全 文 ：第 35 卷第 3 期 通 化 师 范 学 院 学 报( 自然科学) Vol． 35 №3
2014 年 6 月 JOUＲNAL OF TONGHUA NOＲMAL UNIVEＲSITY Jun． 201
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高效液相色谱法测定藤梨根中大黄素的含量
*
滕 坤，于思文
(通化师范学院 制药与食品科学学院，吉林 通化 134002)
摘 要:目的:建立测定藤梨根中大黄素含量的高效液相色谱方法．方法:采用高效液相色谱法测定．选用 Agilent － C18色谱
柱( 250mm ×4． 6mm，5μm) ;流动相:甲醇 － 0． 1%磷酸水溶液( 85: 15) ; 检测波长: 254nm;流速: 1． 00mL·min －1 ;柱温:室温． 结
果:大黄素在 0． 0417 ～ 0． 2088μg范围内线性关系良好，r = 0． 9992，平均加样回收率为 101． 4% ．结论:高效液相色谱法操作简
便，快速，准确，重现性好，适合藤梨根中大黄素含量的测定．
关键词:高效液相色谱法;藤梨根;大黄素
中图分类号:Ｒ931 文献标志码:A 文章编号:1008 － 7974( 2014)
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03 － 0042 － 02
藤梨根为猕猴桃科猕猴桃的根．我国是主产区，
主要分布于我国东北地区及河北、山西、山东、安徽、
浙江、江西、河南、湖北、云南等地，朝鲜和日本也有
分布．含熊果酸(ursolic acid)、齐墩果酸(oleanolic
acid)、琥珀酸(succinicacid)、胡萝卜甙(daucosterol)
以及精氨酸、赖氨酸、亮氨酸、丙氨酸、天门冬氨酸
等，并富含 Fe、Cu、Mn、Se等元素．具有清热解毒，清
热利湿，祛风除湿，利尿止血，解毒消肿，止血的功
效，适用于多种疾病的治疗．藤梨根常被用于主治黄
疸，消化不良，呕吐，风湿痹痛，消化道癌肿，痈疡疮
疖，跌打损伤，外伤出血，乳汁不下等．
大黄素，化学名称为 6 －甲基 － 1，3，8 －三羟基
蒽醌，是从大黄属、蓼属、鼠李属和番泻叶等中药中
分离得到的活性成分．大黄素具有广泛的药理作用，
如具有抗肿瘤活性，解痉、止咳作用，对心血管系统
的作用，利尿作用，对组胺的作用，对 LTB4 的合成
作用，泻下作用等． 近年来，对大黄素药理作用机制
进行的大量深入研究发现，大黄素药理作用主要集
中在抑制细胞增殖、抗炎、抑制肝脏和肾脏纤维化等
方面．本文用高效液相色谱法测定藤梨根中大黄素
的含量，为藤梨根的进一步研究奠定基础．
1 仪器与试药
1． 1 仪器
Aglient 1100 型高效液相色谱仪(Aglient 公
司) ;MP21001 型电子天平(上海恒平科学仪器有限
公司) ;超声波提取仪(昆山市超声仪器有限公司) ;
容量瓶(5mL，10mL，50mL) ;电热套;量筒;蒸发皿;
0． 45μm微孔滤膜;漏斗;滤纸．
1． 2 试药
藤梨根(购置于通化百泉中药饮片有限公司，
经于俊林教授鉴定为软枣猕猴桃的根) ;0． 1%磷酸
水溶液;甲醇(分析纯) ;大黄素对照品(中国药品生
物制品检定所，批号:0756 － 200805)．
2 方法与结果
2． 1 色谱条件
Hypersil － C18色谱柱(250mm × 4． 6mm，5μm) ;
流动相:甲醇 － 0． 1%磷酸水溶液(85:15) ;检测波
长:254nm;流速:1． 00mL·min －1;柱温:室温．
2． 2 对照品溶液的制备
精密称取大黄素对照品 5． 22mg，置 50mL 容量
瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，精密吸取大黄素对照品
2mL置 10mL容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，制成
每 1mL含 20． 88μg的大黄素对照品溶液．
2． 3 供试品溶液的制备
精密称定藤梨根粉末 6． 0332g，精密加入甲醇
50mL，称定重量，放超声波提取仪中超声 30min，放
