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现　代　中　医　药
ModernTraditionalChineseMedicine
2008年 1月第 28卷第 1期
Jan.2008　Vol.28 　No.1
HPLC法测定香莲化滞片中阿魏酸的含量
肖培云　　杨永寿　　刘光明
(云南大理学院药学院 ,云南 大理 671000)
摘　要:目的 建立 HPLC法测定香莲化滞片中阿魏酸的含量。方法 色谱条件:AgilentZORBAXSBC18色谱
柱(4.6×150mm, 5μm),流动相为甲醇 -0.1%磷酸水溶液 ,在 0 ～ 15min内梯度洗脱(20:80至 45:55), 检测波
长为 322nm,流速为 1.0mL/min, 柱温为 30℃。结果 阿魏酸在 0.0101 ～ 1.01μg范围内线性关系良好 , r值为
0.9999,平均回收率为 99.66%, RSD为 0.57%。结论 本法操作简便 、快速 、分离效果好 、稳定性高 、重现性好 ,
为全面控制香莲化滞片的质量提供了一个可靠的方法。
关键词:高效液相色谱法;香莲化滞片;阿魏酸
中图分类号:R284.2　　文献标识码:B　　文章编号:1672-0571(2008)01-0058-02
DeterminationofFerulicAcidinXianglianhuazhiTabletsbyHPLC
XiaoPeiyun, YangYongshou, LiuGuangming
(FacultyofPharmacy, DaliUniversity, DaliYunnan671000, China)
Abstract:ObjectiveToestablishedamethodfordeterminationofferulicacidinXianglianhuazhiTablets.Method
ThechromatographicconditionforferulicacidwasthattheAgilentZORBAXSBC18(4.6×150mm, 5μm)wasused, the
mobilephaseconsistedofCH3OH-H2O(0.1%H3PO4), gradientelution(CH3OH%:0min20%, 15 min45), the
UVwavelengthofferulicacidwas322nm, theflowratewas1.0mL/min, thetemperatureofcolumnwas30℃.Result
ferulicacidwasgoodlinearityovertherangeof0.0101～ 1.01μg, (r=0.9999), Theaveragerecoverieswasintherang-
erof99.66%, RSDwas0.57%.ConclusionThemethodissimple, sensitive, accurate, reproducibleandcanbeused
tocontrolthequalityofXianglianhuazhiTablets.
KeyWords:HPLC, XianglianhuazhiTablets, ferulicacid
　　香莲化滞片是由黄芩 、当归 、白芍 、木香 、陈皮 、
槟榔等十二味中药经加工制成的中药制剂 。具有
调中化滞 ,止痛止痢的功效 。用于红白痢疾 ,里急
后重 ,肚腹绞痛 ,停滞不消 ,效果显著。现行部颁标
准中无含量测定项 ,且处方中当归中所含的阿魏酸
为主要有效成分 [ 1] ,本实验根据阿魏酸的理化性
质 ,建立了高效液相色谱法测定香莲化滞片中阿魏
酸的含量。结果表明 ,此法操作简便 ,结果准确可
靠 ,可用于该药的质量控制 。
1　仪器和试药
Agilent1100高效液相色谱仪 , G1315A/BDAD
检测器 , G1313AALS自动进样器 , Agilent1100色
谱工作站(美国安捷伦科技有限公司);梅特勒电
子天平 AE240(瑞士);SZ-97自动三重纯水蒸馏
器(上海亚荣生化仪器厂);超声波清洗器(上海科
导超声仪器公司)。甲醇(色谱纯)、水(重蒸馏纯
净水)、阿魏酸对照品(中国药品生物制品检定所 ,
批号 110715-200413);香莲化滞片 (大理白族自
治州中药制药股份有限公司)。
2　方法与结果
2.1　色谱条件　色谱柱:AgilentZORBAXSBC18
(4.6 ×150 mm, 5 μm);流动相:甲醇 -水 (含
