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［基金项目］中国药典 2010 版一部标准研究(编号:YS-262) ［作者简介］张小梅，女，硕士，助理研究员，电话:023 － 89029068，E-mail:
ZXM761@ yahoo． com． cn ［通讯作者］梁旭明，男，硕士，助理研究员，电话:023-89029108，E-mail:liangxuming2004@ yahoo． com． cn
高效液相色谱法测定翼首草不同药用
部位齐墩果酸和熊果酸的含量
张小梅，梁旭明，励娜，孙冠芸，杨荣平 (重庆市中药
研究院，重庆 400065 )
［摘要］ 目的:比较翼首草不同药用部位齐墩果酸和熊果酸
的含量。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱:Boston Sym-
metrix(250 mm × 4． 6 mm，5 μm) ，甲醇-0． 1 moL·L －1乙酸铵
溶液(85 ∶ 15) ，流速0． 8 mL·min －1，检测波长 210 nm，柱温
30 ℃。结果:齐墩果酸和熊果酸的线性范围分别为1． 728 ～
25． 92 μg(r = 0． 999 95)、2． 188 ～ 32． 82 μg(r = 0． 999 95) ，
齐墩果酸的平均回收率为99． 90%，RSD 为2． 12%，熊果酸的
平均回收率为99． 90%，RSD 为1． 66%。通过比较不同产地
和批次翼首草样品的测定结果，可知翼首草不同药用部位齐
墩果酸和熊果酸的含量有着较大差别，其中全草中齐墩果酸
和熊果酸含量远远高于根。结论:该方法准确可靠，重现性
好，试验结果为翼首草不同药用部位的临床应用提供了依
据。
［关键词］ 高效液相色谱法;翼首草;齐墩果酸;熊果酸;不
同药用部位;含量
［中图分类号］R927． 2 ［文献标识码］A ［文章编号］1001-
5213(2012)02-0155-02
翼首草为川续断科植物匙叶翼首草 Pterocephalus hookeri
(C． B． Clarke)Hoeck的干燥全草［1］，其性寒，味苦，有小毒。
具有解毒除瘟，清热止痢，祛风通痹之功效，为藏医常用药
材。翼首草中的主要成分为齐墩果烷型五环三萜皂苷类化
合物，此外还含有生物碱、多糖等化学成分。研究表明，翼首
草正丁醇部位总皂苷具有显著的抗炎活性，且其抗炎的作用
与消炎痛效果相似［2］。而翼首草在市场上的应用中有采用
根为药用部位的，也有采用全草(带根)为药用部位的，甚至
有文献写其来源为根或全草［3］，其中根与全草中主要活性成
分是否一致，对其临床应用是否有影响，本文就这一问题，采
用齐墩果酸和熊果酸为对照品，采用高效液相色谱法对不同
药用部位进行了含量测定，目的是为翼首草药材临床应用和
药理研究提供一定的参考依据。
1 材料
Waters 2695 高效液相色谱仪，Waters 2996 检测器，Wa-
ters Empower化学工作站;AEG-45SM 电子天平(十万分之
一，日本岛津公司) ，BP121S电子天平(万分之一) (北京赛多
利斯科学仪器有限公司)。
齐墩果酸(批号 110709-200505，纯度≥99． 0%) ，熊果酸
(批号 110742-200516，纯度≥99． 0%)均由中国药品生物制
品检定所提供。本实验所用 13 批翼首草均为本院生药研究
所研究人员收购或采自四川、西藏等地，采集时间多为 2008
年 7 至 8 月，经重庆市中药研究院院长钟国跃研究员鉴定为
Pterocephalus hookeri (C． B． Clarke)Hoeck。甲醇为色谱纯;
水为超纯水;其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2． 1 对照品溶液和供试品溶液的制备
2． 1． 1 对照品溶液 精密称取齐墩果酸对照品8． 64 mg、熊
果酸对照品10． 94 mg，置 10 mL 量瓶中，加入甲醇溶解并稀
