全 文 ：中药新药与临床药理 2013年 1月第 24卷第 1期
藤茶总黄酮及黄酮醇类化合物的抗血栓作用研究
叶 %勇 1，2，欧贤红 3，黄秋洁 4，刘华钢 2，宋云飞 1（1. 桂林莱茵生物科技股份有限公司博士后工作站，广西 桂
林 %541100； 2. 广西医科大学药学院，广西 南宁%530021；3. 桂林医学院药学院，广西 桂林%541004；4. 广西
中医药大学药学院，广西 南宁 530001）
摘要：目的 研究藤茶提取物藤茶总黄酮（TF）、二氢杨梅素（DMY）及杨梅素（Myr）的抗凝血及溶栓作用。
方法 采用毛细玻璃管法观察对小鼠凝血时间的影响；采用下腔静脉结扎大鼠血栓模型，观察受试药物的抗血
栓作用。结果 与正常对照组比较，高剂量（2 mg·kg-1）的TF、DMY及 Myr均能明显延长小鼠凝血时间（P ＜ 0.05，
P ＜ 0.01）；低剂量（0.5 mg·kg-1）的 TF、DMY及 Myr虽有延长小鼠凝血时间的趋势，但差异无统计学意义。下
腔静脉结扎血栓模型结果显示，阳性药川芎嗪、Myr 及 DMY 各组的血栓干重均明显低于正常对照组（P <
0.01，P < 0.05）；Myr高剂量组的血栓湿重明显低于正常对照组（P < 0.01），TF高、低剂量组的血栓湿重、干
重与正常对照组比较，差异均无统计学意义。各实验组对血栓的抑制率大小依次为：Myr高剂量组 > 川芎嗪组
> DMY低剂量组 > Myr低剂量组 > DMY高剂量组 > TF高剂量组 > TF低剂量组。结论 Myr和 DMY可能是藤
茶抗血栓作用的主要有效成分，且 Myr的抗血栓作用稍强于 DMY。
关键词：藤茶；藤茶总黄酮；二氢杨梅素；杨梅素；抗凝血；抗血栓
中图分类号：R285.5 文献标志码： A 文章编号：1003-9783（2013）01-0033-04
doi：10.3969/j.issn.1003-9783.2013.01.009
Antithrombotic Effect of Total Flavonoids and Monomeric Compounds from Ampelopsis grossedentala
YE Yong1，2，OU Xianhong3，HUANG Qiujie4，LIU Huagang2， SONG Yunfei1（1. Postdoctoral R&D Workstations，
Guilin Layn Natural Ingredients Co. Ltd，Guilin 541100 Guangxi，China；2. School of Pharmacy，Guangxi Medical
University，Nanning 530021 Guangxi，China；3. Department of Pharmacy，Guilin Medical College，Guilin 541004
Guangxi，China； 4. School of Pharmacy，Guangxi University of Traditional Chinese Medicine，Nanning 530001
Guangxi，China）
Abstract：Objective To study the anti-coagulation and thrombolytic effect of total flavonoids（TF），dihydromyricetin
（DMY）and myricetin（Myr）from Ampelopsis Grossedentala. Methods The effects on coagulation time in mice were
observed by capillary glass tube method， and the antithrombotic effects were observed in mouse model of venous
thrombosis induced by ligation of inferior vena cava. Results Compared with the normal group，high dose（2 mg·kg-1）
of TF，DMY and Myr could significantly prolong the coagulation time of mice（P ＜ 0.05，P ＜ 0 .01）, respec －
收稿日期：2012-09-07
作者简介：叶勇，男，博士，讲师，研究方向：中药新制剂与新剂型研究。通信作者：欧贤红，博士，讲师，研究方向：药理学。Email：blue－
eye8081@163.com。
基金项目：广西教育厅基金（201010LX340）。
[9] Strunecká A，Hynie S，Klenerová V. Role of oxytocin/oxytocin re－
ceptor system in regulation of cell growth and neoplastic processes[J].
Folia Biol（Praha），2009，55（5）：159-165.
[10] Oehler MK，Greschik H，Fischer DC，et a1. Functional characteri－
zation of somatic point mutation of the human estrogen receptor alpha
（hER alpha）in edenomyosis uteri[J]. Mol Hum Reprod，2004，10
（12）：850-853.
