全 文 ：紫外分光光度法测定三叶青胶囊总黄酮含量
董昌平，何孝金，王 芬(福建省南平市药品检验所 南平 353000)
摘要:目的 建立紫外分光光度法测定三叶青胶囊中的总黄酮含量的方法。方法 对不同的提取方法进行考察，在单因素试验的基础上，采
用正交试验考察提取温度、乙醇比例、料液比、回流时间对总黄酮提取率的影响;筛选显色系统，对 Al(NO3)3 溶液浓度、NaOH溶液浓度和体积、
反应温度及空白溶液进行考察;采用 NaNO2-Al(NO3)3 -NaOH显色反应体系测定三叶青胶囊中总黄酮含量。结果 回流法为最佳的提取方法，
条件为加 400 倍 40%乙醇于 90℃水浴提取 1. 5h;NaNO2-Al(NO3)3 -NaOH为最佳的显色系统，条件为 5% NaNO2 溶液 1mL、5% Al(NO3)3 溶液
1mL、8%NaOH溶液 10mL、反应温度 40℃并以续滤液为空白;以芦丁为对照，测定波长为 505nm，在 14. 0 ～ 84. 0g·L －1范围内线性关系良好(r =
1. 0000) ，平均回收率为 99. 00%(ＲSD1. 30%，n = 6)。结论 该方法简便、快捷、准确，可作为三叶青胶囊中总黄酮含量测定的方法。
关键词:紫外分光光度法;三叶青胶囊;芦丁;总黄酮;含量测定
中图分类号:Ｒ917 文献标识码:A 文章编号:1006-3765(2016)-02-0961-0077-05
作者简介:董昌平，男(1973 －)。职称:副主任药师，从事中药检验。
联系电话:(0599)8871077，18905999396，E-mail:565029079@ qq. com
Determination of Contents of Total Flavonoids in Tetrastigma hemsleya-
num Capsules by UV
DONG Chang-ping，HE Xiao-jin，WANG Fen(Nanping Institute of Drug Control，Nanping 353000，China)
ABSTＲACT:OBJECTIVE To establish a method of determination on the content of total flavonoids in Tetrastig-
ma hemsleyanum Capsule by UV. METHODS Different extraction methods were investigated. Based on single-fac-
tor tests，orthogonal design was used to adopted to investigate effects of extraction temperature，ethanol concentration，
solid-liquid ratio and refluxing time with extraction rate of total flavonoids as index. Different colour reaction systems
were screened. Al(NO3)3 and NaOH solution concentration，NaOH solution volumn，reaction temperature and blank
solution were investigated. NaNO2-Al(NO3)3-NaOH colour reaction system was used for the determination of total
flavonoids in Tetrastigma hemsleyanum Capsule. ＲESULTS Ｒeflux extraction was the optimum method and the op-
timum conditions were as follows:extracted with 400 times the amount of 40% ethanol for 90min in 90℃ water
bath. NaNO2-Al(NO3)3-NaOH was the optimum colour reaction system and the optimum conditions were as follows:
with subsequent filtrate solution as blank，reaction temperature was 40℃ and added with 5% NaNO2 solution 1mL，
5% Al(NO3)3 solution 1mL，8% NaOH solution 10mL. With Ｒutin as reference and the detection wave lengeh was
set at 505nm. There was good linear relationship during 14. 0 ～ 84. 0g·L －1(r = 1. 0000). The average recovery rate
was 99. 00%(ＲSD1. 30%，n = 6). CONCLUSION The mothod is simple，rapid，accurate and can be used for the
quantitative method of Tetrastigma hemsleyanum Capsule.
