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薄层扫描法测定血府逐瘀丸中齐墩果酸的含量



全 文 :围及避免中毒反应的要求。
参考文献:
[!] 曾衍霖临床药代动力学中群体及个体参数的估算[#]中国临
床药理学杂志,!,’(!):() [*] +,-.-/,0123,4567189:/;<=-1=,>,0-/;51=>=>;-7;5/5>-;0/,? @;/6?-/;51=>=>;[#]A;BC/,>,!$D&,!&(!):*! [(] 26<;.#,E,/?5>23,E,/<=-;83,;157FC;/5B;61=-6G<br?,>=1,/=>GHI076,/;@-;>-;B,75/=J51=,>:B;/0,/?5>-;,0=?K ?5>,5@@5I@0,/1C;5?=>,G7I-,@=<;5>1=H=,1=-@,G;>15?=-=>,1,K H/5?I-=>5><5?=.5-=>[#]+7=>+C;?,!$%’,’%(D):!&&* [)] 夏东亚,申晓环,刘宝庆,等临床药动学给药个体化系统的研 制及应用[#]中国药学杂志,!%,**(():’’ [&] F5I7,/3#,2=;/@+5L=>;@@89M1;N1H,,.0,/1C;-7=>=-575BB7=K -51=,>,01C;/5B;61=-6G?,=1,/=>G[8];O/L=GF;N5@: MHH,1175H,/51,/=;@,!%&,’& [D] 余立江,傅得兴,霍苏男,等老年人丁胺卡那霉素药动学研究 [#]中国药学杂志,!P,’)(!):!% [%] 张菁,郁继诚,施耀国,等庆大霉素和阿米卡星在老年人中的 药代动力学研究[#]中国临床药理学杂志,!%,!((’):%’ [收稿日期]’PP!KP’K’& 薄层扫描法测定血府逐瘀丸中齐墩果酸的含量 颜耀东!,金瑛’,周志刚*,张雷* (!中国人民解放军第(&&医院,北京!PPP%;’第四军医大学吉林军医学院,吉林 吉
林!*’P!*;*中国人民解放军第(&)医院,吉林 吉林!*’P!*)
[摘要] 目的:研究血府逐瘀丸中齐墩果酸的定量方法。方法:采用薄层扫描法进行测定,在硅胶4板上经环已烷K丙酮K乙酸
乙酯((Q’Q!)展开、显色后,!@R)*)>?。结果:本法平均回收率为%&S,TU2为’’S。结论:本法灵敏、简便、准确,可用于 本丸剂测定和质量控制。 [关键词] 薄层扫描法;血府逐瘀丸;齐墩果酸 [中图分类号]T’D’ [文献标识码]M [文章编号]!PP!K)’!*(’PP!)!’KPD!KP* !#%&’(#&)’)*+)’#’#)*),(’),&+(+&-)*!#%&’()*./0123+(’’&’4 VMAV5,K2,>G,#OAV=>G,W9XYWC=K45>G,;157(A,(&&9,@B=157,0:ZM,[;=\=>G!PPP%
56708520:96:;20<=; F,;@15H7=@C5FZ+@-5>>=>G<;1;/?=>51=,>?;1C,<0,/,7;5>,7=-5-=<,0!#$%&’()*>;0?9!7
FC;@5?B7;]5@@;B5/51;G-I-7,C;N5>;K5-;1,>;K;1CI75-;151;((Q’Q!),>1C;@=7=-5G;7B751;@,501;/L=@657=J51=,>1C;B751;
]5@@-5>>;<51)*)>?HI+U^ *P8;7@107 FC;5L;/5G;/;-,L;/I]5@%&S5>?;1C,<=@@=?B7;,5--6/51;,5><@;>@=1=L;
B;CD98!7:!#%&’()*;,7;5>,7=-5-=<;FZ+@-5>>=>G 血府逐瘀丸是!)年版《中国药典》收载的常 用中成药,由桃红,川牛膝,当归,地黄等十余味药物 组成,具有活血逐瘀,行气止痛的功效,用于瘀血内 阻,头痛或胸痛,内热烦闷,失眠多梦,心悸怔忡等证 的治疗。牛膝为该丸剂中的臣药,齐墩果酸是其主 要成分[!],为控制本品质量,我们采用薄层扫描法 对齐墩果酸的含量进行测定,取得满意的结果。 ! 仪器与材料 +U^ *P薄层扫描仪(日本岛津);定量毛细管
