全 文 ： 药物与临床
高效液相色谱法测定不同产地五指毛桃中补骨脂素的含量
秦雪莲
(广西壮族自治区桂林医学院药学院分析药分教研室 ,广西　桂林　541004)
【摘要】　目的　测定不同产地五指毛桃中补骨脂素含量。 方法　采用高效液相色谱法 (H PLC), 色谱柱:Phenom enex Luna
ODS(250 mm ×4.60 mm 5μm)柱 , 波长 246 nm , 流动相:乙腈:水(35:65), 流速 1m l /m in。结果　五指毛桃根中补骨脂素在 0.01589
～ 0. 3178μg, 线性关系良好( r =0.9999), 平均加样回收率为 100.19%, RSD=1. 07%(n=6)。结论　以 HPLC测定五指毛桃中补
骨脂素的含量 , 操作简便 ,专属性好 ,可以用于控制五指毛桃药材的质量。
[关键词 ] 　　色谱法 , 高压液相;五指毛桃 /分析;补骨脂素类 /分析
　　五指毛桃为华南地区习用的中药材 , 别名五爪龙 、南芪 、土
北芪等 , 也是瑶族一味重要的用于补气药材。五指毛桃味辛 、
甘 , 性平 , 有健脾补肺 、利湿舒筋功能 , 用于脾虚浮肿 、食少无
力 、肺痨咳嗽 、盗汗 、风湿痹痛 、肝炎 、产后无乳 [ 1] 。从五指毛桃
药材中已分离鉴定出补骨脂素 ,研究表明补骨脂素为呋喃香豆
素类化合物 , 具有抗菌 、抗病毒 、抑制肿瘤 、抗凝 、免疫调节 、激
素样作用和影响药物代谢等作用 [ 2 , 3] , 可作为五指毛桃的有效
成分。本研究应用 HPLC对不同产地的五指毛桃中补骨脂素
进行含量测定。
1　材料与方法
1 1　仪器与试药　W ate rs2695型高效液相色谱仪 , W aters996
二极管陈列检测器 , EmPow er色谱工作站。乙腈为色谱纯 , 水
为超纯水 , 补骨脂素对照品(中国药品生物制品检定所 , 批号
739-9203)。不同产地的五指毛桃采集于原产地野生品种 , 样
品经桂林医学院生药鉴定教研室鉴定为粗叶榕 F icus hirta
Vah.l的根 ,洗净 ,干燥 ,为供试品。
1 2　方法
1 2 1　色谱条件　色谱柱:Phenom enex Luna ODS (250 mm
×4. 60 mm 5 μm)柱 ,柱温 35℃, 996二级管阵列检测器 , 波长
246 nm;流动相:乙腈:水(35:65), 流速 1m l /m in;对照品溶液与
样品供试品溶液分别进样 10 μl,按外标一点法计算。
1 2 2　对照品溶液的制备　精密称取 105℃干燥至恒重的补
骨脂素标准品适量 ,用甲醇配成浓度为 0.1589 mg /m l的溶液。
1 2 3　供试品溶液的制备　取五指毛桃供试样品 ,粉碎成粗
粉 ,精密称取五指毛桃样品粗粉 1 g,精密加入甲醇 50 m l,密塞,称
重 ,超声波提取 30 m in,放冷,用甲醇补足损失的重量,摇匀 ,滤过 ,
精密量取续滤液 25 m l,蒸干 ,残渣加甲醇使之溶解并转移至 10 m l
容量瓶中,加甲醇定容至刻度。摇匀,滤过,取滤液 ,即得。
2　结果
2 1　线性关系考察 　用流动相分别将标准品液稀释成
1. 589、7. 495、 15. 89、 23.84、 31. 78 μg /m l的溶液 , 进样量 10
μl,每一浓度进样 2次 , EmPowe r色谱工作站处理数据 , 外标法
测定 , 以峰面积为纵坐标 , 标准浓度为横坐标 , 进行线性回归 ,
得补骨脂素标准品回归方程为 y=9.92 ×10- 8 × - 1. 46 ×
10 -4 , r =0.9999, n =5。表明补骨脂素在 0.01589 ～ 0.3178
μg之间呈现良好的线性关系。
2 2　精密度试验结果　取同一份供试品溶液 , 依线性关系的
测定条件进样分析 , 每次进样量 10 μl, 连续进样 5次 ,用峰面