KEY WOＲDS:UV;Tetrastigma hemsleyanum capsule;Ｒutin;Total flavonoids;Quantitative method
三叶青为葡葡萄科植物三叶崖爬藤 Tetrastigma hemsleya-
num Diels ＆ Gilg的干燥块根，具有清热解毒，消肿止痛，化痰
的作用，用于治疗瘰疬结核，毒蛇咬伤等现代用于癌肿、淋巴
结核〔1〕。三叶青内含多种黄酮类化合物，现代研究表明，黄
酮类化合物具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤、抗氧化自由基等作
用〔2〕。
三叶青胶囊系以三叶青为原料制成的制剂，其含量检测
方法目前处于初步研究阶段。本文采用紫外可见分光光度
法，硝酸铝显色体系，以芦丁为对照品，测定三叶青胶囊中总
黄酮的含量，为其质量标准的建立提供依据。
1 仪器与试药
UV-2450 紫外可见分光光度计;HH-6 水浴锅;Millipore
超纯水器。芦丁对照品(批号 100080-200707;含量 92. 5%)
由中国食品药品检定研究院提供;三叶青胶囊由南平市人民
医院提供;NaNO2、Al(NO3)3、NaOH 均为分析纯，水为超纯
水。
2 方法和结果
2. 1 对照品溶液的制备 精密称取芦丁对照品 189. 00mg，
置 50mL量瓶中，加无水乙醇溶解并定容，即得对照品储备液
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(浓度 3. 496g·L －1)。精密吸取对照品储备液 1mL，置 10mL
量瓶中，加无水乙醇至刻度，即得对照品溶液(浓度 0. 1946g
·L －1)。
2. 2 供试品溶液的制备 精密称取内容物约 0. 13g，置于
100mL锥形瓶中，精密加入 40%乙醇 50mL，于 90℃水浴回流
图 1 提取方法对总黄酮
提取率的影响
90min，冷却，滤过，取续滤液。
2. 3 提取条件考察
2. 3. 1 提取方法的筛选:取
一定量样品，分别采取冷浸
24h、超声 1h、回流 2h 进行提
取，以总黄酮提取率为指标优
选提取方法，结果(见图 1)。
由图 1 可知，影响总黄酮
提取率的大小顺序为回流法
＞超声法 ＞冷浸法。故回流法为最佳的提取方法。
2. 3. 2 回流法的单因素考察:精密称取内容物约 0. 2g，对回
流法中影响总黄酮提取率的 4 个因素按(表 1)进行单因素考
察，结果(见图 2)。
表 1 回流法单因素考察
因素 考察点
提取温度 /℃ 40、50、60、70、80、90、100
乙醇比例 /% 0、20、40、60、80、100
溶剂体积 /mL 10、20、30、40、50、60
回流时间 /min 30、60、90、120、150
图 2 回流法的单因素考察
A. 提取温度;B. 乙醇比例;C. 溶剂体积;D. 回流时间
由图 2 可知，总黄酮提取率随着提取温度的升高而增大，
在 90℃时达到平衡，当提取温度继续升高时提取率略微增
大;总黄酮提取率随着乙醇比例的增大而增大，在 40%时达
到最大，当乙醇比例继续增大时提取率迅速降低;总黄酮提取
率随着溶剂体积的增大而增大，在 50mL时达到最大，当溶剂
体积继续加大时提取率略有降低;总黄酮提取率随着回流时
间的增加而增大，在 60min时达到最大，当回流时间继续增加
时提取率逐渐降低。故单因素考察的最佳结果为提取温度
90℃、乙醇比例 40%、料液比 250∶1、回流时间 60min。
