“2. 4”
中方法进行转运实验，做排放研究时，BN 加在 BL
侧，样品中 3 种挥发油与 3 种皂苷均加在 AP 侧。
结果见表 4。与对照组相比，3 种挥发油与 3 种皂苷
均增大了 BN的 Papp值(P ＜ 0. 05) ，除齐墩果酸外，
该值均大于 10 × 10 －6 cm·s － 1，表明 3 种挥发油与 3
种皂苷对 BN透膜吸收均有显著促进作用。
表 1 不同浓度 BN 的 Papp与 ER值 . n = 3，珋x ± s
Tab. 1 Papp and ER of BN at different concentrations． n = 3，
珋x ± s
Samples
Papp × 10 － 6 /cm·s － 1
AP→BL BL→AP
ER
High concentrations of BN 3. 93 ± 0. 25 1. 98 ± 0. 46 0. 50
Medium concentrations of BN 4. 52 ± 0. 33 2. 41 ± 0. 24 0. 53
Low concentrations of BN 3. 92 ± 0. 18 1. 88 ± 0. 10 0. 48
Verapamil hydrochloride 4. 28 ± 0. 06 2. 82 ± 0. 20 0. 66
表 2 BN不同包合物与固体分散体 Papp与 ER 值 . n = 3，
珋x ± s
Tab. 2 Papp and ER of different BN inclusion compounds and
solid dispersion. n = 3，珋x ± s
Samples
Papp × 10 － 6 /cm·s － 1
AP→BL BL→AP
ER
Control group 5. 88 ± 0. 27 3. 44 ± 0. 06 0. 59
BN β-CD inclusion 8. 22 ± 0. 19 2. 36 ± 0. 14 0. 29
BN HP-β-CD inclusion 3. 77 ± 0. 04 1. 41 ± 0. 22 0. 37
BN SBE-β-CD inclusion 8. 39 ± 0. 14 1. 86 ± 0. 11 0. 22
Solid dispersions of BN 6. 78 ± 0. 19 3. 84 ± 0. 20 0. 57
表 3 与高分子辅料合用后 BN Papp与 ER值 . n = 3，珋x ± s
Tab. 3 Pappand ER of BN blended with different polymer mate-
rials. n = 3，珋x ± s
Samples
Papp × 10 － 6 /cm·s － 1
AP→BL BL→AP
ER
Control group 5. 88 ± 0. 27 3. 44 ± 0. 06 0. 59
PEO 4. 26 ± 0. 10 2. 28 ± 0. 10 0. 54
PVP K30 2. 38 ± 0. 16 2. 25 ± 0. 22 0. 95
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3. 7 BN对照组与各样品从 AP侧到 BL侧跨 Caco-
2 细胞单层的转运速率
BN对照组及各样品跨 Caco-2 细胞单层的转运
速率见图 2。在所考察的时间范围内，白芷油、牡荆
油与艾叶油能显著提高 BN 跨膜转运速率，其次是
桔梗皂苷与熊果酸对提高 BN跨膜转运速率也有较
明显的作用。
4 讨 论
4. 1 本实验综合考虑了 BN 的溶解性、稳定性、转
表 4 与吸收促进剂合用后 BN Papp与 ER值 . n = 3，珋x ± s
Tab. 4 Pappand ER of BN blended with different absorption en-
hancers. n = 3，珋x ± s
Samples
Papp × 10 － 6 /cm·s － 1
AP→BL BL→AP
ER
Control group 5. 88 ± 0. 27 3. 44 ± 0. 06 0. 59
Angelica dahurica extract 18. 88 ± 0. 17 9. 22 ± 0. 07 0. 49
Agnuside 21. 00 ± 0. 19 11. 05 ± 0. 42 0. 53
Artemisia argyi oil 34. 84 ± 0. 16 8. 04 ± 0. 10 0. 23
Platycodin 15. 04 ± 0. 12 5. 18 ± 0. 28 0. 34
Oleanolic acid 8. 10 ± 0. 13 4. 59 ± 0. 36 0. 57
Ursolic acid 12. 56 ± 0. 07 5. 36 ± 0. 47 0. 43
图 2 BN对照组与各样品从 AP 侧到 BL 侧跨 Caco-2 细胞
单层的转运速率 . n = 3，珋x ± s
1 －对照组;2 － β-CD包合物;3 － HP-β-CD 包合物;4 － SBE-β-CD 包合物;5 －
固体分散体;6 － PEO;7 － PVP K30;8 －白芷油;9 －牡荆油;10 －艾叶油;11 －
桔梗皂苷;12 －齐墩果酸;13 －熊果酸
Fig. 2 Transport rates of BN from AP side to BL side in the
control group and all samples in Caco-2 cell monolayer model.
