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16种槭属植物叶中没食子酸甲酯的含量



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16种槭属植物叶中没食子酸甲酯的含量
高春春 1 ,赵文华 2* ,宋学英2 ,张英侠 2 ,江蔚新 1
(1.哈尔滨商业大学药学院 ,黑龙江哈尔滨 150076;2.首都医科大学化学生物学与药学院 ,北京 100069)
  摘要 目的:建立槭属植物叶中没食子酸甲酯含量的 RP-HPLC测定方法 ,同时测定 16种槭属植物叶中的没食
子酸甲酯的含量。方法:采用 DiamonsilTM-C18色谱柱(4.6mm×250mm, 5 μm);流动相:乙腈-水(含 2.5%冰醋酸)
(10∶90);流速 1.0 ml/min;检测波长 275nm。结果:16种槭属植物叶均含有没食子酸甲酯 ,但是含量差别较大 ,鞑
靼槭的含量最高 , 细裂槭的含量最低。结论:所建立的方法简便 、准确 、可靠 ,可作为分析槭属植物没食子酸甲酯的
方法。
关键词 槭属;RP-HPLC;没食子酸甲酯;含量
中图分类号:R292.71  文献标识码:A  文章编号:1001-4454(2006)12-1281-02
基金项目:北京市教委基金项目(KM20040025013)作者简介:高春春(1983-),女 ,在读硕士 , E-mail:gaochunchun1983@126.com。*通讯作者:赵文华(1977-), 女(蒙古族), 讲师 , 理学硕士 , 主要从事中药新药的研究开发。 Tel:(010)83911523, E-mail:zwhua@ccums.edu.cn。
  槭树科 Aceraceae金钱槭属 Dipteronia和槭属
Acer等两属 ,主产于北半球温带地区 。我国是世界
槭树种类最多的国家 ,槭属约有 149种 ,以云南省最
多 〔1〕。槭属植物多有药用价值 ,元宝槭的根或根皮
有祛风除湿的功效 ,用于治疗关节疼痛 、骨折 、跌打
损伤等症〔2 ~ 5〕 ,叶含有丰富的黄酮类物质 ,对冠状动
脉硬化 ,脑血管疾病 ,心绞痛具有很好的作用。茶条
槭 、地锦槭 、鸡爪槭等的幼芽 、嫩叶可代茶饮 ,有退热
明目 、祛风除湿 、活血化瘀等功效;果实可清热 ,利咽
喉 〔6 ~ 9〕。地锦槭 、白粉藤叶槭和鸡爪槭等 12种槭属
植物均具有抗炎活性 〔10〕。槭属植物中含有二芳基
庚烷衍生物类 、苯丙素类 、萜类 、甾体类 、黄酮类 、单
宁等化合物 。 2005年马晓峰等从元宝槭叶中分离
得到没食子酸甲酯 〔11〕 ,对血小板聚集有对抗作用 ,
对心脑血管梗塞 ,短暂性局部缺血 ,过敏及哮喘等有
治疗作用。本研究为建立槭属植物中没食子酸甲酯
的 RP-HPLC含量测定方法 ,为槭属植物资源的开发
利用奠定了基础 。
1  材料与仪器
16种槭属植物的落叶于 2005年 10月底采自
北京植物园 ,经北京中医药大学中药学院生药系陈
玉婷副教授鉴定 。
试剂:没食子酸甲酯(货号 48690),购自 Fluka
公司。乙腈为色谱纯 (迪马公司);水为重蒸水;其
他试剂为分析纯 。
Agilent1100高效液相色谱仪(美国);BSZ10S
型电子分析天平(北京赛多利斯仪器系统有限公
司);DiamonsilTM(钻石)-C18色谱柱(迪马公司)。
2  实验方法与结果
2.1 色谱条件 色谱柱:DiamonsilTM(钻石)-C18色
谱柱 (4.6 mm×250 mm, 5 μm);流动相:乙腈-水
(含 2.5%冰醋酸)(10∶90V/V);流速:1.0 ml/min;
检测波长:275 nm;柱温:室温。
2.2 对照溶液的制备 精密称取没食子酸甲酯对
照品 ,加甲醇分别制成 0.025 mg/ml、 0.050mg/ml、
0.075 mg/ml、0.10 mg/ml、0.125 mg/ml、0.150 mg/
ml、0.175 mg/ml的对照品溶液。
2.3 样品溶液的制备 精密称取 16种槭属植物
叶各 1.0g,每种 3份 ,分别加 20 ml50%乙醇 ,振摇
24 h,过滤 ,滤液减压回收至干 ,加水 20 ml加热溶
解 ,水饱和的乙酸乙酯萃取 3次 ,每次 20ml,合并萃
