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高效液相色谱法测定岩陀中岩白菜素的含量



全 文 :理代谢产物成为可能 ,该研究将是解决植物保护和资源利
用最有效的理想途径和方向。
由于天名精属植物资源丰富 、种类繁多 , 在民间应用
天名精属烟管头草治疗急性肾炎有显著疗效 , 为此对天名
精属的全面 、系统的研究是十分必要的 , 应加强生态资源
的合理利用 , 发挥我国民族医药行业优势 , 解决看病贵 、看
病难的现状。 相信随着对天名精属药刚价值认识的不断
深入 , 必将进一步推动天名精的产业化发展。同时 , 促进
天名精的研究更加全面 、完善 , 促使更多安全有效的新制
剂给患者带来康复的福音。
参考文献
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*通讯作者:
收稿日期:2009-03-27
实验
研究   高效液相色谱法测定岩陀中岩白菜素的含量
王其勇 ,熊慧林
(贵州省药品检验所 , 贵州贵阳 550004)
  摘要:目的:建立岩陀中岩白菜素的含量测定方法。 方法:采用高效液相色谱法(HPLC法), 迪马公司(钻石)C
18

(5μ, 4.6mm×150mm),以乙腈 -0.1%磷酸溶液(10∶90)为流动相 , 流速为 1mL· min-1 ,检测波长为 272nm。结果:岩白
菜素在 0.21 ~ 2.08μg(r=0.9999)的范围内线性良好 ,平均回收率为 99.9%(n=6), RSD=2.1%。结论:该方法简便 、快
捷 , 可用于岩陀的质量控制。
关键词:高效液相色谱法;岩陀;岩白菜素
  中图分类号:R927.2 文献标识码:B 文章编号:1002-1108(2009)06-0078-02
  岩陀为虎耳草科植物西南鬼灯檠(Rodgersiasambucifo-
liaHemsl.)或羽叶鬼灯檠(RodgersiapinnataFranch.)的干
燥根茎 , 具有清热解毒 , 祛风除湿 , 收敛等功效。用于感冒
头疼 , 风湿骨痛 ,外伤出血等。本法采用 HPLC测定岩陀中
岩白菜素的含量 ,效果较好。
1 仪器与试药
岛津 LC-20AT高效液相色谱仪 ,岛津 SPD-M20A检
测器 , 岛津 SIL-20AT自动进样器 , 岛津色谱工作站。
岩白菜素对照品(中国药品生物鉴定所 , 批号:1532-
200202),乙腈为色谱纯 , 水为重蒸水 , 其他试剂均为分析
·78·   
第 31卷 第 6期
2009年 11月            
贵阳中医学院学报
JGCTCM            
No.6 Vol.31
November 2009
DOI :10.16588/j.cnki .issn1002-1108.2009.06.026
纯。本次试验所用岩陀药材及饮片在市场采购 , 并由我所
李杨主管药师鉴定 , 为西南鬼灯檠(Rodgersiasambucifolia
Hemsl.)的干燥根茎。
2 色谱条件
色谱柱:迪马 C
18
(5μ, 4.6mm×200mm);流动相:乙腈
-0.1%磷酸溶液(10∶90), 流速为 1mL· min-1 , 检测波
长为 272nm,进样量 10μL。
图 1 岩白菜素 HPLC图
A.溶剂;B.对照品;C.样品
3 方法与结果
3.1 对照品溶液 取岩白菜素对照品加甲醇溶解并稀释
成 0.1mg· mL-1的溶液。
3.2 供试品溶液 取本品细粉 0.3g(过二号筛), 精密称
