全 文 ：★烟草科技 Tobacco Science＆ T echnology★ ★烟草化学 Tobacco Chem istry ★ 2007年第 1期(总第 234期)
作者简介:陈义坤(1975 -), 博士 ,武汉烟草集团技术中心工程师 , 主要从事烟草化学和特色产品技术研究。 E-m a il:m a t-
tirus@ yahoo. com. cn 电话:027-68848247
收稿日期:2006 - 09 - 13
责任编辑:刘立全 E-m a il:llq@ tobacco info. com. cn 电话:0371-67672637
HPLC法测定特制卷烟及烟气中的
前胡甲素 、岩白菜素和槲皮素
陈义坤 1 , 卢金清 2 , 罗红兵1 , 喻 樊 2 , 陈 黎 2 , 肖 波 2 , 詹晓莲 2 , 徐玉婷 2
1. 武汉烟草 (集团 )有限公司 ,武汉市汉阳区十升路特 5号 430051
2. 湖北中医学院 ,武汉市武昌区昙华林特 1号 430061
关键词:高效液相色谱法;卷烟;前胡甲素;岩白菜素;槲皮素
摘要:为了解中药有效成分向烟气中的转移率 ,采用高效液相色谱法测定了添加前胡 、矮地茶 、
槐米提取物的卷烟烟丝及其烟气中这些提取物中的有效成分———前胡甲素 、岩白菜素和槲皮
素的含量 ,采用的色谱柱为 C18 TURNER K rom asilTM(3.0mm ×250mm , 5μm),流动相分别为甲
醇∶水 (75∶25 ,体积比)、甲醇∶水(20∶80)、甲醇∶0.4%磷酸 (42∶58),流速均为 1mL /m in;检测
波长分别为 321、275和 360nm。结果表明 ,前胡甲素和岩白菜素向烟气中的转移率分别为
1.01% ～ 1.77%和 0.41% ～ 0.48%,烟气中未检测到槲皮素 。
中图分类号:TS458 TS411.2 文献标识码:B 文章编号:1002 - 0861(2007)01 -0038 - 05
HPLC Determ ination of Praeruptorin A , Bergenin and Querce tin in Purpose-made C igarette
and its Smoke
CHEN Y I-KUN(1), LU JIN-Q ING(2), LUO HONG-BING(1), YU FAN(2), CHEN LI(2),
XIAO BO(2), ZHAN X IAO-LIAN(2), and XU YU-TING(2)
1. Wuhan Tobacco (G roup) Co. , Ltd. , Wuhan 430051, China
2. Hubei Co llege of T raditiona lCh ineseM edicine, W uhan 430061, Ch ina
Keywords:HPLC;C igarette;Praeruptorin A;Bergenin;Quercetin
Abstract:For investiga ting the ra te o f active substances in traditiona lChinese medic ines transferring
in to cigarette smoke, the active substances, prae rup to rin A , be rgenin and que rcetin, in test ciga-
re ttes incorpora ted w ith extrac ts o f Radix peucedani, Ard isia japon ica , Sophofae japonicae and in
their smoke w ere de term ined by HPLC w ith TURNER K romasilTM-C18 co lumn (3.0mm ×250mm ,
5μm), usingme thano l∶H2O (75∶25, v /v), methano l∶H2O (20∶80), me thano l∶0. 4% phospho ric
acid (75∶25) as mobile phase ( flow rate 1mL /m in) at the w aveleng th of 321nm , 275nm , and
360nm , respective ly. The re sults show ed that the transfer rates o f p raeruptorin A and be rgenin into
cigarette smoke we re 1. 01% -1. 77% and 0. 41% -0. 48%, respective ly;no que rcetin w as detec-
ted in the smoke.