2. 3. 3 回流法的正交试验:在单因素考察基础上，以提取温
度、乙醇比例、溶剂体积、回流时间为考察因素，以总黄酮提取
率为指标，称取供试品 16 份，每份 0. 2g，按 L16(4
5)正交表进
行试验，试验安排(见表 2) ，结果(见表 3) ，方差分析(见表
4)。
表 2 回流提取方法正交试验因素水平
水平
A 提取温度
/℃
B 乙醇比例
/%
C 溶剂体积
/mL
D 回流时间
/min
1 70 20 20 30
2 80 40 40 60
3 90 60 60 90
4 100 80 80 120
表 3 回流法正交试验安排及直观分析
No. A B C D E(误差) 提取率/mg·g － 1
1 1 1 1 1 1 42. 08
2 1 2 2 2 2 50. 28
3 1 3 3 3 3 52. 39
4 1 4 4 4 4 33. 06
5 2 1 2 3 4 55. 89
6 2 2 1 4 3 59. 58
7 2 3 4 1 2 54. 25
8 2 4 3 2 1 31. 60
9 3 1 3 4 2 55. 62
10 3 2 4 3 1 67. 47
11 3 3 1 2 4 48. 98
12 3 4 2 1 3 29. 45
13 4 1 4 2 3 62. 75
14 4 2 3 1 4 57. 55
15 4 3 2 4 1 55. 90
16 4 4 1 3 2 28. 77
K1 177. 81 216. 34 179. 41 183. 33 197. 05
K2 201. 32 234. 88 191. 52 193. 61 188. 92
K3 201. 52 211. 52 197. 16 204. 52 204. 17
K4 204. 97 122. 88 217. 53 204. 16 195. 48
Ｒ 27. 16 112. 00 38. 12 21. 19
表 4 回流法方差分析
方差来源 SS f MS F P
A 117. 36 3 39. 12 3. 99 ＞ 0. 05
B 1878. 03 3 626. 01 63. 88 ＜ 0. 01
C 189. 88 3 63. 29 6. 46 ＞ 0. 05
D 76. 19 3 25. 40 2. 59 ＞ 0. 05
e(误差) 29. 40 3 9. 80
注:F0. 05(3，3)= 9. 28;F0. 01(3，3)= 29. 5
由直观分析可知，各因素对提取率的影响顺序为 B ＞ C ＞
A ＞ D。方差分析表明因素 B对提取率的影响极显著，A、C、D
因素则无显著性影响，由于 A因素 K2、K3、K4 基本相同，从实
验操作角度考虑，提取温度 90℃为宜，故确定最佳提取方法
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为 A3B2C4D3。按优选的提取方法进行验证试验，结果提取率
分别为 67. 99、67. 18、67. 11mg·g －1，表明该方法稳定可行。
2. 3. 4 提取条件的确定:从实验操作角度出发，确定的条件
为精密称取供试品约 0. 13g，加 40%乙醇 50mL，于 90℃水浴
回流 90min。
2. 4 显色条件考察
2. 4. 1 显色系统筛选:①直接测定法:分别取对照品溶液和
供试品溶液各 1mL，置 10mL量瓶中，用水定容至刻度，摇匀，
放置 10min，以相应溶剂为空白。
②AlCl3 显色法:分别取对照品溶液和供试品溶液各