释至刻度。摇匀即得0． 864 g·L －1的齐墩果酸、1． 094 g·L －1
的熊果酸混合对照品溶液。
2． 1． 2 供试品溶液 取翼首草粉末(过 3 号筛，第 2 批)2
g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加入甲醇 50 mL，超声处理
(功率 250 W，频率 40 Hz)30 min，冷却，过滤，用少量甲醇润
洗滤渣，合并滤液，蒸干，残渣加甲醇转移至 10 mL 量瓶，加
甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
2． 2 色谱条件 色谱柱:Boston Symmetrix ODS-R(250 mm
×4． 6 mm，5 μm) ;流动相:甲醇-0． 1 moL·L －1醋酸铵溶液
(85∶ 15) ;检测波长:210 nm;柱温:30 ℃;流速:0． 8 mL·
min －1。理论塔板数以齐墩果酸峰计算应不得低于8 000。混
合对照品及样品色谱图见图 1。
2． 3 标准曲线的制备 分别精密吸取混合对照品溶液0． 2，
0． 6，1． 0，1． 4，2． 0，3． 0 mL分别置 10 mL量瓶中，加甲醇至刻
度，摇匀。依次取上述溶液各 10 μL进样，按“2． 2”项下条件
注入液相色谱仪，记录色谱峰。分别以齐墩果酸和熊果酸的
浓度 E(g)为横坐标(X)、峰面积积分值为纵坐标(Y) ，进行
线性回归，分别得到回归方程:齐墩果酸 Y = 5E + 07X －
104 550(r = 0． 999 95) ，线性范围0． 017 28 ～ 0． 259 2 g·L －1;
熊果酸 Y = 4E + 07 X － 74 058(r = 0． 999 95) ，线性范围
0． 021 88 ～ 0． 328 2 mg·L －1。各对照品在线性范围内含量与
峰面积有很好的相关性。
图 1 翼首草高效液相色谱图
A． 混合对照品;B． 翼首草药材;峰 1-齐墩果酸;峰 2-熊果酸
Fig 1 HPLC chromatograph chart of Pterocephalus hookeri
A． mix reference substance;B． Pterocephalus hookeri;peak 1-oleanolic
acid，peak 2-orsolic acid
2． 4 精密度试验 精密吸取齐墩果酸与熊果酸混合对照品
溶液(浓度为齐墩果酸0． 864 g·L －1，熊果酸1． 094 g·L －1)10
μL，注入高效液相色谱仪，连续进样 6 次，测定峰面积积分
值，其结果 RSD分别为1． 58%，0． 74%，表明仪器具有较好的
精密度。
2． 5 稳定性试验 精密吸取对照品溶液及重现性试验项下
的供试品溶液各 10 μL，分别于 0，4，8，12，24，48 h进样，测定
峰面积积分值，结果表明，对照品溶液及供试品溶液均在 48
h内稳定，对照品中齐墩果酸和熊果酸 RSD 分别为1． 69%和
1． 24%，供试品溶液中齐墩果酸与熊果酸的 RSD 分别为
1． 61%，1． 15%。
2． 6 重复性试验 取同一批样品(第 2 批)6 份，每份约 2
·551·中国医院药学杂志 2012 年第 32 卷第 2 期 Chin Hosp Pharm J，2012 Jan，Vol 32，No． 02
DOI:10.13286/j.cnki.chinhosppharmacyj.2012.02.009
g，精密称定，按拟定的含量测定方法制备，依法测定峰面积，
计算含量，结果供试品中齐墩果酸和熊果酸 RSD 分别为
1． 11%和1． 72%，表明本法具有较好的重现性。
2． 7 加样回收率试验 精密称取齐墩果酸对照品、熊果酸
对照品适量，置 10 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，即
得含齐墩果酸0． 681 g·L －1、熊果酸1． 68 g·L －1的混合对照品