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★烟草科技 Tobacco Science＆ T echnology★ ★烟草化学 Tobacco Chem istry ★ 2007年第 1期(总第 234期)
前胡系伞形科多年生草本植物白花前胡
(Peucedanum pareruptorum Dunn)、紫花前胡 (P.
decursivum M ax im)的根 ,具有降气化痰 、宣散风热
之效 ,其主要有效成分为前胡甲素[ 1] ;矮地茶为
紫金牛科常绿小灌木紫金牛 [ Ardisia japonica
(Hornsted)B lume]的全株 ,具止咳平喘 、清利湿
热之效 ,主要有效成分为岩白菜素 [ 2-3] ;槐米是豆
科落叶乔木槐(Sophora japonica L. )的未开花蕾 ,
主要有效成分为槲皮素 , 亦具有化痰止咳之
效 [ 4] 。将前胡 、矮地茶 、槐米提取物按照适宜配
比和用量添加到烟丝中制备的卷烟 ,燃吸时能缓
解消费者因吸烟引起的咳嗽 ,痰多等症状。为了
检验燃吸过程中这些中草药提取物的有效成分是
否转移到烟气中 ,进而提供添加草本中药提取物
卷烟中的有效成分向烟气中转移的证据 ,采用高
效液相法测定了添加前胡 、矮地茶 、槐米提取物的
卷烟烟丝及其烟气中的有效成分 ———前胡甲
素 [ 1] 、岩白菜素[ 2-3]和槲皮素[ 4] 。
1 材料与方法
1. 1 材料
P680高效液相色谱仪 (美国 D IONEX 公
司 ),配备 UVD170U紫外检测器;超声波清洗器
(熊猫集团南京电子计量有限公司);RW200吸烟
机 (德国 BORGWALDT公司 );S tarto rius BS210S
型电子分析天平 (感量 0.00001g,北京塞多利斯
天平有限公司)。
甲醇 、三氯甲烷 (AR,中国上海振兴化工一
厂 );重蒸馏高纯水;前胡甲素 、岩白菜素和槲皮
素 (标样 ,中国药品生物制品检定所 );中性定性
滤纸(杭州富阳特种纸业有限公司 );添加 0.1%
(与烟丝的质量比 ,下同)枇杷叶与矮地茶 (提取
物的质量比 1∶1)、0.07%槐米与前胡 (1∶1)和
0.1%槐米 、前胡与矮地茶提取物的混合物
(3.5∶3.5∶3)的试验卷烟 (自制 )和未加这些提取
物的对照卷烟 (均为软盒 “黄鹤楼 ”牌卷烟烟丝 )
(武汉烟草集团),编号分别为 1#、2#、3#和 0#。
1. 2 样品的提取与分析
1. 2. 1 烟丝样品的提取[ 5]
取 1#、2#、3#和 0#卷烟烟丝若干 ,分别于 40℃
下干燥 2h, 粉碎 , 过 40目筛 。准确称取烟粉各
20.5003、20.5057、20.5008和 20.5013g(含水率
分别为 5.65%、5.72%、 5.68%和 5.71%),置于
索氏提取器中 , 1#卷烟烟粉加入 250mL三氯甲
烷 , 2#、3#和 0#卷烟烟粉均加入 250mL甲醇 ,加热
回流至提取液无色 ,过滤 , 1#卷烟滤液用 1%(体
积分数 , 下同 )盐酸萃取 2次 , 50mL /次 ,弃去酸
液 ,蒸干 ,加入 25mL三氯甲烷溶解 ,称量 , 60℃下
超声处理 30m in,冷却至室温 ,再称量 ,并用三氯
甲烷补足超声处理过程中溶剂的挥发损失量 ,摇
匀 ,过滤 ,取 5mL滤液 ,再蒸干 ,残渣用甲醇溶解
并定容至 25mL,摇匀 ,作为供试品溶液;2#、3#和
0
#卷烟滤液蒸干 ,残渣各用 30mL水溶解 ,过滤 ,
滤液用 30mL ×2三氯甲烷萃取 ,弃去萃取液 ,水
相蒸干 ,残渣用 20mL甲醇溶解 ,称量 , 60℃下超
声 30m in,冷却至室温 ,再称量 ,并用甲醇补足损
失量 ,摇匀 ,过滤 ,滤液作为烟丝分析液。
1. 2. 2 烟气样品的制备
选取单支重量 0.92g ±0.02g和吸阻 1260Pa
±10Pa的 1#、2#、3#和 0#卷烟各 100支 ,于 22℃ ±
1℃和 RH60%±2%的恒温恒湿箱内平衡 48h后 ,
在 22℃±2℃和 60% ±5%的环境中和标准条件
