全 文 :作者简介:王明慧 女,硕士。研究方向为微生物生理与发酵工艺。E-mail:695237899@ qq. com
* 通讯作者。男,博士,研究员,硕士生导师。研究方向为微生物生理与发酵工艺。E-mail:cyoujun@ sina. com
收稿日期:2013-04-16;修回日期:2013-10-11
水杨酸、萘乙酸和青霉素对大白桩菇、
褐环粘盖牛肝菌及野蘑菇菌丝生长的影响
王明慧,郜 丹,宋晓丽,李国光,陈有君* ,刘 萌,李立民
(内蒙古农业大学 生命科学学院,内蒙古 呼和浩特 010018)
摘 要 研究了水杨酸、萘乙酸及青霉素对大白桩菇、褐环粘盖牛肝菌及野蘑菇菌丝生长的影响。结果表明:
对大白桩菇,水杨酸的致死浓度不大于 1. 94 × 10 -4 g /mL,培养基中浓度大于 1. 07 × 10 -4 g /mL 抑制大白桩菇
菌丝生长,浓度在( 5. 6 × 10 -7 ) ~ ( 5. 6 × 10 -5 ) g /mL 范围内能够促进菌丝生长,浓度小于 5. 6 × 10 -8 g /mL 则
没有明显影响。对褐环粘盖牛肝菌,培养基中水杨酸浓度大于 4. 76 × 10 -6 g /mL 有抑制菌丝生长的作用,致
死浓度不大于 1. 90 × 10 -4 g /mL。培养基中水杨酸浓度在大于 5. 6 × 10 -6 g /mL条件下对野蘑菇菌丝生长有一
定的抑制作用。培养基中萘乙酸浓度在 0. 056 6 ~ 2. 264 mg /L 范围内对大白桩菇菌丝生长有一定的促进作
用。培养基中萘乙酸浓度在 0. 95 ~ 4. 75、0. 056 6 ~ 1. 132 mg /L范围内分别对褐环粘盖牛肝菌、野蘑菇菌丝生
长基本无影响。培养基中青霉素浓度在( 4. 57 × 10 -7 ) ~ ( 4. 57 × 10 -3 ) g /mL范围内对褐环粘盖牛肝菌菌丝生
长具有抑制作用。培养基中青霉素浓度较低时对大白桩菇菌丝生长起促进作用,浓度大于 1. 88 × 10 -3 g /mL
时对大白桩菇菌丝生长起抑制作用。而培养基中青霉素浓度在( 1. 88 × 10 -7 ) ~ ( 1. 88 × 10 -3 ) g /mL 范围内
对野蘑菇菌丝生长无明显作用。
关键词 大白桩菇;褐环粘盖牛肝菌;野蘑菇;菌落直径;菌丝
中图分类号 Q949. 3 文献标识码 A 文章编号 1005 - 7021( 2014) 03 - 0074 - 06
doi: 10. 3969 / j. issn. 1005 - 7021. 2014. 03. 015
Effects of Salicylic Acid,Naphthylacetic Acid & Penicillin on Mycelial
Growth of Leucopaxillus giganteus,Suillus luteus & Agaricus arvensis
WANG Ming-hui,GAO Dan,SONG Xiao-li,LI Guo-guang,CHEN You-jun,LIU Meng,LI Li-min
(Coll. of Life Sci.,Inner Mongolia Agric. Uni.,Huhhot 010018)
Abstract The effects of salicylic acid,naphthylacetic acid and penicillin on the mycelial growth of Leucopaxillus
giganteus,Suillus luteus and Agaricus arvensis were studied. The results showed that for L. giganteus,the lethal con-
centration of salicylic acid in culture medium against the mycelial growth was not greater than 1. 94 × 10 -4 g /mL,it