取液 ,减压回收乙酸乙酯 ,残渣加甲醇溶解 ,定容于
10ml容量瓶中 ,摇匀 , 0.45 μm微孔滤膜过滤 ,取续
滤液做为供试品溶液。
2.4 线性关系的考察 分别精密吸取没食子酸甲
酯对照品溶液 10.0 μl,按上述色谱条件 ,测定峰面
积。以色谱峰峰面积为纵坐标 ,对照品进样量为横
坐标 ,绘制标准曲线 ,计算回归方程:Y=1575.7X-
44, r=0.9996。
2.5 精密度试验 分别精密吸取同一份对照品溶
液(0.15 mg/ml)10.0 μl,连续进样 5次 ,测得没食
子酸甲酯色谱峰峰面积平均值为 2392.9, RSD=
0.72%。
2.6 稳定性试验 精密吸取挪威槭样品溶液 20.0
μl,分别在制备后 0 , 2, 4, 6, 8, 12, 24 h进样 ,测定没
食子酸甲酯色谱峰峰面积 ,计算峰面积相对标准偏
差 RSD=1.07%。表明样品溶液 24 h内稳定性均
良好 。
·1281·中药材第 29卷第 12期 2006年 12月
DOI :10.13863/j.issn1001-4454.2006.12.007
2.7  重现性试验 取挪威槭样品 ,精密称取 5份 ,
按样品测定项下方法 ,测定没食子酸甲酯的含量 ,没
食子酸甲酯平均含量为 69.28 μg/g, RSD=1.32%
(n=5)。
2.8  回收率试验 精密称取已知含量(69.28 μg/
g)的挪威槭叶 5份 ,每份 1.0 g,精密称定 ,分别精密
加入浓度为 0.15 mg/ml没食子酸甲酯对照品溶液
0.4ml,按照样品溶液制备项下方法制备供试品溶
液 ,测定 , 计算平均回收率为 99.79%, RSD=
0.17%。
2.9  样品测定 精密吸取 16种槭属植物样品溶
液 50.0μl, 0.15 mg/ml没食子酸甲酯对照品溶液
10.0μl,依法测定含量 ,计算 16种槭属植物叶中没
食子酸甲酯的含量 ,结果见表 1。
 表 1  样品中没食子酸甲酯含量测定结果(n=3)
样品 含量(μg/g) RSD(%)
挪威槭 A.platanoides 69.28 1.08
鞑靼槭 A.tataricum 515.34 1.91
元宝槭 A.truncatum 17.66 2.12
条裂银后槭 A.sacharinum 14.50 1.03
拧筋槭 A.triflorum 226.28 1.75
细柄槭 A.capillipes 17.06 0.94
银后槭 A.dasyphyla 45.96 1.36
青榨槭 A.dervidi 39.52 1.25
欧亚槭 A.pseudoplatanus 64.88 1.87
金边岑叶槭 A.negundo`Vureomarginatum 4.12 1.62
细裂槭 A.stenolobus 1.06 1.13
茶条槭 A.ginnal 105.08 1.51
血皮槭 A.griseu 190.36 1.18
鸡爪槭 A.palmatum 286.54 1.63
复叶槭 A.negundo 59.80 1.84
田园槭 A.campestre 4.74 1.32
  从表 1可以看出 16种槭属植物叶的没食子酸
甲酯含量差别较大 ,鞑靼槭 、拧筋槭 、茶条槭 、血皮
槭 、鸡爪槭中没食子酸甲酯的含量较高 ,而金边岑叶
槭 、细裂槭 、田园槭几乎没有。
3 讨论
3.1 本实验建立的 RP-HPLC方法简便 、准确 、可
靠 ,可用于分析槭属其它植物没食子酸甲酯含量 。
3.2 16种槭属植物的没食子酸甲酯含量以鞑靼
槭的含量最高 ,达 515.34 μg/g,而细裂槭的含量只
有 1.06 μg/g。含量大于 100 μg/g的有 5种 ,介于
20-100 μg/g的有 5种 , 20 μg/g以下的有 6种 。
3.3 没食子酸甲酯具有广泛的药理活性 ,本分析
的结果可为槭属植物生物活性的进一步研究提供科
学依据。
参 考 文 献
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(2006-04-10收稿
2006-07-24修回)
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·1282· 中药材第 29卷第 12期 2006年 12月