(2/6??,><公司,YUM);:/=?5N(%PP2OT_+F 图
象扫描仪;血府逐瘀丸(长春市中药厂,批号
&!’P&);齐墩果酸标准品(中国药品生物制品检定 所);硅胶4(青岛海洋化工厂);其他试剂均为分析 纯。 方法与结果 ! 提取条件的选择 根据齐墩果酸在牛膝中存 在的状态及性质,曾采用氯仿直接回提法、甲醇提酸 水解后氯仿提取法及酸水解后氯仿回提法等方法进 行对比,最后确定提取条件为:取药丸!P丸,精密称 重,求其平均丸重。取)丸剪碎,任取约’丸量的丸 屑,精密称重,置乳钵中,与精密称重的硅藻土(相当 于平均丸重的’倍)适量,研磨成细粉,混合均匀。 再精密称取相当于’倍平均丸重的分散细粉,置圆 底烧瓶中,加!?,7·Z !^硫酸溶液P?7浸泡’(C
后,加热回流DC,过滤。沉淀物用蒸馏水洗至呈中
性,于DP‘烘干,用滤纸包裹,置圆底烧瓶中,加&P
?7氯仿浸泡!’C,加热回流%C后,过滤。用氯仿
洗涤’次(每次)?7),回收氯仿至近干。残留物用
少量氯仿溶解,定量转移至!P?7量瓶中并定容,作
样品溶液。
展开剂的选择 据文献[’&]报道,齐墩果酸
的展开系统较多,经筛选试验,P)S+8+KA5的硅
胶4薄层层析板上,以环已烷K丙酮K乙酸乙酯((Q’Q
!)为展开剂分离效果最佳,齐墩果酸斑点呈紫红色,
·!D·中国医院药学杂志’PP!年第’!卷第!’期+C=>9,@B:C5/?#,’PP!2;-,a,7’!,A,!’ !#%&’,层析图谱见图(。
图( 薄层层析图谱
(%齐墩果酸标准品溶液;)%样品溶液
!% 显色条件的选择 实验中先后用*+!)+ 硫酸乙醇作显色剂,对显色剂浓度、烘烤温度、烘烤 时间’个因素进行了正交试验,各因素与水平见表 (。样品点样经薄层展开后,在岛津,-./(显色喷 雾器上以固定的喷射压力(012·34/))、喷雾距离 ((534)、喷雾时间(喷雾头来回摆动0次)条件,用 计算机图象扫描仪扫描供试品斑点,并用微机处理 斑点颜色色度变化程度,以斑点的平均灰度与背景 平均灰度的差值(即灰度反差值)为指标,判断在不 同浓度硫酸乙醇液,烘烤温度,烘烤时间下的显色效 果。极差分析确定采用(+ 硫酸乙醇液作显色剂,
56,(478的显色条件。
表# 显色条件的因素与水平
硫酸乙醇液/+ 烘烤温度/6 烘烤时间/478
* 9 : ( 5 (
) (* (*
!% 扫描条件的选择 齐墩果酸在薄层层析板展 开、显色定位后,立即用同样大小玻璃板复盖并用 胶带封边。扫描测定紫外光谱最大吸收波长为*’* 84,故;#*’*84,反射吸收锯齿扫描,狭缝(%)* 44<(%)*44,,=#’,背景>?,灵敏度 @AB,检测 信号CDAE。 !% 线性范围试验 精密吸取齐墩果酸标准品溶 液((42·4F/(氯仿液)%*,(,),’,0,9,(#F点样于 同一块薄层板上,按选定的色谱条件展开显色后,分 别测定各斑点的面积积分值,以点样量(#2)对峰面 积积分值(!)进行线性回归,其回归方程为# 0(*’�/(0*#)5,%#%55*9,表明齐墩果酸
%*!(#2范围内呈良好线性关系。
!%& 精密度试验 在同一块薄层板上点0个’#F
的标准品溶液,展开显色后,测定各斑点的峰面积积
分值,#(*)&:’0%0:,!,G#)%*+(�)。对’
#F标准品溶液的同一个斑点,按上述扫描条件测
定,#(*&’%09,!,G#%90+(�)。表明各
测定数据具有良好的重现性。
!%’ 稳定性试验 将齐墩果酸标准品溶液点于薄
层板上,依法展开显色后,每隔(H扫描测定斑点峰
面积积分值一次,结果!,G#(%0:+(�)。说
明在’H内斑点峰面积积分值基本稳定。
!%( 加样回收率试验 精密称取已知含量的样品’
