全 文 ：图4　紫竹样品 , t=12.4 异红草苷 , t=13.9 红草苷 , t=
23.9异牡荆苷
图5　毛竹样品 , t=12.5 异红草苷 , t=13.8 红草苷 , t=
23.9异牡荆苷
图 6　早园竹样品 , t=12.4 异红草苷 , t=14.0 红草苷 , t=
24.2异牡荆苷
图 7　高节竹样品 , t=12.5 异红草苷 , t=14.1 红草苷 , t=
24.4异牡荆苷
图 8　红壳竹样品 , t=12.3 异红草苷 , t=13.7 红草苷 , t=
23.9 异牡荆苷
图 9　斑竹样品 , t=12.2 异红草苷 , t=13.9 红草苷 , t=
24.2异牡荆苷
5　讨论
5.1　表 3实验结果表明 ,不同来源竹叶中荭草苷 、
异荭草苷和异牡荆苷的含量不同 ,最高含量为紫竹
(0.89%), 其次 为高 节竹 (0.29%)、金 毛竹
(0.12%)、红壳竹(0.19%)、毛竹(0.16%)、班竹
(0.16%),较低为桂竹(0.08%)、早园竹(0.07%)。
5.2　本文以芦丁为标准在同一色谱条件下 ,测定荭
草苷 、异荭草苷和异牡荆苷的含量 ,方法简单 、快速 、
准确度高 、重复性好 ,结果较为满意 ,可用于竹叶黄
酮成分的测定和质量控制。
参考文献:
[ 1] 　中国科学院有机化学研究所.天然有机化学综述论文集[ C] .
北京:科学出版社 , 1966.
[ 2] 　国家医药管理局中草药中心情报站.药物有效成份手册[ M ] .
北京:人民卫生出版社 , 1986.
HPLC测定藤茶不同采收时期及不同部位的二氢杨酶素含量
何桂霞1 , 2 , 　裴　刚2 , 　杨伟丽1 , 　李　斌2
(1.湖南农业大学食品科技学院 ,湖南 长沙 410128;2.湖南中医学院药学院 ,湖南 长沙 410007)
关键词:藤茶;二氢杨梅素;HPLC;含量测定
摘要:目的:建立 HPLC 法对不同产地不同采收期藤茶叶 、茎中的二氢杨梅素进行含量测定。方法:采用 Novapak C18柱
(150mm×4.6mm , 5μm), 甲醇-水-磷酸(27∶73∶0.1)为流动相 , 流速为 1.0mL·min-1;紫外检测波长为 290nm;柱温为 25
°C。结果:本法线性关系良好 , 平均加样回收率为 99.47%, RSD 为 1.68%。 5 月份藤茶叶中二氢杨梅素含量最高
27.8%～ 31.2%;叶中含量高于茎中 3 ～ 4倍。结论:本方法操作简便 , 分离效果好 ,为藤茶的开发利用提供一定的理论
依据。
中图分类号:R927.2　　　　　文献标识码:A　　　　　文章编号:1001-1528(2004)03-0210-03
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Chinese T raditional Patent Medicine
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Determination of dihydromyricetin in different parts of Ampelopsis grossedentata
in different seasons by HPLC
HE Gui-xia1 , 2 , 　PEI Gang2 , 　YANG Wei-li1 , 　LI Bin2
(1 .College of Food Science and Technology , Hunan Agricul tural Un iversity , Changsha , 410128 Ch ina;2.Pharmaceut ical Col lege of Hunan
Trad it iona l Chinese Medical College , Changsha 410007 , China)
KEYWORDS:Ampelopsis g rossedentata;dihydromyricetin;HPLC;determination
ABSTRACT:AIM:To establish the determination of dihydromyricetin in stem , leaf of Ampelopsis g rossedenta-
ta in dif ferent seasons from dif ferent habi tat.METHODS:Novapak C18 column (150mm×4.6mm ,5μm)was
selected as separation column at 25°C.Methanol-water-phosphoric acid(27∶73∶0.1)was used as a mobile phase
at a flow rate of 1.0mL·min-1.The peak of dihydromy ricetin w as detected at UV 290nm.RESULTS:The lin-
earity of this method w as good.The average recovery w as 99.47%, RSD was 1.68%.The content of dihy-
dromy ricetin in leaf of Ampelopsis grossedentata collected in May was the highest and was three ～ four times
the size of that in stem.CONCLUSIONS:The method is convient w ith a good separating degree and is useful ba-
sis fo r the develoment and utilization of Ampelopsis grossedentata.