下 ,用 RM200吸烟机分别抽吸卷烟样品 ,每种卷
烟抽吸 40支 ,用 92mm剑桥滤片捕集烟气 ,每张
滤片捕集 20支卷烟的烟气 ,吸毕 ,取出滤片 ,用
1 /4张剑桥滤片擦净烟气捕集器 ,每张滤片置于
40mL甲醇中 ,室温下超声提取 1h,过滤 ,蒸干 ,残
渣用甲醇溶解并定容至 25mL,摇匀 ,即得烟气分
析液。
1. 2. 3 样品的分析[ 5]
准确称取前胡甲素 、岩白菜素和槲皮素标样
各 1.20、1.27、0.285g,分别用甲醇溶解并定容到
250mL,得标准贮备液 ,然后用甲醇将标准贮备液
稀释 100倍 ,得到 48.0、50.8和 11.4μg /mL的标
准溶液。吸取标准溶液 、烟丝和烟气分析液各
10μL,分别进行 HPLC分析 ,分析条件为:色谱
柱:C18 TURNER K romasilTM (200mm ×4.6mm ,
5μm);柱温:30℃;流动相:甲醇 ∶水 (体积比
75∶25)、甲醇 ∶水 (20∶80)、甲醇 ∶0.4%磷酸
(42∶58),流速 1mL /m in;检测波长:321、275和
360nm ,分别用于检测前胡甲素 、岩白菜素和槲
皮素。
2 结果与讨论
2. 1 烟丝和烟气提取液的 HPLC比较
从图 1 ～图 3可看出:①3种试验卷烟烟丝中
的中草药有效成分———岩白菜素和前胡甲素都转
移到烟气中 ,但烟气中无槲皮素的峰;②这 2种有
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效成分与烟丝 、烟气成分之间均达基线分离 ,槲皮
素与烟丝成分之间也达到基线分离 ,可以进行定
量分析 。
2. 2 岩白菜素 、前胡甲素和槲皮素向烟气中的转
移率
分析结果(表 1)显示:①前胡甲素向烟气中
的转移率最高 ,岩白菜素次之;②前胡甲素向烟气
中的转移率在 1% ～ 2%之间 ,低于卷烟中烟碱
10%的转移率[ 6] , 这与前胡甲素比烟碱的沸
点 [ 6-7]高 ,卷烟燃烧时气化更困难相符合;③虽然
2种添加矮地茶提取物的试验卷烟烟气中均检测
到岩白菜素 ,但其转移率都不到 0.5%,迁移能力
明显比前胡甲素的弱;④3#卷烟烟丝中虽然检测
到了槲皮素 ,但其烟气中并未检测到槲皮素 ,可能
是由于槲皮素的挥发性弱和迁移能力低以及仪器
检出限高。
图 1 前胡甲素标样 、 0#、2#和 3#卷烟烟丝及其烟气提取液的 HPLC比较
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图 2 岩白菜素标样 、 0#、1#和 3#卷烟烟丝及其烟气提取液的 HPLC比较
表 1 卷烟①中的前胡甲素 、岩白菜素向烟气中的转移率
卷烟
编号
前胡甲素 岩白菜素 槲皮素②
烟丝含量
(μg /cig)
烟气含量
(μg /cig)
转移率
(%)
烟丝含量
(μg /cig)
烟气含量
(μg /cig) 转移率
烟丝含量
(μg /c ig)
1# — ③ — — 14. 56 0. 070 0. 48% —
2# 16. 94 0. 300 1. 77 — — — —
3# 16. 17 0. 016 1. 01 8. 54 0. 035 0. 41% 9. 17
注:①1#、 2#和 3#卷烟的抽吸口数和总粒相物分别为 7.31口和 19.54mg /支 、 7. 24口和 19.674mg /支 、 7.18口和
19.244m g /支;②烟气中未检出槲皮素 , 故未列出其转移率;③“— ”表示未检出。
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图 3 槲皮素标样 、0#和 3#卷烟烟丝及其烟气提取液的 HPLC比较
3 小结
在添加前胡 、矮地茶 、槐米提取物的卷烟烟气
中检测到这些中草药的有效成分———前胡甲素和
岩白菜素 ,且前胡甲素向烟气中的转移率远远高
于岩白菜素 ,但未检测到槲皮素 。
参考文献
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