1mL，置 10mL量瓶中，加 10% AlCl3 溶液 1mL，用水定容至刻
度，摇匀，放置 15min，对照品以相应溶剂为空白，供试品以相
应稀释后的续滤液为空白。
③Al(NO3)3 显色法:分别取对照品溶液和供试品溶液各
1mL，置 10mL 量瓶中，一份用 40%乙醇定容至刻度，作为空
白;另一份加 5%亚硝酸钠溶液 1mL，混匀，放置 5min，加 10%
硝酸铝溶液 1mL，摇匀，放置 15min，加 NaOH试液 10mL，再加
40%乙醇至刻度，摇匀，放置 10min，对照品以相应溶剂为空
白。
取上述 3 组溶液，于 200 ～ 800nm 波长范围内光谱扫描，
结果(见图 3)。
图 3 不同显色方法的紫外
光谱图
A. 直接测定法;B. AlCl3 显色
法;C. Al(NO3)3 显色法 1. 对
照品;2. 供试品光谱
由图 3 可知，3 种显
色方法中，硝酸铝显色法的对
照品与供试品的光谱图较一
致，且都在 505nm 波长附近有
最大吸收，故选择硝酸铝显色
法测定三叶青胶囊中总黄酮
含量。
2. 4. 2 显色条件的优化:(1)
Al(NO3)3 溶液浓度的考
察:精密量取对照品溶液和供
试品溶液各 1mL，照 2. 4. 3 项
下方法，分别加入不同浓度的
Al(NO3)3 溶液，对照品溶液以相应试剂为空白，供试品溶液
以稀释后的续滤液为空白，在 200 ～ 600nm 波长范围内进行
光谱扫描，结果(见图 4)。
由图 4 可知，对照品溶液的最大吸收波长不受 Al(NO3)3
溶液浓度的影响，但最大吸收波长的吸光值随着 Al(NO3)3
溶液浓度的增加而增大;供试品溶液的最大吸收波长不受 Al
(NO3)3 溶液浓度的影响，最大吸收波长的吸光值变化较大，
波动较明显，当 Al(NO3)3 溶液浓度为 5%时，吸光值达到最
大值。故 Al(NO3)3 溶液的最适浓度为 5%。
(2)NaOH溶液浓度考察:精密量取对照品溶液和供试品
溶液各 1mL，置 25mL量瓶中，照 2. 4. 3 项下方法，分别加入不
同浓度的 NaOH溶液，对照品溶液以相应试剂为空白，供试品
溶液以稀释后的续滤液为空白，在 200 ～ 600nm 波长范围内
进行光谱扫描，结果(见图 5)。
图 4 Al(NO3)3 溶液
浓度的考察
图 5 NaOH溶液浓度
的考察
由图 5 可知，对照品溶液的最大吸收波长不受 NaOH 溶
液浓度的影响，但最大吸收波长的吸光值随着 NaOH 溶液浓
度的增加而增大，NaOH溶液浓度≥6%时，吸光值较稳定;供
试品溶液的最大吸收波长和吸光值随着 NaOH溶液浓度的增
加而增大，NaOH溶液浓度≥8%时，供试品溶液的最大吸收
波长和吸光值较稳定。故 NaOH溶液的最适浓度为 8%。
(3)NaOH溶液体积的考察:精密量取对照品溶液和供试
品溶液各 1mL，照 2. 4. 3 项下方法，分别加入不同体积的 8%
NaOH溶液，对照品溶液以相应试剂为空白，供试品溶液以稀
释后的续滤液为空白，在 200 ～ 600nm 波长范围内进行光谱
扫描，结果(见图 6)。
由图 6 可知，对照品溶液的最大吸收波长和吸光值基本
不受 NaOH溶液体积的影响;供试品溶液的最大吸收波长和
吸光值随着 NaOH 浓度体积的增加而增大，NaOH 溶液体积
≥10mL时，供试品溶液的最大吸收波长和吸光值较稳定。故
NaOH溶液的最适体积为 10mL。
(4)反应温度的考察:精密量取对照品溶液和供试品溶
液各 1mL，照 2. 4. 3 项下方法，分别在不同温度下进行反应，