0.1%磷酸)的比例在 0 ～ 15min内由 20:80至 45:
55;流速:1.0 mL/min;柱温:30 ℃;检测波长为
322nm[ 2] 。在该色谱条件下阿魏酸被洗脱且达到
基线分离 ,保留时间约为 12.812min。按阿魏酸峰
计算理论塔板数不低于 5 000。对照品 、样品及阴
性对照色谱图见图 1。
DOI :10.13424/j.cnki.mtcm.2008.01.029
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图 1　高效液相色谱图
A.对照品;B.供试品;C.阴性对照
2.2　对照品储备液的制备　精密称取阿魏酸对照
品 5.05mg置 5mL的容量瓶中 ,加甲醇溶解并定
容 ,摇匀 ,作为储备液 。
2.3　供试品溶液的制备　取供试品 10片 ,精密称
定 ,求出平均片重 ,研细 ,过 5号筛 ,取约 0.5g,精密
称定 ,置具塞锥形瓶中 ,精密加入甲醇 25mL,密塞 ,
称定重量 ,超声处理 30min,放冷 ,再称定重量 ,并用
甲醇补足损失重量 ,摇匀 ,滤过 ,取续滤液 ,即得。
2.4　阴性溶液的制备　按处方制备不含当归的片
剂 ,再按供试品溶液的制备方法制成阴性溶液 。
2.5　线性关系的考察　精密吸取阿魏酸对照品贮
备液 ,用甲醇配制成质量浓度为 0.00101、0.00505、
0.0101、0.0505、 0.101 mg/mL系列对照品溶液 。
取上述 5种溶液在选定色谱条件下分别取 10μL
进样 ,记录峰面积 。以质量浓度为横坐标 ,峰面积
为纵坐标 ,绘制标准曲线 ,并进行线性回归分析 ,阿
魏酸的回归方程为:
Y=3560.5X+0.07, r=0.9999;
线性范围为 0.0101 ～ 1.01μg。
2.6　精密度试验　取阿魏酸对照品溶液(0.0101mg/
mL),连续进样 6次 ,分别测定峰面积 ,计算得 RSD
为 0.11%。表明精密度良好 。
2.7　重复性实验　按上述供试品制备方法及色谱
条件操作 ,取同一批样品(批号 070417), 制备 5份
供试品溶液 ,依次进样测定阿魏酸的含量 ,结果阿
魏酸含量平均值为 158.1 μg/g, RSD为 1.54%。
结果表明本实验重复性良好 。
2.8　稳定性试验　取同一供试品溶液分别于 0、
2、4、6、8h进样 10μL,按上述色谱条件测定阿魏酸
的峰面积 , RSD为 2.01%。结果表明供试品溶液
在 8h基本稳定 。
2.9　加样回收率试验　取已知含量的样品(批号
070417)粉末约 0.25g,分别精密加入阿魏酸对照品
溶液 ,按供试品溶液的制备方法制备供试品溶液 ,依
法测定 ,计算回收率 ,结果见表 1。结果表明 ,本实验
确立的提取方法与处理方法回收率较好。
表 1　回收率试验结果　(n=5)
称样量(g) 样品含量(μg) 加入量(μg) 测得值(μg) 回收率(%) 平均回收率(%) RSD
0.2544 40.22 40.4 80.01 98.49
0.2526 39.92 40.4 60.15 100.15
0.2521 39.86 40.4 80.25 99.83 99.53 0.57
0.2532 40.03 40.4 80.32 99.73
0.2538 40.13 40.4 80.31 99.45
2.10　样品含量测定　采用上述供试品溶液制备
方法及色谱条件 ,对 3批样品中的阿魏酸含量进行
测定 ,结果见表 2。
表 2　样品含量测定结果　(n=3)
批号 阿魏酸含量(mg/片) RSD(%)
061207 0.0882 1.12
070202 0.0932 1.86
070417 0.0958 1.65
3　讨论
本实验为确定测量波长 ,对阿魏酸对照品溶液
在 200 ～ 400nm范围内进行扫描 ,阿魏酸在 320nm
处有最大吸收。为了使各组分达到吸收强 、干扰小
的目的 ,选择在 322nm测定阿魏酸。
本品组方较复杂 ,相互干扰因素多 ,经多次试
验 ,采用本文所报道的色谱条件分离效果好 ,理论
塔板数高 ,重现性好 ,能有效控制本品质量。
本实验曾采用乙腈 -水(0.1%磷酸)作流动相
进行梯度洗脱 ,结果表明 ,分离度较差。用甲醇 -水
(0.1%磷酸)进行梯度洗脱 ,分离度和峰形均较好。
参考文献
[ 1]中华人民共和国卫生部药品标准.中药成方制剂(第 15
册)[ S] .1997:131.
[ 2]国家药典编委会.中国药典(一部)[ M] .北京:化学工
业出版社 , 2005:89.
(收稿日期:2007-09-05)