全 文 : 湖 南 中 医 学 院 学 报 1999年 9月第 19卷第 3期
18 Journal of Hunan College of TCM Sep. 1999 Vol. 19 No. 3
薄层扫描法测定藤茶中杨梅素的含量
何桂霞 裴 刚 冯映冰 何定波①
(湖南中医学院药学分院 长沙 410007)
提要 为测定藤茶中杨梅素的含量 ,采用薄层扫描法测定。 结果: 藤茶中杨梅素的含量为 1. 72% ~ 1. 78%。
回收率为 98. 5% , RDS为 2. 4%。 说明该方法简便、灵敏、准确可靠 ,可作为控制藤茶质量的方法。
关键词 藤茶 杨梅素 薄层扫描
中国图书分类号 R284. 1
藤茶 ,又名甜茶藤 Ampelopsis g rossedentata,
系葡萄科蛇葡萄属植物显齿蛇葡萄的嫩茎叶 ,湖南
江华县瑶族山乡百姓采集茎叶 ,经揉制、干燥 ,用于
防治感冒、中暑、肠胃不适等 ,相传已有数百年应用
历史。《中草药汇编》及《广西药用植物名录》记载 ,该
药性味甘淡 ,功效清热解毒 ,主治黄疸型肝炎 ,感冒
风热 ,咽喉肿痛 [ 1, 2]。该药材制成的袋泡剂在临床上
用于高血压及冠心病辅助治疗已取得明显效果。化
学成分研究表明:藤茶中含有杨梅素、二氢杨梅素、
福建茶素、β-谷甾醇、挥发油等多种化学成分 [3~ 5 ] ,
但其含量测定方法还未见报道。 我们采用薄层扫描
法测定藤茶中杨梅素的含量 ,报告如下。
1 仪器与材料
CS-930型薄层扫描仪 (日本岛津 ) , UV -365型
紫外分析仪。硅胶 G(青岛海洋化工厂 ) ,杨梅素对照
品 (由作者提供 ,经光谱鉴定 ) ,藤茶干燥嫩茎叶 (湖
南江华县林科所提供 ,并由本院周天达教授鉴定 ) ,
所用试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2. 1 实验样品的制备
2. 1. 1 供试品溶液 精密称取藤茶干燥嫩茎叶粉
末 (过 20目筛 ) 5 g ,置索氏提取器中 ,用石油醚适量
加热回流 2 h ,脱脂后的药材加甲醇适量加热回流
提取 4 h,提取液浓缩并定容至 50 ml作为供试品溶
液。
2. 1. 2 对照品溶液 精密称取杨梅素对照品 5. 50
mg,加甲醇溶解并定容至 5. 0 ml,制成 1. 11 mg /ml
的溶液作为对照品溶液。
2. 2 薄层层析
用定量毛细管吸取供试品溶液 5μl,对照品溶
液 2μl,分别点样于硅胶 G-CMC-Na薄层板 ( 105℃
活化 0. 5 h)上 ,以甲苯∶乙酸乙酯∶甲酸 ( 10∶ 8∶
5)为展开剂 ,展开 ,展距 15 cm ,用 3% FeCl3乙醇溶
液喷雾 ,显色后 ,覆盖相同大小的玻璃板 ,四周用透
明胶纸密封。杨梅素斑点呈紫色。 薄层层析结果及
扫描色谱图见图 1,光谱扫描吸收图见图 2。
1、藤茶 2、杨梅素
图 1 薄层层析及光谱扫描色谱图
1、藤茶 2、杨梅素 3、空白溶液
图 2 光谱扫描吸收图
① 为本院药学分院制药专业 1994级应届毕业生
第 3期 何桂霞 ,等 薄层扫描法测定藤茶中杨梅素的含量 19
2. 3 扫描条件
对样品色谱及对照品色谱中杨梅素分别进行光
谱扫描 ,结果样品斑点与对照品斑点光谱完全一致 ,
且杨梅素在 440 nm处有最大吸收 ,故选 λS= 440
nm ,λR= 650 nm。反射法锯齿扫描 ,狭缝 1. 2 mm×
0. 4 mm , SX= 3,灵敏度中 ,背景校正。
2. 4 线性关系
准确吸取对照品溶液 2μl、 4μl、 6μl、 8μl、 10
μl,分别点样于同一硅胶 G薄层板上 ,依法展开 ,显