溶液;另取同一批号样品(第 2 批)9 份，每份约 1 g，精密称
定，精密加入齐墩果酸和熊果酸混合对照品溶液适量(3 种
不同水平，各 3 份) ，按正文供试品溶液制备和测定项下进行
操作，依法测定，计算回收率，结果见表 1、表 2。
表 1 齐墩果酸回收率试验结果表
Tab 1 Result of recovery in oleanolic acid
批
次
称样量
/ g
样品中齐墩
果酸 /mg
加入齐墩果
酸量 /mg
测得齐墩果
酸含量 /mg
齐墩果酸
回收率 /%
平均回
收率 /%
RSD
/%
1 0． 997 0 0． 631 5 0． 544 8 1． 171 2 99． 06
2 1． 030 6 0． 651 8 0． 544 8 1． 199 4 100． 51
3 0． 973 6 0． 615 7 0． 544 8 1． 161 7 100． 23
4 0． 987 3 0． 624 4 0． 681 0 1． 298 6 99． 00
5 0． 995 0 0． 629 3 0． 681 0 1． 312 1 100． 26 99． 90 2． 12
6 1． 018 1 0． 643 9 0． 681 0 1． 358 0 104． 86
7 1． 000 9 0． 633 0 0． 817 2 1． 429 0 97． 41
8 1． 002 8 0． 634 2 0． 817 2 1． 436 4 98． 17
9 1． 002 1 0． 633 7 0． 817 2 1． 447 5 99． 58
表 2 熊果酸回收率试验结果表
Tab 2 Result of recovery in orsolic acid
编
号
称样量
/ g
样品中熊
果酸 /mg
加入熊果
酸量 /mg
测得熊果酸
含量 /mg
熊果酸回
收率 /%
平均回
收率 /%
RSD
/%
1 0． 997 0 1． 694 7 1． 344 0 3． 019 9 98． 60
2 1． 030 6 1． 751 8 1． 344 0 3． 086 8 99． 33
3 0． 973 6 1． 654 9 1． 344 0 2． 993 6 99． 61
4 0． 987 3 1． 678 2 1． 680 0 3． 423 3 103． 88
5 0． 995 0 1． 691 3 1． 680 0 3． 383 7 100． 74 99． 90 1． 66
6 1． 018 1 1． 730 6 1． 680 0 3． 379 8 98． 17
7 1． 000 9 1． 701 3 2． 016 0 3． 710 1 99． 64
8 1． 002 8 1． 704 6 2． 016 0 3． 717 9 99． 87
9 1． 002 1 1． 703 4 2． 016 0 3． 704 6 99． 27
注:所有含量都是以干药材(扣除水份)计
结果表明，齐墩果酸和熊果酸的回收率为 95% ～ 105%，
RSD ＜ 3%，表明本法具有较好的回收率。
2． 8 样品测定 取不同产地翼首草粉末(过 3 号筛)2 g，精
密称定。照“2． 1”项下供试品溶液的制备方法制备供试液，
精密吸取各供试品溶液 10 μL，按“2． 2”项下色谱条件进样。
测定对照成分峰面积，计算含量，即得。样品的含量测定结
果见表 3。
［基金项目］安徽新华学院校级自然项目(编号:2009zr007) ［作者简介］卫强，男，硕士，讲师，电话:0551-5381658，E-mail:weiqiang509@ sina．
com
3 结论
本课题为 2010 年版中国药典新增品种“翼首草”的质量
标准研究，严格按照《中国药典》中药质量标准研究技术要求
完成，制定质量标准起草说明时药材来源仅为全草(带根) ，
本文就其根与全草含量的对比研究为翼首草药材的广泛应
用提供一定的依据。
分别测定了 13 批(含根)翼首草药材中齐墩果酸的含
量，发现翼首草不同批次、不同药用部位间齐墩果酸的含量
差别不大(RSD为 17． 7%) ，初步推断药用部位和产地对翼