n = 3，珋x ± s
1 － control group;2 － β-CD inclusion compound;3 － HP-β-CD inclusion com-
pound;4 － SBE-β-CD inclusion compound;5 － solid dispersion;6 － PEO;7 － PVP
K30;8 － Angelica dahurica extract;9 － Agnuside;10 － Artemisia argyi oil;11 －
platycodin;12 － oleanolic acid;13 － ursolic acid
运样品中药物的检测、药物及溶剂的细胞毒性等方
面的因素，通过 MTT 法，最终确定了转运实验中受
试药物的浓度与溶剂。
4. 2 本实验进一步确证了 BN 透膜性差的特点，考
虑对慢性支气管炎的协同治疗作用，最终选择具有
增加膜通透性作用的 3 种挥发油进行转运研究。除
考虑协同增效作用外，结合 BN难溶特性，理想的吸
收促进剂最好兼具增溶作用。皂苷类物质具有类似
表面活性剂的性质，对难溶性药物具有一定的增溶
作用。与此同时，由于表面活性剂的使用，药物会随
溶剂透过上皮细胞，从而能够起到拖动药物进入血
液，促进吸收的作用。因此选择桔梗皂苷、齐墩果
酸、熊果酸用作吸收促进剂进行转运试验，借以探索
促难溶性药物 BN口服吸收的安全有效的新途径。
4. 3 转运实验结果初步表明，BN 未表现出主动转
运特性，其性质类似于生物药剂学分类系统中的Ⅳ
类药物。促 BN 吸收的各项研究结果表明，与对照
组相比，3 种挥发油均显著改善了 BN 的透膜性，且
这种促透膜作用没有方向性，这与文献［8］报道结
果相符。3 种皂苷同样明显促进了 BN 的吸收(P ＜
0. 05) ，但从 BL→AP 方向的转运实验结果来看，该
类成分与挥发性成分的促吸收机制可能存在如前所
述的差异。实验结果还表明，挥发油促渗透作用优
于皂苷。
有文献［9］报道制剂增溶技术及常用亲水性高
分子辅料具有一定促吸收作用，本实验结果证实制
成包合物和固体分散体能促进 BN 的跨膜吸收，但
实验所选择的两种亲水性高分子辅料对 BN 的透膜
吸收没有明显的影响，与前期 Beagle 犬药动学实验
结果相符。
4. 4 Caco-2 细胞模型在制剂处方设计、辅料筛选与
安全性评价等方面均可发挥积极作用。实验结果表
明，在设计 BN渗透泵片处方与工艺时，可选择溶解
度、渗透压、粘度均比较大的包合材料如 SBE-β-CD
等对 BN 进行包合，同时加入适宜的吸收促进剂如
挥发油等进行渗透泵片的制备可有效提高其生物利
用度;并采用 MTT 比色法、测定转运实验后 Caco-2
细胞单层 TEER 值［10］与整体动物试验等方法进行
制剂的安全与有效性评价。
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(收稿日期:2012-11-14)
基金项目:南方医院院长基金(2009C013)
作者简介:郑萍，女，硕士，主管药师 研究方向:临床药学与药代动力学 * 通讯作者:李春富，男 ，主任医师，教授，硕士生导师 研究
方向:造血干细胞物理治疗地中海盆血儿童白血病及恶性肿瘤疾病 Tel /Fax:(020)61641921 E-mail:cunfugzcn@ 126． com
白消安在儿童和成人造血干细胞移植预处理患者体内的药动学研究
郑萍1a，刘世霆1a，李春富1b* ，李力任1a，陈凌云2，马安德2(1. 南方医科大学南方医院，a. 药学部;b. 儿科，广州 510515;2. 南方
医科大学公共卫生与热带医学学院卫生检测中心，广州 510515)
摘要:目的 研究静脉输注白消安在儿童和成人异基因造血干细胞移植预处理患者的药动学特征。方法 儿童 22 名，成人 9
名，共 31 名异基因造血干细胞移植预处理患者静脉输注白消安，其中 8 例地中海贫血患儿输注 0. 8 ～ 1 mg·kg －1，q6 h，4 d，
14 例恶性血液病患儿输注 4 ～ 5 mg·kg －1，qd，4 d，9 例成人白血病患者输注 0. 8 mg·kg －1，q6 h，3 d，在最后一剂给药时，分
