全 文 ：2011.10·
技术 Technique·食品工程
260g ／ L、 pH 值 5．0、 接种量 10％ 、 NH4NO3 的添加量
0．16g ／ L、 温度 37℃。 在此条件下进行乳酸发酵测得乳酸
产量为 50．08g ／ L。
参 考 文 献
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收稿日期： 2011－04－06
作者简介： 孟陆丽 （1980—）， 女， 广西桂林人， 硕士， 主要从事植物
蛋白方面的研究。
通信地址： （545006） 广西柳州市东环路 268 号
美味牛肝菌多糖提取和纯化条件分析
谷 绒
（江苏食品职业技术学院酒店与旅游管理学院）
【摘要】 通过对美味牛肝菌多糖提取进行单因素试验和正交试验分析确定了最佳多糖提取工
艺条件， 即： 浸提温度为 100℃、 浸提时间 4h、 料液比为 1∶40； 进一步运用正交试验对多糖进行纯
化条件探索， 最后确定了多糖纯化条件为： Sevage 试剂添加量为糖液体积的 0．2 倍， 氯仿与正丁醇
体积比 6∶1， 蛋白脱除次数为 4次， 提取量为 3．41％。
【关键词】 牛肝菌； 提取； 正交试验
中图分类号： S 646．9 文献标识码： A 文章编号： 1000-9868(2011)10-0150-02
美味牛肝菌 （Boletus edulis） 又名大脚菇， 白牛肝
菌， 牛肝菌科。 菌盖直径 4～15cm。 扁半球形或较平展、
不黏、 光滑、 边缘钝、 呈黄褐色、 土褐色或赤褐色。 主
要分布于河南、 四川、 云南、 内蒙古、 福建和陕西等地，
属于优质野生食用菌， 其子实体厚而细软， 味道鲜美，
也可入药。 可治腰腿疼痛， 手足麻木， 筋骨不舒， 四肢
抽搐， 其中的多糖和碱性蛋白可抗肿瘤、 病毒， 调节人
体的免疫功能。 本文从美味牛肝菌中提取牛肝菌多糖，
建立其纯化方法， 为牛肝菌多糖药物的开发应用提供试
验依据。
1 试验材料与方法
1．1 试验材料
原料： 美味牛肝菌， 市售。
试剂： 乙醇、 苯酚、 硫酸、 正丁醇、 氯仿等， 均为
国产分析纯。
仪器： Unic UV ／ vis－2802PC， 上海尤尼克仪器有限
公司； 低速台式大容量离心机， 上海安亭科学仪器厂；
RE－52AA旋转蒸发仪， 上海嘉鹏科技有限公司。
1．2 试验方法
1．2．1 牛肝菌多糖提取工艺
美味牛肝菌子实体粉碎→低温烘干→多糖浸提→过滤，
取滤液→乙醇醇析→4 000r ／ min 离心 10min， 取沉淀→Se-
vage法脱蛋白→干燥即得成品
1．2．2 多糖的提取和纯化
分别准确称取干制美味牛肝菌粉末 10g， 对水浸提
的温度、 时间和料液比进行单因素摸索以确定各因素的
水平， 用正交试验优选出最佳浸提工艺条件。 离心沉淀
150
DOI:10.16167/j.cnki.1000-9868.2011.29.043
2011.10·
食品工程·Technique技术
表 2 牛肝菌粗多糖纯化正交试验结果分析表
试验号
Sevage 试剂添加量为
糖液体积的倍数 A
氯仿与正丁醇
体积比 B
蛋白脱除
次数 C
多糖
提取率（％）
1
2
3
4
5
6
7
8
9
1（0．1）
1
1
2（0．2）
2
2
3（0．3）
3
3
1（4∶1）
2（5∶1）
3（6∶1）
1
2
3
1
2
3
1（2）
2（3）
3（4）
2
3
1
3
1
2
2．78
2．89
3．34
3．21
3．09
3．02
2．95
2．90
3．11
k1
k2
k3
R
3．003
3．107
2．9867
0．120
2．980
2．960
3．157
0．197
2．900
3．070
3．127
0．227
表 1 牛肝菌粗多糖正交试验结果分析表
试验号
浸提温度
A（℃）
浸提时间
B（h）
料液比
C（g ／ mL）
粗多糖
提取率（％）
1
2
3
4
5
6
7
8
9
1（80）
1
1
2（90）
2
2
3（100）
3
3
1（3）
2（4）
3（5）
1
2
3
1
2
3
1（1∶20）
2（1∶30）
3（1∶40）
2
3
1
3
1
2
3．15
3．19
3．32
3．26
3．84
3．76
3．88
3．62
3．49
k1
k2
k3
R
3．220
3．620
3．663
0．443
3．430
3．550
3．523
0．120
3．510
3．313
3．680
0．367
后采用 Sevage 试剂与样液的比值进行单因素摸索以确定
Sevage 试剂添加量、 氯仿与正丁醇体积比和蛋白脱除次
数三因素的水平， 再用正交试验确定出最佳组合。 用苯
酚－硫酸法测定粗多糖含量， 考马斯亮蓝 G－250 法测定
蛋白质含量， 二者差即为多糖含量。
2 结果与分析
2．1 提取工艺参数确定
经浸提温度、 浸提时间及料液比等因素进行牛肝菌
粗多糖提取单因素试验， 正交试验结果分析见表 1。
由表 1 可知： 美味牛肝菌提取因素条件最佳组合为
A3B2C3， 而实际试验组合为 A3B1C3， 将 2个组合分别进行
试验， 平行 3 次取平均值分别为 3．95％和 3．89％。 结果
表明： 组合 A3B2C3所得提取率最大， 效果最好， 故牛肝
菌多糖提取工艺条件选用组合 A3B2C3， 即： 浸提温度为
100℃、 浸提时间 4h和料液比为 1∶40。
2．2 粗多糖中蛋白质去除工艺条件确定
粗多糖中的杂质以蛋白质含量最高， 所以除蛋白质
工艺条件的确定是牛肝菌多糖纯化的关键。 本次试验选
用 Sevage 法去除蛋白， 影响因素主要有 Sevage 试剂添加
量、 氯仿与正丁醇体积比和蛋白脱除次数。 正交试验结
果分析见表 2。
由表 2 可知 ： 美味牛肝菌纯化条件最佳组合为
A2B3C3， 而实际试验组合为 A1B3C3， 将 2个组合分别进行
3次试验， 取平均值为 3．41％和 3．36％。 结果表明： 组合
A2B3C3所得多糖提取率最大， 效果最好， 故牛肝菌多糖
纯化工艺条件选用组合为 A2B3C3， Sevage 试剂添加量为
糖液体积的 0．2倍、 氯仿与正丁醇体积比 6∶1和蛋白脱除
次数为 4次。
3 结论
本文研究了牛肝菌多糖的提出和纯化工艺条件， 通
过试验确定提取工艺条件为： 浸提温度为 100℃、 浸提
时间 4h和料液比为 1∶40； 进一步运用正交试验对多糖进
行纯化条件探索， 最后确定了多糖纯化条件为： Sevage
试剂添加量为糖液体积的 0．2 倍、 氯仿与正丁醇体积比
6∶1和蛋白脱除次数为 4次， 最终得到牛肝菌多糖的提取
量为 3．41％
参 考 文 献
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收稿日期： 2011－04－21
作者简介： 谷绒 （1981—）， 女， 四川成都人， 硕士研究生， 讲师， 研
究方向烹饪工艺与营养。
通信地址： （223003） 江苏省淮安市枚承东路 4 号
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