首草药材齐墩果酸的含量影响较小。
表 3 翼首草不同药用部位中齐墩果酸和熊果酸含量测定
结果(n =2)
Tab 3 Contents of oleanolic acid and orsolic acid in Pterocepha-
lus hookeri from different medical parts(n = 2)
批
次
产
地
药材来源
药用
部位
齐墩果酸
含量值 /%
熊果酸含
量值 /%
含量总
和 /%
1 四川 甘孜州藏医院 全草 0． 060 0 0． 161 1 0． 221 1
2 四川 甘孜州藏医院 全草 0． 070 2 0． 184 0 0． 254 2
3 四川 采集于道孚县 全草 0． 075 0 0． 262 4 0． 337 4
4 四川青海雪域中藏药材批发部全草 0． 061 6 0． 216 7 0． 278 3
5 四川 西宁藏聚堂商贸公司 全草 0． 092 5 0． 362 1 0． 454 6
6 四川 西宁雪源药材有限公司 全草 0． 099 1 0． 410 3 0． 509 4
7 甘肃 青海卓玛藏中蒙药材行 全草 0． 096 9 0． 414 4 0． 511 3
8 甘肃青海亚郎中藏药材批发部全草 0． 091 3 0． 333 5 0． 424 8
9 甘肃 青海九康中药销售部 全草 0． 098 8 0． 375 4 0． 474 2
10 青海 青海卓玛藏中蒙药材行 全草 0． 094 6 0． 376 4 0． 471 0
11 西藏 青海卓玛藏中蒙药材行 根 0． 077 2 0． 033 0 0． 055 1
12 西藏青海雪域中藏药材批发部 根 0． 068 2 0． 039 5 0． 053 8
13 西藏青海亚郎中藏药材批发部 根 0． 074 3 0． 032 7 0． 053 5
分别测定了 13 批(含根)翼首草药材中熊果酸的含量
(RSD为59． 3%) ;其中全草(含根和地上部分)间熊果酸含
量差别较大(RSD 为30． 8%) ;根间熊果酸含量差别较小
(RSD为11． 0%) ，初步推断全草中地方部分对熊果酸的含量
影响较大。
研究中只有 3 批药用为根的，样本数太少，且药用部位
含量对比研究用样本不是同一样本，仅能初步说明含量间差
别趋势，不能完全代表翼首草药材，有待进一步采集样本同
时结合药效、毒理等研究阐明并指导临床用药。
从 13 批样品含量结果可初步判断不同药用部位翼首草
药材齐墩果酸和熊果酸含量有一定的差别，本项目的研究为
翼首草药材质量和临床用药选择提供一定的参考依据，对翼
首草药材深入研究奠定基础。
参考文献:
［1］ 中华人民共和国卫生部药典委员会．中华人民共和国卫生部药
品标准(藏药)第一册［S］． 1995:138．
［2］ 关昕璐，阎玉凝，魏太明，等．翼首草的抗炎作用与急毒实验研
究［J］．北京中医药大学学报，2004，27 (2) :71-72．
［3］ 关昕璐，阎玉凝，任子和，等．翼首草的鉴别研究［J］．中国中药
杂志，2004，29(11) :1027-1029．
［收稿日期］2011-02-18
四叶降脂汤中总黄酮对小鼠的降脂作用
卫强1，李前荣2，戴一1，杨哲1，刘超1 (1． 安徽新华学
院药学院，安徽 合肥 230088;2．中国科技大学结构分析开放
研究实验室，安徽 合肥 230026)
［摘要］ 目的:研究荷叶、菊叶、桑叶、银杏叶混合提取后其
总黄酮成分的降脂作用。方法:将小鼠随机分为正常对照
组、模型组、非诺贝特组、四叶降脂汤高、中、低剂量组，经连
续给予小鼠灌胃 30 d后，观测小鼠体质量、肝脏重量、血脂变
化。结果:四叶降脂汤中总黄酮成分能有效降低小鼠体质
量、脂肪、肝脏重量，降低血清总胆固醇(TC)、血清三酰甘油
(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇
·651· 中国医院药学杂志 2012 年第 32 卷第 2 期 Chin Hosp Pharm J，2012 Jan，Vol 32，No． 02