[11] 郑王巧，宋丽华，李海菊，等. PGE2/cAMP信号通路对芍药甘草
汤镇痛作用的影响[J]. 中药药理与临床，2008，24（1）：1-2.
[12] 张玲玲，陈尹，陈镜宇，等. 芍药苷对胶原诱导性关节炎大鼠滑
膜细胞Ras和Raf-1表达的影响[J]. 中国新药杂志，2008，17（5）：
375-379.
[13] Chen T，Guo ZP，Jiao XY，et al . Peoniflorin suppresses tumor
necrosis factor -α induced chemokine production in human dermal
microvascular endothelial cells by blocking nuclear factor -κB and
ERK pathway[J]. Arch Dermatol Res，2011，303（5）：351-361.
（编辑：邓响潮）
33· ·
Traditional Chinese Drug Research ＆ Clinical Pharmacology，2013 Janunary，Vol． 24 No． 1
tively . However，low dose（0.5 mg·kg-1）of TF，DMY and Myr had no s ignificant effect on coagulation time of
mice. In mouse model of venous thrombosis，positive d rug（tetramethylpyrazine），myricetin and dihydromyricetin
could obviously reduce dry thrombus weight（P < 0.01，P < 0.05 compared with the normal group），high dose of
myricetin could obviously reduce wet thrombus weight（P < 0.01）. However，high- and low-dose TF groups had no
significant effect on wet and dry thrombus weight compared with the normal group. The effect of each group on throm－
bus inhibition ratio was as follows：2 mg·kg-1 Myr> tetramethylpyrazine > 0.5 mg·kg-1 DMY>0.5 mg·kg-1 Myr> 2 mg·
kg-1 DMY>2 mg·kg-1 TF> 0.5 mg·kg-1 TF. Conclusion Myr and DMY may be the main antithrombotic active ingredi－
ent of flavonoids from A. grossedntata，and myricetin has stronger thrombolytic effect than dihydromyricetin.
Keywords：Ampelopsis Grossedentala； Total flavonoids；Dihydromyricetin；Myricetin；Anti -coagulation；Anti -
thrombosis
多羟基黄酮化合物是植物界分布最广的黄酮类
化合物，二氢杨梅素和杨梅素均属于多羟基黄酮化
合物。二氢杨梅素（3，5，7，3’，4’，5’-六羟基
2，3-双氢黄酮醇，dihydromyricetin，DMY）广泛存在
于葡萄科植物中，在蛇葡萄属植物中含量尤其丰富[1]。
杨梅素（3，5，7，3’，4’，5’-六羟基黄酮醇，
myricetin，Myr）异名杨梅树皮素、杨梅黄酮、杨梅酮，
属黄酮醇类化合物，存在于壳豆科、豆科、报春花
科、葡萄科、菊科等植物中[2]。研究发现，DMY具有
明显的抗血栓作用[4]。以 Myr为主药制成的 Myr分散
片具有明显的抗凝血效果[6]。Myr可抑制血小板活化因
子（PAF）介导的兔血小板聚集、5-羟色氨（5-HT）释
放及血小板内钙离子浓度升高，从而起到保护心血
管的作用，且其抗 PAF作用比红花的有效成分羟基红