定 , 置具塞锥形瓶中 , 精密加入甲醇 50ml, 称定重量 , 超声
处理 30分钟 , 取出 , 放冷 , 再称定重量 ,用甲醇补足减失的
重量 , 滤过 ,精密量取续滤液 5ml, 置 25ml容量瓶中 , 加甲
醇至刻度 , 摇匀 ,用 0.45μm的微孔滤膜滤过 ,即得。
3.3 线性关系考察 精密量取对照品溶液 2, 5, 10, 15,
20μL进样 , 测定峰面积 , 以岩白菜素的量(μg)为横坐标
(X), 峰面积积分值(A)为纵坐标(Y), 回归方程为:Y=
1412327X-4610, r=0.9999。结果表明岩白菜素在 0.21 ~
2.08μg的范围内线性良好。
3.4 精密度试验 取岩白菜素对照品溶液 10μL, 重复进
样 6次 , 峰面积的 RSD为 0.08%。
3.5 稳定性试验 取供试品溶液在 0, 2, 4, 6, 8, 10h时分
别测定 , 峰面积的 RSD为 1.0%。
3.6 重复性试验 精密称取上述细粉 , 6份 , 照供试品溶
液的方法制备 , 测定。以干燥品计算 , 平均含量为 9.9%,
RSD为 1.4%。
3.7 加样回收率试验 精密称取已知含量的样品适量
(0.15g)6份 , 分别精密加入岩白菜素对照品 13mg,照供试
品溶液的方法制备 , 测定。平均回收率为 99.9%, RSD为
2.1%。结果见表 1。
 表 1 加样回收率试验结果
序号 称样量(g)
相当量
(mg)
加入量
(mg)
总量
(mg)
回收率
(%) 平均(%) RSD(%)
1 0.1529 13.04 13.06 26.22 100.93
2 0.1542 13.15 14.04 27.02 98.79
3 0.156 13.30 13.33 26.33 97.72
4 0.1534 13.08 13.42 26.63 100.96
5 0.1567 13.36 13.31 26.4 97.95
6 0.1538 13.12 12.98 26.51 103.19
99.9 2.1
3.8 样品测试 3批样品结果见表 2。
 表 2 样品测定结果(n=2)
样品编号 岩白菜素 /% RSD/%
1 9.9% 0.2
2 10.9% 0.2
3 7.3% 1.2
4 讨论
4.1 取岩白菜素对照品溶液在 200 ~ 500nm波长处进行
扫描 , 岩白菜素在 216nm与 272nm的波长处有最大吸收。
由于 216nm接近末端吸收 ,故选 272nm为检测波长。
4.2 本法分别采用超声和回流进行提取方式的考察 , 结
果无明显差别 , 由于超声操作简便 , 故选超声作为提取方
式;分别采用甲醇 、乙醇 、甲醇 -水进行溶剂的选择 , 结果
表明采用甲醇提取时岩白菜素的量最高 , 故选甲醇作为溶
剂;同时采用甲醇分别超声 30、45、 60分钟 , 结果表明在 30
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分钟以后岩白菜素的量无明显增加 ,故选采用甲醇超声 30
分钟作为提取方式。
4.3 本法分别采用甲醇 -水(22∶78), 乙腈 -0.1%磷酸
溶液(10∶90)作为流动相 , 结果表明用后者作为流动相时 ,
岩白菜素的峰形 、理论板数及对称度都较好 , 故选乙腈 -
0.1%磷酸溶液(10∶90)作为流动相。
参考文献
[ 1]  贵州省药监局.贵州省中药材 、民族药材质量标准 [ S] .贵
阳:贵州科技出版社 , 2003:242.