结果(见图 7)。
图 6 NaOH溶液体积的考察 图 7 反应温度的考察
1. 芦丁对照品溶液;
2. 供试品溶液
由图 7 可知，芦丁对照品溶液的吸光值在反应温度为
40℃时达到最大，供试品溶液的吸光值在反应温度为 20 ～
40℃时较稳定;芦丁对照品溶液和供试品溶液在反应温度≥
40℃时，吸光值随着温度的增大而降低。故温度对反应过程
的影响较大，最佳反应温度为 40℃。
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2. 4. 3 显色条件的确定:取一定的待测液，置于 25mL 量瓶
中，置于 40℃水浴中，加 5%亚硝酸钠溶液 1mL，混匀，放置
5min，加 5%硝酸铝溶液 1mL，摇匀，放置 15min，加 8% NaOH
溶液 10mL，再加 40%乙醇至刻度，摇匀，放置 10min。
2. 5 空白溶液的选择 精密吸取对照品溶液和供试品溶液
各 3 份，每份 1mL，按 2. 4. 3 项下方法，1 份加入亚硝酸钠，1
份加入亚硝酸钠、硝酸铝，1 份加入亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化
钠;对照品溶液以 40%乙醇溶液为空白、供试品溶液以相应
倍数稀释的续滤液为空白，在 200 ～ 800nm 波长范围内进行
光谱扫描，结果(见图 8)。同时，以不同溶液为空白，分别对
续滤液、显色溶液在 400 ～ 600nm 波长范围内进行光谱扫描，
结果(见图 9)。
图 8 反应过程中的紫外光谱图
A. 芦丁对照品溶液;B. 供试品溶液;1. 加入亚硝酸钠;2. 加入硝
酸铝;3. 加入氢氧化钠
由图 8A可知，在 505nm波长下，若以加入氢氧化钠的吸
收值为 100%，加入亚硝酸钠为 0. 4%，加入硝酸铝为 24%;由
图 8B可知，在 505nm波长下，若以加入氢氧化钠的吸收值为
100%，加入亚硝酸钠为 4. 4%，加入硝酸铝为 32%。有 3-
OH、4-羰基和邻二酚羟基的黄酮类化合物与 Al3 +能够生成黄
色化合物，此类化合物在 420nm波长处有最大吸收，在 505nm
波长也有部分吸收，虽然本法测定的是 3-OH或 5-OH与 4-羰
基一起与 Al3 + 形成稳定络合物的黄酮类化合物，但能够与
Al3 +生成黄色化合物的黄酮类化合物也不宜排除，即使测定
波长并非其最大吸收波长，故笔者认为不宜以加入硝酸铝的
溶液为空白。
由图 9 可知，在 505nm 波长下，若以续滤液-供试品的吸
收值为 100%，溶剂-供试品为 121%，溶剂-续滤液为 18%。
续滤液在 505nm波长下的吸收会使测定结果偏高，这部分干
扰因素排除，而由图 8B 可见加入亚硝酸钠后吸收值变化很
小，从操作的简便性角度应取相应倍数稀释的续滤液为空白
为宜。
2. 6 方法学考察
2. 6. 1 标准曲线的制备:精密吸取对照品溶液 1. 0、2. 0、3. 0、
4. 0、5. 0、6. 0mL，分别置 25mL 量瓶中，置于 40℃水浴中，加
40%乙醇至 6. 0mL，加 5% 亚硝酸钠溶液 1mL，混匀，放置
5min，加 5%硝酸铝溶液 1mL，摇匀，放置 15min，加 8% NaOH
溶液 10mL，再加 40%乙醇至刻度，摇匀，放置 10min，以 40%
乙醇为空白，在 505nm 波长下测定吸光值，以吸光值为纵坐
标、浓度为横坐标绘制标准曲线(见图 10)。
图 9 以不同溶液为空白的
光谱扫描图
1. 以溶剂为空白的供试品;2.