花黄色素 A作用强[5]。DMY和Myr均为藤茶的有效活
性成分，且 DMY单体含量高达 30.60 %[7]。药理研究
表明，藤茶总黄酮具有抗血栓作用 [8]。为探讨 DMY
和 Myr 是否为藤茶总黄酮抗血栓作用的主要活性物
质，本研究采用毛细玻管法和静脉血栓模型，观察
并比较藤茶 TF、DMY及 Myr的抗凝血及溶栓作用。
1 材料与方法
1.1 药品及试剂 藤茶总黄酮（TF）、二氢杨梅素
（DMY）及杨梅素（Myr），均为自制，含量分别为 74 %，
90 %，83 %，以 1 ％ DMSO超声溶解成适宜浓度备
用；川芎嗪，美国 Sigma公司，批号：1000783180；
肝素钠，国药集团化学试剂有限公司，批号：
63007131。
1.2 动物 昆明种小鼠，SPF 级，体质量 18~22 g；
SD大鼠，SPF级，体质量 180~250 g，均由桂林医学
院动物中心提供，许可证号：SCXK桂 2007-0001。
1.3 方法
1.3.1 体内抗凝血实验[8] 将 80只小鼠随机分为正常
对照组，阳性药对照组，TF、Myr 及 DMY 高（2.0
mg·kg-1）、低剂量组（0.5mg·kg-1），共 8组，每组 10
只，按每公斤体质量腹腔注射给药 10 mL。正常对照
组注射生理盐水，阳性药对照组注射肝素钠，TF、
Myr 和 DMY 组分别注射不同剂量的 TF、Myr 和
DMY。给药 20 min后，用内径为 1 mm的毛细管插
入小鼠内眦静脉，至毛细管血柱达到约 5 cm时取出，
平放于桌上。每隔 30 s折断约 5 mm，缓慢拉开，观
察有无血凝丝出现，从毛细管采血到出现血凝丝的
时间为凝血时间。
1.3.2 对静脉血栓形成的影响 将 80 只大鼠随机分
成 8 组，分别为正常对照组、阳性药对照组、TF，
Myr及 DMY高（2.0 mg·kg-1）、低剂量组（0.5mg·kg-1）。
参照文献[8]制备大鼠静脉血栓模型，按 1.5 g·kg-1乌
拉坦溶液腹腔注射麻醉大鼠，仰卧位固定，做腹部
手术以分离下腔静脉，于左肾静脉与下腔静脉交叉
处结扎下腔静脉，然后缝合腹壁。结扎前 10 min正
常对照组尾静脉注射 0.9 %磷酸盐缓冲液，阳性对照
组尾静脉注射川芎嗪，TF、Myr及 DMY组分别尾静
脉注射不同剂量的 TF、Myr 及 DMY，注射容积均为
1 mL 。下腔静脉结扎 4 h后，重新打开腹腔，在结扎
下方 2 cm处夹闭血管，剪开管腔，取出栓子，用滤
纸吸去残余血液后用微量电子天平称湿重，再将栓
子放在烘箱中，70 ℃，2 h后称干重，按下式计算血
栓形成抑制率。血栓形成抑制率（%）=（模型组血栓重
量-给药组血栓重量）/模型组血栓重量×100 %。
1.4 统计学处理方法 采用 SPSS 17.0统计软件，所
有实验数据进行 K-S检验，均符合正态分布。实验
结果以均数±标准差（x ± s）表示，组间差异用独立
样本 t检验（方差不齐时采用 t检验校正公式）。P <
0.05为有统计学意义。
34· ·
中药新药与临床药理 2013年 1月第 24卷第 1期
2 结果
2.1 对小鼠凝血时间的影响 见表 1。与正常对照组
比较，肝素组能显著延长小鼠凝血时间（P ＜ 0.01）；
TF 、DMY及 Myr高剂量均能明显延长小鼠凝血时间
（P ＜ 0.05，P ＜ 0.01）；TF、DMY及 Myr低剂量组虽
有延长小鼠凝血时间的趋势，但与正常对照组比较，
差异无统计学意义。
2.2 对大鼠静脉血栓形成的影响 见表 2。阳性对照
川芎嗪组、Myr及 DMY各剂量组的血栓干重均明显
低于正常对照组（P < 0.01，P < 0.05），Myr高剂量组
和川芎嗪组的血栓湿重也低于正常对照组（P < 0.01，
P < 0.05），TF组的血栓湿重、干重与正常对照组比
较，差异均无统计学意义。结果提示，TF低剂量组、
TF高剂量组、DMY高剂量组、Myr低剂量组、DMY
低剂量组、川芎嗪组、Myr高剂量组抗血栓作用依次
增强。
3 讨论
血栓形成是许多心脑血管疾病的主要发病原因[7]，
如能有效地控制血栓的形成，对防治缺血性心脑血管
疾病有着深远的意义。钟正贤等[8]研究发现，藤茶总
黄酮能明显抑制大鼠体外血小板聚集和体内血栓形
成。藤茶黄酮类化合物包括 Myr、DMY、福建茶素、
杨梅黄素、杨梅苷等，其中 DMY含量较高[9-10]。潘照
斌等[4]采用大鼠静脉血栓模型、颈总动脉-颈外静脉