*通讯作者:梁光义 , 贵阳中医学院 ,教授 、博士生导师 TEL:0851-5656075E-mail:guangyi liang@21cn.com
收稿日期:2009-05-13
绞股蓝对小鼠游泳时间的影响
冯昀熠 1 ,梁光义 2* , 张永萍 2 , 黄 聪 3 , 郑 斌 4
(1.贵阳中医学院 2006级研究生 , 贵州贵阳 550002;2.贵阳中医学院药学系 ,贵州贵阳 550002
3.贵阳中医学院药理教研室 , 贵州贵阳 550002;4.贵阳中医学院 2005级实习生 , 贵州贵阳 550002)
  摘要:目的:观察绞股蓝对小鼠游泳时间的影响。方法:采用小鼠抗疲劳游泳试验 [ 1] , 数据用 SPSS17.0软件包分析 ,
组间比较采用 t检验。结果:试验显示绞股蓝能增加小鼠在水中游泳时间 ,小剂量组及大剂量组跟空白对照组比较 , 有显
著性差异(P<0.05)。结论:绞股蓝具有明显的抗疲劳作用。
关键词:绞股蓝:抗疲劳
  中图分类号:R285.5 文献标识码:B 文章编号:1002-1108(2009)06-0080-01
  绞股蓝药材为葫芦科植物 [ Gynostemmapentaphyllum
(Thunb.)Makino]的干燥地上部分。 性苦 、寒 , 能清热解
毒 , 止咳祛痰 ,益气养阴 ,生津安神 [ 2] 。为了阐明其 “益气”
的功效 , 我们从抗疲劳方面考虑进行了其对小鼠游泳时间
影响的研究 [ 1] , 现报道如下:
1 材料
1.1 动物 昆明种小鼠 , 购自贵阳医学院实验动物中心 ,
小鼠体重 30 ~ 34g, 8周龄 , ♀、♂各半 , 合格证号为 SCXK
(黔)2002-2001, 先予饲养 3天适应环境 , 第 4天进行
试验。
1.2 药物 绞股蓝购于贵阳市同济堂药店 , 经贵阳中医
学院鉴定教研室鉴定为葫芦科植物绞股蓝 [ Gynostemma
pentaphylum(Thunb.)Makino]绞股蓝水煎液由贵阳中医学
院药剂教研室提供(批号 20080710), 临用前稀释成所需
浓度。
1.3 试验材料 50×30×25cm塑料盆 ,温度计 , 秒表。
2 方法
对小鼠游泳时间的影响(抗游泳疲劳实验)[ 1]
塑料盆内加水至 20cm深 , 保持水温 20℃ ±2℃。将昆
明种小鼠 30只 ,随机分成 3组 , 每组 10只。 1.对照组 , 2.
大剂量组:9g/kg, 3.小剂量组 3g/kg(剂量为生药量 , 均为
等容量 0.3mL, 不等浓度)。 ig给药 ,对照组 ig等容量饮用
水 , 给药各组各 ig等容量不同浓度的药物 , 连续 7d,末次给
药后 1h, 将小鼠置于水中游泳 , 观察小鼠游泳至力竭时间
(在水下 10s不能上浮为标准), 该时间为游泳时间。
3 结果(见表 1)
 表 1绞股蓝对小鼠游泳时间的影响(X±s, n=10)
组别 剂量(g/kg) 游泳时间(s)
空白对照组 - 351.10±53.30
大剂量组 9 450.20±79.07*
小剂量组 3 416.80±51.39*
  与空白对照组比较 , *P<0.05。
4 讨论
4.1 股蓝在贵州 , 广西等地为常见保健用药 , 被誉为 “小
人参” 。其抗疲劳主要成分为皂苷 , 能抗疲劳 、延缓衰老 ,
抵抗自由基。 迄今发现的绞股蓝皂苷(Gyp)总共达 136
种 , 现仍为探索热点 ,国家自然科学资金亦有资助研究 [ 3] ,
而本药理试验能很好地支持其皂苷成分的抗疲劳作用。
4.2 鼠游泳能力有个体差异 ,故应先做预试验 ,既能使小
鼠适应游泳 , 又可剔除游泳时间特别短或特别长的小鼠。
4.3 水温对小鼠游泳时间影响非常大 , 所以试验期间必
须保持水恒温。小鼠种类 、批次不同 ,游泳时间亦不一样 ,
故同一个试验必须使用同种同批次小鼠进行试验。 如某
批次小鼠游泳时间过长 , 亦可使小鼠负重游泳(3% ~ 10%
体重)[ 2] 。
(致谢:本试验在贵阳中医学院贵州省中药制剂研究
开发中心完成 , 在此表示衷心感谢!)
参考文献
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第 31卷 第 6期
2009年 11月            
贵阳中医学院学报
JGCTCM            
No.6 Vol.31
November 2009