was inhibited when the concentration was greater than 1. 07 × 10 -4 g /mL,and it can be promoted when the concentra-
tions was in the range of (5. 6 × 10 -7)~(5. 6 × 10 -5)g /mL,but cannot be significantly affected if it was less than
5. 6 × 10 -8 g /mL. For S. luteus,when the concentrations of salicylic acid in the medium was greater than 4. 76 × 10 -6
g /mL it can inhibit the mycelial growth,lethal concentration was not greater than 1. 90 × 10 -4 g /mL. When salicylic
acid in medium was greater than 5. 6 × 10 -5 g /mL it inhibited the mycelial growth of A. arvensis to some extent. When
naphthylacetic acid was in the range of 0. 056 6 ~ 2. 264 mg /L it can promote the mycelial growth of L. giganteus to
some extent. When it was in the range of 0. 95 ~ 4. 75 mg /L and 0. 056 6 ~ 1. 132 mg /L respectively it had no effect
on the mycelial growth of S. luteus and A. arvensis. When penicillin was in the range of (4. 57 × 10 -7)~(4. 57 ×
10 -3)g /mL in the medium,it can inhibit the mycelial growth of S. luteus. Lower concentrations of penicillin in the
47 微生物学杂志 2014 年 6 月第 34 卷 第 3 期 JOURNAL OF MICROBIOLOGY Jun. 2014 Vol. 34 No. 3
medium can promote the mycelial growth of L. giganteus,and when the concentrations was greater than 1. 88 × 10 -3
g /mL it can inhibit the mycelial growth of the fungus. While the concentrations of penicillin in the medium was in the
range of (1. 88 × 10 -7)~(1. 88 × 10 -3)g /mL it had no significant effect on the mycelial growth of A. arvensis.
Keywords Leucopaxillus giganteus;Suillus luteus;Agaricus arvensis;colony diameter;mycelium
褐环粘盖牛肝菌(Suillus luteus (L.:Fr.)
Gray)、野蘑菇(Agaricus arvensis Schaeff.:Fr.)、大
白桩 菇 (Leucopaxillus giganteus (Sow.: Fr.)
Sing.)均为优良的食用菌,有很高的营养价值和
保健作用[1-3]。但是在人工培养过程中菌丝生长