以溶剂为空白的续滤液;3. 以
续滤液为空白的供试品
图 10 芦丁对照品标准曲线
2. 6. 2 精密度试验:精密吸取对照品溶液 4mL，按 2. 6. 1 项
下方法自“置 25mL量瓶中”起，依法测定吸光值，重复测定 6
次，结果吸光值的 ＲSD为 0. 12%，表明方法精密度良好。
2. 6. 3 稳定性试验:精密吸取同一供试品溶液 3mL，按 2. 6. 1
项下方法自“置 25mL量瓶中”起，依法测定吸光值，结果供试
品溶液在 30min内稳定，ＲSD为 1. 96%。
2. 6. 4 重复性试验:取同一样品 6 份，按 2. 2 项下方法制备，
精密吸取 3mL，按 2. 6. 1 项下方法自“置 25mL量瓶中”起，依
法测定吸光值，结果含量平均值为 67. 92 ± 1. 29，ＲSD 为
1. 90%。表明方法重复性良好。
2. 6. 5 准确度试验:取同一样品 6 份，每份约 0. 065g，精密称
定，分别精密加入对照品储备液 1. 26mL，按 2. 2 项下方法制
备，精密吸取 3mL，按 2. 6. 1 项下方法自“置 25mL 量瓶中”
起，依法测定吸光值，结果(见表 5)。
表 5 准确度试验结果
NO 取样量/ g
样品
含量
/mg
加入量
/mg
测得量
/mg
回收率
/%
平均回收率 /%
(x ± s) (ＲSD /%)
1 0. 0653 4. 4352 4. 4050 8. 752 98. 00 99. 00 ± 1. 27(1. 30)
2 0. 0663 4. 5031 4. 4050 8. 813 97. 84
3 0. 0679 4. 6118 4. 4050 8. 985 99. 28
4 0. 0651 4. 4216 4. 4050 8. 754 98. 35
5 0. 0647 4. 3944 4. 4050 8. 608 95. 65
6 0. 0652 4. 4284 4. 4050 8. 785 98. 90
2. 6. 6 样品测定:取三叶青胶囊按 2. 2 项下方法取样制备
后，精密吸取 3mL，按 2. 6. 1 项下方法自“置 25mL 量瓶中”
起，依法测定吸光值，计算总黄酮含量，结果(见表 6)。
表 6 三叶青胶囊中总黄酮含量测定结果 (n = 6)
No. 批号 总黄酮 /mg·g － 1 ＲSD /%
1 20130405 67. 463 1. 29
2 20130415 67. 586 1. 32
3 20130516 68. 571 1. 08
4 20130620 66. 992 1. 11
5 20130701 67. 053 1. 41
3 讨论
3. 1 紫外分光光度法测定总黄酮常用方法有直接测定法和
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显色测定法。直接测定法是依据黄酮自身结构的特点，不使
用显色剂，直接在其特征吸收峰处进行测定，该方法对单一成
分的样品测定简便、快速、准确;但对中草药提取物来说，杂质
的干扰大，往往出现误差，采用更多的是在碱性条件下显色测
定法，一般认为显色测定法明显优于直接测定法的结果，且多
糖、皂苷对试验均无干扰。
3. 2 NaNO2-Al(NO3)3 -NaOH比色法是应用最为广泛的测定
总黄酮的方法，其方法原理是先以 NaNO2 还原黄酮类化合
物，再加 Al(NO3)3 络合，最后加 NaOH 溶液显色，产生稳定
的红色化合物进行比色测定，由苯甲酰基系统的电子跃迁所
引起的吸收带(300 ～ 400nm)在碱性条件下会红移至紫外波
长 505 ± 5nm，并形成一条比较明显的吸收带，由图 8A的加入
硝酸铝和氢氧化钠后的紫外光谱图并未见红移的现象和趋
势，在波长范围 300 ～ 400nm的吸收反而增强了，而 505nm 波
长处的吸收带是从无到有出现的，故笔者认为芦丁在 505nm
波长下本身无吸收，随着还原和络合使结构发生改变而逐渐
产生吸收的，并非吸收带的红移。
3. 3 正交试验多用于工艺优选，较少用于试验条件的考察。
回流方法考察中正交试验与单因素的溶剂体积结果就不同，
笔者依据正交试验结果确定了试验条件，验证结果亦较理想。
3. 4 对三叶青胶囊总黄酮显色稳定性考察结果表明在
30min内稳定，之后吸光值呈明显减小趋势，可能在碱性条件
下黄酮与 Al3 +形成的络合物时间长易分解，故测定过程应注
意显色后及时测定，避免误差。
3. 5 本文对提取条件、显色条件和空白选择进行了较为全面
的考察，建立了测定三叶青胶囊中总黄酮的方法，对于 UV 法
测定总黄酮的方法开发具有参考价值。
参考文献
〔1〕江苏新医学院 . 中药大辞典〔M〕. 下册 . 上海:上海人民出版社，
1977，2123.