色 ,覆盖玻璃板后扫描测定各斑点的面积积分值。以
对照品点样量 (μg数 )为横坐标 ,斑点面积积分值为
纵坐标作图。结果表明杨梅素在 2. 22~ 11. 10μg之
间具有良好的线性关系 ,且直线不过原点 ,故采用外
标两点法测定含量 ,回归方程为: Y= 2 800. 483X-
407. 261( r= 0. 998 6)。
2. 5 稳定性实验
以杨梅素对照品试验 ,在显色后 ,覆盖玻璃板 ,
对同一斑点每隔 30 min扫描测定面积一次 ,结果在
3 h内面积值稳定 ,杨梅素 RSD= 3. 89%。
2. 6 精密度实验
在同一薄层板上点对照品溶液 6份各 2μl ,按
上述条件展开、显色、扫描 ,结果表明同板精密度较
好。 其 n= 6,平均值为 7 495. 63, RSD= 2. 09% ,见
表 1。
表 1 同板精密度实验结果
点样次数 1 2 3 4 5 6
峰面积 7 628. 34 7 528. 32 7 406. 16 7 210. 28 7 587. 41 7 613. 24
2. 7 样品含量测定
用定量毛吸管准确吸取供试品溶液 3个 2μl和
对照品溶液 2μl、 6μl点在同一块薄层板上 ,按上述
条件展开、显色、扫描 ,测定杨梅素斑点面积积分值 ,
以外标两点法计算杨梅素含量 ,结果见表 2。
2. 8 回收率实验
采取加样回收法 ,取已知含量的藤茶粉末 ,分别
表 2 藤茶中杨梅素的含量
批号 杨梅素含量 (% ,n= 3) RSD
980412 1. 73 3. 21
980418 1. 70 2. 14
980426 1. 78 2. 86
添加对照品溶液 , 100℃烘干 ,按供试品溶液的制备
方法操作 ,依法展层 ,扫描测定 ,计算回收率 ,结果见
表 3。
表 3 回收率实验结果表
序号 藤茶中杨梅素的量 (mg ) 加入杨梅素的量 ( mg) 测出杨梅素的量 (mg ) 回收率% (n= 3) 平均回收率% RSD
1 0. 541 0. 231 0. 766 98. 6
2 0. 528 0. 314 0. 883 100. 5
3 0. 563 0. 269 0. 794 97. 6 98. 5 2. 4
4 0. 537 0. 289 0. 819 96. 9
5 0. 528 0. 308 0. 879 99. 1
3 小结
藤茶含有大量色素 ,采用石油醚脱脂除去杂质 ,
可以较好地解决斑点重叠和脱尾现象。
展开剂的选择 精密吸取供试品溶液 4μl,对
照品溶液 2μl,点于薄层板上 ,以甲苯∶乙酸乙酯∶
甲酸 ( 10∶ 8∶ 5)为展开剂 ,展开 ,其所得薄层色谱图
分离效果好 ,故采用。
采用薄层扫描法测定藤茶中杨梅素的含量 ,方
法稳定 ,回收率高 ,重现性好 ,可以作为目前控制藤
茶质量的一种方法。测定 3批样品 ,杨梅素在藤茶中
含量为 1. 72% ~ 1. 78% 。
参考文献
1 全国中草药汇编编写组 .中草药汇编 (下册 ) .北京:人民卫生出版
社 , 1997. 788
2 广西医药研究所 .广西药用植物名录 .南宁:广西民族出版社 ,
1974. 203
3 周天达 ,周雪仙 .藤茶中双氢黄酮醇的分离结构鉴定及药理活性 .
中国药学杂志 , 1996, 31( 8): 458
4 覃洁萍 ,许学键 ,李剑江 .广西瑶族藤茶化学成份的研究 .天然产
物研究与开发 , 1997, 9( 4): 41
5 袁阿兴 ,黄筱美 .显齿蛇葡萄化学成分的研究 .中国中药杂志 ,
1998, 23( 6): 359
(收稿日期 1999-04-27)