缓慢、易老化,不利于生产实践应用,所以寻找加
快其生长的培养方法具有重要意义。研究表明某
些植物类激素及细菌抗生素类化合物有促进真菌
菌丝生长的作用。水杨酸的高效、低成本、无毒、
无残留等特点,使其在农业生产应用中显示出广
阔的前景[4]。纪秀娥等[5]研究发现低浓度的水杨
酸对所试 3 株平菇(平菇夏王、苏云 6 号和 9400)
菌丝的生长有明显的促进作用,而较高浓度则呈
现抑制作用。侯集瑞等[6]研究发现在浓度 2 ~ 10
μg /mL范围内的 α-萘乙酸对羊肚菌菌丝体生长
有促进作用,以 5 μg /mL 时促进作用较强;而 20
~ 40 μg /mL浓度范围内有一定的抑制作用。毛
慧玲等[7]研究表明,α-萘乙酸对茶树菇菌丝生长
起抑制作用,且浓度越低抑制作用越强。Nuhu
Alam 等[8]研究了萘乙酸对平菇生长的作用。古
红梅等[9]研究发现在所配制 100 mL 培养基中加
入 1 mL (1. 28 × 10 -3)~(6. 40 × 10 -3)U /mL 青
霉素溶液,对木耳菌丝生长具有显著促进作用。
但这些非真菌类调节剂类化合物对真菌的作用具
有普遍性还是特殊性作用还属未知,也还未见报
道水杨酸、萘乙酸及青霉素对大白桩菇、褐环粘盖
牛肝菌和野蘑菇菌丝生长的影响。为了弄清这些
问题,本文探究了 3 种真菌菌丝在一定浓度的水
杨酸、萘乙酸和青霉素作用下生长情况。
1 材料与方法
1. 1 材料
菌株来源 试验菌株褐环粘盖牛肝菌(Sp9、
00 牛)由内蒙古农业大学菌根生物技术研究室提
供,野蘑菇菌株分离自山西省右玉县的野生种,大
白桩菇菌株分离自锡林郭勒盟的野生菌株。
1. 2 方法
1. 2. 1 处理 将配置好的水杨酸、萘乙酸、青霉
素溶液,用已灭菌的细菌过滤灭菌器过滤后,加入
已灭菌的液体培养基中,配制成含有不同浓度水
杨酸、萘乙酸、青霉素的培养基。褐环粘盖牛肝菌
采用 Pach培养基为基础培养基[10]。水杨酸在培
养基中的浓度为 4. 76 × 10 -10、2. 38 × 10 -9、4. 76
× 10 -9、2. 38 × 10 -8、4. 76 × 10 -8、4. 76 × 10 -7、
4. 76 × 10 -6、4. 76 × 10 -5、1. 90 × 10 -4 g /mL;萘乙
酸在培养基中的浓度为 0. 95、1. 90、2. 85、3. 80、
4. 75 mg /L;青霉素在培养基中的浓度为 4. 57 ×
10 -7、4. 57 × 10 -6、4. 57 × 10 -5、4. 57 × 10 -4、4. 57
× 10 -3 g /mL。野蘑菇采用 CYM培养基为基础培
养基[11]。水杨酸在培养基中的浓度为 5. 6 ×
10 -9、5. 6 × 10 -8、5. 6 × 10 -7、5. 6 × 10 -6、5. 6 ×
10 -5 g /mL;萘乙酸在培养基中的浓度为 0. 056 6、
0. 283、0. 566、0. 849、1. 132 mg /L;青霉素在培养
基中的浓度为 0. 188 × 10 -6、0. 188 × 10 -5、0. 188
× 10 -4、0. 188 × 10 -3、0. 188 × 10 -2 g /mL。大白
桩菇采用 PDA 培养基为基础培养基[12]。水杨酸
在培养基中的浓度为 5. 6 × 10 -9、5. 6 × 10 -8、5. 6
× 10 -7、5. 6 × 10 -6、5. 6 × 10 -5、1. 07 × 10 -4、1. 94
× 10 -4 g /mL;萘乙酸在培养基中的浓度为
0. 056 6、0. 566、1. 132 、1. 698、2. 264 mg /L;青霉
素在培养基中的浓度为 0. 188 × 10 -6、0. 188 ×
10 -5、0. 188 × 10 -4、0. 188 × 10 -3、0. 188 × 10 -2 g /
mL。以不添加药品的基础培养基为对照,每个浓
度设 3 次重复。用 6 mm打孔器打取菌块,接于固
体平板上,于 25 ℃恒温培养箱培养。