〔2〕马锐，吴胜本 . 中药黄酮类化合物药理作用及作用机制研究进展
〔J〕. 中药药物警戒，2013，10(5) :286-290.
〔3〕马雯芳，邓慧连，蔡毅，等 . 冰糖草总黄酮含量测定及显色方法优
化〔J〕. 中国实验方剂学杂志，2013，19(3) :112-115.
〔4〕胡春晖，邱祥建，袁庆 . 正交试验优选猫爪草中小毛茛内酯的提
取工艺〔J〕. 中国实验方剂学杂志，2014，20(12) :17-19.
〔5〕金蕾 . NaNO2-Al(NO3)3 -NaOH 法测定总黄酮含量的实验条件研
究〔J〕. 海峡药学，2008，3:66-67.
〔6〕喻樊 . 槐米中总黄酮的含量测定〔J〕. 海峡药学，2008，7:71-73.
氨咖黄敏胶囊中对乙酰氨基酚和咖啡因的含量测定
赵 燕(江苏泰兴市食品药品检验所 泰兴 225400)
摘要:目的 采用高效液相色谱法(HPLC)测定氨咖黄敏胶囊中对乙酰氨基酚和咖啡因的含量。方法 采用十八烷基硅烷键合硅胶柱的色谱
柱;流动相:磷酸盐缓冲液 pH 4. 5∶甲醇 = 80∶ 20;检测波长:254nm。结果 从线性关系、精密度、重复性、稳定性试验、回收率试验结果可以得
出，该方法的方法学验证符合规定。结论 高效液相色谱法简便、快速、重现性好。
关键词:高效液相色谱法;对乙酰氨基酚;咖啡因
中图分类号:Ｒ927 文献标识码:A 文章编号:1006-3765(2016)-02-07109-0081-02
作者简介:赵 燕，女(1965 － )。职称:主管药师。联系电话:
13626134470，E-mail:391929634@ qq. com
氨咖黄敏胶囊适用于缓解普通感冒及流行性感冒引起的
发热、头痛、四肢酸痛、打喷嚏、流鼻涕、鼻塞、咽痛等症状，临
床应用较为广泛，但一直未有较好方法对两种主要成分进行
质量控制，笔者采用高效液相色谱法测定对乙酰氨基酚和咖
啡因的含量，现报道如下。
1 仪器与试药
高效液相色谱仪(安捷伦 1100) ;氨咖黄敏胶囊(扬子江
药业，批号:13083102) ;对乙酰氨基酚对照品、咖啡因对照品
(批号:20130328、中检所)。
2 方法与结果
2. 1 色谱条件 色谱柱:十八烷基硅烷键合硅胶柱;流动相:
磷酸盐缓冲液(pH 4. 5)∶甲醇 = 80 ∶ 20;检测波长:254nm〔1〕。
取氨咖黄敏胶囊(批号 13083102)粉末 10mg，于 100mL 容量
瓶中，加流动相溶解样品，取 1μL进样，结果(见图 1)。
图 1 对乙酰氨基酚和咖啡因的色谱图
2. 2 线性关系考察 取对乙酰氨基酚对照品 25. 82mg，咖啡
因对照品 15. 16mg，加流动相溶于 100mL容量瓶中，精密量取
①1mL至 50mL容量瓶中，②2mL 至 50mL 容量瓶中，③1mL
至 10mL容量瓶中，④2mL至 10mL容量瓶中，⑤3mL至 10mL
容量瓶中，⑥5mL 至 10mL 容量瓶中，加流动相稀释至刻度，
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Strait Pharmaceutical Journal Vol 28 No. 2 2016