全 文 ：高效液相色谱法测定虎耳草中岩白菜素含量
冉启军 ,丁　宁
(遵义医学院附属医院 药剂科 ,贵州 遵义　563003;贵阳中医学院 药学系 ,贵州 贵阳　550002)
[ 摘　要] 　目的　为控制虎耳草药材质量 , 建立测定虎耳草中岩白菜素含量的高效液相色谱方法。方法　采用
Hypersil ODS 色谱柱(5μm , 250mm ×4.6mm i.d , Agilent);柱温 25℃;流动相为甲醇—水(体积比为 25∶75);流速
为 1.0ml/ min;检测波长为 274nm。结果　岩白菜素的进样量为 0.502 ～ 3.120μg 时与峰面积呈良好线性关系 , 平
均回收率 99.11%, RSD 为 1.0%(n=5);结论　本法准确 、灵敏度高 、重现性好 , 可作为虎耳草药材质量控制的含
量检测方法。
[ 关键词] 　虎耳草;岩白菜素;高效液相色谱法
[ 中图分类号] R917　[ 文献标识码] B　[ 文章编号] 　1000-2715(2005)05-0474-02
　　虎耳草又名普耳草 ,苗药名窝比省为虎耳草科植
物虎耳草 Saxi fraga stolonifera(L .)Meerb 的干燥
全草 。具有消炎 、解毒的功效 。用于急性中耳炎 ,风
热咳嗽;外治大泡性鼓膜炎 ,风疹瘙痒[ 1] ,是常用民
族药 。始见于《履 岩本草》 , 《本草纲目》 、《植物名实
图考》等 ,均有记载。《中国药典》1977年版曾收载 ,
现《贵州省中药材 、民族药质量标准》2003年版收载
本品[ 2] 。贵州省以虎耳草为原料开发了多个药品 ,
为更好控制虎耳草药材质量 ,本文建立可作为虎耳草
药材质量控制的含量检测方法。虎耳草中所含主要
化学成分是岩白菜素(Bergenin)[ 3] ,具有镇咳祛痰作
用。因此 ,选择岩白菜素作为虎耳草含量测定的控制
成份 。岩白菜素的含量测定方法有分光光度法[ 4] 、
薄层扫描色谱法[ 5] 、高效液相色谱法[ 6] 。本文报道
用高效液相色谱方法测定虎耳草中岩白菜素含量的
方法学研究。
1　仪器 、样品 、试剂
Agilent 1100高效液相色谱仪(在线脱气机 、二
元泵 、自动进样器 、智能柱温箱 、二极管阵列检测器 、
化学工作站等)。虎耳草药材购于贵阳市药材公司 ,
经贵阳中医学院陈德媛研究员鉴定为虎耳草科植物
虎耳草 Saxif raga stolonifera(L .)Meerb的干燥全草。
岩白菜素对照品(742-200111 ,供含量测定用 ,中国
药品生物制品检定所);甲醇为色谱纯;其他试剂均为
分析纯;水为纯净水 。
2　实验方法与结果
2.1　色谱分析条件 　Hypersil ODS(5μm , 250mm
×4.6mm i.d.,Agilent)色谱柱 ,甲醇—水(25∶75)为
流动相 , 流速 1.0 ml/min , 柱温 25℃, 检测波长
274nm;进样量为 5μl ,在上述色谱条件下 ,岩白菜素
与其他成份分离良好 ,理论板数以岩白菜素峰计算不
低于 5000;分离度大于 1.5 ,结果见图 1。
2.2　对照品溶液的制备　精密称取岩白菜素对照品
适量 ,置于量瓶中 ,用甲醇溶解 ,加甲醇至刻度 ,摇匀 ,
制成 1ml含 0.1mg 的对照品溶液 。
2.3　供试品溶液的制备　取本品粉末(粗粉)约 1g ,
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第 28卷第 5期
2005年 10月 　　　　　
遵　义　医　学　院　学　报
ACTA ACADEM IAE MEDICINAE ZUNYI
　　　　　Vol.28 No.5　Oct.2005
精密称定 ,置具塞锥形瓶中 ,精密加入甲醇 25ml ,称
定重量 ,超声处理 1h ,放冷 ,再称定重量 ,用甲醇补足
减失的重量 ,摇匀 ,滤过 ,即得 。
2.4　方法学考察
2.4.1　线性关系的考察　精密称取岩白菜素对照品
适量 ,置 25ml量瓶中 ,用甲醇溶解 ,加甲醇至刻度 ,摇
匀 ,制成每 ml中含 1.040mg 的对照品溶液 。精密吸
取储备对照品溶液 1 、2 、3 、4 、5 、6ml于 10ml量瓶中 ,
加甲醇至刻度 , 制成浓度为 0.104 、0.208 、0.312 、0.