收稿日期:2003-05-19
作者简介:何桂霞(1965～ ),女 ,黑龙江省伊春市人,副教授 ,博士研究生。主要从事天然药物化学教学与研究 ,电话:(0731)5496712 , E-
mail:heguixia@163.net 。
　　藤茶 ,又名显齿蛇葡萄(Ampelopsis grosseden-
tata(Hand.Mazz.)W.T .Wang (A .cantoniensis
var .grossedentata Hand.Mazz.)是葡萄科蛇葡萄
属的一种野生藤本植物[ 1] ,又称茅岩莓茶 、甘露茶
等 ,湖南 、广西等省区壮族和瑶族民间常用其幼嫩茎
叶入茶 ,用于治疗感冒发热 、咽喉肿痛 、黄疸型肝炎 、
痈疥 、高血压等症 ,已有数百年的使用历史[ 2] 。藤
茶中已分离出一些化学成分 ,其中主要成分是二氢
杨梅素(dihydromyricet in)。药理研究表明 ,该成分
能对抗去肾上腺素和高 K+所致的兔胸主动脉条的
收缩反应及显著扩血管和钙拮抗作用[ 3] ;具有祛痰
止咳 、降血脂 、保肝作用[ 4] 。为合理开发和利用这
一资源 ,本文采用反相高效液相法 ,对湖南张家界 、
江华 、株洲三个地区藤茶从芽期 4月到落叶期 11月
的茎 、叶作了二氢杨梅素的含量测定 ,对藤茶最佳收
采时间 、合理用药 、质量控制提供参考和启示 。
1　仪器与实验材料
BF-KNAUER高效液相色谱仪;K-501高压输
液泵;K-2501 紫外分光检测器;BF-2002 色谱工作
站;Scout百分之一电子天平(梅特勒—托利多常州
衡器有限公司);FA2104万分之一电子天平(上海
精密科学仪器有限公司天平仪器厂);所有化学试剂
均为国产分析纯。二氢杨梅素对照品为从湖南江华
产藤茶中分离得到 ,经 UV , IR、MS 、1H-NMR光谱
分析鉴定结构 ,逆流色谱法纯化处理 ,归一化方法检
测 ,含量在 99.0%以上。藤茶采于湖南江华县贝江
区 、张家界永定区罗塔平乡 、株洲县八斗乡 ,并经我
院彭菲教授鉴定 ,从芽期 4月到落叶期 11月每月中
旬采集藤茶的茎叶 。
2　方法与结果
2.1　液相色谱条件　色谱柱系 Novapak C18柱 ,流
动相为甲醇-水-磷酸(27∶73∶0.1), 应用前经过
0.45μm微孔滤膜抽滤 ,超声脱气 ,流速为 1.0mL·
min
-1;进样时为 20μL , 柱温:25°C;检测波长:
290nm 。该色谱条件的对照品及样品的色谱图见图
1 ,图 2。
2.2　供试样品液的制备　精密称取样品粉末(60
°C烘干 ,粉碎后过 40目筛)约 0.1g 置 50mg 圆底烧
瓶中 ,用 95%乙醇回流提取 3次 ,第 1 、2次加 20mL
95%的乙醇提取 1h ,第 3次加 10mL 95%的乙醇提
取 0.5h ,将提取液定容至 50mL ,滤过 ,弃去初滤液 ,
精密吸取续滤液 1.0mL 定容至 10mL , 0.45μm 微
孔滤膜滤过即得样品溶液。
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图 1　二氢杨梅素对照
品 HPLC图谱
Fig.1　HPLC chromatogram
of dihydromyricetin
保留时间(min)
(dihydromyricet in):9.56
图 2　样品 HPLC图谱
Fig.2　HPLC chromato-
gram of sample
保留时间(min)
(dihydromyricet in):9.56
2.3　对照品溶液的配制　精密称取二氢杨梅素对
照品 10.8mg ,置 10mL 量瓶中 ,加甲醇溶解稀释至
刻度 ,摇匀 ,配成浓度为 1.08mg·mL-1的对照品贮
备液 。
2.4　线性关系考察　精密吸取对照品溶液 0.1 ,
0.2 ,0.4 ,0.8 ,1.2 , 1.6mL 置 25mL 量瓶中 ,加甲醇
至刻度 ,摇匀。精密吸取各浓度的对照品溶液 20μL