积求算其 RSD,补骨脂素的 RSD为 1. 05%。
2 3　稳定性试验结果　对同一供试样品溶液 , 每隔一定时间
进样一次 , 并计算补骨脂素的含量 , 考察 24 h, 结果表明 24 h
内相对稳定 , (RSD为 1.09%, n =8)。
化 , 导致白细胞在炎症部位的聚集增多和细胞间特异性抗原反
应的加强。本研究提示 , 子宫内膜异位症患者腹腔液 sICAM-1
增高 , 与分期呈负相关 ,与雌激素水平无关 , 提示 sICAM-1在子
宫内膜异位症发病中起一定作用。
参考文献
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[收稿日期:2005 -04 - 01]
270 Jou rna l of Ch inese Phy sic ian, February, 2006, Vo l 8, No2
2 4　重复性试验结果　取同一批五指毛桃样品 , 按上述方法
平行测定 6份 , 计算 , 结果测得补骨脂素含量的平均值为
0. 045%, RSD=1.36%( n =6)。
2 5　加样回收率试验结果　按供试品溶液制备方法处理同
一批样品 6份 , 精密称定 0. 5 g, 精密加入补骨脂素对照品
(0. 1589 m g /m l)1.5 m l,按供试品溶液制备项下方法制备 , 进样
量 10 μl, 按上述色谱柱条件测定 , 测定结果平均加样回收率为
100. 19%, RSD=1.07%( n =6)。
2 6　不同产地五指毛桃样品含量测定结果　按上述方法分
别测定了 12份不同产地来源的五指毛桃样品中补骨脂素的含
量 ,结果见表 1,高效液相色谱图见图 1、图 2。
图 1　补骨脂素对照品色谱图 图 2　样品色谱图
表 1　不同产地五指毛桃中补骨脂素的含量
　产地 采收季节 补骨脂素的含量(%)
　广西桂林雁山 2004年 9月 0. 056
　广西桂林临桂 2005年 9月 0. 066
　广西防城 2004年 11月 0. 072
　广西融水 2004年 8月 0. 045
　贵州都匀 2004年 6月 0. 052
　贵州遵义 2004年 6月 0. 038
　云南(市售) 2004年 10月 0. 046
　广东河源 2004年 9月 0. 028
　江西赣州 2004年 5月 0. 036
　广东龙门 2004年 10月 0. 042
　湖南怀化 2004年 10月 0. 041
　湖南道县 2005年 9月 0. 043
3　讨论
3 1　五指毛桃始载于岭南特色本草《生草药性备要》(清 何
克谏著),是广东 、广西 、云南 、贵州等省的大宗特产药材 , 商家
多以五指毛桃香味的浓厚程度来判定五指毛桃质量的优劣 , 在
实际操作上有量化不确定性。补骨脂素是五指毛桃药材中的重
要有效成分 ,用 HPLC测定五指毛桃中补骨脂素的含量测定方
法简便可行 ,结果可靠 , 可对五指毛桃药材及含五指毛桃药材的
制剂含量测定控制提供方法参考。
3 2　五指毛桃中补骨脂素为脂溶性成分 ,在提取过程中 , 如采
用极性较低的溶剂提取 ,会提出大部的油状物 ,对补骨脂素的含
量测定有较大影响 ,而且甲醇穿透力较强 ,能够较好提取出五指
毛桃中的补骨脂素。
3 3　本文对五指毛桃的几个主要产区的五指毛桃的质量进行
了测定 ,发现不同产地的五指毛桃药材中补骨脂素的含量差较
大 ,可能与各产区的土壤 、气候及采集的时间有较大的关系 , 进
一步开展补骨脂素在五指毛桃中的动态积累对于指导五指毛桃
的种植及采收有现实意义。
参考文献
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[收稿日期:2005 -10 - 18]
271中国医师杂志　2006年 2月　第 8卷第 2期