血流旁路法及小鼠静脉注射胶原蛋白-肾上腺素血栓
模型研究 DMY的抗血栓作用，结果发现，DMY能明
显减轻静脉血栓湿重和干重，抑制大鼠颈总动脉-颈
外静脉血流旁路血栓形成，提高胶原蛋白-肾上腺素
诱导小鼠瘫痪的恢复率。覃洁萍报道[11]，从广西藤茶
中提取得到的 Myr为主要原料研制而成的 Myr分散
片对大鼠实验性脑缺血具有明显保护作用，并有明显
抗血栓形成作用，机制可能与其抑制脂质过氧化物损
害及提高抗氧化酶活性、改善凝血状态、抑制血小板
依赖性血栓的形成有关。
为进一步明确藤茶不同提取物藤茶总黄酮、
DMY和 Myr的抗血栓活性，本文采用毛细玻璃管法、
腔静脉结扎大鼠血栓模型，分别检测小鼠的凝血时间
和血栓湿重和干重，研究藤茶不同提取物的溶拴作
用。结果发现，阳性药川芎嗪、Myr和 DMY各剂量
组的血栓干重均明显低于正常对照组（P < 0.01，P <
0.05），2 mg·kg－1 Myr高剂量及川芎嗪组的血栓湿重
明显低于正常对照组（P < 0.01，P < 0.05），但是，TF
各剂量组的血栓湿重、干重与正常对照组比较，差异
均无统计学意义。Myr高剂量组对血栓的抑制率最明
显，其次是川芎嗪组，DMY低剂量组次之，Myr低
剂量组、DMY高剂量组、TF高剂量组则作用依次减
弱，TF低剂量组对血栓的抑制率作用最弱。Myr对
血栓的抑制作用有一定的量效依赖性，但 DMY未呈
现相似的作用。TF 、DMY及 Myr高剂量均能明显延
长小鼠凝血时间，且 Myr延长小鼠凝血时间的作用
优于同剂量的 TF和 DMY。综合抗凝血实验和静脉血
栓模型实验结果，提示 Myr和 DMY可能是藤茶总黄
酮抗血栓作用的主要有效成分，且 Myr的溶栓作用
稍强于 DMY。
（致谢： 桂林医学院 2009级药学专业本科学生韦桂兰
和莫慧俊同学参与了本文部分研究工作， 特此感谢！）
表 1 藤茶总黄酮及黄酮醇类化合物对小鼠凝血时间的影响
（x ± s）
Table 1 The effect of TF，DMY and Myr on the coagulation time of
mice
组别
正常对照组
肝素组
TF高剂量组
TF低剂量组
DMY高剂量组
DMY低剂量组
Myr高剂量组
Myr低剂量组
n
10
8
7
8
8
7
8
7
剂量/ mg·kg-1
-
1000 U·kg-1
2.0
0.5
2.0
0.5
2.0
0.5
凝血时间/s
129±99
4674±2574*
227±88*
205±97
307±286*
227±119
487±180#
248±162
注：与正常对照组比较，*P < 0.05，#P < 0.01。
表 2 藤茶总黄酮及黄酮醇类化合物对大鼠静脉血栓形成的影
响（x± s，n=10）
Table 2 The effect of TF，DMY and Myr on venous thrombosis in
rats
组别
正常对照组
川芎嗪组
TF高剂量组
TF低剂量组
DMY高剂量组
DMY低剂量组
Myr高剂量组
Myr低剂量组
剂量/ mg·kg-1
-
14
2
0.5
2
0.5
2
0.5
湿重/mg
13.36±7.20
6.93± .63*
11.57±3.54
12.35±13.73
10.19±7.46
8.31±6.32
4.77±3.89#
9.35± .67
抑制率/%
0
41.39
13.40
7.56
23.73
37.80
64.30
30.01
干重/mg
6.91±3.66
2.41± .52#
5.27±4.68
6.25±4.87
3.68±2.71*
3.01±2.72*
2.38±2.19#
3.44±2.35*
抑制率/%
0
65.12
23.73
9.55
46.74
56.44
65.56
50.22
注：与正常对照组比较，*P < 0.05，#P < 0.01。
35· ·
Traditional Chinese Drug Research ＆ Clinical Pharmacology，2013 Janunary，Vol． 24 No． 1
参考文献：
[1] 何桂霞，裴刚，冯映冰，等. 藤茶中二氢杨梅素的含量测定[J]. 中药
材，2000，23（4）：210-212.
[2] 姜仕先，董乃维，张婧，等. 藤茶中杨梅素和二氢杨梅素的分离及
抗心肌细胞凋亡作用[J]. 哈尔滨医科大学学报，2008，42（1）：4-7.