注入高效液相色谱仪 ,记录色谱图(见图 1)。以峰
面积为纵坐标(Y),对照品溶液浓度为横坐标(X),
绘制标准曲线 ,得回归方程 Y =65894X +384331 ,
r=0.9993 ,二氢杨梅素在 4.32 ～ 69.12μg·mL-1范
围内 ,峰面积与浓度呈良好的线性关系 。
2.5　精密度试验　精密吸取同一浓度的对照品溶
液 20μL ,重复进样 5次 ,峰面积的 RSD 为 1.20%。
2.6 　稳定性试验 　精密吸取同一批样品溶液
2 0μL 。每 隔 1 h测 1次 。连续 测 5次 , RSD 为
1.62%。结果表明样品在 5h内稳定性良好。
2.7　加样回收率试验　精密称取已知含量的 5份
样品各约 0.1g ,分别加入二氢杨梅素对照品适量 ,
按样品制备和含量测定项下方法操作 。结果见表
1。
表 1 加样回收率试验结果(n=5)
Table 1 Result of Recovery rate Test
of dihydromyricetin(n=5)
Sample
(mg)
Added
(mg)
Found
(mg)
Recovery
(%)
Average
Recovery(%)
RSD
(%)
18.88 5.0 23.54 98.58
15.35 5.0 20.61 101.23
12.49 5.0 16.98 97.08 99.47 1.68
4.91 5.0 9.88 99.70
4.09 5.0 9.16 100.77
2.8　样品的测定　精密称取不同产地 、不同季节的
藤茶茎 、叶粉末约 0.1g ,按照操作步骤 2.2项下制
备各样品溶液 ,重复 3次 ,按设定的色谱条件进行测
定 ,结果表 2。
3　讨论
　　根据测定结果中可见 ,相同季节内叶中二氢杨
梅素含量比茎中的含量高 3 ～ 4倍;而不同产地的藤
茶中二氢杨梅素含量高低有差异 ,其中以江华产藤
茶中含量最高 ,其次为张家界 ,株洲产含量稍低 。但
不论产地如何 ,二氢杨梅素在藤茶中的积累呈现出
明显的特征 ,即 5 月份植物体内含量最高 ,其次是
4 、6月份 , 6月份以后到 11月落叶期随时间逐渐降
低 。这提示藤茶中二氢杨梅素含量随着外界环境的
改变而改变 。藤茶采集的最佳时节应为 4 ～ 6月 ,即
春之交 。本文为充分开发利用藤茶资源提供了科学
依据。
表 2 样品中二氢杨梅素的含量(mg·g-1)(n=3)
Table 2 Content of dihydromyricetin in the samples
产地 采收时间(月)
4 5 6 7 8 9 10 11
株洲(叶) 254.0 278.8 236.8 203.4 188.8 153.5 124.9 108.0
株洲(茎) 78.7 79.5 60.3 50.2 49.1 40.9 33.2 27.3
张家界(叶) 265.2 284.6 256.6 254.8 239.7 194.2 141.3 112.5
张家界(茎) 75.7 75.5 61.6 54.9 52.7 43.8 36.2 28.1
江华(叶) - 312.5 - - - - - -
江华(茎) - 92.0 - - - - - -
参考文献:
[ 1 ] 　中国科学院植物研究所.中国高等植物图鉴(二册)补编[ M] .
北京:科学出版社 , 1883:349-356.
[ 2 ] 　广西植物研究所.广西药用植物名录[ M] .南宁.广西民族出
版社 , 1974:202-206.
[ 3 ] 　周雪仙 ,周天达 ,双氢杨梅树皮素对兔胸主动脉条平滑肌收缩
反应[ J] .现代应用药学, 1997 , 14(2):43-44.
[ 4 ] 　钟正贤 ,覃洁萍 ,周桂芬 ,等.广西瑶族藤茶中双氢杨梅树皮素
的药理研究[ J] .中国民族医药杂志 , 1998 , 4(3):42-44.
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