别于给药前、输注中及给药后不同时间点采集血样，用液相色谱-串联质谱法测定血浆白消安浓度，用 DAS软件进行药动学房
室模型拟合，计算药动学参数。结果 静脉输注白消安在异基因造血干细胞移植预处理患者体内符合二室模型。儿童和成
人主要药动学参数分别为: CL( 0. 4 ± 0. 2) 与( 0. 2 ± 0. 1) L·h －1·kg －1、t1 /2β ( 3. 3 ± 1. 5) 与( 3. 1 ± 0. 8) h、Vd ( 0. 6 ± 0. 8 ) 与
( 0. 4 ± 0. 2) L·kg －1、Cav ( 590. 4 ± 265. 3) 与( 572. 2 ± 214. 7) μg·L
－1。成人和儿童 CL有显著性差异( P ＜ 0. 05) ，地中海贫血
患儿和恶性白血病患儿 t1 /2β、Vd、CL、K10、K12有极显著差异( P ＜ 0. 01) 。结论 静脉输注白消安在异基因造血干细胞移植预处
理患者体内的主要药动学参数个体差异大，儿童间差异显著，地中海贫血患儿 Vd、t1 /2β显著减少，有必要开展治疗药物监测。
关键词:白消安;药动学;造血干细胞移植;预处理方案;儿童; 成人
doi: 10. 11669 /cpj. 2013. 13. 011 中图分类号:R969． 1 文献标志码:A 文章编号:1001 － 2494(2013)13 － 1088 － 06
Pharmacokinetics of Busulfan in Pediatric and Adult Patients Prior to Hematopoietic Stem Cell Transplan-
tation
ZHENG Ping1a，LIU Shi-ting1a，LI Chun-fu1b* ，LI Li-ren1a，CHEN Ling-yun2，MA An-de2(1a. Department of Phar-
macy;1b. Department of Pediatrics，Nanfang Hospital，Southern Medical University，Guangzhou 510515，China;2. Hygiene Detection
Center，School of Public Health and Tropical Medicin，Southern Medical University，Guangzhou 510515，China)
ABSTRACT:OBJECTIVE To study the pharmacokinetic profiles of intravenous busulfan in Chinese pediatric and adult patients
undergoing allogeneic hematopoietic stem cell transplantation(allo-HSCT). METHODS Blood samples of 22 pediatric and 9 adult
patients were collected following the last dose of a 3 － 4 d，12 － 16 doses intravenous busulfan regimen in children with thalassemia and
adult leukemia patients or of a 4 d，once-daily intravenous busulfan regimen in pediatric hematologic malignancies patients. The plasma
concentrations of busulfan were determined by LC /MS /MS，and the pharmacokinetic parameters of busulfan were calculated by DAS.
·8801· Chin Pharm J，2013 July，Vol. 48 No. 13 中国药学杂志 2013 年 7 月第 48 卷第 13 期