份,按)%(项下操作至沉淀物“于:6烘干 ”处加入 一定量的齐墩果酸标准品。氯仿萃取,分离氯仿层, 并定容至(4F量瓶,在薄层板上点样品及加样样
品液各’#F,标准品溶液’,*#F,按样品测定项下操
作,结果见表)。
表! 加样回收率试验
加入量/42 测得量/42 回收率/+ 平均回收率/+ !,G/+
( %5:&& 5:%&& ( %5950 59%50 59%& )%)
) (%5&’: 5&%’:
) )%(*) ((%*
!%) 样品测定 分别精密吸取供试品溶液’#F,标
准品溶液’,*#F交叉点于同一薄层板上,按上述条
件展开、显色后,用外标二点法分别测定样品中齐墩
果酸的含量。结果血府逐瘀丸中齐墩果酸的含量’
#()*%5+(42·2/(),!,G#(%9*+(&#’)。
讨论
齐墩果酸多以与糖或糖醛酸结合成皂苷及游离
形式存在于植物中[:],牛膝根中含有蜕皮激素,牛
膝甾酮,三萜皂苷等成分。目前文献报道牛膝的含
量多以该成分为指标[0%*%&%9],三萜皂苷经水解后生
成齐墩果酸。本实验结果表明,先用酸水解齐墩果
酸后用氯仿提取的方法,其提取率最高,而氯仿直接
萃取法提取率低,仅提取了游离的齐墩果酸。
本文采用正交设计优选出最佳显色条件,斑点
颜色清晰集中,层析板底色白净。因显色后斑点颜
色在空气中不稳定,故用玻璃板复盖,可保持数小时
内颜色无变化。
由于齐墩果酸溶解性质与三萜皂苷差别很大,
且在酸水解过程中可能会造成含量下降,因此在加
样回收率试验中,标准品于酸水解后加入,以确保模
拟样品的可靠性。
齐墩果酸的定量方法薄层比色法[)%5%(]、双波 长薄层扫描法[’!:],因双波长锯齿扫描法费时,本 文采用单波长反射锯齿式扫描,方法准确、快速,结 果满意。 参考文献: [(] 江苏新医学编%中药大辞典[@]%上册%上海:上海人民出版社, (5::%0(:% [)] 李秀珍%怀牛膝根中游离齐墩果酸及其皂苷的薄层比色测定 [I]%中药通报,(599,(’()):’:% [’] 吴乃居,王延明,陈鸿英,等%中草药中齐墩果酸含量测定[I]% 中草药,(55),)’(5):0&:% [0] 李先端,胡世林%不同产地牛膝中齐墩果酸含量测定[I]%中国 中药杂志,(55*,)(9):0*5%
[*] 王荣娣,钱频菲%怀牛膝中齐墩果酸薄层扫描测定方法的研究
[I]%中药材,(595,()(():’0%
·):· 中国医院药学杂志)(年第)(卷第()期JH78KL;M-HED4I,)(GA3,NLF)(,?L%() [!] 殷玉生怀牛膝的炮制方法探讨[#]中成药,%&%,$$($’):$(
[(] 张登科,孙文基,沙振方,等)*种植物的齐墩果酸含量比较
[#]中药材,$%&%,$’($’):$%
[&] 王宝琴中成药质量标准与标准物质研究[+]北京:中国医药
科技出版社,$%%,!-&
[%] 王晓娟怀牛膝与土牛膝的薄层比色测定法[#]西北药学杂
志,$%%’,((’):$)
[$-]刘红亚,钟炽昌,杨大坚,等女贞子中齐墩果酸含量测定及样
品制备方法的改进[#]中草药,$%%),’,(,):’$%
[收稿日期]’--$.’.$%
二陈汤合煎剂与分煎颗粒剂药效学对比
汪晖$,程军’,张卫国$,孔锐$,王君$ ($武汉大学医学院药理教研室,湖北 武汉,)--($;’三九医药股份有限公司
中药发展部,广东 深圳*$&-’%)
[摘要] 目的:探讨二陈汤合煎剂和分煎颗粒剂的药理作用差异。方法:采用小鼠气管酚红排泄实验、氨水引咳实验和豚鼠
整体组胺吸入诱喘实验,比较二陈汤合煎剂和颗粒剂在祛痰、镇咳和平喘作用方面的差异。结果:合煎和分煎颗粒剂均能明
显促进小鼠气管内酚红排泄量,延长咳嗽潜伏期和减少咳嗽次数,显著延长组胺吸入致豚鼠哮喘发作潜伏期和翻倒发生时
间,降低翻倒率。结论:二陈汤分煎颗粒剂的药效不亚于传统的合煎剂。
[关键词] 二陈汤;合煎剂;分煎颗粒剂;药效