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* 收稿日期:2014 － 03 － 25
作者简介:滕坤(1975 －) ，女，硕士，副教授，制药与食品科学学院副院长．
基金项目:国家自然基金青年基金项目(31100254)．
DOI:10.13877/j.cnki.cn22-1284.2014.06.017
冷后补足重量，滤过，精密吸取续滤液 25mL 致蒸发
皿中蒸干，蒸干后的残渣用少量甲醇溶解并转移至
5mL容量瓶中，用甲醇定容，摇匀，用 0． 45μm 微孔
滤膜滤过，即得供试品溶液．
2． 4 线性关系的考察
精密吸取大黄素对照品溶液 2、4、6、8、10μL，依
次注入液相色谱仪，按上述色谱条件分别进行分析，
测定其峰面积积分值(表 1) ，以峰面积积分值 (A)
与进样量(X)进行线性回归，得回归方程为:A =
2806． 6X － 1． 4318，r = 0． 9992，结果表明，大黄素在
0． 0417 ～ 0． 2088μg 范围内与其色谱峰峰面积呈良
好的线性关系(图 1)．
表 1 大黄素的浓度、峰面积
大黄素对照品 X(μg) 峰面积 A
0． 0417 112． 380
0． 0835 235． 451
0． 1253 356． 403
0． 1670 460． 215
0． 2088 586． 142
图 1 大黄素标准曲线图
2． 5 精密度实验
精密吸取对照品溶液 15μL，按“2． 1”项中的色
谱条件进样，连续进样 5 次，测定峰面积，大黄素峰
面积 ＲSD =1． 0%，说明精密度良好．
2． 6 稳定性试验
精密吸取对照品溶液 15μL，分别在 0、1、2、3、
4h进样，测定大黄素峰面积并记录峰面积，结果显
示，样品在 4h内基本稳定，其 ＲSD为 0． 9% ．
2． 7 重复性试验
精密称取已知含量的供试品溶液 15μL，按“2． 1”
项中的色谱条件连续测定 5 次，计算大黄素含量，测
得其 ＲSD值为 1． 2%，表明本方法重现性良好．
表 2 加样回收率试验结果
称样量
/ g
样品含量
/μg
加入量
/μg
测定总量
/μg
回收率
/%
ＲSD
/%
3． 0648 17． 27 33． 01 103． 2
3． 0542 17． 23 33． 76 102． 8
3． 0861 17． 41 15． 6 34． 03 100． 0 1． 3
3． 0329 17． 13 32． 95 100． 6
3． 0116 16． 95 32． 63 100． 3
2． 8 加样回收率试验
精密称定已知含量的供试品 5 份，每份 3g，适
量加入对照品溶液，按照“供试品溶液的制备”项下
方法处理，依照其方法测定，计算回收率(表 2) ，大
黄素的平均回收率为 101． 4%，ＲSD为 1． 3% ．
2． 9 样品的测定
取购置于通化百泉中药饮片有限公司的藤梨根
样品，按“供试品溶液的制备”项下方法制备溶液，
并取对照品溶液，分别进样测定，结果如图 2、图 3
所示．计算样品中大黄素的含量，结果测得，藤梨根
中大黄素的含量为 6． 30μg·g －1 ．
图 2 对照品溶液色谱图
图 3 藤梨根大黄素样品色谱图
3 结论与讨论
根据文献报道的含大黄素制剂中大黄素的含量
测定条件，单纯甲醇与水作用为流动相，尽管也能得
到较好地分离，但大黄素表现不稳定．用 0． 1%的磷
酸水溶液代替水可增强大黄素的稳定性． 本文对流
动相比例进行了调整，选择甲醇 － 0． 1%磷酸水溶液
(85:15)为流动相，检测波长为 254nm，流速为
1． 00mL·min －1，柱温为室温，大黄素色谱峰分离良
好．
本文建立了藤梨根中大黄素的含量测定方法，
该法简便，快速、准确，重现性好，为藤梨根及其复方
的质量标准研究提供一定的科学依据，对藤梨根中
其他化合物的定量也提供了一定的参考．
参考文献:
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［4］李杰，张陆勇，江振洲．大黄素的药理学研究近况［J］． 药学
进展，2005，29( 12) : 540 － 544． (责任编辑:陈衍峰)
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