416 、0.520 、0.624mg/ml岩白菜素对照品溶液 ,分别
以 5μl依次进样 ,按高效液相色谱法测定。以岩白菜
素的进样量(μg)为横坐标 ,峰面积为纵坐标作图 ,为
一基本过原点的直线 。岩白菜素在 0.502 ～ 3.120μg
范围内与峰面积值呈线性关系 ,回归方程:Y=1401.
4 X+0.1816r=0.99996(n=6)。
2.4.2　稳定性试验　取虎耳草药材粗粉 1.0g ,精密
称定 ,按供试液制备项制备供试液 ,进样 6次 ,时间间
隔为 0 、2 、4 、6 、8 、10h ,记录峰面积值 ,岩白菜素含量
平均值为 0.424%,RSD=0.8%,结果表明本试验条
件稳定 ,供试液至少在 10h内测定较稳定 。
2.4.3　精密度试验　精密吸取虎耳草药材供试液
5μl ,连续进样 6次 , 6次进样测得岩白菜素含量平均
结果为 0.423%, RSD=0.1%,表明本试验方法精密
度良好。
2.4.4　重复性试验　取虎耳草药材粗粉 6份 ,各 1.
0g ,精密称定 ,按供试液制备项制备供试液 ,进样 ,记
录峰面积值 。6 份样品岩白菜素含量平均值为 0.
424%, RSD=1.1%,表明本试验方法重复性良好 。
2.4.5　加样回收试验　取虎耳草药材粗粉 5份 ,各
0.5g ,精密称定 ,于每份样品中加入适量岩白菜素对
照品溶液 ,按供试液制备项制备供试液 ,进样分析 ,计
算回收率 ,平均回收率为 99.11%, RSD=1.0%,表
明本试验方法回收良好 。
　　表 1　加样回收试验测定结果(虎耳草药材产地:贵州省平坝县　含量:0.424%)
序号 称样量(g) 样品中岩白菜素的量(mg) 加入对照品的量(mg) 测得岩白菜素的量(mg) 回收率(%) 平均值(%) RSD(%)
1 0.5001 2.120 2.001 4.108 99.34
2 0.5001 2.120 2.001 4.132 100.10
3 0.5002 2.120 2.001 4.096 98.77 99.11 1.0
4 0.5003 2.121 2.001 4.083 98.10
5 0.5003 2.121 2.001 4.107 99.25
2.4.6　样品测定结果　按上述方法和色谱条件测定
了不同产地虎耳草药材中岩白菜素的含量 ,结果见表
2。
　　表 2　不同产地虎耳草药材中岩白菜素含量(n=3)
产　　地 岩白菜素含量(%) RSD(%)
四　　川 0.231 1.1
广　　东 0.025 1.0
广　　西 0.056 0.8
湖　　南 0.321 0.9
贵州安顺 0.186 0.8
贵州贵阳 0.332 0.7
贵州凯里 0.325 1.1
贵州毕节 0.241 0.7
贵州平坝 0.424 0.3
3　讨论
3.1　检测波长的确定　对岩白菜素于 190 ～ 400nm
波长下扫描 ,最大吸收波长为 220nm 和 274nm ,在
274nm波长处岩白菜素吸收峰灵敏度较高 , 其他色
谱峰干扰较小 ,故选用 274nm 作为检测波长 。
3.2　供试品提取方法的选择　本文在研究过程中采
用了 70%乙醇 、乙醇 、甲醇 、50%甲醇几种不同溶剂
以及超声和回流两种提取方法 ,结果以甲醇作为溶剂
超声提取较为方便 。
3.3　不同产地的虎耳草药材中岩白菜素含量差异较
大 ,其中广东 、广西习用虎耳草叶片较大 ,但岩白菜素
含量较低;四川 、湖南 、贵州产虎耳草药材叶片较小岩
白菜素含量相对较高 ,经鉴别均为同属植物 。本数据
可为我省以虎耳草为原料的民族药在原料采购上提
供参考。
[参考文献]
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社 , 1997.1335.
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[ 3] 　韩力 , 倪慕云.中药朱砂根化学成分的研究[ J] .中国中
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[ 4] 　国家药典委员会.中华人民共和国药典[ S] .版一部北
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[ 5] 　刘伟华.薄层扫描法测定矮地茶中岩白菜素的含量[ J] .
中国中药杂志 , 1991 , 16(2)∶102.
[ 6] 　陈文斗.落新妇和岩菖蒲中岩白菜素的高效液相色谱法
测定[ J] .药学学报 , 1988 , 23(7)∶60.
[责任编辑:杨明富　收稿日期:2005-09-12]
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　　　　　　　　　　　　　遵　义　医　学　院　学　报　　　　　　　　　　　28卷