[中图分类号]/%,,’ [文献标识码]0 [文章编号]$--$.*’$)(’--$)$’.-(’$.-)
!#$%#&’()*#%+&&’%,#$+#-’*’*./%+0/((/&’&.+’*#*(./-/,#$#./(1$#*23/’4!#$%&’(&)
1023456,74823#59,:40231;6.35<,;=>?(+;@6A>?79E96F;GH6=I,45J>915D>9,)--($)
567895:8:;6<=:8>?= KGM>A<@I9>M6AHJ;=N;;9=D;M6O;@@;A9@=D;H;L>G>=;@BG>95?;!#$%&’(&)(87K),>LG;HAG6L=6<9@6=6<9>?7D69;H;M;@6A69;@=8A;B7 PD>GM>A<@I9>M6AHM6O;@@;AG>=;@@;A9@=D;H;L>G>=;@BG>95?;G>?;?IH=5@6;@<9=D;CLD;9?;69;OAG;=6<9CGAD;>,=D;A<5BD69@5A;@JI>MM<96>>9@=D;>H=DM>69@5A;@JID6H=>M69;9=7CD87
KD;H;=NH;=D;LD;9?;69;OAG;=6<9CGAD;>,LG=;9=L;G6<@>9@G;@5A;=D;A<5BD=6M;H69M6A;KD;G;H5?=H>?H==D;?>=;9=L;G6<@HH=DM>>9@=D;A=6<9JID6H.
=>M69;N;G;H6B96C6A>9=?I;O=;9@;@,>9@=D;=6H@;AG;>H;@69B569;>L6B:;E:DC7>;E7 KD;LD>GM>A<@I9>M6AH87K69=D;H;L>G>=;@BG>95?;6H9<=69C;G6=69=D;M6O;@@;AF=GH;9B7:!#$%&’(&);M6O;@@;AG>=;@BG>95?;;LD>GM>A<@I9>M6AH
二陈汤为《太平惠民和剂局》所载处方,具有燥
湿化痰、理气和中之功效,临床上主要用于治疗慢性
支气管炎[’]。为探讨二陈汤分煎颗粒剂(以下简 称为颗粒剂)和合煎剂药理作用有无差异,本文以小 鼠酚红排泄实验、小鼠氨水引咳实验和豚鼠整体组 胺吸入诱喘实验为指标,对比观察二陈汤合煎剂和 颗粒剂在祛痰、镇咳和平喘作用上的差异,为临床上 推广应用免煎中药饮片(即分煎颗粒剂)提供药效学 依据。 ! 材料与方法 !! 药品与试剂 二陈汤方剂组成为:制半夏 *B,陈皮*B,茯苓%B,炙甘草*B,生姜)B,乌梅 )B。合煎所用药材以及颗粒剂由深圳三九医药股 份有限公司提供。合煎时按实验需要量将诸药混 合,用水浸泡)-M69后,用#QR—S型多孔式远红 外中药煎药炉煎煮。加水煎煮时,第一次加水量为 生药重量的!倍,第二次加水量为生药重量的,倍, 取其滤液浓缩。颗粒剂是按实验需量将各种分煎颗 粒剂用温蒸馏水混合配制而成。各剂浓度均为相当 生药)B·M?T,冰箱保存,使用时以蒸馏水稀释 成 所 需 浓 度。氯 化 铵 (自 贡 制 药 厂,批 号 -&-&)--);咳必清(天津制药厂,批号’----!(); 氢氧化铵 (开封东大化工公司试剂厂,批号 %(-)’-);氨茶碱(天津市氨基酸公司人民制药厂,批 号’-----’’);苯酚红(上海化学试剂总厂);重盐
酸组织胺(中国医药公司上海采购供应站)。
! 动物 昆明种小鼠,!兼用,体重!!’-B。 健康豚鼠,!各半,体重,-!’--B,皆由武汉大
学医学院实验动物中心提供。
!# 分组和统计 为比较合煎剂和颗粒剂的作用
差异,各剂设)个剂量组。除样本率差异应用!’检
验外,其余结果均经多组间02UV0方差分析,呈
一定量效关系者进行回归处理,并作两方程间*检
验[)]。
·’(·中国医院药学杂志’--年第’卷第’期7D694GM#,’--$W;A,V

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