1. 2. 2 菌落直径和菌丝干重的测定 每 2 d 测
定 1 次菌落直径大小。以菌落中心为中心点,在
平板上划“十”字,用游标卡尺在 2 条线上测量长
度,再取 2 次的平均值作为菌落大小,以统计菌丝
的生长情况。最后 1 次测定直径后,将菌落用接
种刀取出,在沸水浴中煮掉菌丝上培养基,用吸水
纸吸干,包在烘干称量过的称量纸中,在烘干箱中
烘干至恒重,测量菌丝的干重。
2 结果与分析
573 期 王明慧等:水杨酸、萘乙酸和青霉素对大白桩菇、褐环粘盖牛肝菌及野蘑菇菌丝生长的影响
2. 1 水杨酸对 3 种真菌生长的影响
2. 1. 1 水杨酸对大白桩菇生长的影响 不同浓
度水杨酸处理大白桩菇菌丝生长的趋势曲线见图
1、图 2 所示,水杨酸浓度在(5. 6 × 10 -9)~(5. 6 ×
10 -8)g /mL范围内,大白桩菇菌落直径及菌丝干
重与对照相比均没有显著性差异;水杨酸浓度在
(5. 6 × 10 -7)~(5. 6 × 10 -5)g /mL 范围内,随着
浓度升高,大白桩菇菌落直径和菌丝干重增大,且
大于对照。浓度为(5. 6 × 10 -7)、(5. 6 × 10 -5)g /
mL的处理菌落直径显著高于对照,5. 6 × 10 -6 g /
mL浓度下菌落直径极显著高于对照、菌丝干重显
著高于对照,5. 6 × 10 -5 g /mL 浓度下菌丝干重极
显著高于对照。水杨酸浓度大于 5. 6 × 10 -5 g /mL
条件下,随着水杨酸浓度升高,菌落直径和菌丝干
重减小,在 1. 94 × 10 -4 g /mL 浓度下菌丝不生长。
由此得知,水杨酸浓度在(5. 6 × 10 -9)~(5. 6 ×
10 -8 g /mL)范围内对大白桩菇菌丝生长没有影
响,浓度在 5. 6 × 10 -7 ~ 5. 6 × 10 -5 g /mL 范围内
能够促进大白桩菇菌丝生长,浓度大于 1. 07 ×
10 -4 g /mL则抑制大白桩菇菌丝生长。
图 1 大白桩菇菌落直径随水杨酸
浓度的变化趋势
Fig. 1 Trendes of Leucopaxillus giganteus colony diameters
with the concentration of salicylic acid
图 2 大白桩菇菌丝干重随水杨酸浓度的变化趋势
Fig. 2 Trend of the dry weight of Leucopaxillus giganteus
mycelium with the concentration of salicylic acid
2. 1. 2 水杨酸对褐环粘盖牛肝菌生长的影响
不同浓度水杨酸对褐环粘盖牛肝菌 Sp9 菌落直径
的影响见图 3。培养基中水杨酸浓度在 0 ~ 4. 76
× 10 -7 g /mL范围内,不同处理间菌落直径没有显
著差异;浓度大于 4. 76 × 10 -7 g /mL 条件下,随着
水杨酸浓度增加,Sp9 菌落直径逐渐减小,且小于
对照。水杨酸浓度大于 4. 76 × 10 -5 g /mL 条件
下,与对照相比差异达到极显著水平,1. 90 × 10 -4
g /mL浓度处理菌丝完全没有生长。由此可知,水
杨酸浓度在(4. 76 × 10 -10)~(4. 76 × 10 -7)g /mL
范围内,对 Sp9 菌落直径生长无明显作用;浓度大
于 4. 76 × 10 -6 g /mL 时抑制 Sp9 菌落直径的增
长,且浓度越高抑制作用越强,致死浓度可能不大
于 1. 90 × 10 -4 g /mL。
图 3 Sp9 菌落直径随水杨酸浓度的变化趋势
Fig. 3 Trendes of Sp9 colony diameters with the
concentration of salicylic acid
不同浓度水杨酸对褐环粘盖牛肝菌 Sp9 菌丝
干重的影响情况见图 4。水杨酸浓度小于 4. 76 ×
10 -10 g /mL 的处理,菌丝干重与对照基本相同;
水杨酸浓度在 (4. 76 × 10 -9) ~ (4. 76 × 10 -6)