[3] 刘德育，雷焕强. 杨梅黄素及蛇葡萄素对酪氨酸酶的抑制作用[J].
生物化学杂志，1996，12（5）：618-620.
[4] 潘照斌，李棐朝，廖月娥，等. 二氢杨梅素抗血栓形成的作用研究
[J]. 中医药导报，2010，16（11）：92-94.
[5] 臧宝霞，金鸣，吴伟，等. 杨梅素对血小板活化因子拮抗的作用
[J]. 药学学报，2003，38（11）：831-833.
[6] 王乃平，覃洁萍，钟正贤，等. 杨梅素滴丸和杨梅素分散片的抗血
栓作用对比[J]. 广西中医学院学报，2008，11（4）：1-2.
[7] 张友胜，杨伟丽，熊皓平. 显齿蛇葡萄基本成分研究[J]. 天然产
物研究与开发，2001，13（5）：46-48.
[8] 钟正贤，陈学芬，周桂芬，等. 广西产藤茶总黄酮的药理研究（英文）
[J]. 广西科学，1999，6（3）：216-218.
[9] 史小莲，刘俊田，李西宽，等. 水蛭免加热提取物抗凝血及抗血栓
作用[J]. 中药新药与临床药理，2004，15（2）：95-97.
[10] 覃骊兰. 藤茶的化学成分及药理作用研究进展[J]. 上海中医药杂
志，2008，42（6）：94-96.
[11] 覃洁萍，王乃平，钟正贤，等. 杨梅素分散片对大鼠实验性脑缺
血的保护作用及对血栓形成的影响[J]. 时珍国医国药，2009，20
（1）：58-60.
（编辑：邓响潮）
归芪通乳合剂对溴隐亭诱导大鼠产后缺乳的催乳作用
万 %鹏 1，聂 %慧 1，邓时贵 2（1. 重庆市北碚区中医院，重庆 400700；2. 广东省中医院动物实验中心，广东 广
州 510006）
摘要：目的 观察归芪通乳合剂对缺乳大鼠模型血清催乳素（PRL）、雌二醇（E2）、多巴胺（DA）水平的影响，
探讨其催乳机制。方法 建立溴隐亭诱导的大鼠缺乳模型，采用酶联免疫法检测归芪通乳合剂对缺乳大鼠血清
PRL、E2、DA水平的影响。结果 与溴隐亭缺乳大鼠模型组比较，归芪通乳合剂各剂量组能显著提高溴隐亭缺
乳大鼠血清 PRL、E2含量（P < 0.05），降低 DA的水平（P < 0.05）。结论 归芪通乳合剂催乳机制与提高 PRL、
E2含量及降低 DA的水平有关。
关键词： 归芪通乳合剂；缺乳大鼠模型；产后缺乳
中图分类号：R285.5 文献标志码： A 文章编号：1003-9783（2013）01-0036-03
doi：10.3969/j.issn.1003-9783.2013.01.010
Galactogogue Action of Guiqi Tongru Mixture on Rat Model of Bromocriptine -induced Postnatal Lack of
Lactation
WAN Peng1，NIE Hui1，DENG Shigui2（1. Chongqing Beibei District Hospital of Traditional Chinese Medicine，
Chongqing 400700，China；2. Animal Experiment Center of Guangdong Provincial Hospital of Traditional Chinese
Medicine，Guangzhou 510006 Guangdong，China）
Abstract：Objective To observe the effect of Guiqi Tongru Mixture on serum prolactin，estradiol and dopamine in
rats with postnatal lack of lactation. Methods Rat model of postnatal lack of lactation was induced by bromocriptine.
The expression of serum prolactin， estradiol and dopamine in the model rat was detected by enzyme -linked
immunosorbent assay. Results Compared with the model group，the serum prolactin and estradiol contents of Guiqi
Tongru Mixture groups were increased significantly（both P < 0.05），while the dopamine expression level was decreased
significantly（P < 0.05）.Conclusion The lactagogue mechanism of Guiqi Tongru Mixture may be related to its increase
of prolactin and estradiol contents and to its inhibition of dopamine expression.
Keywords：Guiqi Tongru Mixture；Lack of lactation rat model；Postnatal lack of lactation
收稿日期：2012-09-17
作者简介：万鹏，男，硕士，副主任中医师，研究方向：中医内科学。Email：1523215480@qq.com。
基金项目：重庆市科技计划项目（2010GGD057）。
36· ·