g /mL范围内菌丝干重均大于对照组,但是 t 检
验差异都没有达到显著水平,4. 76 × 10 -7 g /mL
浓度处理菌丝干重与对照之间差值最大 (P =
0. 08)。水杨酸浓度大于 4. 76 × 10 -7 g /mL 条件
下,随着浓度增加,菌丝干重减小;浓度大于
4. 76 × 10 -5 g /mL条件下,菌丝干重小于对照组,
1. 90 × 10 -4 g /mL浓度下菌丝干重增长为零。由
此可见,水杨酸浓度在 (4. 76 × 10 -10) ~
(4. 76 × 10 -6)g /mL范围内有促进 Sp9 菌丝重量
增长的作用,浓度高于 4. 76 × 10 -6 g /mL 时则抑
制菌丝重量增长。
67 微 生 物 学 杂 志 34 卷
图 4 Sp9 菌丝干重随水杨酸浓度的变化趋势
Fig. 4 Trend of the dry weight of Sp9 mycelium with
the concentration of salicylic acid
2. 1. 3 水杨酸对野蘑菇生长的影响 实验结果
表明,经不同浓度水杨酸处理,野蘑菇菌丝生长没
有表现出明显差异,各浓度水杨酸处理下菌落直
径相差不大,而菌丝干重有所差异。野蘑菇菌丝
干重随水杨酸浓度的变化曲线如图 5 所示。经不
同浓度水杨酸的处理,野蘑菇菌丝干重均低于对
照,且随水杨酸浓度的增加,菌丝干重大致呈递减
趋势。在 5. 6 × 10 -6 g /mL 浓度下菌丝干重与对
照有显著差异,5. 6 × 10 -5 g /mL 浓度下菌丝干重
与对照相比有极显著差异。由此得知,水杨酸浓
度在(5. 6 × 10 -9)~(5. 6 × 10 -5)g /mL范围内对
野蘑菇菌落直径大小无明显影响,但是菌丝干重
降低,菌丝稀疏、徒长是菌丝干重降低的原因。
图 5 野蘑菇菌丝干重随水杨酸浓度的变化趋势
Fig. 5 Trend of the dry weight of Agaricus arvensis Schaeff
mycelium with the concentration of salicylic acid
2. 2 萘乙酸对 3 种真菌生长的影响
2. 2. 1 萘乙酸对大白桩菇菌丝生长的影响 不
同浓度萘乙酸对大白桩菇菌丝生长的影响如图
6、图 7 所示。所有浓度萘乙酸处理大白桩菇菌落
直径及菌丝干重均大于对照,在 0. 056 6 ~ 0. 566
mg /L浓度范围内大白桩菇菌落直径及菌丝干重
逐渐增大,在 0. 566 ~ 2. 264 mg /L 浓度范围内菌
落直径及菌丝干重逐渐减小,但仍大于对照。萘
乙酸浓度在 2. 264 mg /L 下菌落直径与对照相比
达到显著水平。由此可看出,萘乙酸浓度在
0. 056 6 ~ 2. 264 mg /L 范围内对大白桩菇菌丝生
长具有一定的促进作用。
图 6 大白桩菇菌落直径随萘乙酸浓度变化曲线
Fig. 6 The curves of Leucopaxillus giganteus colony diameters
with the concentration of naphthylacetic acid
图 7 大白桩菇菌丝干重随萘乙酸浓度的变化曲线
Fig. 7 The curves of the dry weight of Leucopaxillus giganteus
mycelium with the concentration of naphthylacetic acid
2. 2. 2 萘乙酸对褐环粘盖牛肝菌及野蘑菇菌丝
生长的影响 由实验结果可知,经不同浓度萘乙
酸处理,褐环粘盖牛肝菌 Sp9、00 牛及野蘑菇菌丝
生长虽然有所差异,但与对照相比差异不明显,经
t检验分析可知没有达到显著水平。所以,在所试
萘乙酸浓度范围内对褐环粘盖牛肝菌 Sp9、00 牛
及野蘑菇菌丝生长没有影响。
2. 3 青霉素对 3 种真菌生长的影响
2. 3. 1 青霉素对褐环粘盖牛肝菌菌丝生长的影
773 期 王明慧等:水杨酸、萘乙酸和青霉素对大白桩菇、褐环粘盖牛肝菌及野蘑菇菌丝生长的影响
响 由不同浓度青霉素处理后,褐环粘盖牛肝菌
00 牛菌落直径生长情况如图 8 所示。经不同浓
度青霉素处理,褐环粘盖牛肝菌 00 牛菌落直径生
长小于对照,且浓度越高菌落直径越小。青霉素
浓度在(4. 57 × 10 -6)~(4. 57 × 10 -4)g /mL范围
内,00 牛菌落直径显著低于对照,浓度在 4. 57 ×
10 -3 g /mL条件下 00 牛菌落直径极显著低于对
照。经不同浓度青霉素处理后,褐环粘盖牛肝菌
Sp9 菌落直径也小于对照,在(4. 57 × 10 -6)~
(4. 57 × 10 -3)g /mL 范围内,随着浓度的升高,
Sp9 菌落直径减小。经 4. 57 × 10 -3 g /mL 浓度处
理,Sp9 菌落直径显著低于对照,经 4. 57 × 10 -7、
4. 57 × 10 -6 g /mL浓度处理,Sp9 菌落直径极显著
低于对照。由此可知,青霉素浓度在(4. 57 ×
10 -7)~(4. 57 × 10 -3)g /mL 范围内对褐环粘盖
牛肝菌菌落直径生长具有抑制作用,且浓度越高
抑制作用越强。
图 8 00 牛菌落直径随青霉素浓度变化趋势
Fig. 8 Trendes of 00 cattle colony diameters with
the concentration of penicillin
由不同浓度青霉素处理后,褐环粘盖牛肝菌
00 牛菌丝干重情况如图 9 所示。经不同浓度青
霉素处理,褐环粘盖牛肝菌 00 牛菌丝干重小于对
照,且浓度越高菌丝干重越小。青霉素浓度在
4. 57 × 10 -5、4. 57 × 10 -4 g /mL 条件下 00 牛菌丝
干重与对照相比达到极显著差异。经不同浓度青
霉素处理后,褐环粘盖牛肝菌 Sp9 菌丝干重小于
对照,且浓度越高菌丝干重越小。经 4. 57 × 10 -4
g /mL浓度处理,Sp9 菌丝干重显著低于对照。由
此看出,青霉素浓度在 4. 57 × 10 -7 ~ 4. 57 × 10 -3
g /mL范围内对褐环粘盖牛肝菌菌丝干重具有抑
制作用。
图 9 00 牛菌丝干重随青霉素浓度变化趋势
Fig. 9 Trend of the dry weight of 00 cattle mycelium with
the concentration of penicillin
2. 3. 2 青霉素对大白桩菇及野蘑菇菌丝生长的
影响 由实验结果可知,青霉素在较低浓度(小于
1. 88 × 10 -5 g /mL)下对大白桩菇菌丝生长具有一
定的促进作用,但促进作用不明显;浓度大于
1. 88 × 10 -5 g /mL下对大白桩菇菌丝生长起抑制
作用。由不同浓度青霉素处理后的野蘑菇菌丝生
长之间没有表现出明显差异,所以培养基中青霉
素浓度在(1. 88 × 10 -7)~(1. 88 × 10 -3)g /mL 范
围内对野蘑菇菌丝生长没有影响。
3 讨 论
经过试验研究发现,水杨酸在较低浓度下能
够促进某些真菌(如大白桩菇、褐环粘盖牛肝菌
等)菌丝生长,较高浓度下则抑制真菌菌丝生长,
甚至使真菌致死。可以通过加入适量的水杨酸加
快大白桩菇、褐环粘盖牛肝菌菌丝的生长速度,且
水杨酸在低浓度下不仅对人体无害,而且还有杀
菌、消炎等功效。
萘乙酸在较低浓度下会促进大白桩菇菌丝的
生长,但对褐环粘盖牛肝菌、野蘑菇菌丝生长基本
无影响。萘乙酸是一种植物生长调节剂,也可以
促进某些真菌的生长。值得注意的是萘乙酸对人
体有一定毒性,在使用时应严格控制用量。
青霉素在较低浓度下既能够促进大白桩菇菌
丝的生长,也能够抑制褐环粘盖牛肝菌菌丝生
长,但对某些真菌 (如野蘑菇)无明显影响。
青霉素虽然是一类抗生素,但同时也可以促进某
些真菌的生长,这其中的作用机理还有待于进一
步研究。
87 微 生 物 学 杂 志 34 卷
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973 期 王明慧等:水杨酸、萘乙酸和青霉素对大白桩菇、褐环粘盖牛肝菌及野蘑菇菌丝生长的影响